黄芪三萜皂苷通过抑制CVB3诱导的心肌细胞凋亡保护病毒性心肌炎小鼠的心肌损伤

目的研究黄芪三萜皂苷(astragalus triterpenoid, AST)对病毒性心肌炎的保护作用。方法利用柯萨奇B3(CVB3)病毒构建病毒性心肌炎小鼠模型并使用AST进行干预,记录小鼠的死亡和体重变化情况、检测小鼠外周血中心肌损伤标志物乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平、体外超声和心肌组织天狼星红染色评价小鼠的心脏功能及纤维化水平。TUNEL染色检测小鼠心肌组织凋亡水平,Westerm Blot检测小鼠心肌组织中凋亡相关因子caspase-3, Bax和Bcl-2的表达水平,初步探讨AST保护病毒性心肌炎的机制。结果 AST对CVB3诱导的小鼠死亡和体重减轻具有显著的保护作用;AST对CVB3诱导的心肌损伤具有显著的保护作用,主要表现为AST干预组小鼠外周血中LDH及CK-MB水平、心肌组织纤维化水平及心肌细胞凋亡水平较CVB3组小鼠显著降低;AST干预对CVB3诱导的小鼠心脏射血分数(EF)的降低和E/E'的升高具有显著地抑制作用,说明AST对CVB3诱导的小鼠心脏收缩和舒张功能的降低具有保护作用;CVB3诱导组小鼠心肌组织中凋亡相关因子Caspase-3, Bax, Bcl-2的表达水平及Bax/BCL-2比值较对照组小鼠显著增加,而AST干预组小鼠心肌组织中上述指标较CVB3组小鼠显著降低。结论 AST对CVB3诱导的病毒性心肌炎具有显著的保护作用,这种保护作用可能与其抑制CVB3诱导的心肌细胞凋亡有关。     

黄芪总黄酮通过抑制内质网应激对小鼠病毒性心肌炎保护作用的实验研究

目的:探讨黄芪总黄酮对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞内质网应激凋亡的作用。方法:将60只雄性Balb/c小鼠均分为病毒性心肌炎组、正常组及黄芪总黄酮组。病毒性心肌炎组与黄芪总黄酮组腹腔内无菌注射含0.1ml 10-9 50TCIDCVB3,正常组不注射CVB3病毒。黄芪总黄酮组小鼠每日腹腔注射20mg·L-1黄芪总黄酮0.2ml,观察小鼠的一般情况,7d时行血流动力学检查后处死取心脏标本,用TUNEL法检测各组小鼠心肌细胞凋亡情况,RT-PCR检测各组小鼠心肌细胞内质网伴侣蛋白GRP78和GRP94的mRNA表达水平。结果:1与正常组相比,病毒性心肌炎组小鼠血流动力学指标明显降低(P0.05);与病毒性心肌炎组小鼠相比,黄芪总黄酮组小鼠血流动力学指标有显著改善(P0.05)。2TUNEL染色显示,与正常组相比,病毒性心肌炎组小鼠心肌细胞凋亡明显增多(P0.05);与病毒性心肌炎组小鼠相比,黄芪总黄酮组小鼠心肌细胞凋亡显著减少(P0.05)。3与正常组相比,病毒性心肌炎组小鼠内质网伴侣蛋白GRP78和GRP94的mRNA表达水平均明显升高(均P0.05),且其变化趋势与心肌细胞凋亡数相似;与病毒性心肌炎组小鼠相比,黄芪总黄酮组小鼠内质网伴侣蛋白GRP78和GRP94的mRNA表达水平明显下降(均P0.05)。结论:黄芪总黄酮对病毒性心肌炎心力衰竭小鼠内质网应激介导的心肌细胞凋亡有保护作用,这可能是黄芪总黄酮改善病毒性心肌炎心力衰竭小鼠血流动力学的作用机制之一。     

益气温阳、活血化瘀方对慢性病毒性心肌炎模型小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察益气温阳、活血化瘀方对慢性病毒性心肌炎模型小鼠心肌细胞凋亡的影响。方法采用多次腹腔注射柯萨奇B3m病毒稀释液方法,复制小鼠慢性病毒性心肌炎的模型。将BALB/c小鼠120只,随机分为:模型组、空白组、中药治疗组,每组40只。中药组予益气温阳、活血化瘀方治疗,空白组和模型组灌胃同体积生理盐水。于给药4周后采用原位末端标记法(TUNEL),观察益气温阳、活血化瘀方对实验性慢性病毒性心肌炎模型小鼠心肌细胞凋亡的影响。结果中药组与模型组比较,可改善小鼠心肌组织病理形态学及超微结构的变化,抑制心肌细胞凋亡。结论益气温阳活血化瘀方能够减轻慢性病毒性心肌炎模型小鼠病理损伤,抑制心肌细胞肥大,抑制心肌细胞凋亡,从而对慢性病毒性心肌炎起到一定的防治作用。     

急性病毒性心肌炎小鼠心肌中Calpain mRNA表达与心肌细胞凋亡的关系研究

目的检测CMpmn mRNA在柯萨奇病毒B3（Coxsackievirus B3,CVB3）急性心肌炎小鼠心肌组织中的表达,并分析其与心肌细胞凋亡的关系。方法以CVB3单次感染Balb／c小鼠建立急性病毒性心肌炎（n=10）模型,同时设立药物干预组（n=12）及药物对照组（n=10）;同期小鼠腹腔无菌注射等剂量不含病毒的DMEM液作为正常对照组（n=8）。以缺口末端标记法（TUNEL）检测各组心肌细胞凋亡情况,计数凋亡率。用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测小鼠心肌组织中Calpain-1及Calpain-2 mRNA的表达。结果急性病毒性心肌炎组较正常对照组及药物对照组心肌组织内Calpain-1（P=0．02及P=0．04）和Calpain-2（P〈0．01及P=0．02）mRNA表达升高,心肌细胞凋亡率亦增高（P值均〈0．01）;药物对照组与正常对照组心肌组织内Calpain-1（P〉0．05）和Calpain-2（P〉0．05）mRNA及心肌细胞凋亡率均没有统计学差异（P〉0．05）;药物干预组较正常组心肌组织内Calpain-1（P〈0．01）及Calpain-2（P〈0．01）mRNA表达升高,心肌细胞凋亡率亦升高（P〈0．01）;药物干预组较急性病毒性心肌炎组心肌组织内Calpain-1（P=0．04）及Calpain-2（P〈0．01）mRNA表达升高,心肌细胞凋亡率亦升高（P〈0．01）。各实验组小鼠心肌组织中calpain-1及Calpain-2m RNA的表达水平分别与心肌细胞的凋亡呈正相关。结论柯萨奇B3病毒通过激活心肌组织内Calpain,导致心肌细胞的凋亡,从而参与病毒性心肌炎的发生。     

重组硫氧还蛋白对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨重组人硫氧还蛋白(TRX)对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡的影响及对凋亡相关蛋白表达的调节作用.方法 Balb/c小鼠24只,体质量12～14 g,按体质量随机分为对照组、病毒组和TRX保护组,每组8只.病毒组和TRX保护组小鼠给予腹腔注射100TCID50柯萨奇B3病毒(CVB3)0.1 ml,对照组给予等量生理盐水.同时,TRX保护组给予尾静脉注射TRX(2 mg/kg),病毒组给予等量生理盐水.14 d后处死小鼠,光镜下观察心肌组织病理形态学改变,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,采用免疫组化法检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、caspase-3)的表达.结果 ①光镜结果显示,病毒组小鼠心肌细胞有局灶性坏死和炎细胞浸润;TRX保护组心肌细胞可见散在的凝固性坏死和细胞水肿;对照组心肌细胞未见明显异常.②凋亡检测结果显示,病毒组和TRX保护组凋亡指数[(90.23±3.63)％、(20.02±2.41)％]明显高于对照组(0.00±0.00,P均＜0.05),TRX保护组凋亡指数较病毒组明显降低(P＜0.05).③免疫组化结果显示,病毒组和TRX保护组Bcl-2蛋白阳性表达(+、++、+++)明显高于对照组(P均＜ 0.05),TRX保护组Bcl-2蛋白表达较病毒组明显增加(P＜0.05);病毒组和TRX保护组caspase-3蛋白阳性表达(+、++)明显高于对照组(P均＜0.05),TRX保护组caspase-3蛋白表达较病毒组明显降低(P＜0.05).结论 TRX能够抑制病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡,对心肌细胞凋亡的抑制作用与调节凋亡相关蛋白表达有关.     

菟丝子复方制剂对衰老小鼠心肌Cyt C和caspase-3的影响

目的 研究菟丝子及其复方制剂对衰老小鼠心肌细胞色素C(Cyt C)、caspase-3活性及心肌细胞凋亡的影响作用机制.方法 40只雄性昆明种小鼠,随机分为青年对照组、衰老模型对照组、菟丝子治疗组、菟丝子复方制剂组.采用D-半乳糖注射法制作衰老模型,然后灌服菟丝子水煎剂及复方制剂治疗7 w.使用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用酶联免疫标记法测定Cyt C含量、分光光度法检测caspase-3活性.结果 衰老模型组与青年组比较,心肌组织Cyt C释放增加(P＜0.01),caspase-3活性增加(P＜0.01),心肌细胞凋亡增加(P＜0.01);菟丝子及其复方制剂组与模型组比较,能够减少胞浆Cyt C含量(P＜0.01),降低心肌细胞内caspase-3活性(P＜0.05),抑制心肌细胞凋亡(P＜0.05).与菟丝子组比较,其复方制剂的效果与菟丝子没有显著差异(P＞0.05).结论 菟丝子及其复方制剂可能通过减少线粒体Cyt C的溢出,降低caspase-3活性,从而减少衰老模型小鼠心肌细胞的凋亡率.菟丝子是菟丝子复方制剂发挥作用的主要成分.     

雷米普利对病毒性心肌炎后心肌细胞凋亡水平的影响

目的:探讨雷米普利对病毒性心肌炎后心肌细胞凋亡水平的影响。方法:采用CVB3感染BALB/c乳鼠原代心肌细胞,构建病毒性心肌炎模型。将细胞分为空白组、模型组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、AngⅡ+雷米普利组和雷米普利组。空白组正常培养心肌细胞72h。其余4组以CVB3 100PFU/cell的比例感染心肌细胞48h,构建病毒性心肌细胞模型,模型组于培养液中加入PBS,AngⅡ组于培养液中加入终浓度为100nmol/L的AngⅡ,AngⅡ+雷米普利组于培养液中加入终浓度为100nmol/L的AngⅡ和1μmol/L的雷米普利,雷米普利组于培养液中加入终浓度为1μmol/L的雷米普利。培养24h后,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)法检测细胞凋亡水平,Western blot法检测凋亡蛋白caspase-3的表达水平。结果:与空白组相比,模型组和AngⅡ组细胞的凋亡率和caspase-3的蛋白表达水平均显著升高(P均0.01);与模型组相比,雷米普利组细胞的凋亡率和caspase-3的蛋白表达水平均显著降低(P均0.01);与AngⅡ组相比,AngⅡ+雷米普利组细胞的凋亡率和caspase-3的蛋白表达水平均显著降低(P均0.01)。结论:雷米普利能降低病毒性心肌炎引起的细胞凋亡,其作用可能与AngⅡ有关。     

小鼠病毒性心肌炎中Fas/FasL异常表达的研究

目的探讨柯萨奇病毒B3(CVB3)所致小鼠病毒性心肌炎(VM)心肌细胞损伤的变化,观察Fas/FasL介导的细胞凋亡在心肌损伤中的作用.方法采用CVB3制备小鼠病毒性心肌炎动物模型,心肌组织切片HE染色了解心肌损伤情况;电镜检测观察心肌组织中的细胞凋亡;同时采用免疫组化、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)两种方法检测心肌炎小鼠不同时期心肌组织中Fas与FasL基因转录与蛋白的表达.结果光镜观察见对照组小鼠心肌组织无异常改变,实验组病鼠可见心肌细胞坏死和单核、淋巴细胞浸润,后期可见纤维化;电镜观察对照组心肌中未检出凋亡细胞,而病鼠心肌凋亡细胞检出率较高58.33%(7/12例),且细胞凋亡多存在于炎症病灶周围的心肌细胞及病灶处炎性浸润细胞;感染后第7～14天的病鼠心肌组织中,主要表达于心肌细胞的Fas mRNA及蛋白和主要表达于浸润淋巴细胞的FasL mRNA及蛋白均明显增强;FasL蛋白表达水平与心肌病变积分呈正相关(r=0.9082,P＜0.001).结论小鼠病毒性心肌炎中心肌损伤坏死与心肌细胞凋亡共存,通过Fas/FasL基因路径介导的心肌细胞凋亡与病毒性心肌炎的发病过程有关.     

缬沙坦对大鼠缺血-再灌注心肌caspase-3活性及凋亡相关基因表达的影响

目的:观察缬沙坦对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)时心肌细胞天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法:以SD大鼠建立I/R模型,设立I/R组、缬沙坦组和假手术组.用分光光度法检测caspase-3活性,免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察心肌超微结构的变化.结果:同I/R组相比,缬沙坦组心肌组织caspase-3活性明显降低(P＜0.05),Bax蛋白表达显著降低(P＜0.01),而Bcl-2蛋白表达显著增高(P＜0.01),Bax/Bcl-2显著降低(P＜0.01),心肌细胞超微结构损伤明显减轻.结论:缬沙坦通过抑制caspase-3活性、调控Bax/Bcl-2表达而抑制心肌I/R所致细胞凋亡.     

Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨Ghrelin对高糖诱导心肌细胞凋亡的影响.方法 将原代培养的心肌细胞随机分为:①正常对照组(N组);②高糖组(H组);③高糖+Ghrelin组(G组).应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测各组心肌细胞凋亡,分光光度法检测心肌细胞内caspase-3活性的变化.结果 与N组比较,H组心肌细胞凋亡明显增加,caspase-3活性显著升高;与H组比较,G组心肌细胞凋亡数量明显减少,caspase-3活性明显降低(均P＜0.05).结论 Ghrelin可能通过降低caspase-3活性抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡.     

钙激活中性蛋白酶在脓毒症小鼠心肌半胱氨酸蛋白酶-3活化中的作用及其机制

目的 探讨钙激活中性蛋白酶(calpain)在脓毒症小鼠心肌半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活化中的作用及其机制.方法 (1)体内实验:腹腔注射脂多糖(LPS,4 mg/kg)建立脓毒症小鼠模型.Western blot检测心肌组织中calpain、caspase-3活性和calpain-1、calpain-2、calpain特异性抑制蛋白calpastatin水平以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bid水平及剪切片段,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,Langendorff灌注装置评价小鼠心脏的收缩和舒张功能.(2)体外实验:成年大鼠心肌细胞给予LPS(1μg/ml)处理4 h,或同时予以calpain抑制剂calpain inhibitor-Ⅲ(10 μmol/L)干预后,检测心肌细胞calpain和caspase-3活性,Bcl-2、Bid蛋白水平以及心肌细胞凋亡情况.结果 (1)体内实验:在脓毒症小鼠心肌组织中,calpain活性增高2.7倍,caspase-3活性增高1.8倍,给予calpain-inhibitor-Ⅲ或PD150606,均可抑制caspase-3活性的增高.脓毒症小鼠心肌组织calpain-1、calpain-2、calpastatin以及Bcl-2、Bid蛋白水平未见改变,亦未检测到Bcl-2、Bid剪切片段.Calpain inhibitor-Ⅲ则可使脓毒症小鼠心室最快压力上升速率和心室最快压力下降速率分别增加34.5%和34.6%,从而改善脓毒症小鼠心功能障碍.(2)体外实验:LPS可诱导成年大鼠心肌细胞calpain和caspase-3活性增高,给予calpain inhibitor-Ⅲ则可抑制caspase-3活性的增高,心肌细胞Bcl-2、Bid蛋白水平未见改变.体内外实验均未发现LPS可诱导心肌细胞凋亡的增加.结论 脓毒症小鼠心肌calpain活性增高,可活化心肌caspase-3,但未导致心肌细胞凋亡,其机制与凋亡蛋白Bcl-2和Bid无关.     

柯萨奇病毒B3引致心肌细胞钙超载及细胞凋亡的研究

目的以柯萨奇病毒B3(CVB3)感染体外培养的小鼠心肌细胞,探讨CVB3感染心肌细胞后对心肌细胞周期、心肌细胞凋亡和心肌细胞浆游离钙的影响.方法制备心肌细胞样本,设正常对照组及实验组(CVB3感染心肌细胞),流式细胞仪、钙荧光探针标记分别检测细胞周期、细胞凋亡及心肌细胞浆内游离钙.结果CVB3感染心肌细胞后,可显著抑制心肌细胞的分裂增殖,诱导心肌细胞凋亡;显著增高心肌细胞浆内游离钙浓度和减少细胞外钙含量.结论CVB3感染体外培养的心肌细胞,可能引起心肌细胞凋亡和心肌细胞浆内钙超载,初步实验提示此种变化可能是病毒性心肌炎心脏损伤的重要机制.     

桂枝加减汤对MRL小鼠心肌细胞凋亡及Bax mRNA、Caspase3mRNA基因表达的影响

目的:探讨复方中药对MRL小鼠心肌细胞凋亡的作用及机理.方法:将MRL小鼠分为复方中药组、桂枝组、强的松组和空白对照组,检测MRL小鼠心肌组织凋亡细胞,计算心肌细胞凋亡指数(AI),RT-PCR法检测心肌细胞凋亡基因Bax mRNA、Caspase 3 mRNA表达,观察复方中药(组成:丹参、桂枝、西洋参、冰片)对MRL小鼠心肌细胞凋亡的影响.结果:复方中药能抑制Bax mRNA、Caspase 3 mRNA表达,明显抑制心肌细胞凋亡(心肌细胞凋亡指数显著下降).其疗效明显优于桂枝组和空白对照组(P<0.05),与强的松组疗效相当,P>0.05.结论:复方中药可能通过调控凋亡基因Bax mRNA、Caspase 3 mRNA表达而抑制心肌细胞凋亡,从而延缓或部分逆转MRL心肌损害的发生、发展.     

缬沙坦对大鼠缺血-再灌注心肌caspase-3活性及凋亡相关基因表达的影响

目的：观察缬沙坦对大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)时心肌细胞天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法：以SD大鼠建立I/R模型,设立I/R组、缬沙坦组和假手术组。用分光光度法检测caspase-3活性,免疫组化法检测心肌组织Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果：同I/R组相比,缬沙坦组心肌组织caspase-3活性明显降低(P＜0．05),Bax蛋白表达显著降低(P＜0．01),而Bcl-2蛋白表达显著增高(P＜0．01),Bax/Bcl-2显著降低(P＜0．01),心肌细胞超微结构损伤明显减轻。结论：缬沙坦通过抑制caspase-3活性、调控Bax/Bcl-2表达而抑制心肌I/R所致细胞凋亡。     

丁基苯酞对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌损伤及凋亡的作用

目的 探讨丁基苯酞对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌损伤保护作用及抗凋亡机制.方法 SD大鼠48只,随机分为对照组（Control组,n=12）、异丙肾上腺素组（ISO组,n=12）、异丙肾上腺素＋Tween-80（丁苯酞溶媒）组（n=12）和异丙肾上腺素＋丁苯酞组（n=12）.7d后处死大鼠,测定血清CK-MB活性,TUNEL检测心肌组织细胞凋亡及Western Blot检测大鼠心肌caspase-3表达.结果 ISO组成功制备了心肌损伤模型.与Control 组相比,ISO组血清CK-MB活性明显增加,凋亡的心肌细胞增加,caspase-3的表达增加.丁基苯酞（NBP）能显著减轻异丙肾上腺素导致的心肌损害.与ISO组相比,ISO＋NBP组血清CK-MB活性降低,差异有统计学意义（P＜0.05）,凋亡的心肌细胞减少,caspase-3的表达减少.结论 丁基苯酞对异丙肾上腺素引起的大鼠损伤心肌有保护作用,机制可能与其抗凋亡作用有关.     

黄芪对病毒性心肌炎小鼠热休克蛋白70及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:研究黄芪对病毒性心肌炎(VMC)小鼠热休克蛋白(HSP)70及凋亡相关基因蛋白产物表达的影响。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,用Western Blot观察心肌细胞HSP70、Bcl-2及Bax变化;120只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、病毒组以及黄芪干预组,采用腹腔接种柯萨奇病毒制做VMC小鼠模型,免疫组化检测各组小鼠Bcl-2和Bax基因表达的情况,并用图像分析系统进行分析。结果:黄芪干预组心肌细胞HSP70及Bcl-2表达明显高于病毒组,2组Bax表达无差异;黄芪干预组心肌组织Bcl-2表达明显高于病毒组,2组Bax表达亦无差异。结论:黄芪可能通过上调心肌细胞Bcl-2、HSP70的表达来抑制病毒所致的心肌细胞凋亡。     

双去甲氧基姜黄素对星型孢菌素诱导心肌细胞凋亡的影响

目的探讨双去甲氧基姜黄素(BDMC)对星型孢菌素(STS)诱导的原代心肌细胞凋亡的影响。方法常规培养C57BL/6J小鼠原代心肌细胞,分为4组:对照组、STS组、BDMC预处理+STS组、BDMC组。CCK-8法检测心肌细胞生存率,1unel检测心肌细胞凋亡情况,Caspase-3酶活性试剂盒检测caspase-3活性,活性氧检测试剂盒检测心肌细胞内活性氧(ROS)水平。结果终浓度为100μmol/L的BDMC预处理能显著提高心肌细胞生存率降低caspase-3酶活性,降低心肌细胞凋亡率和细胞内ROS水平(P0.05)。结论 BDMC可通过降低STS处理后的心肌细胞内ROS水平,抑制心肌细胞凋亡,达到保护损伤心肌细胞的作用。     

Caspase-3在异丙基肾上腺素致大鼠急性心肌损伤中的作用及bFGF的影响

目的：研究半胱天冬酶-3(caspase-3)在异丙基肾上腺素(isoprenaline，Iso)致大鼠急性心肌损伤中的作用及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对它的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成3组：对照组、损伤组和bFGF保护组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测caspase-3蛋白及mRNA的表达水平，底物降解法测定该酶的活性。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显升高，酶活性增加；bFGF保护组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Caspase-3基因mRNA和蛋白表达水平明显下降，酶活性受到抑制。结论：bFGF可能通过抑制Caspase-3的表达和活性减少心肌细胞凋亡而减轻大鼠心肌损伤。     

FTY720对CVB3病毒诱导的病毒性心肌炎模型的治疗作用研究

目的本文旨在研究FTY720对CVB3诱导的病毒性心肌炎细胞和动物模型的治疗作用。方法利用CVB3病毒、乳鼠心肌细胞及小鼠建立病毒性心肌炎细胞和动物模型。通过观察心肌细胞病变情况、动物死亡率及心脏脏器系数、心肌组织HE染色及动物模型外周血清中LDH、CK-MB水平对FTY720的疗效进行评价。通过FTY720抑制病毒增殖实验及心肌细胞凋亡实验研究FTY720抗病毒性心肌炎的作用机制。结果 FTY720能够显著的抑制由CVB3引起的细胞病变(P0.05),显著的降低小鼠外周血中心肌酶LDH和CK-MB的水平及小鼠心脏脏器系数(P0.05),而对小鼠死亡率影响不大(P0.05)。FTY720能够显著的抑制CVB3的增殖和心肌细胞的凋亡(P0.05或P0.01)。结论 FTY720对CVB3诱导的病毒性心肌炎细胞和动物模型均具有一定的保护作用,其作用机制与抑制病毒增殖及心肌细胞凋亡有关。     

Calpastatin减轻病毒性心肌炎心脏炎症损伤的作用

目的探讨钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)对柯萨奇B组病毒3型(coxsackievirus B3, CVB3)诱导的病毒性心肌炎小鼠心脏炎症损伤的作用。方法取全身过表达calpastatin的转基因小鼠(Tg-CAST)及野生型小鼠(WT)腹腔注射CVB3,感染病毒7 d后建立病毒性心肌炎模型。分为对照组、Tg-CAST组、WT病毒性心肌炎组、Tg-CAST病毒性心肌炎组。留取小鼠心肌、血清及脾脏组织标本,分别行组织病理学检查以及炎症损伤相关因子检测。结果①WT病毒性心肌炎小鼠心肌组织中炎症浸润面积、病毒包膜蛋白VP-I及血清cTnI水平均明显高于对照组(P0.001)。与WT病毒性心肌炎小鼠相比,Tg-CAST病毒性心肌炎小鼠心肌炎症浸润面积、VP-1及cTnl水平均明显降低(P0.05)。②WT病毒性心肌炎小鼠心肌、脾脏与血清中炎症因子HMGB1、TNF-α、IL-17水平及心肌β-NF-κB表达显著升高(P0.01),而Tg-CAST病毒性心肌炎小鼠相应指标均明显低于WT病毒性心肌炎小鼠(P0.05)。结论 calpastatin可能通过抑制NF-KB通路活化降低病毒性心肌炎小鼠HMGB1、TNF-α、IL-17水平,进而改善心脏炎症损伤。