类风湿关节炎患者Treg细胞变化及与病情活动度的关系

目的探讨Treg细胞在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及与病情活动度、RA相关抗体的关系。方法流式细胞仪技术检测40例RA患者和40例健康对照者外周血Treg占CD4+T细胞的百分率,酶联免疫吸附试验检测血清IL-10及TGF-β1,实时荧光定量PCR法检测Foxp3 mRNA,分析Treg细胞百分率与病情活动度及RA相关抗体的相关性。结果 RA患者外周血中Treg细胞(CD4+CD25+FOXP3+T细胞)的百分率显著低于健康对照组[(5.36±1.55)%vs(7.49±1.46)%,P<0.01],Foxp3mRNA表达也较对照组显著减少(P<0.01);RA组IL-10水平低于健康对照组(P=0.000),而TGF-β1则显著高于健康对照组(P=0.000);相关性分析显示IL-10水平与Treg细胞百分率及Foxp3 mRNA相对表达量正相关;RA患者外周血中Treg细胞百分率与关节压痛数、关节肿胀数、患者疼痛模拟视觉评分、健康评估问卷、DAS28评分、红细胞沉降率、C反应蛋白等临床和实验室病情活动指标无明显相关性(P>0.05),与RF、抗CCP抗体滴度也无相关性(P>0.05)。结论 RA患者中Treg细胞数量减少并存在功能异常,疾病活动度越高的患者可能Treg细胞数量减少越明显。     

类风湿关节炎患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞百分率的变化及意义

目的 探讨滤泡辅助性T淋巴细胞(Tfh)百分率在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的变化及意义.方法 选取该院2016年9-11月收治的RA患者,分为RA活动组与RA稳定组,各35例.另选取同期行健康体检者35例作为健康对照组.用流式细胞术检测受试者外周血CD4+ CXCR5+ ICOS+ Tfh细胞的百分率,分析RA患者外周血Tfh细胞百分率与28个关节疾病活动度评分(DAS28)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体及类风湿因子(RF)水平的相关性.结果 RA活动组外周血Tfh细胞百分率[(0.84±0.16)％]明显高于RA稳定组[(0.64±0.15)％]及健康对照组[(0.56±0.14)％],差异均有统计学意义(P＜0.01);且RA稳定组亦高于健康对照组(P＜0.05).RA患者外周血Tfh细胞百分率与DAS28及抗CCP抗体水平均呈明显正相关(r=0.355、0.324,P＜0.01),与RF水平无明显相关性(r=0.205,P＞0.05).结论 外周血中Tfh细胞百分率的增加可能与RA的发生、发展有关.     

类风湿关节炎患者外周血中糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关基因及其配体的表达和意义

目的:研究糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)与其配体(GITRL)在类风湿关节炎(RA)患者外周血中的表达及其与临床指标的相关性,探讨GITR/GITRL 在RA中的意义.方法:采用实时荧光定量PCR法检测RA组(n=53)、骨关节炎(OA)组(n=35)及正常对照组(n=35)外周血GITR/GITRL mRNA含量,同时利用流式细胞仪检测上述三组患者的GITR在CD4+CD25+ T细胞的表达,并研究GITR mRNA与RA患者DAS28评分、抗环瓜氨酸(CCP)抗体、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)及类风湿因子(RF)的关系.结果:RA患者外周血GITR mRNA水平和GITRL mRNA水平(分别为12.38±5.72,16.41±10.16)明显高于正常对照组(分别为8.75±3.78,11.99±8.42)及OA组(分别为9.59±5.87,12.09±7.53;均P＜0.05).RA患者与OA组及正常对照组比较,外周血CD4+CD25+GITR+T细胞的比例也明显增高[分别为(28.12±16.85)%,(21.01±14.42)%,(19.98±9.40)%,均P＜0.05].RA患者GITR mRNA表达水平与DAS28评分及ESR呈明显正相关(r值分别为0.361和0.427,P＜0.01).结论:RA患者GITR/GITRL表达增多,与RA发病及疾病活动度有关.     

CD4+CD25+T细胞表面GITR及血清中IL-6、IL-17在类风湿关节炎中的作用及意义

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者外周血糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体家族相关基因(GITR)在CD4+CD25+T细胞中的表达及细胞因子IL-6、IL-17的浓度水平变化,探讨两者在RA发病中的作用.方法 流式细胞术检测GITR在CD4+CD25+T细胞的阳性表达率,ELISA法检测血清中IL-6、IL-17的浓度水平并分析GITR阳性表达率与RA患者DAS28的关系.结果 RA组中的CD4+CD25+Treg细胞表面GITR阳性表达率(3.03±1.95)%明显低于健康对照组(7.68±2.01)%,RA组中IL-6,IL-17浓度水平明显高于健康对照组(P<0.05).GITR阳性表达率与DAS28呈明显负相关.结论 RA患者GITR+CD4+CD25+T细胞阳性表达率低下,与RA发病及疾病的活动性有一定的相关性.     

类风湿关节炎患者外周血和关节液中Foxp3+调节性T细胞的检测及意义

目的 研究Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)在类风湿关节炎患者外周血和关节液的含量及其与临床的相关性.方法 采集91例RA患者和20例健康人外周血,常规关节穿刺术抽取RA患者关节液,采用流式细胞术检测Foxp3+Treg细胞百分含量,并研究其与RA患者病情活动程度、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)的关系.结果 RA组患者外周血Foxp3+ Treg细胞的百分含量低于健康对照组(P＜0.05),而与DAS28评分分组、ESR、CRP、RF无相关性(P＞0.05);RA组患者关节液Foxp3+ Treg细胞的百分含量高于自身外周血(P＜0.01),且与DAS28评分分组、ESR、CRP有负相关性(P均＜0.01);RA组患者糖皮质激素治疗3个月后外周血和关节液中Foxp3+ Treg细胞百分率较治疗前高(P均＜0.05).结论 Foxp3+ Treg细胞在RA发病机制上起重要作用.外周血Foxp3+ Treg细胞降低导致其负调控作用的减弱,促进了疾病的发生和发展,聚集于关节液中Foxp3 +T细胞,不能抑制疾病的发生,但在控制炎症程度发挥了一定作用.监测患者外周血Foxp3+ Treg细胞水平可作为糖皮质激素治疗的疗效判断.     

CD4~+CD25~+Treg细胞表面CTLA-4及血清IL-10、TGF-β1在类风湿关节炎中的表达及意义

目的通过类风湿关节炎(RA)患者和健康对照组外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达水平的比较,以及与细胞因子IL-10、TGF-β1、临床疾病活动度评分DAS28的相关性分析,探讨CTLA-4在类风湿关节炎发病机制中的可能作用。方法选择符合1987年美国风湿病学会制定的RA诊断标准的30名RA患者作为实验组,选择30名健康人为对照组。用流式法测外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达水平,用ELISA法测血清IL-10、TGF-β1的水平。结果⑴RA患者外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达及血清IL-10、TGF-β1的表达水平要低于健康对照组(P0.01);⑵RA静止组、RA活动组、健康对照组三组间比较,外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达及血清IL-10、TGF-β1的表达水平差异有统计学意义(P0.01);⑶相关性分析结果显示RA组中外周血Treg细胞表面CTLA-4的表达与血清IL-10、TGF-β1的表达水平均呈正相关关系,与DAS28呈负相关关系。结论 Treg细胞表面CTLA-4的低表达可能参与了RA的发病,并与RA的疾病活动度有一定关系。     

类风湿关节炎患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞和白介素17及转化生长因子β的表达研究

目的 观察类风湿关节炎(RA)患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例及血清白介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平变化及三者的相互关系.方法 选取33例RA患者,其中RA活动期患者22例,RA非活动期患者11例.另选取15例健康体检者作为对照组.RA患者及健康者外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例采用流式细胞仪(FCM)检测,血清IL-17、TGF-β水平采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测.结果 RA活动期患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例[(1.46±0.72)%]显著低于对照组[(2.72±2.07)%],血清IL-17[(384±106)pg/ml]、TGF-β[(23.8±10.0)pg/ml]水平显著高于RA非活动期患者[(245±110)pg/ml与(14.7±7.5)pg/ml]和对照组[(174±50)pg/ml与(9.8±4.0)pg/ml],差异均有统计学意义(P＜0.01).血清IL-17水平与外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例呈负相关(r=-0.375,P＜0.05),与血清TGF-β水平呈正相关(r=0.650,P＜0.01).结论 外周血CD+4CD+25调节性T细胞比例及血清IL-17、TGF-β表达水平与RA疾病活动有关,且三者相互联系,相互影响,相互制约,共同参与RA的发生、发展.     

类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞趋化因子受体CCR7的表达及其临床意义

目的 探讨CC族趋化因子受体CCR7在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用及其临床意义.方法 选取30例RA患者(RA组)和20例健康体检者(正常对照组).应用流式细胞检测术检测两组受检者外周血淋巴细胞表面CCR7的表达,并根据患者的触痛关节数、肿胀关节数、红细胞沉降率计算出患者的疾病活动性积分(DAS28),分析CCR7的表达与疾病活动性的关系.结果 RA组患者外周血CD+4T细胞和CD+8T细胞上CCR7的表达率[(74.5±13.7)%与(57.9±11.8)%]均显著高于正常对照组[(16.7±2.0)%与(16.6±1.6)%],差异有统计学意义(P＜0.01);且RA组患者外周血CD+4T细胞上CCR7的表达率显著高于CD+8T细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).RA组患者外周血CD+4T细胞CCR7的表达与DAS28呈正相关(r=0.836,P＜0.01).结论 CCR7在RA患者外周血淋巴细胞上的表达异常增加,尤其是在CD+4T细胞上;CCR7在CD+4T细胞上的异常表达可能是导致RA病情活动的重要因素之一.     

高强度聚焦超声联合单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷自杀基因治疗对VX2荷瘤兔免疫力的影响

目的探讨高强度聚焦超声(high intensity focused ultrasound,HIUF)联合单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-tk/GCV)治疗对VX2荷瘤兔的肿瘤免疫耐受和特异性抗肿瘤免疫的影响。方法将40只实验兔按随机数字表法分为对照组、肿瘤组、HIFU组和联合治疗组,每组10只,其中HIFU组给予HIFU单独治疗,联合组给予HIFU和HSV-tk/GCV联合治疗。于治疗后第13天流式细胞术检测各组兔外周血CD4+CD25+Treg(Treg)细胞的数量变化情况,ELISA法检测外周血血浆IL-10,TGF-β的浓度,MTT法检测兔脾淋巴细胞对VX2肿瘤细胞的体外杀伤活性。结果肿瘤组外周血Treg细胞数量[(8.30±0.69)%]、IL-10水平[(67.82±4.52)pg/ml]和TGF-β水平[(6.55±0.45)μg/ml]相对于对照组[(5.30±0.45)%、(54.58±3.53)pg/ml、(5.51±0.27)μg/ml]均显著升高(P<0.01);HIFU组Treg细胞数量[(7.00±0.56)%]、IL-10水平[(60.32±4.70)pg/ml]、TGF-β水平[(6.22±0.19)μg/ml]明显低于肿瘤组(P<0.01,P<0.05);联合治疗组Treg细胞数量[(6.40±0.72)%]和TGF-β水平[(5.86±0.31)μg/ml]低于HIFU组(P<0.05),而IL-10水平[(58.79±4.42)pg/ml]变化则无统计学意义(P>0.05)。杀伤实验显示HIFU组和联合治疗组脾淋巴细胞对VX2肿瘤细胞的杀伤活性分别为(31.62±3.09)%、(29.48±2.68)%,明显高于对照组[(13.94±2.45)%]和肿瘤组[(12.00±2.96)%](P<0.01),但联合治疗组和HIFU组的比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HIFU联合HSV-tk/GCV治疗后,宿主肿瘤免疫耐受情况得到改善,特异性抗肿瘤免疫力增强。     

35例多发性硬化患者Th17细胞及相关细胞因子的检测

目的 探讨多发性硬化(MS)患者外周血Th17细胞水平及相关细胞因子的意义.方法 采用流式细胞分析法检测35例MS患者(MS组)和20例健康者(对照组)外周血Th17细胞占CD4+T细胞比例,ELISA法检测外周血IL-17、IL-23水平.结果 MS组患者外周血Th17/CD4+T细胞比例[(1.94±0.32)%]显著高于对照组[(0.60±0.25)%],差异有统计学意义(P<0.01);MS组患者外周血IL-17、IL-23水平亦明显高于对照组[IL-17:MS组(69.01±19.29)ng/L、对照组(25.94±15.61)ng/L;IL-23:MS组(550.80±112.06)ng/L、对照组(158.78±33.19)ng/L,(P<0.01)].患者外周血IL-17水平与IL-23水平呈正相关(r=0.731,P<0.01).结论 MS患者外周血Th17/CD4+T细胞比例增加,相关细胞因子IL-17、IL-23水平升高,Th17细胞可能参与了MS的发生与发展.     

变应性鼻炎辅助性T细胞免疫球蛋白功能区和黏液素样功能区-1的表达

目的 探讨人辅助性T细胞(helperT lymphocyte,Th)表达T细胞免疫球蛋白功能区和黏液素样功能区-1(T cell immunoglobulin domain and mucin domain-1,TIM-1)在变应性鼻炎(allergicrhinitis,AR)中的作用.方法 密度梯度离心分离20名健康人和20例AR患者外周血单个核细胞(human peripheral blood mononuclear cells,PBMC),免疫磁珠分选CD4+T细胞,CD4+CD45RA+T细胞,免疫荧光和流式细胞仪检测TIM-1阳性细胞.对比植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA,20μg/ml)非特异性刺激上述细胞后表达TIM-1阳性细胞的差异.标准变应原(屋尘螨,50000 SOU/ml)和内毒素(脂多糖,lipopolysaccharide,LPS,20ng/ml)特异性刺激树突状细胞(dendritic cells,DC),观察DC提呈抗原并诱导初始Th细胞表达TIM-1的特点.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养液中IL-4、IFN-γ的分泌.结果 AR患者组CD4+T细胞中TIM-1阳性CD4+T细胞9.48%4±1.51%,高于健康组3.12%±0.32%(P＜0.05);PHA刺激后两组表达TIM-1的CD4+T细胞均高于刺激前(P值均<0.05).DC提呈抗原刺激健康组初始Th细胞后,检测混合细胞液中表达TIM-1的细胞,标准变应原组10.81%±1.48%,高于LPS组6.07%±1.45%(P＜0.05).ELISA检测相应IL-4、IFN-γ的分泌,标准变应原组IL-4为(74.61±13.82)pg/ml、(25.31±7.23)pg/ml;LPS组分别为(28.57±3.36)pg/ml、(163.41±82.37)Pg/ml.结论 AR患者中表达TIM-1的Th细胞高于健康者,DC提呈抗原后可以促进其表达;TIM-1的表达有利于初始Th细胞向Th2分化,由此诱发以Th2细胞因子为主的免疫反应.     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10、TGF-β检测及意义

目的观察呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）毛细支气管炎（毛支）患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）及其分泌细胞因子IL-10、TGF？β的水平,探讨Treg与RSV毛支发病的关系。方法采集31例RSV阳性毛支患儿外周血,采用流式细胞仪检测外周血Treg细胞百分率,ELISA法检测血浆IL-10、TGF？β的水平。27例非RSV感染的普通肺炎患儿作为阳性对照,24例健康儿童为正常对照组。结果 RSV毛支患儿外周血Treg百分率（10.71±1.11）%显著低于肺炎组（12.73±1.35）%及正常对照组（13.24±1.13）%（P〈0.01）;RSV毛支组血浆IL-10水平（89.83±9.43）ng/L显著低于肺炎组（116.40±14.10）ng/L与正常对照组（124.22±18.38）ng/L（P〈0.01）;RSV毛支组TGF？β水平（1 019.17±353.32）ng/L显著低于肺炎组（1 979.50±462.30）ng/L与正常对照组（2 139.88±484.75）ng/L（P〈0.01）。结论 RSV毛支患儿外周血存在Treg细胞数量及功能的不足,可能是引起RSV毛支发作的重要因素之一。     

类风湿关节炎患者CD8+IL-17+T细胞升高及其机制

目的 探讨CD8+IL-17+T细胞在类风湿关节炎(RA)的改变及可能的机制.方法 随机采集39例RA患者和40名健康人的外周血.以流式细胞术测定全部RA患者和27名健康人的外周血CD8+IL-17+T细胞的比例;以ELISA方法测定全部RA患者和健康人的血清白细胞介素(IL)6、IL-23和IL-17水平,并分析这些指标可能的相瓦关系.结果 RA患者CD8+IL-17+T细胞在CD8+T细胞的比例中位数为2.7%,95%可信区间为1.55%-3.74%;而正常人中位数为1.61%,95%可信区间为1.25%-2.61%.RA患者外周血CD8+IL-17+T细胞升高(P<0.05).对CD8+IL-17+T细胞功能相关的IL-17水平测定结果为,RA患者为(429±502)ng/L,而正常人仅为(13±30)ns/L(P<0.01).RA患者血清IL-17水平明显升高.对于CD8+IL-17+T细胞分化相关细胞因子的血清测定结果,IL-23水平在RA患者为(157.83±27.07)ns/L,正常人为(21.97±3.52)ns/L(P<0.01);IL-6水平在RA患者为(32.67±34.50)ns/L,正常人为(1.82±1.51)ns/L(P<0.01);RA患者血清IL-6、IL-23水平明显升高.结论 RA患者CD8+IL-17+T细胞数量增多,作用增强,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因.     

血清MK和Th17/调节性T细胞对类风湿关节炎患者病情发生发展的影响

目的 观察Th17/调节性T细胞(Treg)免疫失衡在类风湿关节炎(RA)患者发病时的作用,探讨血清中期因子(MK)和Th17/调节性T细胞(Treg)对RA患者病情发生发展的影响.方法 选取2013年3月至2016年1月在攀枝花市第二人民医院接受治疗的RA患者58例,根据RA是否处于活动期,将26例DAS28≤3.2者纳入非活动组,32例DAS28>3.2纳入活动组,另将30例健康者作为对照组,采用酶联免疫吸附法对三组受检者的血清MK、白介素-17(IL-17)、白介素-6(IL-6)、白介素-23(IL-23)水平进行检测,利用流式细胞术检测调节性T细胞和外周血Th17细胞的比例变化,并对其比例变化和血清MK、IL-17、IL-6、IL-23的水平进行比较.结果 活动组患者的Th17、调节性T细胞比例分别为(1.90±1.00)%、(1.58±1.03)%,非活动组分别为(0.98±0.36)%、(3.92±1.29)%,对照组分别为(0.57±0.21)%、(8.01±1.44)%,活动组血清MK为(342.36±68.39)pg/mL,非活动组为(257.91±56.79)pg/mL,对照组为(200.14±83.42)pg/mL,活动组血清MK及Th17、调节性T细胞比例分别与非活动组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),活动组与非活动组的血清MK及Th17、调节性T细胞比例分别与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05).活动组IL-17、IL-6和IL-23分别为(28.74±4.37)ng/L、(12.84±2.38)ng/L、(74.27±11.74)ng/L,非活动组分别为(19.25±3.27)ng/L、(9.36±2.74)ng/L、(52.29±13.83)ng/L,对照组分别为(6.01±3.28)ng/L、(5.99±2.92)ng/L、(27.37±10.27)ng/L,活动组与非活动组的IL-17、IL-6和IL-23水平分别与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 RA患者的血清MK上升,且类风湿性关节炎患者Th17/Treg平衡中Th17相对增高,而Treg会相对降低,MK的上升和Th17/Treg平衡失调都促进了RA的发生发展.     

血浆Dickkopf-1在类风湿关节炎患者中的表达及其与外周血T细胞亚群的相关性

目的: 检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血浆Dickkopf-1(DKK-1)水平,并分析其与外周血T细胞亚群、临床指标之间的相关性。方法: 采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测32例RA患者及20例健康对照者的血浆DKK-1的水平,并记录RA患者的各项临床表现和实验室指标。流式细胞仪检测RA患者外周血T细胞亚群(包括Treg、nTreg、aTreg、sTreg、Teff、Tfh、CD4⁺CD161⁺T、CD8⁺T、CD8⁺CD161⁺T细胞)。比较两组血浆DKK-1的水平,并分析其与外周血T细胞亚群、临床指标的相关性。结果: (1)RA患者血浆DKK-1浓度为(124.97±64.98) ng/L,健康对照组血浆DKK-1浓度为(84.95±13.74) ng/L,RA患者血浆DKK-1水平显著高于健康对照组(P<0.05),RA患者外周血CD8⁺CD161⁺T细胞百分比显著高于健康对照组(P<0.05)。(2)血浆DKK-1水平与红细胞沉降率(r=0.406,P=0.021)、DAS28评分(r=0.372,P=0.036)、免疫球蛋白G(r=0.362,P=0.042)、免疫球蛋白A(r=0.377,P=0.033)呈正相关;与年龄、病程、C-反应蛋白、类风湿因子、抗环瓜氨酸肽抗体、免疫球蛋白M、补体C3、补体C4、白细胞计数、中性粒细胞百分比无相关性。(3)RA患者血浆DKK-1水平与外周血CD8⁺CD161⁺T细胞百分比呈正相关(r=0.413,P=0.019);与Treg、nTreg、aTreg、sTreg、Teff、Tfh、CD4⁺CD161⁺T、CD8⁺T细胞无相关性。(4)外周血CD161⁺CD8⁺T细胞百分比与红细胞沉降率(r=-0.415,P=0.004)、C-反应蛋白(r=-0.393,P=0.007)、DAS28评分(r=-0.392,P=0.007)、类风湿因子(r=-0.535,P<0.001)、抗环瓜氨酸肽抗体(r=-0.589,P<0.001)、免疫球蛋白G(r=-0.368,P=0.012)、免疫球蛋白M(r=-0.311,P=0.035)呈负相关;与年龄、病程、免疫球蛋白A、补体C3、补体C4、白细胞计数、中性粒细胞百分比无相关性。结论: RA患者血浆DKK-1水平和外周血T细胞亚群中的CD8⁺CD161⁺T细胞百分比均升高,可能与患者体内促炎细胞因子的分泌有关;DKK-1参与骨稳态的调节,可用作RA骨破坏的标志物。     

肺癌模型小鼠肿瘤和主要免疫器官组织中调节性T细胞和NK细胞的数量变化及其意义

目的：探讨肺癌小鼠CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞（Treg）和自然杀伤细胞（NK）在外周免疫器官和肿瘤组织中数量的变化,阐明其对肿瘤发展的影响。方法：C57BL/6小鼠分为Lewis肺癌细胞系（LLC）注射组和正常对照组,LLC注射组小鼠采用LLC腋窝注射制备皮下肿瘤模型,正常对照组小鼠采用生理盐水等量注射。采用细胞表面和细胞内特异荧光抗体染色和流式细胞术检测肺癌小鼠脾脏、淋巴结和肿瘤组织中CD4⁺CD25⁺T细胞、Treg细胞及脾脏组织中NK细胞数量。结果：与正常对照组比较,LLC注射组小鼠脾脏和淋巴结中CD4⁺CD25⁺ T细胞占CD4⁺T细胞比例及Foxp3⁺在CD4⁺CD25⁺T细胞中的表达比例明显升高（P < 0.05）,CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Treg细胞数量也明显升高（P < 0.05或P < 0.01）。LLC接种组小鼠肿瘤组织中CD4⁺CD25⁺ T细胞占CD4⁺T细胞比例及Foxp3⁺在CD4⁺CD25⁺T细胞中的表达比例明显高于脾脏和淋巴结（P < 0.05）。与正常对照组比较,LLC注射组小鼠脾脏组织中NK细胞比例明显降低（P < 0.05）。结论：肺癌小鼠主要免疫脏器官组织中Treg细胞比例和数量升高,NK细胞比例降低,其可促进肿瘤发展,抑制机体对肿瘤细胞的免疫应答。     

宫颈疾病患者外周血CD4+CD25+C-D127-/low Treg细胞的检测及临床意义

目的 检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变患者外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达,分析其临床意义.方法 荧光抗体CD127-FITC、CD4-PECY5、CD25-PE标记T细胞,流式细胞术测定50例宫颈癌患者和49例宫颈上皮内瘤变患者中CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达.结果 与正常对照组[n=33,(8.07±2.18)％]比较,宫颈癌组[n=50,(11.15±1.97)％]、宫颈上皮内瘤变组[n=49,(10.61±2.62)％]CD4+CD25+CD127-low均显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=6.018,P＜0.001;t=4.943,P＜0.001);与宫颈上皮内瘤变Ⅰ级组[n=16,(8.96±0.65)％]比较,宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ级组[n=33,(11.54±2.72)％]显著升高,两者比较有差异统计学意义(t=4.114,P＜0.001);与宫颈癌Ⅰ期组[n=20,(10.34±1.79)％]比较,官颈癌Ⅱ期组[n=30,(11.68±1.97)％]显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=2.424,P＜0.05).结论 外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达升高可能在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变发病的发生、发展过程中起一定作用.     

类风湿关节炎患者TH17细胞及其相关细胞因子的表达及临床意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者TH17细胞及其相关细胞因子的表达及临床意义.方法 收集大连医科大学附属第一医院门诊RA初治活动期患者的外周血标本32例为活动期RA组,健康献血者30例为健康对照组,所有受试者清晨空腹坐位肘静脉采血.应用酶联免疫吸附法(ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)法,分别检测外周血血清中IL-17水平和外周血单个核细胞(PBMC)中IL-17mRNA表达水平;将PBMC一组不加刺激,另一组用佛波酯(50 ng/mL)和离子霉素(1μg/mL)刺激4h后,流式细胞仪检测TH17细胞数量.结果 活动期RA患者血清IL-17水平(15.76 ±0.62) pg/mL与健康对照组(8.67±0.12) pg/mL比较,差异有显著性意义(P＜0.05).活动期RA患者PBMC的IL-17mRNA表达水平(1.94±0.46)与健康对照组(0.84±0.16)比较,差异有显著性意义(P＜0.05).RA组血清IL-17水平与mRNA表达水平呈正相关(r=0.70,P＜0.05),且与疾病活动程度(DAS28)评分呈正相关(r=0.99,P＜0.05).活动期RA患者外周血TH17细胞比例(2.50±0.54)％与健康对照组(0.03±0.00)％比较,差异有显著性意义(P＜0.05).但刺激组(3.23±0.05)％与无刺激组(2.50±0.54)％比较,差异无显著性意义(P＞0.05).RA患者组TH17细胞数量与疾病活动程度(DAS28)评分呈正相关(r=0.96,P＜0.05).结论 活动期RA患者TH17细胞及其主要效应性细胞因子IL-17在细胞、蛋白和基因表达水平上均明显升高并与疾病活动程度呈正相关,对临床制定治疗方案、判断疗效有指导意义.