血浆Septin9基因甲基化检测对结直肠癌诊断的价值研究

目的 探讨血浆中Septin9基因甲基化(methylated Septin 9,mSEPT9)检测在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)诊断中的应用价值。方法 收集2020年5月至2022年4月在右江民族医学院附属医院收治并经病理学诊断为非CRC患者42例和CRC患者129例,分别作为非CRC组和CRC组,分析患者血浆mSEPT9检测、大便隐血试验(FOBT)、癌胚抗原(CEA)和CA199检测结果,评价其单项检测和基于血浆mSEPT9的联合检测在CRC诊断中的应用价值。结果 (1)CRC组mSEPT9检测阳性率为58.14%(75/129),非CRC组mSEPT9检测阳性率为19.05%(8/42),两组差异具有统计学意义(P<0.001)。(2)血浆mSEPT9检测CRC的敏感度为58.14%,高于CEA(39.53%)和CA199(19.38%);特异度为80.95%,高于FOBT(47.62%),基于血浆mSEPT9检测的联合检测敏感度均高于其单项检测。结论 mSEPT9检测在CRC诊断中具有较高的敏感性和特异度,基于mSEPT9的联合检测敏感度高于...     

循环血Septin9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用价值

目的 研究循环血Septin 9基因甲基化在结直肠癌筛查中的检出率及术后监控中的临床意义。方法 选取甘肃省人民医院2018年1月-2019年1月入院结直肠癌患者125例为实验组,74例非肿瘤患者为对照组,检测外周血Septin 9基因甲基化、癌胚抗原（CEA）、CA199、CA724,统计4项检查指标的诊断灵敏度、特异度、总符合率,观察结直肠癌患者术后4项检查指标阳性率。结果 Septin 9基因甲基化阳性检出率实验组较对照组显著升高（P<0.05）。实验组检测中Septin 9基因甲基化诊断灵敏度较其他3项检查指标显著增高（P <0.05）,4项检测指标总符合率对比Septin 9为最高（P<0.05）。结论 循环血Septin 9基因甲基化检测较CEA、CA199、CA724在结直肠癌诊断中具有更高诊断效能,可用于结直肠癌筛查以及疗效评估。     

血浆SFRP1和Septin9基因甲基化检测对结直肠癌诊断的临床价值

探讨SFRP1和Septin9基因甲基化对结直肠癌的诊断价值,收集结肠镜检查和组织病理学确诊为结直肠癌的患者47例,非结直肠癌的对照组33例;测定两组外周血浆中SFRP1和Septin9基因的甲基化状态,并且进行粪隐血检测。结果显示,SFRP1和Septin9基因甲基化诊断结直肠癌的敏感度为80.0%,特异度为95.3%,粪便免疫学检测的敏感度为86.3%,特异度为54.3%,两者结合后敏感度为97.6%,特异度为96.8%,且明显高于单独检测。故SFRP1和Septin9基因甲基化联合粪免疫学检查可提高结直肠癌诊断的敏感度和特异度,而且具有无创、采样简单、依从性强、实验方法稳定等特点,适宜于临床推广使用。     

血浆SFRP1和Septin9基因甲基化检测对结直肠癌诊断的临床价值

探讨SFRP1和Septin9基因甲基化对结直肠癌的诊断价值,收集结肠镜检查和组织病理学确诊为结直肠癌的患者47例,非结直肠癌的对照组33例;测定两组外周血浆中SFRP1和Septin9基因的甲基化状态,并且进行粪隐血检测。结果显示,SFRP1和Septin9基因甲基化诊断结直肠癌的敏感度为80.0%,特异度为95.3%,粪便免疫学检测的敏感度为86.3%,特异度为54.3%,两者结合后敏感度为97.6%,特异度为96.8%,且明显高于单独检测。故SFRP1和Septin9基因甲基化联合粪免疫学检查可提高结直肠癌诊断的敏感度和特异度,而且具有无创、采样简单、依从性强、实验方法稳定等特点,适宜于临床推广使用。     

外周血Septin9基因甲基化检测在结直肠腺瘤中的预测价值

目的 探讨外周血Septin9基因甲基化（mSEPT9）检测在结直肠腺瘤诊断中的预测意义。方法 收集2020年10月至2022年5月在昆明市第一人民医院病理科诊断为结直肠腺瘤的31名患者作为实验组,21例肠镜阴性受试者（消化科门诊患者）作为对照组。对2组人员进行外周血mSEPT9检测,并收集其相应外周血CEA检测结果,对检测结果采用受试者特征曲线进行统计分析。结果 mSEPT9检测对腺瘤的曲线下预测面积（AREA of the ROC:AUC）为0.720 5(P <0.05),分界值（CT值）为39.55,此时对应的敏感度为90.91%,特异度为56.67%;CEA检测对腺瘤的AUC为0.533 3(P> 0.05)。结论 外周血mSEPT9检测筛查结直肠腺瘤效果优于外周血CEA肿瘤标记物,具有较好的敏感度及特异度,一定程度上对mSEPT9筛查阳性人群再行侵入性肠镜检查,更易为该类人群接受且可早期筛查结直肠腺瘤。     

Septin9基因与结直肠癌相关性研究进展

Septin9是一类具有三磷酸鸟苷酶活性的保守基因家族成员之一,与染色体分离、DNA修复、迁移和凋亡等许多细胞功能有关。Septin9与诸如恶性肿瘤等人类疾病发生密切相关,且Septin9已成为现阶段肿瘤相关研究的新热点。Septin9基因在结直肠肿瘤组织中高度甲基化,其甲基化异常是结直肠癌的重要分子特征,而其在外周血和粪便中的改变可用于结直肠癌的早期诊断。     

血浆游离DNA SEPT9甲基化与结直肠癌不同病理类型的相关性

目的研究血浆游离DNA中SEPT9甲基化在结直肠癌(CRC)不同组织病理学类型、不同大体形态分型中的检出水平及临床意义。方法选取北京市肛肠医院术前检测SEPT9甲基化,术后进行病理学分析的大肠良恶性肿瘤209例,包括结直肠癌182例,腺瘤及神经内分泌瘤27例,统计SEPT9甲基化在结直肠癌不同组织学类型、不同大体形态分型的阳性检出率。结果SEPT9在不同组织学类型:腺癌(非特殊性)、腺癌(特殊型,如印戒细胞癌)、鳞癌、腺瘤、肠道其他肿瘤(主要为神经内分泌瘤、平滑肌瘤、间质瘤)中的阳性检出率分别为66.7%、63.6%、33.3%、4.5%和0;在不同大体形态分型:隆起型、溃疡型、隆起溃疡型中的阳性检出率分别为35.3%、50.0%和67.0%。结论SEPT9在不同组织学类型中阳性检出率不同,可能与大肠癌的发病机制及发病阶段有关。SEPT9在隆起型、溃疡型、溃疡隆起型肿瘤中阳性检出率依次升高,可能与肿瘤随着肿瘤进展,逐渐增大有关。     

SDC2基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的价值研究

目的探究粪便重组人黏结蛋白聚糖2（SDC2）基因甲基化检测在结直肠癌（CRC）早期筛查中的价值。方法收集2019年7—10月在温州医科大学附属第一医院就诊的88例CRC患者、47例结直肠进展期腺瘤患者、238例对照人群（肠癌术后、其他癌症、其他肠道疾病及肠道健康人群）粪便,使用SDC2基因甲基化检测试剂盒检测粪便中SDC2甲基化情况,分析其对CRC及结直肠进展期腺瘤诊断的特异度、灵敏度、假阳性率、假阴性率、阳性预测值、阴性预测值;绘制ROC曲线,评估其在CRC和进展期腺瘤诊断中的精确度和区分度。结果粪便SDC2基因甲基化检测对于CRC及结直肠进展期腺瘤患者诊断的灵敏度分别为0.841和0.553,总体灵敏度为0.741,假阴性率为0.259;阴性对照样本筛查中,粪便SDC2基因甲基化检测CRC的特异度为0.882,假阳性率为0.118;粪便SDC2基因甲基化检测CRC及结直肠进展期腺瘤的阳性预测值、阴性预测值分别为0.781和0.857,总符合率为0.831,AUC为0.819,Kappa=0.63,P＜0.05,说明两者具有较高的一致性。结论粪便SDC2基因甲基化检测对CRC筛查具有高的灵敏度和特异度,可为CRC无创筛查和早期诊断提供依据。     

血浆SEPT9甲基化检测对结直肠癌诊断价值的临床研究

背景　结直肠癌（CRC）是消化系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率呈逐年上升的趋势,早诊断和早治疗是防治CRC的关键,然而目前临床上仍缺乏确诊CRC的无创、简便、有效的检测方法。目的　探讨血浆SEPT9甲基化（mSEPT9）检测对CRC的诊断价值,提供CRC诊断依据。方法　选取2017年12月-2018年12月于昆明医科大学第一附属医院消化内科、胃肠外科及肿瘤科就诊的患者共272例（CRC 126例,非CRC 146例）为研究对象,按结肠镜检查及术后病理检查结果分为对照组82例、腺瘤组64例、早期癌组72例、进展期癌组54例,分析血浆mSEPT9阳性表达与CRC患者临床特征的关系;探讨血浆mSEPT9、血清癌胚抗原（CEA）及二者联合检测在4组患者中阳性率的差异;评估血浆mSEPT9、血清CEA及二者联合检测诊断CRC的价值。结果　不同年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤最大直径CRC患者mSEPT9阳性率比较,差异无统计学意义（P>0.05）;早期癌患者血浆mSEPT9阳性率低于进展期癌患者,有淋巴结转移患者血浆mSEPT9阳性率高于无淋巴结转移患者（P<0.001）。对照组、腺瘤组、早期癌组和进展期癌组患者血浆mSEPT9、血清CEA及二者联合检测的阳性率比较,差异均有统计学意义（P<0.001）。血浆mSEPT9及血清CEA联合检测的灵敏度、准确度、阴性预测值高于单一指标检测,血浆mSEPT9联合血清CEA检测与金标准诊断一致性检验,Kappa值为0.514。结论　在早期和进展期CRC患者中,血浆mSEPT9检测的阳性率均高于血清CEA,二者联合检测对CRC的诊断价值（灵敏度、准确度、阴性预测值、与金标准诊断的一致性）可进一步提高,这为CRC的确诊提供了新思路、新方法。     

不同类型结直肠癌前病变患者血浆Septin9基因甲基化水平及病变组织CEA、DNMT3b蛋白的表达

目的:分析不同类型结直肠癌前病变患者血浆Septin9基因甲基化水平及病变组织CEA、DNMT3b蛋白的表达水平。方法:选取114例结直肠癌前病变患者为研究对象,均行肠镜和病理检查,并检测血浆Septin9甲基化水平和病变组织CEA、DNMT3b蛋白水平,比较不同类型结直肠癌前病变患者血浆Septin9甲基化水平和病变组织CEA、DNMT3b蛋白的表达水平。结果:肠镜和病理检查结果显示,114例结直肠癌前病变患者中,结直肠腺瘤43例,腺瘤病30例,炎症性肠病相关异型增生41例;腺瘤病患者血浆Septin9基因甲基化水平及病变组织CEA、DNMT3b蛋白相对表达量均高于腺瘤及炎症性肠病相关异型增生患者,且腺瘤患者高于炎症性肠病相关异型增生患者,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌前病变组织中CEA与DNMT3b蛋白均呈高表达,尤以腺瘤病患者最为明显,CEA蛋白表达部位以细胞膜为主,DNMT3b蛋白表达部位以细胞质为主。结论:不同类型结直肠癌前病变患者血浆Septin9基因甲基化水平、病变组织CEA与DNMT3b蛋白相对表达量均存在差异,以腺瘤病患者最高,腺瘤患者次之,炎症性肠病相关异型增生患者最低。     

NDRG4基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的应用研究

目的探讨NDRG4甲基化检测在结直肠癌诊断中的价值。方法从84例结直肠癌手术切除癌组织、癌旁组织及其术前粪便、尿、血中提取DNA,应用巢式甲基化特异性PCR（nested methylation specific PCR,nMSP）检测结直肠癌粪便、尿、血中NDRG4基因甲基化水平。比较结直肠癌组织和粪便、尿、血中NDRG4甲基化检测在结直肠癌诊断中的敏感性和特异性。结果在84例结直肠癌中,癌组织NDRG4检出率为81.0%,癌旁组织检出率为8.3%,敏感性为81.0%,特异性为91.7%;结直肠癌中粪便NDRG4基因甲基化的敏感性和特异性在3个微量DNA中最高,尿次之。结论结直肠癌组织NDRG4基因甲基化异常发生率高;粪便和尿中NDRG4甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。     

血浆甲基化 SEPT9 DNA用于筛查无症状结直肠癌

对进展期胃癌,目前只有人表皮生长因子受体2 (human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)基因阳性的患者可以通过化疗联合靶向治疗延长其生存期.但进展期胃癌患者中,HER-2阳性率不足1/4,我国患者这一比例可能更低.因此,有必要进一步探索胃癌新的治疗靶点.受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTK)染色体重排存在于常见的上皮细胞恶性肿瘤、非小细胞肺癌、结直肠癌、乳腺癌中,原癌基因1 (c-ros oncogene 1,ROS1)酪氨酸激酶属于RTK家族,是非小细胞肺癌的驱动基因,在ROS1阳性的非小细胞肺癌患者中,其抑制剂克唑替尼(一种ALK/MET/ROS1抑制剂)可使肿瘤明显缩小.     

血浆甲基化SEPT9 DNA用于筛查无症状结直肠癌

美国学者Church等对精确检测血浆中甲基化SEPT9 DNA(mSEPT9)筛查人群中结直肠患者的方法进行了前瞻性的评价.该研究选取年龄≥50岁、无临床症状的人群进行结肠镜筛查,检查前留取血浆样本,由3个设盲的独立实验室采用RT-PCR分析所有检出的结直肠癌患者和随机分层的其他筛查者血浆的DNA,并对总体的灵敏度和特异性进行标准化.研究结果显示:对53例结直肠癌和1 457例无结直肠癌的研究对象,该方法的标准化灵敏度为48.2％(95％可信区间32.4％～63.6％,粗略灵敏度为50.9％);对于Ⅰ～Ⅳ期结直肠癌患者分别为35.0％、63.0％、46.0％和77.4％.     

Apaf-1基因甲基化及表达在结直肠癌发生中的作用

目的探讨Apaf—1基因甲基化及表达在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）发生中的作用。方法应用半定量RT—PCR和甲基化特异性PCR方法,分析40例CRC及癌旁正常组织中Apaf—1（apoptotic protease activating factor—1）基因的表达及启动子区甲基化情况。结果65％（26／40）的CRC组织Apaf-1表达明显下调,与癌旁正常组织相比差异有统计学意义（P〈0．05）。Apaf-1基因与患者的性别及浸润深度差异无统计学意义（P〉0．05）,与患者的病理组织分化程度、淋巴结转移与否、临床TNM分期差异有统计学意义（P〈0．05）。在Apaf-1基因表达明显下调的26例CRC中20例出现甲基化,表达水平无明显变化的14例CRC中5例出现甲基化,二者对比差异有统计学意义（P〈0．05）。40例癌旁正常对照组织未检测到Apaf-1基因甲基化,提示甲基化是Apaf-1基因表达下调的主要原因。结论Apaf-1基因与CRC的发生发展相关,启动子区甲基化是该基因失活的重要发生机制。     

MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用

目的 建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性.方法 按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较.梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立.随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响.结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%.36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化.不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA.2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果.结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台.     

高甲基化导致EphA7基因在结直肠癌中低表达

目的：Eph基因和配体在多种肿瘤中呈高表达，并可能在肿瘤的发生、发展及预后中发挥重要作用。作者探讨EphA7基因在大肠癌细胞系和结直肠癌组织及其正常黏膜中的表达情况，以及EphA7基因在大肠癌发生、发展中的作用。方法：定量RT—PCR检测大肠癌细胞系和原发性结直肠癌标本中EphA7的表达。经甲基化特异性PCR（MSP）和亚硫酸氢钠处理后，用DNA测序等方法分析EphA7基因启动子区CpG岛甲基化状况。构建pEGFPN3-EphA7质粒，并转染至EphA7表达丢失的大肠癌细胞系中，对转染子进行mRNA基因表达芯片分析。结果：大肠癌细胞系DLD1、HT29、HCT116、SW480和SW620中Epha7基因低表达。59例进行定量RT-PCR测定的原发性结直肠癌患者中，29例患者癌组织中EphA7基因的表达水平低于来源相同患者的正常黏膜（P=0．008）。经MSP、亚硫酸氢钠处理后DNA测序等发现，EphA7基因启动子区CpG岛高甲基化。EphA7的高甲基化与肿瘤分化、性别以及肿瘤发生部位等有关。对EphA7质粒转染子mRNA基因芯片分析，观察到多种基因表达改变。结论：EphA7基因启动子区CpG岛甲基化是EphA7在大肠癌中低表达的机制。Epha7基因可能在结直肠癌的肿瘤发生、发展中起重要作用。     

基于生物芯片检测结直肠癌相关基因的甲基化

摘 要:【目的】 应用微矩阵基因芯片技术筛选结直肠癌甲基化基因?【方法】 分别提取6对结直肠癌组织和癌旁正常组织DNA,超声破碎及甲基化DNA富集后与甲基化芯片(NimbleGen human DNA Methylation 3 × 720K CpG)进行杂交,杂交信号经扫描等处理后采用生物信息学对检测结果进行分析?并对筛选出来的基因进行验证?【结果】 一共发现有2 296个高甲基化基因,其中有293个基因无文献报道?生物信息学分析显示,所有的甲基化基因随机分布在24对染色体上?聚类分析结果显示,某些在细胞分裂和肿瘤发生发展中起重要作用的生理过程中存在大量甲基化差异基因,如DNA修复,细胞周期和侵袭等?初步验证发现,Opmcl基因在结直肠癌组织及癌旁正常组织中存在甲基化差异?【结论】 在结直肠癌中运用DNA甲基化芯片进行甲基化基因筛查是一种有效的方法?     

SEPT9基因甲基化检测联合CA199和CEA在结直肠癌诊断中的应用价值

目的 探讨SEPT9基因甲基化(mSEPT9)联合糖类抗原19-9(CA199)、癌胚抗原(CEA)在结直肠癌诊断中的应用价值.方法 选取2019年6月至2020年6月于本院肛肠科住院患者200例的血液样本,其中70例结直肠癌患者血液样本作为A组,130例结直肠腺瘤患者血液样本作为B组;同期收集本院体检中心100名健康...     

CDH1基因甲基化状态与结直肠癌临床病理特征及预后的相关性研究

目的：探讨CDH1基因启动子所在5'-CpG岛的异常甲基化与临床病情发展、病理变化及术后预后的相关性。方法选取2013年1~12月在我院肿瘤科进行结直肠癌切除术的原发性结直肠癌患者184例,其中甲基化组86例,非甲基化组98例,所有入选患者由专人进行跟踪随访。检测CDH1基因启动子所在5'-CpG岛的异常甲基化,通过全基因组扩增技术对修饰后的DNA进行扩增,根据GenBank基因库设计CDH1基因甲基化特异性引物及CDH1基因非甲基化特异性引物。结果甲基化组肿瘤直径为(6.5±2.1) cm,大于非甲基化组的(3.2±2.2) cm,甲基化组肿瘤浸润性所占比例54.7%,高于非甲基化组的42.9%,差异均有显著统计学意义(P<0.01);甲基化组肿瘤分化程度(高分化14.0%,中分化36.0%)低于非甲基化组(高分化40.8%,中分化45.9%%),差异有显著统计学意义(P<0.01);甲基化组淋巴转移率为67.4%、远处转移率为31.4%,高于非甲基化组的21.4%和17.3%,差异均有统计学意义(P<0.05);甲基化组临床TNM分期更晚(甲基化组：Ⅰ期11.6%,Ⅱ期11.6%,Ⅲ期37.2%,Ⅳ期39.5%;非甲基化组：Ⅰ期27.6%,Ⅱ期32.7%,Ⅲ期20.4%,Ⅳ期19.4%),差异均有显著统计学意义(P<0.01);非甲基化组患者生存率(89.5%)高于甲基化组患者(68.7%),差异有统计学意义(P<0.05)。Cox比例风险模型结果显示,腹腔灌洗液悬浮细胞CDH1基因甲基化是原发性结直肠癌患者术后预后生存率的独立危险因素(RR=28.5,P<0.01)。结论原发性结直肠癌患者腹腔灌洗液悬浮细胞CDH1基因甲基化程度提高,恶性程度高,预后差。