心肌尔康颗粒抗病毒性心肌炎的实验研究

目的 :观察心肌尔康颗粒对病毒性心肌炎的防治作用。方法 :采用小鼠病毒性心肌炎模型及体外抗柯萨奇B_3m病毒实验 ,阿霉素致小鼠中毒性心肌炎模型 ,氯化钡、氯仿致心律失常模型 ,蛋清、琼脂致炎模型及心脏血流动力学等试验。结果 :心肌尔康颗粒在体内、外均有抗柯萨奇病毒B_3m作用 ,对小鼠病毒性心肌炎和中毒性心肌炎均有防治作用 ,能降低小鼠死亡率及血清LDH,AST和CK水平 ,改善心电图及心肌的病理性损害 ,以及降低病毒性心肌炎小鼠血清中和抗体和心脏病毒滴度。还有抗心律失常、增强心肌收缩力、抗心肌缺氧、抗炎作用 ,以及能升高大鼠血清IgG水平。结论 :心肌尔康颗粒有抗病毒性及中毒性心肌炎的作用。     

黄芩、柴胡及其配伍提取物对柯萨奇病毒B3m感染Balb/c小鼠心肌炎治疗作用

目的:探讨黄芩、柴胡及其配伍提取物对柯萨奇病毒B3m(CVB3m)感染小鼠心肌炎的治疗作用。方法:采用腹腔注射CVB3m诱导Balb/c小鼠心肌炎模型,用黄芩、柴胡及其配伍提取物对此动物模型进行治疗,观察各组小鼠给药后不同时间点的一般状态、存活率、心脏/体质量比值、心肌组织病理积分和心肌CVB3m病毒滴度情况。结果:3组药物均能不同程度改善模型小鼠的一般状态、心脏/体质量比值、存活率及心肌组织病理积分,同时降低模型小鼠的心肌组织病毒滴度;柴胡组和配伍组心肌组织病理积分明显低于黄芩组;黄芩组的病毒滴度明显低于柴胡组。结论:柴胡在减轻心肌病理损伤方面作用显著;黄芩在抑制病毒增殖作用方面作用显著;配伍组药物具有抑制病毒复制和减轻病理损伤作用。     

心肌康注射液对急性柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠免疫功能影响的实验研究

为了进一步探讨中药“心肌康”治疗病毒性心肌炎的作用机制,观察了“心肌康”对急性Cox-sackieB_3病毒性心肌炎BALB/C小鼠免疫功能的影响。实验结果表明:急性CoxsackieB_3病毒性心肌炎BALBC/C小鼠脾脏PFC降低,T细胞总数及T_H降低,T_H/Ts比值倒置,NK细胞活性降低;证明感染小鼠呈免疫抑制状态。中药“心肌康”具有增加急性CoxsackieB_3病毒性心肌炎BALB/C小鼠脾脏PFC作用,可提高其T细胞总数和T_H百分率及T_H/Ts比值,并可增强其NK细胞活性,增强其单核巨噬细胞舌噬功能;证明该药具有免疫增强作用。     

苏木乙酸乙酯提取物对急性病毒性心肌炎小鼠模型心肌组织IFN-γ的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对急性病毒性心肌炎小鼠模型心肌组织中干扰素-γ(Interferon gamma,IFN-γ)水平及其心肌组织病理形态学改变的影响,探讨苏木对病毒性心肌炎的治疗机制。方法:选用清洁级、4周龄近交系纯种健康雄性Balb/c小鼠50只,随机分为3组,苏木乙酸乙酯提取物组20只,模型对照组20只,空白对照组10只,苏木乙酸乙酯提取物组、模型对照组小鼠给予腹腔注射接种半数组织培养感染剂量为10-7/m L的柯萨奇病毒B3(CVB3)Nancy株病毒稀释液0.3 m L。空白对照组小鼠注射同体积的RM1640溶液;接种病毒0.5 h后,苏木乙酸乙酯提取物组小鼠给药苏木乙酸乙酯提取物溶液0.2 m L;模型对照组及空白对照组按体质量计算等容量0.2%羧甲基纤维素钠溶液给药,每日1次,连续给药14 d后,小鼠断颈处死并取出心脏,常规石蜡包埋,采用免疫组化法测定小鼠心肌组织IFN-γ的含量,光镜下观察心肌病理形态学改变。结果:与模型对照组比较,苏木乙酸乙酯提取物组小鼠心肌组织IFN-γ的表达水平明显降低(P0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物能够显著降低CVB3感染小鼠心肌组织中IFN-γ表达水平,从而发挥治疗病毒性心肌炎的作用。     

病毒性心肌炎小鼠心肌颗粒酶B的表达及清心胶囊的干预作用

目的:探讨颗粒酶B对病毒性心肌炎(VMC)心肌病变的影响,进一步阐明VMC的发病机理和清心胶囊治疗VMC的作用机制。方法:将62只5～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分成3组:正常组10只,模型组和治疗组各26只。于第11天处死小鼠取出心脏观察心肌病变,并以半定量RT-PCR和免疫组化方法检测心肌颗粒酶B的表达。结果:模型组和治疗组小鼠心肌组织中均检测到颗粒酶BmRNA的表达,且模型组表达明显高于治疗组,两组中颗粒酶B阳性细胞数分别为2.7333±3.1043、0.8000±0.9487个/高倍视野(P<0.01);正常组心肌中未检测到颗粒酶B的表达。结论:心肌浸润细胞中颗粒酶B的表达可能在病毒性心肌炎心肌损伤中起一定作用;清心胶囊对CVB3病毒性心肌炎的治疗机理,还可能与其能够抑制活化的CTL和NK细胞中颗粒酶B的表达,减轻炎症反应的损伤作用有关。     

心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠的防治作用

目的探讨心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠的心肌保护作用。方法采用BALB/C小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3),建立小鼠病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为空白对照组,模型组,心安颗粒10、20、40g原药材/(kg·d)组和病毒唑[0.1g/(kg·d)]组。一批小鼠先注射CVB32h后给药,连续用药7d,第8天处死小鼠,取血测定血清乳酸脱氢酶(LDH),取心脏称重并作心肌病理学检查;另一批小鼠先用药2d,注射CVB3后用药7d,观察20d,记录小鼠存活时间。结果心安颗粒治疗组与模型组相比,心脏指数降低,心表面出血点检出率明显减少,心肌组织病理损伤减轻,血清LDH含量明显降低,小鼠存活时间明显延长。结论心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠具有防治作用。     

益心康对柯萨奇B_(3m)病毒性心肌炎小鼠作用的实验研究

目的 :实验观察中药复方益心康 ,对实验性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护作用和对心肌细胞内病毒复制的抑制作用。方法 :诱导Balb/c小鼠形成病毒性心肌炎模型 ,分别予益心康、病毒唑稀释液、生理盐水灌胃。测每个小鼠血清磷酸肌酸激酶 (CK)及其同功酶MB(CK -MB) ,测心肌细胞感染CVB3mRNA量。结果 :中药治疗组小鼠的血清CK和CK -MB明显低于其它两个治疗组。中药治疗组小鼠的心肌细胞含有的病毒RNA量明显少于其它两个治疗组。结论 :益心康对柯萨奇B3m病毒性心肌炎小鼠有保护作用 ,并抑制柯萨奇病毒B3m在心肌细胞中的复制。     

益心饮对病毒性心肌炎心肌组织穿孔素和颗粒酶B基因表达的影响

目的观察益心饮对实验性病毒性心肌炎心肌穿孔素和颗粒酶B基因表达的影响.方法用cVB3感染Ba1b/c小鼠造成病毒性心肌炎动物模型,分别用生理盐水、益心饮口服液灌胃治疗,观察7 d和14d的心肌组织病理变化,并以RT-PcR法检测心肌组织中穿孔素和颗粒酶BmRNA表达水平.结果益心饮能够明显降低心肌组织中穿孔素和颗粒酶B mRNA表达,并明显减轻心肌的病理形态学损伤.结论益心饮有明显的抗免疫损伤作用,可能是通过降低穿孔素和颗粒酶B mRNA的表达而发挥免疫抑制作用.     

益心饮对病毒性心肌炎小鼠心肌PFP和GraB mRNA表达的影响

目的：观察益心饮对实验性病毒性心肌炎心肌穿孔素和颗粒酶B基因表达的影响。方法：用CVB3感染Balb／c小鼠造成病毒性心肌炎动物模型，分别用生理盐水、益心饮口服液灌胃治疗，观察7d和14d的心肌组织病理变化，并以RT—PCR法检测心肌组织中穿孔素和颗粒酶B mRNA表达水平。结果：益心饮能够明显降低心肌组织中穿孔素和颗粒酶B mRNA表达，并明显减轻心肌的病理形态学损伤。结论：益心饮有明显的抗免疫损伤作用，可能是通过降低穿孔素和颗粒酶B mRNA的表达而发挥免疫抑制的作用。     

保心胶囊对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌组织TNF-α的影响

目的:观察保心胶囊对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌组织TNF-α表达的影响,探讨其防治慢性VMC的可能机制,为进一步指导临床提供客观依据。方法:将90只Balb/c小鼠,随机分为3组,空白对照组、模型对照组、保心胶囊组,每组30只;腹腔注射CVB3m复制慢性病毒性心肌炎动物模型;RT-PCR法观察模型小鼠心肌组织TNF-α表达水平的变化。结果:保心胶囊能下调慢性病毒性心肌病小鼠心肌组织TNF-α的表达水平。结论:保心胶囊下调慢性病毒性心肌炎小鼠心肌组织TNF-α的表达,这可能是其防治慢性病毒性心肌炎的作用机制之一。     

丹参、川芎对CoxsackieB_3病毒感染后小鼠心肌纤维化的影响

目的:评价丹参、川芎对病毒性心肌炎替代性胶原增生及心肌纤维化的影响。方法:用 Cox-Sackie B_3病毒感染小鼠制成病毒性心肌炎模型,治疗组分别每天用丹参或川芎水煎液(5g/kg)喂服,3个月后取材,观察小鼠心肌胶原含量及瘢痕面积。结果:病毒感染2周内各感染组的死亡率差异无显著性。感染组心室重、心室重/体重、斑痕面积/总面积比值与心肌胶原含量均明显高于正常组,两种药物治疗组上述参数则明显低于感染组。结论:丹参、川芎可明显减轻病毒性心肌炎所致的心肌胶原增生。     

羚桂龙牡颗粒对病毒性心肌炎小鼠血清IFN-γ、IL-4水平的影响

目的：探讨羚桂龙牡颗粒对病毒性心肌炎的作用机制。方法：采用小鼠心肌注射柯萨奇病毒复制病毒性心肌炎模型,实验分为3组,正常组、模型组、中药羚桂龙牡颗粒组,于给药第7、14天采血,ELISA法测定血清IFN-γ和IL-4水平。结果：羚桂龙牡颗粒可显著升高病毒性心肌炎小鼠血清IFN-γ水平,降低IL-4水平,与模型组比较有显著性差异。结论：调节IFN-γ和IL-4水平是羚桂龙牡颗粒治疗病毒性心肌炎的作用机制之一。     

心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠IL-6,TNF-α及病毒复制的影响

目的:研究心安颗粒对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的柯萨奇B3病毒(CVB3)mRNA,白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将60只健康雄性BALB/c小鼠随机分为6组,空白组、模型组、利巴韦林组(阳性药物,0.02 g·kg-1·d-1)和心安颗粒高、中、低剂量组(12,6,3 g·kg-1·d-1),其中空白组腹腔接种0.15 m L生理盐水,其余5组均腹腔接种1×10-8TCID50·m L-1CVB3 Nancy标准病毒液0.15 m L,进行模型制备。造模2 h后对各给药组小鼠灌胃(ig)相应药物,空白组和模型组小鼠ig生理盐水,连续7 d。7 d后小鼠进行实验,观察小鼠心肌组织病理变化,并进行评分;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌组织中CVB3 mRNA水平和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α,IL-6蛋白表达。结果:给药7 d后,与空白组比较,模型组心肌细胞排列紊乱,出现间质水肿,可见大量炎症细胞浸润,发生明显病变,心肌病变评分和心肌组织中CVB3 mRNA表达水平和IL-6,TNF-α蛋白水平明显升高(P0.05);与模型组比较,各给药组小鼠心肌组织病变得到改善,病理评分和心肌组织中CVB3 mRNA和TNF-α,IL-6蛋白水平明显降低(P0.05)。结论:心安颗粒可明显下调病毒性心肌炎模型小鼠心肌组织中CVB3 mRNA和TNF-α,IL-6蛋白水平的表达,推测是其防治病毒性心肌炎的作用机制之一。     

卫益颗粒抗病毒作用的实验研究

目的 :观察卫益颗粒对FM1流感病毒感染小鼠的治疗效果 ,判定卫益颗粒的抗病毒作用。方法 :统计病毒性肺炎小鼠的死亡率 ,测定小鼠肺悬液中病毒的血凝滴度 ,在光学显微镜下观察小鼠呼吸器官病理改变。结果 :卫益颗粒能降低流感病毒FM1株感染小鼠的死亡率和肺悬液中病毒的血凝滴度 ,并显著减轻肺部病变。结论 :卫益颗粒通过抑制肺内流感病毒的复制 ,减轻肺脏炎性病变 ,降低死亡率等 ,卫益颗粒大剂量组也可以显著改变肺部病变 ,说明卫益颗粒有一定的抗病毒作用。     

抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊复方新制剂抗CVB3作用

目的 通过体内外实验观察抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊K-CoXB-JN复方新制剂对柯萨奇B3(CVB3)病毒感染的心肌细胞和病毒性心肌炎(VMC)小鼠的保护作用.方法 体外实验用1000 TCID50的CVB3感染心肌细胞后,分别加入不同浓度的K-CoXB-JN复方新制剂和利巴韦林,并设定正常对照组和模型对照组,当细胞病变达到75％后,测定细胞上清液中肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;体内实验用CVB3感染Balb/c小鼠造成病毒性心肌炎模型,分别予K-CoXB-JN复方新制剂高、中、低剂量,利巴韦林和纯水连续灌胃14 d,记录小鼠死亡数,观察药物对小鼠的死亡保护情况.结果 K-CoXB-JN复方新制剂可降低CVB3感染的心肌细胞培养上清液中CK、AST、LDH含量,降低病毒性心肌炎小鼠的死亡率,给药组和模型对照组相比较P＜0.05.结论 K-CoXB-JN复方新制剂对CVB3感染的心肌细胞和病毒性心肌炎小鼠具有保护作用.     

黄芩、柴胡对CVB3m小鼠心肌炎凋亡及相关基因Bcl-2/Bax表达的影响

目的:观察黄芩、柴胡提取物对CVB3m小鼠心肌炎凋亡及相关基因Bc l-2/Bax表达的影响。方法:采用腹腔注射CVB3m病毒诱导Balb/c小鼠心肌炎模型,采用TUNEL检测心肌组织细胞凋亡,免疫组化法检测心肌组织Bc l-2、Bax蛋白表达,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测小鼠Bc l-2/BaxmRNA表达。结果:与模型组比较,黄芩、柴胡组心肌组织的凋亡细胞指数均明显增高;两组心肌组织中的Bc l-2表达明显下降,而黄芩组下降尤为明显;两组Bax的表达与模型组相比差异不显著。在病毒感染的3、5、7天的病理积分与Bc l-2蛋白阳性表达强度呈明显正相关。结论:黄芩、柴胡在病毒性心肌炎的急性期具有减轻心肌的病理损伤作用,其机制可能与其促进受染细胞的凋亡有关,而黄芩的作用表现尤为明显。     

心肌泰胶囊治疗病毒性心肌炎的实验研究

目的：观察心肌泰胶囊对柯萨奇病毒的抑制作用及其所诱导的大鼠心肌炎的治疗作用。方法：采用细胞病变抑制法(CPE)观察心肌泰胶囊及心肌片1号的抗柯萨奇病毒B3作用，并用小鼠腹腔注射氢化可的松加柯萨奇病毒B3液制作心肌炎模型，观察心肌泰胶囊的治疗作用。结果：心肌泰胶囊对柯萨奇B3有明显的抑制作用，可明显减少心肌炎小鼠的死亡率，改善一般状况，减轻心肌病理性损伤，结论：心肌泰胶囊对柯萨奇B3病毒确有抑制作用，是治疗心肌炎的有效药物。     

通脉口服液对柯萨奇病毒抑制作用及对小鼠急性CVB3m心肌炎治疗作用的实验研究

目的探讨通脉口服液对柯萨奇病毒感染的小鼠心肌炎模型的治疗作用和抑制病毒效果。方法用通脉口服液和病毒唑注射液分别于模型小鼠（CVB3m所致Balb／c小鼠心肌炎）连续给药7d，第8日取心肌和血标本；观察病死率、心肌炎发病率和心肌病理以及心肌组织与血的病毒滴度。结果通脉口服液能明显降低心肌炎模型小鼠心肌中的病毒滴度，其中高剂量组的作用强度明显大于低剂量组和病毒唑对照组；通脉口服液可以明显降低模型小鼠心肌炎的病死率（高剂量与低剂量），明显减少心肌组织病理积分（高剂量）。结论通脉口服液对心肌炎具有较明显的治疗作用，可以明显减轻病毒对心肌细胞直接损害。     

心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达影响的实验研究

目的:观察心肌康对慢性病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡及Fas/FasL蛋白表达的影响,探讨心肌康的作用机制。方法:给Balb/c小鼠多次接种嗜鼠心肌柯萨奇B3病毒制作慢性VMC模型,首次感染病毒50天后将存活小鼠分为模型组、心肌康组及氯沙坦组,同时设正常对照组,分别予以相应药物干预30天,采用原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡及免疫组化方法检测Fas/FasL蛋白表达。结果:正常组未见到心肌细胞凋亡,模型组心肌细胞凋亡,凋亡率较正常组显著增加(P<0.05),心肌康组和氯沙坦组凋亡率较模型组显著降低(P<0.05)。模型组Fas/FasL蛋白表达较正常组显著增多(P<0.01),心肌康组和氯沙坦组较模型组显著降低(P<0.01)。结论:心肌细胞凋亡参与了慢性病毒性心肌炎的发病,心肌康能够抑制VMC心肌细胞的凋亡,通过下调Fas/FasL蛋白表达,对心肌细胞起到保护作用。     

金银花对病毒性心肌炎小鼠血清心肌酶的影响

目的:探讨金银花对于CVB3病毒感染小鼠心肌损伤模型的保护作用。方法:将CVB3病毒在HeLa细胞培养基中培养,一段时间后测定细胞的半数感染量,将CVB3病毒培养液接种在小鼠腹腔内,借此创建VMC模型。小鼠随机分为正常对照组,模型组,金银花低剂量组、金银花高剂量组,灌胃给药3周。应用酶联免疫法检测各组感染小鼠体内3种心肌酶(磷酸肌酸激酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶)在血清中的释放量;并将其心肌组织进行HE染色,观察其形态学病理变化。结果:金银花低剂量组、高剂量组对于血清LDH、AST、CK含量具有明显抑制作用(P0.05),金银花能减小心肌炎症对周围的浸润范围,有效抑制心肌炎病情的恶化,保护心肌组织。结论:金银花可以有效抑制机体内VMC病毒的扩散,对防治感染程度较轻的小鼠VMC具有一定的效果。