流体切应力作用下乙醇对血管内皮细胞HSP70表达的影响

目的探讨在流体切应力作用下不同浓度的乙醇对血管内皮细胞HSP70表达的影响。方法不同浓度的乙醇分别在静止状态下和1 Pa切应力下作用于培养的EA．Hy926内皮细胞1h、2h、4h、6h,不加乙醇组为对照组,用免疫组化SP法观察内皮细胞HSP70的表达。结果对照组在静止状态下无HSP70的表达,在1 Pa切应力作用4h后可见表达;50mg／dL乙醇组不管在有无切应力作用下表达HSP70与对照组的差异均无统计学意义;150mg／dL和300mg／dL乙醇组在静止状态下作用于内皮细胞4h和2h可见HSP70表达,在1 Pa切应力作用下表达明显增强。绪论中、高浓度的乙醇与流体切应力的联合作用能明显增强内皮细胞HSP70的表达,同时与作用时间也有密切关系。     

γ-干扰素在体外对血管内皮细胞凋亡的诱导作用

目的: 观察γ-干扰素(IFN-γ)对血管内皮细胞(EC)的作用及其对肿瘤坏死因子-α(TNFα)表达的影响。方法: 体外培养EC,MTT法检测IFN-γ(0、20、40、80μg/L)对EC生长的直接影响,半定量逆转录-多聚酶链反应检测不同浓度的IFN-γ对EC凋亡相关基因TNFαmRNA的表达的影响。结果: IFN-γ可抑制体外培养的EC生长(P<0.01),且具有剂量依赖;IFN-γ能明显上调EC的TNFα表达。结论: IFN-γ可能通过上调EC中TNFα的表达而诱导EC凋亡。     

血管内皮细胞损伤机制及其药物保护的研究进展

20世纪60年代以前,人们仅认为血管内皮细胞衬附在血管内壁,维持血管内膜的光滑,并作为半透膜,将血管内外分开.自于His1865年首先提出内皮这概念以来,人们对内皮功能的研究逐渐深入.20世纪70年代,Vane等发现由EC(endothe-lial cells)产生的前列环素(PGI2)具有很强的舒血管和抗血小板聚集活性.到了20世纪80年代,随着血管内皮舒张因子(EDRF-NO)的发现及对其重要功能的认识,人们对EC功能的研究逐渐进入一个崭新的时代.     

氯沙坦对大鼠血管内皮保护作用机制研究

目的:探讨氯沙坦对于大鼠血管内皮保护作用机制。方法:选取24只残肾模型SD大鼠随机分为对照组和观察组,每组各12只。对照组大鼠给予生理盐水灌胃;观察组大鼠给予氯沙坦进行治疗。3个月后,观察两组大鼠毛细血管内皮细胞密度、肾小球纤维化程度情况,血管内皮生长因子、血小板反应蛋白表达水平情况等。结果:观察组大鼠的血肌酐、血脂水平、24 h尿蛋白量等指标均明显低于对照组。结论:氯沙坦能够有效降低残肾大鼠血管内皮细胞的损伤情况,不断改善其肾功能。     

大豆异黄酮对动脉粥样硬化所致血管内皮细胞损伤的保护作用

血管内皮细胞能分泌众多生物活性物质,在维持正常的血管功能方面发挥着重要的作用.动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)病变中内皮细胞功能发生显著改变,功能改变的内皮细胞又能通过分泌众多生物活性物质进一步促进AS的发生发展.大豆异黄酮(soybean isoflavone,SI)具有多种生物活性,对预防AS所致的血管内皮细胞损伤保护有很重要的作用,为抗AS的治疗提供新思路.本文综述了SI对这些活性物质的重要生物学特点及其抗氧化作用在AS病变中的重要地位.     

杏丁注射液对血管内皮细胞HSP 72表达的影响

目的:观察杏丁注射液对紫外线照射后血管内皮细胞热休克蛋白72(heat shock protein 72,HSP 72)表达的影响.方法:采用体外培养的猪主动脉血管内皮细胞,以含浓度分别为0.1、0.5、1.0、5.0、10 mg/ml的杏丁注射液的培养基培养72 h后,用紫外线分别照射细胞30 min,以Western-blot方法检测内皮细胞中的HSP 72表达.结果:正常情况下检测不到HSP 72表达,紫外线照射后血管内皮细胞HSP 72有较强表达,杏丁注射液在0.1 mg/ml浓度即有很明显的促进HSP 72表达的作用,1.0 mg/ml浓度时其作用达到高峰,再增加浓度并不能增加HSP 72表达.结论:杏丁注射液能通过促进HSP 72表达而保护血管内皮细胞在应激状态下免受损伤,这可能是其防治心脑血管疾病的重要机制之一.     

染料木黄酮对人血管内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 观察染料木黄酮(genistein, Gen)对人血管内皮细胞株EA hy.926氧化应激损伤保护效应并探讨其机制.方法 用H2O2建立氧化应激损伤模型,CCK-8法检测Gen对细胞活力的影响;流式细胞仪和TUNEL法检测Gen对氧化应激诱导细胞凋亡的影响;Western blot检测Gen对Bcl-2、Nrf2、HO-1表达的影响.结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为650 μmol/L),Gen(100～500 nmol/L)处理能显著抑制细胞活力下降,且细胞凋亡率由16.54%下降为6.18%;Gen对Bcl-2有上调作用;Gen能激活Nrf2/HO-1抗氧化途径.结论 Gen抑制血管内皮细胞的氧化应激损伤与对Bcl-2的调节和Nrf2/HO-1抗氧化途径的激活有关.     

Corilagin抗PAF诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究Corilagin抗血小板活化因子（PAF）损伤人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制．方法用PAF损伤HUVEC,采用MTT法测定Corilagin对HUVEC活性的影响;以Fura-2／AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用ELISA法测定培养的细胞上清液中t-PA、PAI-1含量的变化．结果1μmol／L的PAF刺激内皮细胞2h后,可明显降低HUVEC的吸光度值,细胞内钙离子浓度升高,PAI-1含量明显升高,t-PA含量无明显变化;50～200μmol／L的Corilagin可升高PAF引起HUVEC吸光度值的降低,呈浓度依赖性显著降低HUVEC内游离钙浓度;Corilagin明显抑制PAF诱导的PAI-1分泌增高,对t-PA水平无明显影响．结论Corilagin对PAF诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制PAI-1产生、调节t-PA／PAI-1平衡密切相关．     

姜黄素对血管内皮细胞过氧化氢损伤的保护作用及其机制研究

目的研究不同浓度姜黄素（Cur）对正常血管内皮细胞活力的影响,及Cur对血管内皮细胞过氧化氢（H2O2）损伤的保护作用及机制。方法用不同浓度Cur（12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）8 h,MTT法检测不同浓度Cur对HUVECs存活率的影响;H2O2（250μmol/L）孵育建立HUVECs损伤模型,不同浓度Cur（12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）与H2O2共同处理HUVECs 4 h,检测细胞存活率,黏附能力和培养液中乳酸脱氢酶（LDH）释放量;Griess法测定培养液中NO2-浓度,反映内皮细胞释放一氧化氮（NO）量。结果不同浓度Cur处理内皮细胞8 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异（P〉0.05）;Cur能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率和黏附能力（P〈0.01）,降低内皮细胞LDH的释放（P〈0.01）;增加H2O2损伤后HUVECs培养液中NO含量（P〈0.01）。其中Cur浓度为25μmol/L时效果最明显。结论不同浓度Cur（12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L）对内皮细胞的存活率均无影响;Cur对血管内皮细胞氧化损伤具有保护作用,机制可能与其促进NO的合成有关。     

球松素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的观察球松素对人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法采用灌注消化法分离培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,并对其进行形态学和免疫组织化学染色鉴定。用脂多糖（LPS）诱导建立人脐静脉血管内皮细胞的损伤模型,随后用球松素作用于受损伤细胞,观察其对HUVEC的保护作用。结果倒置显微镜下可见细胞呈梭形,单层铺路石状排列,Factor VIII相关抗原免疫组织化学染色鉴定阳性。100μg/L的LPS对脐静脉内皮细胞生长有明显的抑制作用,可作为人脐静脉内皮损伤模型的造模浓度。球松素能减轻LPS对细胞的损伤（P〈0.05）,并呈剂量依赖关系。结论球松素对LPS所诱导的人脐静脉内皮细胞损伤有保护作用。     

大蒜素对高半胱氨酸所致内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究大蒜素对高半胱氨酸所致内皮细胞损伤的保护作用。方法：将培养的内皮细胞分成高半胱氨酸组（模型对照组）、大蒜素大剂量组、大蒜素中剂量组、大蒜素小剂量组、空白对照组5组,分别加不同的培养液,并于加药后的12、24、36?h取出上清液测乳酸脱氢酶（LDH）;另外采用MTT比色法观察细胞的存活率。结果：大蒜素小、中剂量组显示出对内皮细胞的保护作用：大蒜素小、中剂量组与模型对照组比较均能明显降低LDH含量（P＜0.05）;大蒜素大剂量组在36?h拮抗Hcy损害作用降低,跟模型对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。这一结果跟MTT测试结果吻合：小、中剂量的大蒜素组光吸收值A较模型对照组明显升高（P＜0.01）,大蒜素大剂量组A值跟模型对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：大蒜素小、中剂量可明显降低高半胱氨酸对内皮细胞的损伤,有效防治高半胱氨酸血症。     

川芎嗪对脂多糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)RhoA、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK2)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)磷酸化及细胞骨架连接蛋白(ezrin-radxin-moesin,ERM)磷酸化水平的影响。方法:以体外培养的HUVEC为实验对象,分为对照组、LPS组和TMP组(0.5、1.0、1.5 mg/mL),荧光定量PCR测定内皮细胞RhoA、ROCK2和信使RNA(p-Ezr mRNA)的表达,Western blot法测定内皮细胞RhoA、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白水平的表达。结果:与对照组比较,LPS组RhoA、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及RhoA、ROCK2和p-Ezr mRNA表达均显著升高(P<0.01);与LPS组比较,TMP 3组RhoA蛋白表达与mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05),ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及ROCK2、p-Ezr mRNA表达均降低(P<0.05~P<0.01),且TMP 3组之间ROCK2、p-MLC和p-ERM的分子表达差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01)。结论:TMP对LPS诱导的HUVEC损伤的保护作用可能是通过抑制Rho/ROCK信号通路中ROCK2、p-MLC和p-ERM的表达,以减弱LPS对内皮细胞骨架的损伤。     

锌对尿毒症血清诱导的内皮细胞氧化应激的保护作用及其机制

目的：探讨锌对尿毒症血清诱导的血管内皮细胞氧化应激的保护作用及可能机制。方法：收集尿毒症患者及健康正常人血清,以15%的血清浓度作用于血管内皮细胞。分为4组进行实验：正常血清组（N）、尿毒症血清组（U）、尿毒症血清+10 ?滋mol/L硫酸锌组（U+10）、尿毒症血清+30 ?滋mol/L硫酸锌组（U＋30）。 荧光素 DCFH-DA 探针法测定细胞内活性氧含量,采用总抗氧化能力检测试剂盒检测细胞总抗氧化能力,实时荧光定量PCR检测细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸：醌氧化还原酶1（nicotinamide adenine dinucleotidephosphate：quinone oxidoreductase 1,NQO-1）及诱导Ⅰ型血红素氧合酶（heme oxyge－nase,HO-1）mRNA的表达,蛋白印迹检测细胞NQO-1、HO-1及核因子E2相关因子2（nucleus factor-E2 related factor 2,Nrf2）的表达。结果：与N组比较,U组内皮细胞的总抗氧化能力明显降低（N vs. U：452.8±19.5 vs. 321.4±27.8,P＜0.001）,活性氧水平升高（22.9±2.7 vs. 75.1±11.2,P＜0.001）;而锌干预处理（U+10和U+30）则增加了细胞总抗氧化能力（U vs. U+10 vs. U+30：321.4±27.8 vs. 455.7±16.0 vs. 462.9±18.6,均有P＜0.001）,减少了活性氧产生（75.1±11.2 vs. 45.2±7.6 vs. 49.3±8.3,P＜0.001）;同时,尿毒症血清组及锌干预组NQO-1、HO-1 mRNA及蛋白表达增高（NQO-1蛋白：N vs. U vs. U+10：0.40±0.05 vs. 0.65±0.07 vs. 1.09±0.08;HO-1蛋白：0.21±0.07 vs. 0.47±0.08 vs. 1.09±0.11,P＜0.05）,且锌干预组较尿毒症血清组增加更明显（P＜0.05）;锌干预组细胞核Nrf-2表达较正常血清组及尿毒症血清组增加（N vs. U vs. U+10 vs. U+30：0.23±0.07 vs. 0.25±0.07 vs. 0.65±0.07 vs. 0.69±0.06,均有P＜0.001）;但上述指标在不同浓度的锌处理组间均无统计学差异。结论：锌可能通过促进Nrf-2核转位,增加抗氧化酶NQO-1及HO-1表达,进而增加血管内皮细胞的总抗氧化能力和削弱尿毒症血清诱导的氧化应激反应。     

雷公藤多苷对慢性肾脏病大鼠血管内皮损伤的保护作用及其机制

目的:探讨雷公藤多苷(GTW)对慢性肾脏病(CKD)大鼠血管内皮损伤的保护作用,并阐明其作用机制.方法:将60只大鼠随机分为对照组、模型组和低、中及高剂量GTW组,每组12只.采用腺嘌呤诱导CKD大鼠模型.低、中和高剂量GTW组大鼠分别灌胃给予3.0、6.0和9.0 mg·kg-1 GTW,对照组和模型组大鼠给予等体积...     

盐酸右美托咪啶对缺血再灌注肾损伤小鼠的肾小管保护作用

目的  缺血再灌注肾损伤（IR）是围手术期常见的疾病,本研究通过构建缺血再灌注肾损伤模型,观察右美托咪啶（Dex）注射对受损肾小管的保护作用及机制。方法  将60只小鼠随机分为对照组、IR模型组和IR+Dex组（简称Dex组）,制备IR模型后24 h分别处死3组小鼠取肾组织。用全自动生化分析仪测定血肌酐（Scr）及尿素氮（BUN）。采用HE染色观察各组小鼠肾组织的形态,评定肾小管损伤程度;免疫组织化学染色测定低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达。结果  对照组的肾小管结构与形态均正常。IR模型组肾小管损害明显、HIF-1α及MCP-1表达均增高。而Dex组肾小管损害程度较轻,HIF-1α及MCP-1表达均较IR模型组减低,肾小管上皮细胞低氧程度及炎症反应均较IR模型组明显减轻。Dex组小鼠的血肌酐及尿素氮水平较IR模型组明显降低。结论  Dex可以通过抑制炎症反应、减轻肾小管上皮细胞低氧程度从而减轻IR小鼠肾小管的损害,保护肾脏功能。

     

温脉通对高脂致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究温脉通对高脂损伤血管内皮细胞的保护作用,以探讨其治疗动脉硬化闭塞症(ASO)的机制。方法用高脂血清造成人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤模型,以温脉通及其温经益气拆方和活血通脉拆方含药血清进行干预。光镜下观察细胞形态变化,MTT法检测细胞活性;取细胞上清液,以分光光度计比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)含量,硝酸还原酶法测定NO含量;放射免疫测定法测定内皮素(ET)含量。结果温脉通及其拆方均能使高脂损伤的HUVEC形态趋于正常,活性增强,细胞膜损伤减轻;并能使HUVEC培养上清中NO含量增加而ET含量减少。两拆方单独的作用均比全方弱。结论温脉通对高脂损伤的血管内皮细胞有保护作用,这可能是其治疗ASO的机制之一。温脉通全方对内皮细胞损伤的保护作用比其温经益气拆方和活血通脉拆方强,说明组方具有合理性。     

当归红芪超滤物对X射线引起人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制

目的：探讨当归红芪超滤物(UFE-AH)对X射线引起人脐静脉内皮细胞(HUVECs损伤的保护作用,阐明其可能的机制。方法：体外培养HUVECs,采用不同剂量(0、2、4、6、8和10 Gy) X射线辐射,筛选出最佳辐射剂量(6 Gy);用不同浓度(0、 50、100、200、400、600、800和1 000μg·L^-1 ) UFE-AH干预HUVECs,筛选出最佳促增殖浓度(100、200和400μg·L-1)。实验分为空白组、模型组(6 Gy X射线)、低剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+100μg·L^-1 UFE-AH)、中剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+200μg·L^-1 UFE-AH)和高剂量UFE-AH组(6 Gy X射线+400μg·L^-1 UFE-AH)。CCK-8法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,透射电子显微镜下观察各组细胞超微结构,Western blotting法检测各组细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (Akt)、磷酸化Akt (p...     

N-乙酰氨基葡萄糖对乙醇致肝组织损伤的保护作用及其机制

目的:探讨N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)减轻乙醇对肝组织损伤的作用,并阐明其作用机制.方法:小鼠灌胃市售白酒建立酒精性肝病模型,同时在市售白酒中加入低、中、高剂量的GlcNAc作为干预组,记录模型组和干预组小鼠开始醉酒时间及醉酒持续时间,HE染色观察模型组和干预组小鼠肠道组织和肝组织的病理损伤程度.结果:与模型组比...