聚合酶链反应-微孔板杂交法检测结核杆菌的临床应用及其评价

目的　对聚合酶链反应 ( PCR) -微孔板杂交法检测结核杆菌的临床适用性和可行性进行评价。方法　收集 1130份临床标本 ,分别用抗酸染色、培养、PCR电泳及 PCR微孔板杂交法进行结核杆菌检测 ,并结合临床诊断和疗效观察对实验结果进行分析。结果　 10 0份临床证实无结核病的体液标本经抗酸染色和 PCR电泳 ,分别有 1例和 2例假阳性 ,但经培养和 PCR微孔板杂交法未查出阳性 ;其余 10 30份高度怀疑含有结核杆菌的体液标本的检测结果 ,以 PCR微孔板杂交阳性检出例数最高 ( 481/ 10 30 ) ,其次为 PCR电泳 ( 40 6 / 10 30 )、培养 ( 36 5 /10 30 )以及抗酸染色 ( 2 5 6 / 10 30 ) ;χ2 检验结果显示 ,PCR微孔板杂交的结核杆菌阳性检出例数与其它三种方法比较均呈显著或极显著性差异 ( P<0 .0 0 83及 P<0 .0 0 17)。结论　 PCR-微孔板杂交方法是特异、灵敏、准确、快速的结核杆菌检测方法 ,具有推广应用价值     

斑点杂交法检测结核分枝杆菌临床应用价值探讨

目的:探讨斑点杂交法检测结核分枝杆菌的临床应用价值.方法:用抗酸染色法、L-J培养法、PCR法和斑点杂交法平行检测76例临床标本和28种标准菌株. 结果:46例肺结核患者痰标本抗酸染色法、L-J培养法、PCR法和斑点杂交法结核分枝杆菌检测阳性率分别为43.4%、50.0%、73.9%和56.5%;30例非结核患者痰标本、19种非结核分枝杆菌和9种非分枝杆菌标准株培养法和斑点杂交法检测结果均为阴性,PCR法有3例阳性.结论:斑点杂交法检测结核分枝杆菌方法简便,结果可靠,可用于结核病的快速诊断.     

聚合酶链反应在结核病诊断上的应用研究

本文运用ＰＣＲ检测技术，对５５例正常人，３５例非结核性肺部疾病患者，１４６例肺结核病人作对照，用抗酸染色法以及分枝杆菌培养法作对比分析，检测结果为ＰＣＲ检测法阳性率明显高于涂片和培养法，特异性为９７．８％，敏感世为８０％。由于其方法简单，检测速度快，灵敏度高，为结核病的诊断和鉴别诊断提供可靠的依据。     

电子支气管镜下取分泌物结核菌培养对支气管、不典型肺结核的诊断价值

目的评价BF260电子支气管镜下取分泌物用培养法对不典型肺结核的诊断价值。方法选自门诊和住院病人无痰或痰抗酸杆菌涂片检查屡为阴性的疑似肺结核患者,电子支气管镜下取分泌物培养结核杆菌。结果82例检出结核菌19株,培养阳性率为23.17%。同时做痰液培养生长2株,培养阳性率为3.66%。两者比较,差异明显,χ2=34.11,P<0.05;用支气管分泌物直接涂片检出抗酸杆菌5例,涂阳率6.10%,与培养比较,χ2=9.512,P<0.05。结论用支气管分泌物对无痰或痰抗酸杆菌涂片检查屡为阴性的肺结核患者行结核菌培养的方法,能明显提高结核菌的检出率,对临床不典型肺结核的明确诊断有重要价值。     

微阵列芯片技术在耐多药结核病临床诊断中的应用研究

目的 探讨微阵列芯片技术在耐多药结核病（multidrug resistant tuberculosis,MDR-TB）临床诊断中的应用。方法 收集2020年6月至2021年5月经滨州市中心医院确诊的245例住院肺结核患者的标本（痰液标本125例和痰培养分离菌株120例）。痰液标本同时采用DNA微阵列芯片技术和传统培养法检测其结核杆菌阳性率。痰液标本和分离菌株均采用DNA微阵列芯片技术进行肺结核耐多药检测和分枝杆菌菌种鉴定。结果 125例痰液标本经DNA微阵列芯片技术和痰培养法检测,阳性率分别为58.4%（73/125）和24.8%（31/125）,两种方法比较差异有统计学意义（2=14.520,P<0.001）。采用DNA微阵列芯片技术检测125例痰液标本和120例分离菌株,共检出结核分枝杆菌复合群192例,非结核分枝杆菌7例。结核分枝杆菌复合群192例检出耐药者41例,其中耐异烟肼15例,耐利福平19例,同时耐两种药物7例。非结核分枝杆菌包括胞内分枝杆菌4例,堪萨斯分枝杆菌2例,鸟分枝杆菌1例。结论 DNA微阵列芯片技术检测周期短,能同时进行结核分枝杆菌耐多药检测和菌种鉴定,对MDR-TB的早期诊断和治疗有较大的临床应用价值。     

结核杆菌痰检方法的临床应用比较

目的：比较结核杆菌抗酸染色、金胺O荧光染色（以下简称荧光染色）及结核杆菌分离培养（以下简称结核培养）3种检测方法的阳性检出率,探讨最适合基层医疗机构结核杆菌筛查的检测模式。方法选取确诊为肺结核的患者536例,期间共计痰检人次为1531次,按医学影像学和临床症状分为3个组,每位肺结核患者每痰检1次则记为1例,其中处于进展期895例,好转期357例,稳定期279例。对处于进展期、好转期和稳定期的患者的痰检标本分别采用抗酸染色、金胺O荧光染色及结核杆菌分离培养3种方法同时检测即时、夜间和晨痰3份标本。对检测结果进行统计学分析。结果（1）肺结核进展期895例,其中抗酸染色阳性病例为266例（29.72%）,金胺O荧光染色阳性病例377例（42.12%）,结核杆菌分离培养阳性病例401例（44.80%）。结核杆菌分离培养阳性检出率最高,荧光染色次之,抗酸染色最低;抗酸染色与另2种检测方法之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）;另2种检测方法之间比较差异无统计学意义。（2）肺结核好转期357例,其中抗酸染色阳性病例为7例（1.96%）,金胺O荧光染色阳性病例23例（6.44%）,结核杆菌分离培养阳性病例19例（5.32%）。后2种检测方法之间比较差异无统计学意义;抗酸染色与后2种检测方法之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）。（3）稳定期279例,其中抗酸染色阳性病例为5例（1.79%）,金胺O荧光染色阳性病例8例（2.86%）,结核杆菌分离培养阳性病例7例（2.51%）。3种方法之间比较差异均无统计学意义。结论抗酸染色检测迅速,实验操作及设备要求简单,适合基层医疗机构大规模结核病初次筛查及稳定期患者的痰检;金胺O荧光染色检测迅速,操作简单,实验设备要求相对较高,配合抗酸染色有助于提高结核杆菌检出率,适用于肺结核治疗过程中痰菌检测;结核杆菌分离培养在3种方法中阳性检出率最高,但是检测时间相对较长,不利于结核杆菌的快速检出,可用于检测抗酸染色和金胺O荧光染色不能确定的可疑标本。     

458份痰抗酸染色涂片和结核杆菌快速培养的结果比较

目的：评价痰抗酸染色和快速结核菌培养检测结核分枝杆菌的临床诊断价值,分析两种方法的优缺点.方法：对458份痰标本同时采用抗酸染色涂片法和快速结核菌培养法进行检测,并对其阳性率进行比较.结果：458例痰标本抗酸染色阳性160例,阳性率34.9％;结核菌培养阳性223例,阳性率48.7％;其中痰抗酸染色涂片与结核菌培养均阳性150例,阳性率32.8％;痰抗酸染色涂片阳性,结核菌培养阴性10例,阳性率2.2％;痰抗酸染色涂片阴性,结核菌培养阳性73例,阳性率15.9％;痰抗酸染色涂片与结核菌培养均阴性225例.结论：痰快速结核菌培养阳性率高于抗酸染色涂片,但不能过分依赖仪器,应对可疑标本做好涂片验证.抗酸染色报告时间短,价格低廉,两种方法在结核病的诊断中相互弥补,缺一不可.     

变色液体培养基用于结核分枝杆菌快速培养的研究

目的评价变色液体培养基在结核病早期诊断中的应用。方法通过选择确诊的肺结核200例,同时用4种方法检验结核分枝杆菌,比较方法的特点和优劣。结果快速液体变色培养法与涂片法相比阳性率高并且有显著性差异,高于L-J培养法,低于BACT/ALERT法,但与两者比较均无显著性差异。结论快速液体变色培养法用于结核杆菌培养具有快速廉价、结果可靠、操作简单等优点,值得临床推广应用。     

肺结核病人两种痰涂片染色法结果比较

目的比较痰涂片两种染色方法对肺结核病人发现的作用。方法采集初诊活动期肺结核病例痰标本进行抗酸染色、荧光染色,并用酸性改良罗氏培养基法进行分离培养结核分枝杆菌,比较痰涂片阳性率。结果1344份痰标本中抗酸染色阳性率11．6％、荧光染色阳性率13．8％,差异有统计学意义（χ2=21．43,P〈0．01）;246份痰培养阳性标本中抗酸染色和荧光染色镜检结果1＋时阳性率分别为20．3％、29．3％,差异有统计学意义（χ2=13．78,P〈0．01）。结论两种痰涂片染色方法对初诊结核病人发现差异有统计学意义,特别是对痰标本中低密度结核分枝杆菌发现荧光染色效果更好,应加强基层技术培训,提高结核病人发现率。     

酶联免疫斑点法检测在涂阴肺结核患者的诊断价值

目的：评价肺泡灌洗液酶联免疫斑点试验（ELISPOT）在痰涂片抗酸杆菌阴性（涂阴）肺结核患者的诊断价值。方法应用ELISPOT检测32例涂阴肺结核患者、30例非结核肺部疾病患者外周血和肺泡灌洗液中分泌结核抗原特异性干扰素的T淋巴细胞水平;绘制受试者工作特征曲线（ROC）,计算曲线下面积,比较两者的诊断价值。涂阴肺结核患者的肺泡灌洗液分别进行涂片抗酸染色、分枝杆菌培养、结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测,比较其阳性率。结果在32例涂阴肺结核患者和30例非结核肺部疾病患者中,血ELISPOT检测的敏感性和特异性分别为84.4%、90.0%,肺泡灌洗液ELISPOT检测的敏感性和特异性分别为90.6%、96.7%,两者的差异无统计学意义（P＞0.05）;肺泡灌洗液、血ELISPOT检测ROC曲线下面积为0.936、0.872。涂阴肺结核肺泡灌洗液ELISPOT检测阳性率（90.6%）明显高于肺泡灌洗液抗酸染色（15.6%）、分枝杆菌培养（34.4%）和结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测（31.3%）,差异均有统计学意义（P均=0.000）。结论 ELISPOT检测肺泡灌洗液中分泌结核抗原特异性干扰素γ的T淋巴细胞水平,具有敏感、特异、快速等优点,可成为涂阴肺结核的辅助诊断方法。