错配修复蛋白hMSH2 hMLH1表达在胃癌发生中的作用及临床意义

目的：探讨错配修复蛋白hMSH2、hMLH1表达及其在细胞内表达位置对胃癌发生的影响及临床意义.方法：收集大连医科大学附属第一医院胃癌标本172例、癌旁胃粘膜标本151例，非癌患者胃粘膜标本34例．应用免疫组织化学方法检测每例胃粘膜标本hMSH2、hMLH1蛋白的表达情况（包括其在细胞内表达位置），应用χ^2检验，Speannan等级相关分析在SPSS13．0统计软件上作相关统计结果：胃癌、癌旁胃粘膜和非癌患者胃粘膜hMSH2蛋白表达率分别为69．8％（120／172）、49．7％（75／151）和32．4％（11／34），胃癌组显著高于后两组（P=0．000），而后两组间无显著性差异（P=0．067）；hMLH1蛋白表达率分别为73.3％（126／172）、57．6％（87／151）和41．2％（14／34），胃癌组显著高于后两组（P=0．000），而后两组间无显著性差异（P=-0．082）．hMSH2和hMLH1蛋白表达率与胃癌患者的性别、年龄及胃癌分化程度均无显著相关关系．胃癌、癌旁胃粘膜和非癌患者胃粘膜hMSH2蛋白细胞核表达率分别为70．0％（84／120）、58．7％（44／75）和36．4％（4／11），细胞浆表达率分别为30．0％（36／120）、41.3％（31／75）和63．6％（7／11）；胃癌、癌旁胃粘膜、非癌患者胃粘膜中，hMSH2蛋白细胞核表达率逐渐降低，而细胞浆表达率则逐渐增高（r=0．161，P=0．020）。三种不同胃粘膜间，hMLH1蛋白在细胞内表达位置无显著性差异（P=0．878）。结论：同时检测胃粘膜错配修复蛋白hMSH2和hMLH1的表达及其细胞内表达位置可能有助于胃癌的早期预警。     

胃癌组织hMLH1启动子甲基化是造成其蛋白表达降低的主要原因

目的：通过研究胃癌中错配修复基因hMLH1启动子区5CpG岛甲基化及蛋白表达情况，探讨hMLH1启动子Ⅸ甲基化对蛋白表达的影响及在胃癌发病中的作用。方法：收集诊断明确且未经放化疗的胃癌手术切除标本41例及同病例癌旁黏膜。应用免疫组化SP法检测标本hMLH1蛋白表达情况。应用甲基化特异性PCR（MSP）榆测标本hMLH1启动子区甲基化情况。结果：胃癌组与癌旁组，hMLH1蛋白阳性表达率分别为58．54％（24／41）和80．49％（33／41）（P〈0．05）；启动子甲基化率分别为80．49％（33／41）和24．39％（10／41）（P〈0．05）；完全甲基化率分别为41．46％（17／41）和19．51％（8／41）（P〈0．05）；部分甲基化率分别为39．02％（16／41）和4．88％（2／41）（P〈0．05）。无论胃癌组织还是癌旁组织，完全甲基化病例均出现hMLH1蛋白表达缺失，部分甲基化病例和启动子未甲基化病例均有hMLH1蛋白表达。hMLHI基因启动子甲基化率与胃癌患者性别、年龄、癌组织分化程度、浸润深度和淋巴结转移均无明显相关性（P〉0．05）。结论：hM—LH1基因启动子甲基化是导致hMLH1蛋白表达降低的主要原因；胃黏膜hMLH1蛋白表达降低有助于胃癌的预警。     

胃癌组织中环氧合酶-2和hMLH1及hMSH2 蛋白表达与微卫星不稳定的关系

目的 观察环氧合酶-2（COX-2）、hMLH1和hMSH2蛋白在胃癌组织中的表达,探讨其与微卫星不稳定（MSI）的关系。方法 采用Western blot和PCR技术,检测30例胃癌及相应癌旁正常组织COX-2、hMLH1和hMSH2蛋白表达及5个位点的MSI状态。结果 胃癌组织COX-2高表达率为66．7％,hMLH1、hMSH2低表达率分别为40．0％和33．3％,与癌旁正常组织差异均有统计学意义（P均〈0．05）。30例胃癌组织中微卫譬稳定（MSS）17例,MS1l3例,其中高频率MS1（MSI-H）9例,低频率MSI（MSI-L）4例。9例MS1-H中COX-2、hMLH1和hMSH2低表达者分别为6,8和5例,与MSS组差异均有统汁学意义（P均〈0．05）。结论 散发性胃癌发生过程中可能存在MSI途径。MSI途径常伴有hMI．Hl、hMSH2蛋白表达缺陷,并可能伴有COX-2表达降低。     

EphA2/EphrinA1在胃癌中的表达及其意义

目的：探计EphA2及其配体EphrinA1在胃癌组织中的表达及与胃癌临床病理特征的关系。方法：利用免疫组织化学法检测82例胃癌手术切除标本的癌组织、癌旁组织及正常胃粘膜内EphA2、EphrinA1和E-cadherin的表达；并采用流式细胞术对其中随机选取的45例标本进行上述三种蛋白的定量分析，采用SPSS软件进行统计学处理。结果：胃癌组织中EphA2、EphrinA1的表达明显高于癌旁组织及正常胃粘膜（P〈0．01），而癌旁组织与正常胃粘膜之间无显著性差异（P〉0．05）；E—cadherin在胃癌组织中的表达明显低于癌旁组织和正常胃粘膜（P〈0．01），而癌旁组织与正常胃粘膜间无显著性差异（P〉0．05）。在胃癌组织中，随分化程度的降低，EphA2、EphrinA1蛋白的表达均显著升高（P〈0．05），而E-cadherin蛋白的表达则显著降低（P〈0．05）；随浸润深度的增加，EphA2、EphrinA1蛋白的表达均显著升高（P〈0．05），而E-cadherin蛋白的表达显著降低（P〈0．05）；淋巴结转移组中EphA2、EphrinA1蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组（P〈0．05），而E-cadherin蛋白的表达则显著低于无淋巴结转移组（P〈0．05）；EphA2、EphrinA1和E-cadherin蛋白的表达与肿瘤直径、患者的性别和年龄无关（P〉0．05）EphA2与E—cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．231，P〈0．01），EphrinA1与E-cadherin蛋白的表达呈显著负相关（r=-0．403，P〈0．01），EphA2与EphrinA1蛋白的表达呈显著正相关（r=0．707，P〈0．01）。结论：EphA2／EphrinA1与E-cadherin蛋白表达异常可能共同参与了胃癌的发生、发展与转移；联合捡测三种蛋白对于评价胃癌的恶性程度、判断其转移潜能具有一定的参考价值。     

错配修复基因hMSH6在胃癌中表达特点的研究

目的：了解错配修复基因hMSH6在胃癌中的表达特点。方法：用免疫组织化学SP法检测45例胃癌组织、36例癌旁黏膜和30例正常胃黏膜hMSH6蛋白的表达情况。结果：胃癌组、癌旁组与正常胃黏膜组hMSH6蛋白细胞核表达阳性率分别为24．44％（11／45）、13．89％（5／36）和53．33％（16／30）;细胞质表达阳性率分别为66．67％（30／45）、58．33％（21／36）和96．67％（29／30）;细胞核和细胞质表达阳性率胃癌组和癌旁组均显著低于正常胃黏膜组（P〈0．05）;而胃癌组与癌旁组hMSH6蛋白在细胞核及细胞质中表达差异均无显著性意义（P〉0．05）。胃癌组织中,hMSH6蛋白在细胞核中表达与患者性别、年龄,肿瘤分化程度及分期、淋巴结转移均无显著相关性（P〉0．05）,但在细胞质的表达与肿瘤分化程度及分期正相关（P〈0．05）,而与患者年龄、性别、淋巴结转移无显著相关性（P〉0．05）。结论：胃癌及癌旁组织均出现错配修复基因hMSH6表达下调,这可能将成为胃癌发生的预警信号。     

胃癌个体化免疫治疗新策略研究

目的 探讨程序性死亡配体 1（PD L1）、程序性死亡受体 1（PD 1）、错配修复基因hMSH2、hMLH1在胃癌表达及其与临床病理特征的关系。 方法 应用免疫组化法检测76例胃癌组织中PD L1、PD 1和hMSH2、hMLH1蛋白表达。 结果 胃癌组织中,PD L1表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况及脉管癌栓相关（均P＜005）;PD 1表达与各临床病例特征均无相关（P＞005）。hMSH2、hMLH1表达与TNM分期相关（P＜005）。PD L1与hMSH2、hMLH1蛋白表达相关（均P＜005）,PD 1与hMSH2、hMLH1蛋白表达均无相关,PD L1表达与PD 1无相关（P＞005）。 结论 依据错配修复缺陷基因及PD L1表达水平选择性阻断PD L1／PD 1免疫检查点有望成为胃癌个体化免疫治疗的新策略。     

子宫颈鳞癌HPV16感染对错配修复基因表达的影响

目的：探讨子宫颈癌发病机制中HPV感染对错配修复（mismatch repair，MMR）基因表达影响的意义。方法：77例子宫颈鳞癌标本采用免疫组织化学SP法检测HPV16、hM—SH2与hMLH1的表达。并分析这些表达与临床病理参数的关系。结果：HPV感染与非感染组子宫颈癌hM—LH1的阳性表达率分别为69．0％（29／42）和40．8％（12／28），rs=0．260，P=0．029；hMSH2的阳性表达率分别为64．2％（27／42）和46．4％（13／28），n=0．177，P=0．143。HPV感染、hMLH1及hMSH2阳性表达率与分化程度、临床分期及淋巴结转移无显著相关。结论：HPV感染组细胞hMSH2与hMLH1蛋白表达上调的现象表明HPV16感染增加子宫颈上皮细胞DNA复制时的碱基错配。因此，这可能是HPV16的致癌机制之一。     

H2-ealponin在胃癌中的表达及意义

目的：研究H2-calponin在胃癌原发灶、癌旁组织及正常组织中的表达、分布及意义，探讨H2-cal—ponin与胃癌发生、分化程度以及侵袭、转移的关系及临床意义。方法：采用免疫组化sP法检测70例胃癌组织，并选取30例癌旁组织及正常胃粘膜组织作为对照进行染色以观察H2-calponin的表达分布和定位情况。结果：H2-calponin在正常胃粘膜、慢性胃粘膜炎（癌旁组织）及胃癌组织中均有表达，其阳性率分别为56．7％、66．7％、58．6％，无显著统计学差异。H2-calponin在伴有淋巴结转移的胃癌组织中的阳性表达率高于无淋巴结转移的胃癌组织中的阳性表达率（P〈0．05），具有显著统计学差异；在有浆膜浸润的胃癌组织中的阳性表达率高于无浆膜浸润的胃癌组织中的阳性表达率（P〈0．05），具有显著统计学差异；其与患者的年龄、性别和肿瘤的组织分化等因素无关（P〉0．05）。肿瘤细胞中H2-calponin均表达于细胞质中。结论：胃癌组织中H2-calponin蛋白的表达与肿瘤侵袭深度和淋巴结转移相关，提示H2-calponin可能与胃癌的转移存在一定的关系。     

IL-8基因在胃癌及癌前状态中的表达

目的：探讨IL－8基因与癌前状态与胃癌发生发展的关系。方法：采用RT－PCR检测25例胃癌及癌旁正常粘膜中IL－8基因mRNA表达；免疫组化技术检测283例不同胃粘膜标本IL－8蛋白表达，其中包括29例正常胃粘膜、54例浅表性胃炎、33例胃溃疡、57例萎缩性胃炎、40例异型增生、70例胃癌。结果：1）胃癌组织中IL－8 mRNA及蛋白水平显著高于正常胃粘膜（P＜0．01）；2）正常胃粘膜、癌前状态与胃癌组织IL－8蛋白阳性表达率逐渐升高（P＜0．01），胃癌IL－8蛋白阳性表达率与癌前状态相比有显著性差异（P＜0．01）；3）浅表性胃炎、胃溃疡、异型增生、萎缩性胃炎及胃癌IL－8蛋白阳性表达率依次上升（29．6％、45．5％、57．5％、71．9％、88．6％），胃癌与萎缩性胃炎相比有显著性差异（P＜0．05）；胃癌与浅表性胃炎、胃溃疡、异型增生相比差异非常显著（P＜0．01）；萎缩性胃炎与异型增生中IL－8蛋白阳性表达率均高于浅表性胃炎（P＜0．01或P＜0．05）；萎缩性胃炎中IL－8蛋白阳性表达率高于异型增生。结论：IL－8基因在癌前状态及胃癌中高表达，IL－8基因表达增强与胃癌的发生发展及分化程度密切相关并与癌前状态的进展有关。IL－8在肿瘤中的作用机制以及临床应用前景有待于进一步研究。     

PTEN蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨抑癌基因PTEN在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用SABC免疫组织化学方法，检测了62例乳腺癌、15例癌旁及12例正常乳腺组织中PTEN蛋白表达水平，结合临床病理指标进性分析。结果 乳腺癌组PTEN蛋白阳性表达率（56．5％）显著低于癌旁组（86．7％）和正常组（100．0％），P均〈0．05；癌旁组（86．7％）低于正常组（100．0％），P〉0．05。伴有淋巴结转移的乳腺癌中PTEN蛋白阳性表达率（32．1％）显著低于无淋巴结转移乳腺癌（61．8％），P〈0．05；浸润性癌PTEN蛋白阳性表达率（44．4％）显著低于早期浸润性癌（75．0％），P〈0．05；PTEN蛋白表达与肿瘤大小、PTNM分期无关，P〉0．05。结论 PTEN蛋白在乳腺癌的发生、发展、侵袭转移中可能起着重要作用。PTEN蛋白表达水平可以作为判定乳腺癌病理生物学行为的客观指标。