人肺癌细胞体外培养及其应用

人癌细胞体外培养是研究癌变机理和癌细胞生物学特性的重要方法。在肺癌细胞培养方面,1955年Frisch首先报告了肺腺癌患者胸水细胞建成的MABEN细胞系,1962年国内何申也报道了人肺鳞癌细胞系。随后,又有众多关于肺癌细胞建系的报道。本文就近年来人肺癌细胞体外培养技术的改进和应用研究两方面作一综述。一、人肺癌细胞体外培养(一)材料和方法肺部原发癌、转移癌,恶性渗液,淋巴结活检,骨髓穿刺及其它转移部位切取的癌组织标本均可用作体外培养的     

应用MTT法分析青蒿素对人癌细胞系Hella细胞的体外细胞毒作用

MTT法是一种快速、简便的能够半自动化定量分析细胞增殖及药物细胞毒作用的方法.青蒿素是从天然植物青蒿中提取的有效成分,有关文献曾报道了青蒿素的一些生物活性[1].为了探讨青蒿素的抗癌活性,我们通过体外MTT法分析检测了青蒿素对体外培养的人癌细胞系Hella细胞的细胞毒效应,现报告如下.     

双苓扶正抗癌制剂对人胃癌细胞周期的影响

目的：研究双苓扶正抗癌制剂对人胃癌细胞周期的影响。方法：应用体外培养方法和流式细胞技术，分析双苓扶正抗癌制剂对人胃癌SGC-7901细胞周期的影响。结果：双苓扶正抗癌制剂(160μg／ml和320μg/ml)体外加药48h和72h，可启动人胃癌SGC-7901G0期细胞进入细胞增殖周期，并将其阻滞于S期。结论：双苓扶正抗癌制剂的抗肿瘤作用机制可能涉及细胞增殖周期动力学。     

高强度聚焦超声对体外培养人肝癌细胞的作用

目的：探讨高强度聚焦超声的不同照射剂量对体外培养人肝癌细胞的作用。方法：观察人肝癌细胞经受不同剂量的高强度聚焦超声照射后的温度变化、死亡率、形态变化及其生长曲线。结果：随着高强度聚焦超声照射剂量增大，温度增加，其生物学效应越明显。结论：高强度聚焦超声能够杀灭肿瘤细胞，肿瘤细胞的死亡率与治疗剂量呈正相关。     

硒化沙棘油脂肪酸体外抗癌作用的研究

硒化沙棘油脂肪酸体外抗癌作用的研究李宝林１齐浩２薛少安１周宝石１张培梧沙棘油是从胡颓子科酸刺属灌木植物沙棘籽粒中提取而得，其中含有丰富的维生素Ｃ、维生素Ａ〔１〕。而将沙棘油皂化后所得到的物质中含有大量不饱和脂肪酸，其中以油酸、亚油酸、亚麻酸的含量较高...     

榄香烯乳对体外培养人肺癌细胞株超微结构的影响

榄香烯乳(Elemene emulsion)是从中药温莪术(Gurcurma Wenyujin Y.HCHEN)的挥发油中提取的抗癌活性成分,经乳化处理而制成的乳剂注射液。体内、体外实验研究均证实该药对肿瘤细胞有直接及间接的抑制作用。临床上显示对多种肿瘤有效,并能改善病人症状,提高生活质量。为进一步了解榄香烯乳的作用机理,我们从超微结构上观察了其对人肺癌细胞株的影响。 1 材料与方法 1.1 细胞培养 选取体外人小细胞肺癌细胞株H128、SPC,人肺腺癌细胞株Anip-937、A549、Spc-A1,在含15％小牛血清的RPMI-1640培养液中常规培养传代。     

咖啡因与苯巴比妥联合对顺铂的体外抗癌增效作用

目的：研究咖啡因（CAF）对顺铂（DDP）的抗癌增效作用及苯巴比妥（PBT）是否抑制咖啡因的抗癌增效作用。方法：以SPC－A－1细胞为,要用MTT法研究甲基黄嘌呤类药物－CAF及其与PBT联合应用对DDP的体外细胞毒作用的影响,结果：120ug/ml的CAF及10ug/ml PBT对细胞生长无明显的细胞毒作用,120ug/ml的CAF可明显增强DDP对SPC－A－1细胞的细胞毒作用（P＜0．05）,10ug/ml PBT对DDP无增效作用（P＞0．05）,120ug/ml CAF与10ug/ml PBT的混合物也能增强DDP的细胞毒作用（P＜0．01）,其增效作用与单纯CAF的增效作用比较无显著性差异（P＞0．05）,。结论：咖啡因可明显增强DDP对SPC－A－1细胞的体外抗癌效应,而苯巴比妥对咖啡因的体外抗癌增效作用无拮抗作用,提示苯巴比妥作为降低咖啡因副反应的成分,有可能与咖啡因联合作用作为化疗增效剂用于肺癌治疗。     

蝎毒组分对人大肠癌细胞的体外抑杀作用研究

目的 观察蝎毒不同组分对人大肠癌细胞的体外抑杀作用。方法 用噻唑蓝（MTT法）、集落形成抑制实验，以丝裂霉素C（MMC)为阳性对照药品，以蝎毒提取物SVCⅠ、SVCⅡ、SVCⅢ，SVCⅣ各组分、浓度分别为45μg/ml、60μg/ml、75μg/ml、90μg/ml处理人大肠癌细胞Lovo，观察Lovo的生长情况。结果 SVCⅢ对Lovo细胞的细胞毒性和集落形成的抑制作用略强于MMC组，SVCⅠ、SVCⅡ、SVCⅣ对细胞Lovo的影响在所用药物浓度内与对照组相比未见统计学差异，细胞毒性作用不显著。结论 SVCⅢ对人大肠癌细胞具有明显的细胞毒性和生长抑制作用。     

国产蜂胶对肝癌细胞体外杀伤作用的研究

采用MTT细胞毒实验分别测定不同浓度的国产蜂胶对体外培养人肝癌细胞株细胞的杀伤率，并与商业化标准蜂胶（Sigma#P-1010）比较。结果示国产蜂胶和标准蜂胶对肝癌细胞喜闻乐见 有杀伤作用，且呈浓度-抑制率相关关系。而对正常细胞的影响较小。     

人胃癌原代细胞短期培养与纯化培养体外药敏试验

目的 :评价人胃癌原代细胞短期培养 (混杂非肿瘤细胞 )与纯化培养MTT法体外药敏试验的可行性、各自的优势与缺陷。方法 :采用短期培养MTT比色法测定 7种化疗药物敏感性。另经反复贴壁、胶原酶消化排除、胰蛋白酶消化选择或自然纯化法获得纯的原代肿瘤细胞 ,再行MTT法。测定两种方法细胞数与A(光密度 )值的相关性、药物抑制率及两种方法药敏结果的灵敏性。结果 :短期法MTT药敏试验成功率 81 4% (48/59) ;纯化培养为 50 8% (30 /59) ;两种方法细胞数与A值均呈直线相关 (P均 <0 0 1 ) ,药敏结果具有可比性 ;两种方法 7种药物敏感性顺序一致 ,但纯化法显示 7种化疗药物的抑制率有 6种均高于短期法 ,表明纯化法较敏感 ;纯化培养所需时间平均 (2 0 2± 9 5)天。结论 :人胃癌原代细胞短期培养MTT比色法快捷、简便 ,能够反映化疗药敏结果的基本趋势及个体化差异 ,但灵敏性略低。纯化培养后药敏试验结果更理想 ,但成功率不高     

细胞生长液与粘附胶原对大肠肿瘤细胞体外生长的影响

本文以ＲＰＭＩ１６４０培养液为基础，探讨了补加因子及粘附胶原对大肠癌细胞体生长和贴壁的影响，结果表明：在基础培养液中添加１０％的补充液可显著促进大肠癌细胞的生长，降低癌细胞对培养液的需求量；并表明，鼠尾胶原可明显促进癌细胞克隆形成率。对于组织贴壁培养，粘附胶原组成功率（６６．７％），亦明显比无胶原被复组（４１．７％）为高。     

LPAK细胞对裸鼠人胃癌的抗瘤作用

LPAK细胞(Lymphokine and PHA Activated Killer cells,LPAK)在体外实验中对Raji细胞和SGC-7901胃癌细胞均有较强的杀伤活性. LPAK细胞对裸鼠SGC-7901胃癌亦有显著的抗瘤作用,抑瘤率达84.6±8.6%.     

As2O3联合Ad-pml体外抗肝癌细胞作用的实验研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合腺病毒介导的早幼粒细胞性白血病基因(promyelocytic leukemia-adenovirus,Ad-pml)体外抗肝癌细胞作用。方法:同时设Ad-pml组、As2O3组、As2O3联合Ad-pml组以及正常细胞对照组,运用分子生物学和细胞生物学技术,观察联合应用As2O3和Ad-pml在体外治疗肝癌的效果,并进一步探讨其作用机制及特点。结果:Ad-pml与As2O3对肝癌细胞体外生长的影响:两因素析因设计分析结果表明,单用Ad-pml处理肝癌细胞,其抑制作用随Ad-pml MOI值的增加而增加(P<0.05),单独应用As2O3在浓度小于5μmol/L时,未发现有明显的肿瘤抑制作用(P>0.05);As2O3和Ad-pml联合应用具有协同抗肿瘤作用,二者之间存在着交互作用(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡结果:用Ad-pml和As2O3共同作用肝癌细胞24小时后,早期细胞凋亡率明显增高。RT-PCR结果表明,联合治疗组p53表达最高,而Bcl-2表达最低,相反,肝癌细胞对照组p53表达最低,而Bcl-2表达最高。结论:As2O3和Ad-pml联合应用有协同抗肝癌细胞作用,其机制与增强肝癌细胞凋亡及控制凋亡相关基因的表达有关。     

大黄素在体外诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡的初步研究

背景与目的:大黄素(3-甲基-1,6,8-三羟蒽醌)是大黄等多种中药的有效成分之一。研究表明大黄素对于乳腺癌细胞、肺癌细胞的生长具有抑制作用,但目前大黄素抗肿瘤的作用机理尚不明确。本研究拟讨论大黄素在体外对肝癌细胞HepG2的作用及其机理。方法:应用MTT、软琼脂克隆形成、DNAladder凝胶电泳及流式细胞术等方法,研究中药单体大黄素对肝癌细胞HepG2生长增殖的影响以及作用机理。结果:大黄素在较低浓度可抑制肿瘤细胞的生长,MTT实验测得的半数抑制浓度(IC50)为(36±2.6)μg/ml。在软琼脂实验中,大黄素可以浓度依赖的方式抑制细胞克隆的形成。经DNAladder及流式细胞仪检测发现,大黄素能诱导HepG2细胞凋亡,与阴性对照相比,随着药物浓度从10μg/ml增加到20μg/ml,AnnexinV染色细胞显著增多,由27.3%增至59.6%;当药物浓度增至40μg/ml时,培养液中几乎无活细胞,由碘化丙啶和AnnexinV双重标记的凋亡后期以继发性坏死细胞为主。结论:中药单体大黄素在体外能抑制肝癌细胞HepG2的生长增殖,并能诱导该细胞凋亡。     

催乳素对人NK细胞抗癌效应的调节作用

ＮＫ细胞是机体抗癌的前哨，属免疫系统个体发育中较早形成的细胞。ＰＲＬ为机机体十分重要的脑本激素。在生命基本活动中起重要作用。由于ＰＲＬ的受体类似于许多造血免疫相关的细胞因子，因而ＰＲＬ的促造血和调节免疫功能的作用十分引人注目，其中ＰＲＬ与ＮＫ的关系倍受关注。ＮＫ细胞膜可表达高亲和力的ＰＲＬ受体，ＰＲＬ对ＮＫ扔ＰＲＬ受体作用可引起ＮＫ的ＩＬ－２Ｒ和ＩＬ－２基因表达，从而调控ＮＫ的功能。     

中药复方三生注射液对体外培养人胃癌细胞的抗癌作用的研究

复方三生注射液是生附片、生川乌、生南星、玄胡、木香、三七等六味中药提取有效成份制成的水溶性注射制剂。经基础和临床研究证明对晚期肺癌有明显疗效,对肝癌、胃癌等其他癌瘤有一定疗效。作者用体外培养人胃癌细胞研究,结果表明复方三生     

保尔佳抑制体外培养人肝癌细胞的生长

保尔佳是从动物脾脏中提取的活性肽,为证明其直接抗肿瘤细胞生长作用,我们观察了人肝癌细胞株在含保尔佳培养液中的生长情况。１　材料与方法１．１　材料人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４和ＳＭＭＣ－７７２１由第四军医大学病理教研室提供。对照组为含１０％小牛血清的ＲＰＭＩ－１６４０培养液,实验组另加入３０μｇ／ｍｌ的保尔佳。１．２　噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法和流式细胞术（ＦＣＭ）获取对数生长期人肝癌细胞制成１×１０４／ｍｌ浓度的细胞悬液,按１０００个／孔的密度接种于２４孔培养板上,过夜后细胞换液,加入实验组和对照组…     

稀土抗诱变抗癌作用体外实验研究

稀土抗诱变抗癌作用体外实验研究崔明珍，肖白，卢庆生，蔡丽，杨华（北京市劳动卫生职业病防治研究所北京１０００２０）为探索稀土元素在肿瘤防治方面的应用前景，我们采用若干体外实验系统，研究了稀士化合物（ＲＥ）的抗诱变和抗癌作用。用拟Ａｍｅｓ试验纸圈小区抑制...     

体外IL-2或IFN-α基因转染人肾癌细胞对其浸润性和转移性的影响

IL-2、IFN-α基因转染的人肾癌细胞体外生长及体内致瘤性下降，本文进一步IL-2和／或IFN-α基因转染对人肾癌R11细胞浸润性和转移性的影响。     

沙培林对胃癌SGC7901细胞体外作用的研究

目的:观察沙培林在体外对人胃癌SGC7901细胞的作用.方法:以不同浓度的沙培林(0、0.001KE/ml、0.01KE/ml、0.1KE/ml和0.5 KE/ml)处理6h、12h、24h和48h后,噻唑蓝(MTT)比色法观察SGC7901细胞的生长情况;0.5 KE/ml沙培林作用于胃癌SGC7901细胞48h后,流式细胞仪检测细胞周期的变化;免疫组化染色观察药物处理前后的p53、p27、PCNA蛋白的表达.结果:沙培林对SGC7901胃癌细胞具有抑制增殖效应,并在一定范围呈现时间和浓度依赖性;沙培林(0.5 KE/ml)作用48h后,周期检测发现SGC7901细胞G0/G1期细胞下降,S期增加(P< 0.01);免疫组化结果显示:沙培林干预可使SGC7901细胞p53蛋白表达下调,p27蛋白表达上调(P< 0.01),PCNA蛋白表达组间无统计学差异(P>0.01).结论:沙培林可改变SGC7901细胞周期分布,抑制细胞增殖;可使细胞p53表达减少,p27表达增加.