大蒜多糖对病毒性心肌炎小鼠心肌凋亡的影响

采用BALB/C小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)建立病毒性心肌炎模型.随机分为正常对照组、模型组、大蒜多糖治疗组及正常小鼠大蒜多糖处理组.TUNEL法检测心肌凋亡;Western blot等检测心肌caspase-3活性和表达的变化.发现大蒜多糖能显著降低模型组心肌细胞凋亡,下调caspase-3表达及活性.提示大蒜多糖能显著抑制小鼠病毒性心肌炎心肌细胞凋亡,机制与抑制caspase-3表达及活性有关.     

病毒性心肌炎小鼠不同时期心肌组织转录因子ROR-Υt的表达

目的观察｜rhl7细胞特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体1t（retinoid—relatedorphannuclearreceptorΥt,ROR-Υt）在柯萨奇病毒B3（COXsackievirusB3,CVB3）诱导的病毒性心肌炎小鼠不同时期心肌组织中的表达变化,初步探讨ROR-Υt在病毒性心肌炎发病中的作用。方法雄性BALB／c小鼠腹腔注射CVB3建立病毒性心肌炎小鼠模型（实验组）,对照组小鼠腹腔注射等量的磷酸盐缓冲液,按注射后第0、1、2、3、4、6周分为6个时点亚组,每个时点亚组至相应时间取小鼠心脏,苏木精-伊红染色观察心肌病理改变,半定量反转录聚合酶链反应测定小鼠心肌组织ROR-TtmRNA的表达,Western-Blotting测定小鼠心肌组织ROR-Υt蛋白的表达。结果苏木精-伊红染色证实病毒性心肌炎模型构建成功。实验组小鼠中,1周亚组ROR-ΥtmRNA及其蛋白的表达较0周亚组升高,4周亚组表达最高,6周亚组表达低于4周亚组但仍高于0周亚组：实验组各亚组ROR-1tmRNA及其蛋白的表达与相应时间对照组各亚组比较,差异均具有统计学意义（P均〈0．05）。结论Thl7细胞特异性转录因子ROR-Υt在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中呈高表达,且其变化趋势与Thl7细胞改变趋势一致,提示ROR-Υt通过参与病毒性心肌炎中Thl7细胞的分化,可能参与病毒性心肌炎的免疫发病过程。     

黄芪总黄酮对病毒性心肌炎小鼠心律失常的作用

目的探讨黄芪总黄酮（TFA）对病毒性心肌炎小鼠心律失常的作用。方法应用CVB3感染BALB／c小鼠制作病毒性心肌炎模型,每日腹腔注射TFA（dOmg／kg）0．1ml;对照组每13腹腔注射生理盐水0．1ml。10d后以BL一420生物机能实验系统对小鼠心电图进行观察和改良CurtisandRavingerovand评分,并进行统计分析。结果应用黄芪总黄酮（TFA）组病毒性心肌炎小鼠与对照组相比较,心律失常发生率明显减少（12例,P〈0．05）。结论黄芪总黄酮可显著降低病毒性心肌炎小鼠心律失常发生率。     

巨噬细胞炎性蛋白-2在病毒性心肌炎小鼠中的表达及黄芪的干预作用

目的：探讨巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）在病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌中的表达及黄芪的干预作用。方法：将40只雄性Bal b/c小鼠随机分为正常对照组[腹腔接种不含柯萨奇B3病毒（CVB3）的Eagle’培养液,10例]、模型组（15例）和治疗组（15例）,模型组和治疗组腹腔接种CVB3建立VMC模型,治疗组腹腔注射黄芪注射液（10g/kg.d）,其余两组注射等容积生理盐水。第14d处死小鼠,行苏木素伊红（HE）染色计算心肌病理积分,用化学发光法检测肌钙蛋白（cTnI）,蛋白质免疫印迹法检测MIP-2蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测MIP-2 mRNA表达。结果：14d后,治疗组生存率较模型组明显升高（80.0%∶53.33%,P〈0.05）;与正常对照组比较,模型组病理积分[0分∶（2.57±0.48）分]、血清cTnI水平[（0.27±0.04）ng/mL∶（0.62±0.17）ng/mL]、心肌MIP-2 mRNA[（0.31±0.06）∶（0.92±0.23）]及蛋白表达[（0.24±0.05）∶（0.67±0.18）]水平均明显提高（P〈0.01）,且MIP-2蛋白表达与病理积分和cTnI呈正相关（r=0.89,P〈0.01;r=0.74,P〈0.05）;治疗组病理积分[（1.42±0.27）分]、cTnI[（0.39±0.11）ng/mL]、MIP-2 mRNA[（0.71±0.18）]及蛋白表达[（0.43±0.12）]较模型组明显降低（P均〈0.05）。结论：病毒性心肌炎MIP-2表达显著增加,其表达水平与心肌病变严重程度密切相关,提示MIP-2参与病毒性心肌炎发病过程,减少其产生可能是黄芪治疗病毒性心肌炎的机制之一。     

单核细胞趋化蛋白1在病毒性心肌炎中的作用及黄芪甲甙干预研究

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1在病毒性心肌炎中的作用及黄芪甲甙干预后的变化.方法 55只雄性Bal/c小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型对照组(n=15)、低剂量干预组(n=15)及高剂量干预组(n=15),后3组小鼠经腹腔接种0.1mL柯萨奇病毒B3建立病毒性心肌炎模型,低剂量干预组和高剂量干预组于病毒接种后当天分别以0.01g/L、0.09g/L黄芪甲甙0.1mL灌胃,正常对照组和模型对照组均以羧甲基纤维素钠溶液灌胃,第15天处死全部存活小鼠,心脏石蜡切片HE染色计算病理积分,免疫组织化学染色检测单核细胞趋化蛋白1蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应检测单核细胞趋化蛋白1mRNA表达.结果 正常对照组、模型对照组、低剂量干预组及高剂量干预组死亡率分别为0、46.7%、40.0%、13.3.0%,高剂量干预组死亡率明显低于模型对照组和低剂量干预组(P<0.05).模型对照组心肌单核细胞趋化蛋白1mRNA及蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P<0.01),高剂量干预组病理积分及单核细胞趋化蛋白1mRNA、蛋白表达量较模型对照组、低剂量干预组显著降低(P<0.05或0.01).结论 单核细胞趋化蛋白1参与病毒性心肌炎发病过程,黄芪甲甙对病毒性心肌炎的治疗作用可能与其抑制单核细胞趋化蛋白1表达有关.     

病毒性心肌炎心肌颗粒酶B表达的实验研究

目的 探讨颗粒酶B在柯萨奇病毒B组病毒介导的病毒性心肌炎心肌病变及发病机制中的作用.方法 将36只5周～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分成两组:正常组10只,模型组26只.模型组以病毒液0.1 mL腹腔注射建立模型,正常组予0.1 mL不含病毒的Eagle's基本必需培养基液腹腔注射.于第11 d处死小鼠取出心脏,分别在肉眼下、光镜下和电镜下观察心肌的病变并计分;以半定量逆转录酶聚合酶链反应和免疫组化方法 检测心肌颗粒酶B的表达.结果 模型组心肌大体病变计分显著高于正常组,差异有统计学意义[(3.2±1.6)分 vs. (0.2±0.1)分,P<0.01].光镜下模型组心肌病理计分显著高于正常组,差异有统计学意义[(8.4±4.5)分vs. (0.3±0.1)分,P<0.01].电镜下模型组心肌细胞超微结构损害严重,正常组心肌细胞超微结构均正常.免疫组化显示模型组每高倍视野颗粒酶B阳性细胞数显著高于正常组,差异有统计学意义[(2.7±1.1)个 vs.(0.0±0.0)个,P<0.01].直线相关与回归分析表明,模型组小鼠心肌浸润细胞颗粒酶B阳性细胞数与心肌病理计分呈显著正相关(r=0.859,P<0.01).逆转录酶聚合酶链反应产物电泳条带的半定量分析表明,模型组心肌颗粒酶B扩增产物产量高,而正常组无颗粒酶B表达.结论 心肌浸润细胞中颗粒酶B的表达在病毒性心肌炎心肌损伤中起一定作用,其表达水平与心肌病理损害严重程度一致.     

病毒性心肌炎连接蛋白的变化

目的观察小鼠急性病毒性心肌炎时连接蛋白的变化，了解连接蛋白与病毒性心肌炎的关系。方法Balb／c4周龄雄性小鼠26只，随机分为模型组（20只）和正常对照组（6只），模型组予腹腔接种柯萨奇病毒B组3型（CVB3）建立小鼠急性病毒性心肌炎模型。在接种病毒后第14天处死所有存活小鼠，观察心肌形态学改变，并采用聚合酶链式反应（PCR）及免疫组织化学技术，检测各组小鼠心肌组织中connexin43（Cx43）、connexin40（Cx40）和connexin45（Cx45）基因水平及蛋白水平的变化。结果模型组小鼠心肌HE染色可见明显的炎性细胞浸润和心肌坏死等炎症改变；与正常对照组相比，Cx43和Cx45mRNA表达明显减少（分别为0．11±0．02vs0．34±0．05，0．21±0．02vs0．41±0．06）。Cx40mRNA表达较对照组无统计学差异，三者蛋白水平的变化与基因水平变化相一致。结论急性病毒性心肌炎小鼠心肌中connexin43和connexin45表达明显减少，上述连接蛋白的变化与病毒性心肌炎致心律失常的潜在作用有关。     

急性病毒性心肌炎小鼠心肌中Calpain mRNA表达与心肌细胞凋亡的关系研究

目的检测CMpmn mRNA在柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）急性心肌炎小鼠心肌组织中的表达,并分析其与心肌细胞凋亡的关系。方法以CVB3单次感染Balb／c小鼠建立急性病毒性心肌炎（n=10）模型,同时设立药物干预组（n=12）及药物对照组（n=10）;同期小鼠腹腔无菌注射等剂量不含病毒的DMEM液作为正常对照组（n=8）。以缺口末端标记法（TUNEL）检测各组心肌细胞凋亡情况,计数凋亡率。用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测小鼠心肌组织中Calpain-1及Calpain-2 mRNA的表达。结果急性病毒性心肌炎组较正常对照组及药物对照组心肌组织内Calpain-1（P=0．02及P=0．04）和Calpain-2（P〈0．01及P=0．02）mRNA表达升高,心肌细胞凋亡率亦增高（P值均〈0．01）;药物对照组与正常对照组心肌组织内Calpain-1（P〉0．05）和Calpain-2（P〉0．05）mRNA及心肌细胞凋亡率均没有统计学差异（P〉0．05）;药物干预组较正常组心肌组织内Calpain-1（P〈0．01）及Calpain-2（P〈0．01）mRNA表达升高,心肌细胞凋亡率亦升高（P〈0．01）;药物干预组较急性病毒性心肌炎组心肌组织内Calpain-1（P=0．04）及Calpain-2（P〈0．01）mRNA表达升高,心肌细胞凋亡率亦升高（P〈0．01）。各实验组小鼠心肌组织中calpain-1及Calpain-2m RNA的表达水平分别与心肌细胞的凋亡呈正相关。结论柯萨奇B3病毒通过激活心肌组织内Calpain,导致心肌细胞的凋亡,从而参与病毒性心肌炎的发生。     

肾上腺皮质激素对柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌的保护作用

目的 探讨肾上腺皮质激素对柯萨奇岛病毒感染小鼠心肌损害的治疗作用。方法将200只4周龄Balb／c小鼠随机分为正常对照组、病毒对照组和病毒感染后早期激素治疗组、中期激素治疗组及晚期激素治疗组，每组加只。在病毒感染后不同时期计算心肌病理积分，空斑形成单位法测定心肌细胞病毒滴度，化学发光法检测血清肌钙蛋白I水平。结果病毒感染后7-10天，柯萨奇B3病毒感染各组小鼠心肌病理积分均显著高于正常对照组，而各感染组之间无显著性差异。病毒感染后14天，中期激素治疗组小鼠心肌病理积分显著低于其他病毒感染组，30天后中期激素治疗组小鼠心肌已完全正常，而其他各组小鼠心肌仍有病变。病毒感染后早期激素治疗组心肌病毒滴度显著高于其他各组，且消失慢。病毒性心肌炎小鼠血清肌钙蛋白I水平显著升高，并与病理变化呈直线正相关。结论肾上腺皮质激素可以明显减轻病毒性心肌炎时心肌的病理损害，对心肌细胞有保护作用，尤以病毒感染中期使用激素治疗疗效最好。     

IL-35抑制Th17细胞治疗柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎

目的研究IL-35在柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎小鼠模型心脏中的表达意义。方法通过CVB3感染BALB/c小鼠建立病毒性心肌炎模型为感染组(IF组),给予IL-35治疗的小鼠为IL-35治疗组,感染后给予空载质粒治疗的小鼠为p-FC组,正常组未给予病毒感染并给予生理盐水为对照,感染者为酶联免疫吸附法检测心脏IL-35表达,流式细胞技术检测Th17比例,小鼠心脏组织HE染色后进行心肌炎评分。结果感染CVB3病毒1 d、3 d、5 d和7 d后,BALB/c小鼠体重逐步下降分别为(22.3±4.2)g、(18.3±2.6)g、(17.1±2.4)g和(13.2±1.8)g,心肌炎评分逐步升高分别为0.5、1.5、3.0和4.0,腹腔注射IL-35表达质粒可缓解小鼠体重和心肌炎评分;心脏IL-35表达水平与小鼠体重减轻重量(r=-0.532,P=0.034)和心肌炎评分(r=-0.670,P=0.005)呈负相关;CVB3感染第7 d,经IL-35治疗的小鼠脾脏Th17细胞比例下降(P0.05)。结论在心脏组织表达的IL-35可能通过抑制脾脏Th17细胞治疗柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.