胆囊癌患者癌组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7表达及意义

目的研究胆囊癌患者癌组织中趋化因子CXCL12以及其受体CXCR4/CXCR7的表达与意义。方法选取2012年4月至2016年6月在我院行手术切除治疗的67例证实为胆囊癌的标本作为观察组,同时另选取67例正常胆囊组织标本作为对照组。采用免疫组织化学法(SP)检测癌组织中趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7表 达水平及意义。结果观察组患者CXCL12、CXCR4与CXCR7的表达率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7在性别、年龄中比较差异无统计学意义(P>0.05),在中低分化中阳性表达率明显高于在高分化的阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05),在有淋巴结转移中的阳性表达率明显高于无淋巴结转移中的阳性表达率,在TNM分期中Ⅲ+Ⅳ期的阳性表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期的阳性表达率(P<0.05);经Pearson相关性分析显示,CXCL12与CXCR4蛋白在胆囊癌中成正相关(r=0.424,P<0.05),CXCL12与CXCR7蛋白在胆囊癌中成正相关(r=0.624,P<0.05),CXCL4与CXCR7蛋白在胆囊癌中无相关 (r=0.164,P>0.05)。结论趋化因子CXCL12及其受体CXCR4、CXCR7在胆囊癌组织中高度表达,而且与TNM分期、淋巴结转移、组织学分级有着密切的相关性,对胆囊癌诊断与预后具有一定的临床价值。     

趋化因子CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌组织中mRNA及蛋白表达水平临床研究

目的通过对比分析趋化因子CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌组织中m RNA及蛋白表达水平,为治疗子宫内膜癌提供理论依据。方法选取自2014年6月~2017年6月本科室接诊的100例患者为研究对象。患者年龄为29~77岁,平均(56.8±9.8)岁。应用组织芯片技术、免疫组化法和RT-PCR法检测患者CXCL12和CXCR4表达水平。观察记录患者的姓名、年龄等基本信息,记录患者趋化因子CXCL12及CXCR4表达水平等指标。结果CXCL12在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率76.8%,明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率18.8%、50.0%、35.7%,差异有统计学意义(P0.05);CXCR4在子宫内膜癌组患者体内阳性表达率71.4%,明显高于不典型内膜增生组、单纯性内膜增生组和正常内膜组患者阳性表达率56.3%、42.9%、28.6%,差异有统计学意义(P0.05);CXCL12 m RNA在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为(0.587±0.022)、(1.132±0.041),差异有统计学意义(P0.05);CXCR4 m RAN在正常内膜组和子宫内膜癌组患者体内表达水平分别为(0.253±0.035)、(0.522±0.258),差异有统计学意义(P0.05)。CXCL12表达与患者的肿瘤临床分期、年龄等无关,差异无统计学意义(P0.05),CXCR4的表达与患者的肿瘤临床分期密切相关,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CXCL12及CXCR4在子宫内膜癌患者体内表达水平明显升高,CXCR4表达与患者肿瘤临床分期密切相关,为子宫内膜癌患者提供准确的治疗时机,同时,为广大医护人员积累了经验,值得临床广泛推广和应用。     

趋化因子12促进少突胶质前体细胞的增殖

目的 体外研究趋化因子12(CXCL12)对大鼠少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)增殖的影响及其机制.方法 振荡分离和差速贴壁等方法获得OPCs,采用免疫细胞化学技术进行鉴定;CCK-8检测OPCs在不同浓度CXCL12(0、5、10、20 ng/mL)作用不同时间点(0、24、48、72 h)的增殖,Western blot检测OPCs在各浓度下72 h后下游CXCR4、CXCR7、MMP9蛋白表达;CXCR4 siRNA、CXCR7 siRNA分别干扰CXCR4、CXCR7蛋白表达后,检测在20 ng/mL CXCL12下OPCs在各时间点的增殖,Western blot检测该条件下CXCR4、CXCR7、MMP9蛋白表达;MMP9 siRNA干扰MMP9蛋白表达后,检测在20 ng/mL CXCL12下OPCs在各时间点的增殖.结果 在一定浓度范围内,CXCL12能够明显促进OPCs增殖,并且促进OPCs内CXCR4、CXCR7、MMP9蛋白表达.与0 ng/mL相比,20 ng/mL CXCL12作用72 h后,OPCs增殖及CXCR4、CXCR7、MMP9蛋白表达增加最明显(P＜0.05,P＜0.01);CXCR4、CXCR7分别干扰后,OPCs增殖受到抑制,MMP9蛋白表达量也明显降低(P＜0.05,P＜0.01);MMP9干扰后,OPCs增殖受到抑制(P＜0.05).结论 CXCL12对OPCs增殖有明显促进作用,与CXCR4、CXCR7、MMP9蛋白表达上调相关.     

CXCL12和CXCR4在人星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在人星形细胞瘤中的表达及意义。方法应用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)、免疫组化SP法检测CXCL12和CXCR4在非瘤脑组织和人星形细胞瘤组织中的表达,分析CXCL12和CXCR4在不同病理级别人星形细胞瘤组织中的表达和它们之间的相关性。结果经统计学分析,CXCL12和CXCR4在非瘤脑组织和人星形细胞瘤组织中表达比较差异有统计学意义(P<0.05);在WHOⅠ～Ⅱ级人星形细胞瘤组织和WHOⅢ～Ⅳ级人星形细胞瘤组织中表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL12和CXCR4表达呈现明显的正相关(P<0.05)。结论 CXCL12和CX-CR4在人星细胞瘤中的表达高于在非瘤脑组织中的表达,其表达水平随病理级别的升高而升高,并且CXC L12和CXCR4之间存在明显的正相关。     

CXCL12及其受体CXCR4在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨CXCL12以及CXCK4基因在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义.方法 取39例喉鳞癌及28例正常喉组织,应用半定量的RT-PCR方法检测CXCL12以及CXCR4基因mRNA的表达.结果 正常喉黏膜CXCL12基因mRNA表达量为(1.22±0.41),在有淋巴结转移(N1,N2),晚期分级(L3T4)的喉癌组织中CXCL12表达量升高,其mRNA值分别为(1.63±0.47)和(1.57±0.61),与正常喉黏膜组织相比差异有统计学意义(P＜0.05).正常喉黏膜组织的CXCR4基因mRNA表迭量为(0.98±1.02),CXCR4基因mR-NA在喉癌中表达与淋巴结转移、T分级及病理分化无关,与正常喉黏膜组织mRNA表达相比,其差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 与CXCR4基因比较,CXCL12基因表达与喉癌发展关系更为密切,CXCL12基因mRNA表达升高可能与喉鳞状细胞癌的淋巴结转移及演进有关.     

子宫内膜癌组织CXCL12及其受体CXCR4 mRNA表达及意义

目的了解趋化因子CXC配体-12(CXCL12)及其受体CXCR4在子宫内膜癌组织表达及其意义。方法采用RT-PCR方法,检测12例正常子宫内膜组织和29例子宫内膜癌组织CXCL12、CXCR4mRNA表达,分析子宫内膜癌组织CXCL12、CXCR4mRNA表达与临床病理特征的关系。结果子宫内膜癌组织CXCL12、CXCR4mRNA表达显著高于正常子宫内膜组织(t=3.338、4.174,P<0.01),且二者表达呈显著正相关(r=0.796,P<0.01)。子宫内膜癌组织中CXCL12mRNA表达与FIGO分期、淋巴结转移、细胞分化程度、病理类型及年龄无关(P>0.05);不同病理分级的子宫内膜癌组织CXCR4mRNA表达差异有统计学意义(F=5.535,P<0.01),且其表达与子宫内膜癌病理分级呈负相关(r=-0.472,P<0.05);CXCR4mRNA表达与FIGO分期、淋巴结转移、病理类型及年龄无关(P>0.05)。结论子宫内膜癌组织中CXCL12、CXCR4mRNA表达上调,提示CX-CL12和CXCR4可能在子宫内膜癌的发生、发展中发挥生物学作用。     

基于CXCL12/CXCR4生物轴探讨清心饮抑制CVB3感染后CMVECs发生EndMT的作用

[目的] 探讨趋化因子12(chemokine 12,CXCL12)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)生物轴在清心饮含药血清抑制柯萨奇B3病毒(Coxsackie virus B3,CVB3)感染后心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMVECs)发生内皮间充质转分化(endothelial-mesenchymal transition,EndMT)过程中的作用。[方法] 取生长状态良好的CMVECs设计为正常对照组、模型组、CXCR4拮抗剂组、清心饮组和清心饮+CXCR4拮抗剂组。除正常对照组用含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的杜尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco‘s modification of Eaglews medium,DMEM)培养外,其余各组CMVECs先用CVB3培养基感染2 h,后弃去CVB3培养基,改为普通培养。通过细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK8)检测各组细胞活力,免疫荧光(immunofluorescence,IF)、免疫印迹和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)等实验方法检测内皮细胞标志物血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)、间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、CXCL12和CXCR4的蛋白及基因表达。[结果] 与正常对照组比较,模型组CD31表达下降(P＜0.01),α-SMA、CXCL12和CXCR4表达增强(P＜0.01)。与模型组比较,CXCR4拮抗剂组、清心饮组CD31表达增强(P＜0.01),α-SMA和CXCR4表达下降(P＜0.01),CXCR4拮抗剂组CXCL12表达差异无统计学意义(P＞0.05),清心饮组CXCL12表达下降(P＜0.05)。与清心饮组比较,清心饮+CXCR4拮抗剂组CD31的表达增强(P＜0.05),α-SMA、CXCL12和CXCR4表达下降(P＜0.01,P＜0.05)。[结论] CXCL12/CXCR4生物轴参与了CVB3感染后CMVECs发生EndMT的过程,拮抗CXCL12/CXCR4生物轴能够明显增强清心饮对该过程的抑制。     

CXCL12/CXCR4在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨CXCL12/CXCR4在膀胱移行细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭与转移的关系.方法 以免疫组织化学SABC法检测18例正常膀胱组织和70例膀胱移行细胞癌组织中CXXL12/CXCR4蛋白的表达,分析其与肿瘤分期、分级及复发的关系并探讨二者表达的相关性.结果 18例正常膀胱组织CXCL12及CXCR4阳性表达各1例,70例膀胱移行细胞癌组织中CXCL12及CXCR4阳性表达各有52例及56例;差异均有显著性(P＜0.01).CXCL12及CXCR4的阳性表达与肿瘤临床分期及复发密切相关(P＜0.01),而未发现与肿瘤的病理分级有相关性(P＞0.05).CXCL12与CXCR4二者之间的表达具有明显相关性(P＜0.000).结论 CXCL12/CXCR4的表达上调可能在膀胱移行细胞癌的复发及侵袭转移过程中有重要作用.     

三阴乳癌组织CXCL12与CXCR4表达及其意义

目的探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4在三阴乳癌(TNBC)组织表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化SP法检测CXCL12和CXCR4蛋白在55例TNBC组织中的表达,观察相应的临床病理指标(病人年龄、肿瘤大小、淋巴结转移情况、临床分期),并进行相关性分析。结果 TNBC组织CXCL12、CXCR4表达与病人年龄、肿瘤大小和临床分期无明显相关性(P>0.05),而与腋窝淋巴结转移状态呈正相关(r=0.413、0.325,P<0.05),淋巴结有转移组CXCL12、CXCR4的表达明显强于淋巴结无转移组(uc=3.02、2.38,P<0.05)。结论推测CXCL12及CXCR4可作为预测TNBC腋窝淋巴结转移及预后的一个重要分子标志物。     

不同分子分型乳腺癌组织中趋化因子 CXCL12 及其受体 CXCR4 和 CXCR7 的表达及临床意义

目的：探讨趋化因子CXCL12及其受体CXCR4和CXCR7在不同分子分型乳腺癌组织中的表达及临床意 义。方法：应用实时定量PCR检查80例不同分子分型乳腺癌组织中的趋化因子CXCL12 mRNA及其受体CXCR4和 CXCR7 mRNA的表达,采用免疫组织化学技术检测160例不同分子分型乳腺癌细胞组织中趋化因子CXCL12蛋白及其 受体CXCR4和CXCR7蛋白的表达,并分析它们在不同分子分型乳腺癌中的表达差异。结果：CXCL12 mRNA及其受 体CXCR4和CXCR7 mRNA在Luminal A和Luminal B型中表达无差异,在HER-2过表达型和三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)两个类型之间的表达也无差异,但三者在HER-2过表达型和TNBC中的表达明显高于Luminal A和 Luminal B型(均P<0.05);CXCL12蛋白、CXCR4蛋白和CXCR7蛋白在HER-2过表达型和TNBC中的阳性表达率均明显高 于Luminal A和Luminal B型(均P<0.05),但在Luminal A和Luminal B之间及HER-2过表达型和TNBC之间的表达无差异。 结 论：趋化因子CXCL12及其受体CXCR4和CXCR7在HER-2过表达型乳腺癌和TNBC组织中高表达,可能与该类型乳腺 癌预后较差有关,抑制其表达可为该类乳腺癌的治疗提供重要途径。     

氯膦酸二钠脂质体清除巨噬细胞对小鼠造血干祖细胞归巢过程的影响

目的 探讨清除巨噬细胞对小鼠造血干祖细胞（hematopoietic stem/progenitor cells,HSPC）归巢过程的影响。 方法 免疫磁珠分选获得小鼠HSPC,使用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（Carboxyfluorescein diacetate succinimide ester,CSFE）染色标记,采用氯膦酸二钠脂质体（clodronate liposomes,Clod）方法建立去除巨噬细胞的小鼠模型,通过流式细胞术检测HSPC移植的归巢效率,通过实时荧光定量逆转录酶链式反应方法和酶联免疫吸附测定方法检测去除巨噬细胞后骨髓微环境中CXCL12、SCF和人血管内皮细胞粘附分子1(vascular adhesion molecule 1,VCAM1)分子mRNA表达水平和蛋白表达水平的变化。 结果 氯膦酸二钠脂质体作用后第24小时和第48小时,小鼠骨髓中CD11b+F4/80+巨噬细胞数量显著减少（P＜0.05）;移植小鼠HSPC后,相较于对照组,去除巨噬细胞组小鼠HSPC归巢效率显著降低（P＜0.05）;同时去除巨噬细胞组小鼠骨髓微环境中CXCL12、SCF的mRNA和蛋白表达量比对照组显著降低（P＜0.05）,而VCAM1表达量无显著变化。 结论 去除巨噬细胞能够显著降低小鼠HSPC归巢效率,该作用可能与去除巨噬细胞后导致的骨髓微环境中CXCL12与SCF含量减少有关。     

NGF、NCAM、CXCL12/CXCR4在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中作用的研究

目的：探讨涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC）中神经生长因子（nerve growth factor,NGF ）、神经细胞黏附分子（neural cell adhesion molecule,NCAM）、趋化因子（CXC chemokine ligand 12,CXCL12 ）及趋化因子受体（CXC chemokine receptor type 4,CXCR4）表达与嗜神经侵袭的关系。方法：选取临床病理资料齐全的SACC 60例,分为嗜神经侵袭组（36例）和非嗜神经侵袭组（24例）,制作组织芯片。采用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）技术检测两组NGF、NCAM、CXCL12/CXCR4蛋白的表达,分析指标表达与临床病理参数的相关性。结果：NGF、CXCL12、CXCR4蛋白在SACC嗜神经侵袭组阳性表达率均高于非嗜神经侵袭组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;NGF、CXCL12、CXCR4表达与患者性别、组织学类型、肿瘤发生部位及大小均无关（P＞0.05）。SACC中NGF与CXCL12的阳性表达相关（r=0.279,P＜0.05）,也与CXCR4阳性表达相关（r=0.451,P＜0.05）,但CXCL12与CXCR4无明显相关（r=0.254,P=0.05）。NCAM在两组SACC中均呈阴性表达。结论：NGF、CXCL12/CXCR4过表达共同参与了SACC的嗜神经侵袭过程。     

肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠趋化因子CXCL12及其受体CXCR4表达的影响

目的：观察肺岩宁（Feiyanning,FYN）方对C57小鼠Lewis肺癌肿瘤组织中趋化因子CXCL12及其受体（CXC chemokine receptor 4,CXCR4）mRNA及蛋白表达的影响。 方法：建立C57小鼠Lewis肺癌模型,随机分为模型组、化疗组、肺岩宁组和综合组（肺岩宁加化疗组）。给予相应干预21d后观察肺转移情况,采用逆转录聚合酶链反应法和免疫组化SP法分别检测C57小鼠Lewis肺癌中CXCL12和CXCR4 mRNA及蛋白表达水平。 结果：肺岩宁组与综合组小鼠的肺转移率低于模型组。C57小鼠Lewis肺癌组织中表达CXCL12和CXCR4,肺岩宁组与综合组小鼠肺癌中CXCR4 mRNA及蛋白的表达水平均明显低于模型组与化疗组（P〈0．05）,而4组小鼠Lewis肺癌组织中CXCL12 mRNA及蛋白的表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）． 结论：肺岩宁抑制C57小鼠Lewis肿瘤转移的机制可能与下调趋化因子受体CXCR4的表达,影响CXCL12-CXCR4生物轴的作用有关。     

CXCL10、CXCR3及T细胞亚群在进展期白癜风患者外周血中的表达及复方中药对其影响

目的 检测进展期白癜风患者外周血中T细胞亚群及趋化因子配体10(CXCL10)及其受俸3(CXCR3)的表这情况,并探索复方中药对其影响.方法 采用流式细胞仪检测治疗前后白癜风患者外周血中T细胞亚群的细胞比例,ELISA法检测治疗前后白癜风患者外周血清中CXCL10及CXCR3水平.结果 服用复方中药1个月后,白癜风患者外周血中CD3+ CD4+、CD3+ CD8+T细胞比例均较治疗前升高(P＜0.05).治疗前外周血清中CXCL10水平较健康对照组明显升高(P＜0.01),治疗后较治疗前明显降低(P＜0.05).治疗前外周血清中CXCR3水平较健康对照组明显升高(P＜0.01),治疗后仍明显高于健康对照组(P＜0.01).结论 CXCL10、CXCR3表达水平及T细胞亚群比例异常可能与白癜风的发病相关,本研究所用的复方中药可能通过调节T细胞亚群、CXCL10及CXCR3的表达水平发挥其治疗作用.     

Mobilization efficiency of granulocyte colony-stimulating factor and stem cell factor to bone marrow mononuclear cells and mechanisms

The mobilization efficiency of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) and stem cell factor (SCF) to bone marrow mononuclear cells (MNCs) in mice was observed, and the changes of CXCL12/CXCR4 signal were detected in order to find out the mobilization mechanism of stem cells. Kunming mice were randomly divided into two groups. The mice in treatment group were subjected to subcutaneous injection of G-CSF at a dose of 100 μg/kg and SCF at a dose of 25 μg/kg every day for 5 days, and those in control grou...     

CXCL12-CXCR4轴促进胶质母细胞瘤前神经间质转化

［摘要］目的: 探讨CXC趋化因子配体12-CXC趋化因子受体4(CXC chemokine ligand 12 CXC chemokine receptor 4,CXCL12-CXCR4)轴对脑胶质母细胞瘤前神经间质转化的作用。方法: 分析TCGA GBM基因数据库中CXCR4 mRNA在不同胶质瘤分子分型肿瘤组织中的水平差异及其对肿瘤患者生存率的影响;人胶质瘤LN428、U87MG细胞经不同浓度CXCL12 (0、20、40、60、80、100 ng/mL)及20 μmol/L普乐沙福(选择性CXCR4拮抗剂)预处理48 h,免疫印迹实验检测细胞内OLIG2、E-钙黏蛋白、YKL-40、N钙-黏蛋白和波形蛋白表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,CCK8法和克隆形成实验检测肿瘤细胞增殖能力。结果： TCGA GBM数据库分析结果显示,与健康者相比,胶质瘤患者CXCR4 mRNA表达显著增高,且与患者生存率呈负相关;间质型胶质母细胞瘤组织标本中CXCR4 mRNA水平显著高于前神经型胶质母细胞瘤(P均＜0.05)。与对照组相比,CXCL12组细胞间质型相关蛋白YKL-40、N-钙黏蛋白、波形蛋白表达水平显著升高,而前神经型相关蛋白OLIG2、E-钙黏蛋白表达水平显著降低,人胶质瘤LN428、U87MG细胞迁移和侵袭能力、增殖能力显著增强(P均＜0.05);给予普乐沙福处理后,与CXCL12组相比,人胶质瘤LN428、U87MG细胞迁移和侵袭能力、增殖能力显著降低,且间质型相关指标蛋白表达显著降低,前神经型相关指标蛋白表达显著升高(P均＜0.05)。结论： CXCL12-CXCR4轴具有促进胶质母细胞瘤前神经间质转化,及迁移和侵袭、增殖的作用。     

食管鳞形细胞癌及转移性淋巴结组织中CXCL12及其受体CXCR4的表达和临床意义

 目的  探讨CXCL12及其受体CXCR4在食管癌及转移性淋巴结组织中的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法  收集2006年于复旦大学附属中山医院行根治性手术的154例胸段食管鳞癌及45例肿瘤转移性淋巴结组织腊块标本,利用免疫组化技术检测肿瘤组织中CXCL12和CXCR4的表达,并分析两者表达水平的相关性。对各指标和患者临床特征进行相关性分析,比较原发肿瘤组织与淋巴结转移性肿瘤组织之间CXCL12和CXCR4表达的差异,并且分析相关因素和患者预后的关系。结果  CXCL12表达水平与患者临床病理学特征无明显相关性(P>0.05);CXCR4表达水平与患者性别、肿瘤浸润深度、区域淋巴结转移、TNM分期具有相关性(P<0.05)。原发肿瘤组织中CXCL12和CXCR4表达水平具有相关性(P<0.01)。肿瘤转移性淋巴结组织中CXCR4表达评分均值明显高于与其配对的原发肿瘤组织(P<0.01)。单因素分析显示CXCR4高表达患者无瘤生存期(disease free survival,DFS)及总生存期(overall survival,OS)明显低于CXCR4低表达患者(P<0.01);CXCL12和CXCR4联合表达阳性的患者,其DFS及OS明显低于联合表达阴性的患者(P<0.01)。多因素分析显示CXCR4高表达及区域性淋巴结转移是患者DFS和OS的独立预后不良因素。结论  CXCL12和CXCR4表达水平与食管癌患者预后密切相关,CXCL12/CXCR4信号轴在食管癌转移中起到重要作用,两者可能通过自分泌机制促进肿瘤转移。