miR-140-5p在恶性肿瘤中的研究进展

微小RNA(miRNA)是一类内源性、非蛋白编码的微小RNA分子,在转录后能调控基因表达。染色体结构维持蛋白4(SMC4)是染色体三磷酸腺苷酶中SMC家族的核心成员之一。通过生物信息学分析预测miR-140-5p可能与SMC4的mRNA 3’非翻译区(UTR)匹配区相结合。miR-140-5p是miRNAs主要成员之一,其在多种肿瘤中呈现出不同的表达水平及功能,影响着肿瘤的侵袭、转移、预后及对化疗药物的敏感性,在肿瘤发生发展过程中是不可或缺的,其有望成为恶性肿瘤诊断、治疗和预后的一种新型生物标志物。     

miR-146a-5p基因多态性与多囊卵巢综合征发病风险的相关性

目的研究分析miR-146a-5p基因多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)发病风险的相关性。方法回顾性选取PCOS患者122例为观察组,选取同期本院体检正常者110例为对照组。收集两组年龄、身高、体质量及BMI等指标。采用血液基因组DNA提取试剂盒提取DNA,采用四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(T-ARMS-PCR)法对miR-146a-5p rs2910164位点进行基因分型。Logistic回归模型用于评价miR-146a-5p的rs2910164位点与PCOS发病风险的关联强度及PCOS的危险因素。结果观察组体质量、BMI显著高于对照组(P＜0.05);观察组与对照组miR-146a-5p的基因型分布差异有显著性(P＜0.05);miR-146a-5p的基因型在两组间的分布符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。观察组和对照组的CG基因型分布差异存在显著性(OR=2.16,95%CI=1.19~3.70,P＝0.004)。观察组的C等位基因频率显著高于对照组(OR=1.78,95%CI=1.15~2.36,P＝0.001)。在C等位基因的显性作用(CC+CG与GG之间的比较)中,CC+CG基因型显著增加了PCOS的风险(OR=1.91,95%CI=1.42~2.75,P＝0.001)。对年龄和BMI进行调整后,共显性、显性和隐性模型的基因型在OR中均未显示任何显著变化。以PCOS为因变量,以体质量、BMI和miR-146a-5p基因型为自变量,进行Logistic回归分析,结果显示miR-146a-5p rs2910164、体质量、BMI是PCOS的独立危险因素。结论miR-146a-5p的rs2910164位点C等位基因与PCOS发病风险增加有关,可以作为预测PCOS发病风险的潜在预警生物标志物。     

miR-146a-5p对无水乙醇刺激的胃黏膜上皮细胞的保护作用

目的 研究miR-146a-5p对无水乙醇刺激的胃黏膜上皮细胞的保护作用。方法 选取胃黏膜上皮细胞(GES-1),将细胞分为空白组和模型组,通过无水乙醇刺激建立胃溃疡模型。采用MTT法检测两组细胞增殖率,RT-qPCR检测miR-146a-5p、白细胞介素1受体关联激酶1(IRAK1)、核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)和白细胞介素6(IL-6)的表达水平,Western blot检测IRAK1、NF-κB p65和IL-6蛋白的表达,ELISA法检测两组细胞中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6和白细胞介素10(IL-10)的含量。采用Targetscan数据库预测miR-146a-5p的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验验证靶基因。进一步通过过表达和敲减miR-146a-5p后观察靶点蛋白的变化,以确定miR-146a-5p和靶点蛋白的调控关系。过表达miR-146a-5p和敲减IRAK1后,Western blot检测IRAK1、NF-κB p65和IL-6蛋白的表达,ELISA法检测细胞中炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10的含量。结果 MTT结...     

miR-146a-5p表达与新生儿坏死性小肠结肠炎肠道损伤严重程度的相关研究

目的 ·检测新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠道miR-146a-5p表达水平,并分析其与NEC患儿肠道损伤严重程度的相关性.方法 ·收集2014年1月—2018年12月于上海交通大学附属儿童医院普外科就诊的NEC和肠闭锁(intestinal atresia,IA)...     

血浆外泌体miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病中的表达及诊断价值

目的 研究miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病血浆外泌体中的表达差异性及其诊断价值。方法 通过生物信息学网站筛选结核病外泌体中具有差异性表达的miRNAs(miR-26a-5p和miR-151a-3p)。再以70例结核病患者(结核病组),58例体检健康者(健康对照组)样本进行临床验证：采用差速离心法提取血浆外泌体,透射电子显微镜,粒径分析,Western blot对其鉴定,采用RT-qPCR检测血浆外泌体中miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病组和对照组中的表达水平,并通过ROC曲线评价二者在结核病中诊断价值。结果 透射电镜、粒径分析、Western blot鉴定到典型的外泌体特性,即成功提取到血浆外泌体。在临床验证中,以内参和外参同时校准,结核组患者血浆外泌体中miR-26a-5p表达水平低于对照组(P<0.000 1),结核组患者血浆外泌体中miR-151a-3p表达水平高于对照组(P<0.000 1),与生物信息学结果一致。作为诊断标记,以内参为基准,血浆外泌体miR-26a-5p、miR-151a-3p鉴别结核病的曲线下面积(AUC)分...     

miR-125a-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的探讨miR-125a-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法荧光定量PCR检测胰腺癌组织中miR-125a-5p的表达水平,细胞计数试剂盒-8检测下调miR-125a-5p水平对胰腺癌细胞生长的影响,流式细胞术检测下调miR-125a-5p表达水平对胰腺癌细胞周期和凋亡的影响,软琼脂集落形成实验评价miR-125a-5p在胰腺癌细胞恶性转化过程中的作用。结果 miR-125a-5p在胰腺癌组织的表达高于癌旁正常组织(P<0.05)。下调miR-125a-5p表达水平后,胰腺癌细胞系Panc-1和MIA Pa Ca-2的生长受到抑制(P<0.05),早期凋亡率分别增加13.6%和11.0%(P<0.05),细胞集落数目分别下降27.3%和27.8%(P<0.05),Panc-1细胞S期细胞百分比降低11.8%(P<0.05)。结论 miR-125a-5p在胰腺癌组织中高表达,下调miR-125a-5p表达水平使胰腺癌细胞生长受到抑制,集落形成能力下降,细胞周期受到阻滞,凋亡比例增加,提示miR-125a-5p在胰腺癌中发挥癌基因的作用。     

miR-146a-3p靶向TLR4减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的 研究微小RNA (miR)-146a-3p对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)和炎症反应的作用及机制.方法 将32只BALB/c小鼠随机分为假手术组、ALI组、ALI+agomiR-阴性对照(NC)组以及ALI+miR-146a-3p激动剂组(ALI+agomiR-146a-3p组),每组8只.通过气...     

miR-146a-5p靶向IRAK-1调控DVT患者内皮祖细胞的增殖及炎症

目的 研究微RNA(miR)-146a-5p靶向白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)调控深静脉血栓(DVT)患者内皮祖细胞(EPCs)的增殖及炎症.方法 选取2018年7月至2019年6月该院诊断为DVT的10例患者及10例体检的健康志愿者为研究对象,分离外周血EPCs,检测miR-146a-5p、IRAK-1的表达水平;DVT患者的EPCs分为miR-阴性对照(NC)组、miR-146a-5p组、miR-NC+NC质粒组、miR-146a-5p+NC质粒组、miR-146a-5p+IRAK-1质粒组,检测细胞增殖活力及吸光度(A490)值、miR-146a-5p、IRAK-1、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平.结果 DVT患者EPCs中miR-146-5p相对表达水平低于健康志愿者,IRAK-1相对表达水平高于健康志愿者(P<0.05);miR-146a-5p组A490值、miR-146a-5p相对表达水平高于miR-NC组,IRAK-1、NF-κB、TNF-α、IL-1β表达水平、野生型IRAK-1基因的荧光活力低于miR-NC组(P<0.05);miR-146a-5p+IRAK-1质粒组A490值低于miR-146a-5p+NC质粒组,I-RAK-1、NF-κB、TNF-α、IL-1β水平高于miR-146a-5p+NC质粒组(P<0.05).结论 miR-146a-5p靶向I-RAK-1促进DVT患者的EPCs增殖并抑制炎性反应.     

肝癌组织miR-146b-5p和miR-134的表达下调及临床意义

目的 探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 选取2017年6月～2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组.采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测癌组织和癌旁正常组织中miR-...     

LncRNA SNHG7靶向调节miR-146a-5p对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和细胞凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNASNHG7)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制.方法:培养人正常胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞NCI-N87、Hs-746T、NCI-SNU-16;将si-NC、si-SNHG7分别转染至 NCI-N87细胞中,记为 si-NC 组、si...     

miR-219a-5p在胃癌中的甲基化调控及生物学功能研究

目的 检测miR-219a-5p在胃癌及其癌旁组织中的表达并分析其启动子区域甲基化水平,探讨其对胃癌细胞系生物学功能的影响。方法 利用实时荧光定量PCR (Real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)和甲基化特异性PCR (methylation specific PCR,MSP)方法检测胃癌及其癌旁组织中miR-219a-5p的表达及甲基化水平,通过细胞增殖实验和流式细胞仪检测过表达miR-219a-5p后对胃癌细胞增殖和凋亡的影响;体外细胞迁移和侵袭实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力。结果 miR-219a-5p的表达水平在胃癌患者的癌组织中呈现普遍下调,miR-219a-5p在癌组织中的相对表达量(0.769±0.95)明显低于癌旁组织表达(2.114±5.10),差异具有统计学意义(P<0.05);且miR-219a-5p表达下调组的DNA甲基化水平比表达上调组明显升高;过表达miR-219a-5p的胃癌细胞系MGC-803细胞增殖能力和迁移侵袭能力明显受到抑制(P<0.05),过表达组凋亡比例明显...     

miR-15a-5p在乳腺癌耐药与敏感患者中的差异分析及耐药价值预测

目的 探讨miR-15a-5p在多西他赛治疗敏感组和耐药组中的表达差异及对临床预后的意义。方法 运用TCGA数据库分析miR-15a-5p在恶性肿瘤中的表达情况。收集2019年1月至2020年1月在本院治疗的30例对多西他赛耐药的乳腺癌患者为耐药组,收集同期治疗的30例对药物敏感的乳腺癌患者为敏感组,通过q-PCR荧光定量法检测患者癌组织中miR-15a-5p的表达水平,探讨miR-15a-5p与乳腺癌耐药、分型的关联情况。绘制ROC曲线分析miR-15a-5p对患者预后的预测价值以及miR-15a-5p对乳腺癌患者耐药诊断价值。结果 通过泛癌分析发现,miR-15a-5p在乳腺癌等多种癌症中显著高表达。q-PCR结果显示,多西他赛化疗敏感组的miR-15a-5p的表达水平高于耐药组的表达水平(P<0.05)。临床统计分析发现miR-15a-5p与ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)的表达呈负相关,而与人表皮生长因子受体-2的表达无明显关联性。结论 miR-15a-5p在多西他赛耐药患者的肿瘤组织中的表达水平明显低于敏感组,且miR-15a-5p在乳腺癌的高表达与乳腺癌的分子分...     

miR-499a-5p在骨肉瘤中的表达及其对骨肉瘤发生发展的影响

目的:探讨miR-499a-5p在骨肉瘤(OS)中的表达及其对OS发生发展的影响.方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证miR-499a-5p在OS细胞系(143B、MNNG)及正常成骨细胞(hFOB1.19)中的差异表达,并使用3种在线预测工具对miR-499a-5p的靶基因进行了预测,并取3种数据共同交...     

术前血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平预测前列腺癌患者术后复发转移的价值

目的：探讨血清miR-148a-3p及miR-139-5p水平对前列腺癌（prostate cancer,PCa）患者术后复发转移的价值。方法：选取2015年1月1日至2017年12月31日海口市第三人民医院收治的PCa患者142例,根据其术后是否发生复发转移分为未复发转移组（n=84）和复发转移组（n=58）。检测两组术前miR-148a-3p、miR-139-5p及前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）表达水平,分析其与临床病理特征的关系。应用ROC曲线分析miR-148a-3p、miR-139-5p及PSA预测PCa术后复发转移的价值。Pearson相关分析miR-148a-3p、miR-139-5p与PSA相关性。结果：复发转移组血清miR-148a-3p、miR-139-5p及PSA水平分别为（4.80±0.75）、（7.64±2.38）和（63.75±14.92） ng/mL,均高于未复发转移组的（2.15±0.36）、（3.50±0.62）和（18.72±8.60） ng/mL,差异有统计学意义（t值分别为10.648、14.715和9.804,均P=0.000）。复发转移患者血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平与肿瘤分期（t=5.117,P=0.024;t=5.304,P=0.018）、Gleason评分（t=5.512,P=0.006;t=6.218,P=0.000）及PSA水平（t=10.208,P=0.000;t=13.620,P=0.000）有关联。ROC曲线分析显示,血清miR-148a-3p、miR-139-5p及PSA预测PCa术后复发转移的最佳截值分别为3.40、5.38和36.80 ng/mL,三项联合预测PCa术后复发转移的AUC（0.914,95%CI=0.858～0.972）最大,其敏感度和特异度为92.0%和83.6%。相关分析显示,复发转移患者血清miR-148a-3p、miR-139-5p水平与PSA均呈正相关（r=0.774,P＜0.001;r=0.806,P＜0.001）。结论：术前血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达上调与PCa术后复发转移有关,联合PSA检测对预测PCa术后复发转移具有较高的价值。     

血清miR-30a-5p作为原发性肾病综合征新分子标志物的研究

目的 观察原发性肾病综合征(PNS)患者血清miR-30a-5p的表达水平,并探索其临床价值.方法 选取在首诊并诊断为PNS的160患者作为病例组,按照1 ∶ 1匹配原则另选160例同期健康体检人员为对照组.收集两组临床资料和血液样本,检测血生化指标,并采用定量PCR技术检测血清miR-30a-5p的表达水平.对患者进...     

miR-34a-5p在ox-LDL引起内皮细胞损伤中的作用机制

目的 研究miR-34a-5p在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)引起内皮细胞损伤中的作用及机制。方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分为对照组、ox-LDL组、阴性对照(NC)组、NC+ox-LDL组、miR-34a-5p敲低+ox-LDL组,采用荧光定量PCR检测miR-34a-5p的表达水平,采用western blot检测沉默信息调节因子1(Sirt1)、p53、核因子κB(NF-κB)的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-34a-5p靶向Sirt1,采用试剂盒检测细胞活力A₄₉₀水平及凋亡率,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)。结果ox-LDL组中miR-34a-5p、p53、NF-κB的表达水平高于对照组,Sirt1的表达水平低于对照组(P<0.05);Sirt1基因mRNA 3′UTR中含有miR-34a-5p的互补结合位点,miR-34a-5p组Sirt1的荧光素酶活性低于NC组(P<0.05);NC+ox-L...