Histopathological studies of acute and chronic effects of Calliandra portoricensis leaf extract on the stomach and pancreas of adult Swiss albino mice

Objective

To evaluate the consequence of oral administration of Calliandra portoricensis (C. portoricensis) leaf extract on the stomach and pancreas in Swiss albino mice.

Methods

Three groups of mice (B, C and D) were treated with 4 mg/kg of C. portoricensis extract. Group A was the control and received an equivalent volume of distilled water. Group B received C. portoricensis leaf extract for 7 days, Group C received C. portoricensis leaf extract for 14 days, and Group D received C. portoricensis leaf extract for 28 days. At different stages in the study, the mice were sacrificed and the stomach and pancreas were excised and fixed in 10% formol saline for histological analysis.

Results

The result showed a normal microstructural outline in groups B and C as compared with the control. However, animals in group D showed disorganization of the mucosa and discontinuation of epithelial lining of the stomach while the islets of Langerans in the pancreas were at various degree of degeneration as compared with the control mice.

Conclusions

The present finding suggests that chronic administration (28 days as seen in this study) of C. portoricensis leaf extract may inhibit the proper function of the stomach and pancreas.     

重组小鼠血管抑素基因转染抗血管生成治疗胆囊癌的实验研究

目的:研究重组小鼠血管抑素基因真核表达质粒转染的胆囊癌细胞表达具有抑制血管内皮细胞生长活性的血管抑素蛋白,以及对裸鼠种植性胆囊癌生长的抑制作用. 方法:应用脂质体lipofectamine2000将重组小鼠血管抑素基因的真核表达质粒pcDNA3.1( )-angiostatin转染胆囊癌细胞株GBC-SD,G418抗性筛选;以Western blot检测血管抑素的表达,以血管内皮细胞增殖分析检测其生物学活性,接种裸鼠并比较肿瘤体积和肿瘤微血管密度(MVD). 结果:得到表达血管抑素的胆囊癌细胞克隆,其培养上清能有效抑制bFGF刺激的血管内皮细胞增殖(P＜0.01);血管抑素组裸鼠肿瘤体积小于野生细胞对照组(P＜0.01),免疫组化检测显示血管抑素组裸鼠肿瘤微血管密度(MVD)低于野生细胞对照组(P＜0.05). 结论:血管抑素基因转染对裸鼠种植性胆囊癌的生长有抑制作用,这是血管抑素组肿瘤组织内新生血管形成受到抑制而减少所致.     

血清PSA、F-PSA及F-PSA/PSA比值对前列腺癌的诊断价值

目的探讨T-PSA、F-PSA、F-PSA/T-PSA比值对前列腺癌的诊断价值。方法采用全自动电化学发光免疫分析仪（ECLIA）检测86例健康男性、46例前列腺增生和48例前列腺癌患者血清T-PSA和F-PSA,计算F-PSA/T-PSA比值,并进行统计分析。结果前列腺癌患者血清T-PSA明显高于前列腺增生组及正常对照组（P〈0.01）,F-PSA/T-PSA比值明显低于前列腺增生组及正常对照组（P〈0.01）,T-PSA与前列腺癌分期存在正相关性（r=0.786,P〈0.001）,Ⅲ-Ⅳ期患者的T-PSA明显高于Ⅰ-Ⅱ期,而F-PSA/T-PSA比值与前列腺癌分期无相关性（P〉0.05）。结论T-PSA和F-PSA对前列腺癌有较高的诊断价值,F-PSA/T-PSA比值可用于前列腺癌和前列腺增生的鉴别诊断。     

三氧化二砷对前列腺癌细胞PC-3凋亡抑制蛋白XIAP表达的影响

[目的]探讨三氧化二砷(As2O3)对前列腺癌细胞株PC-3细胞增殖、细胞凋亡及X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响.[方法]取对数生长期PC-3细胞,分别经0.5,1.0,2.0μmol/L As2O3处理,采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法及实时荧光定量PCR检测XIAP蛋白表达及XIAP mRNA表达的变化.[结果]0.5,1.0,2.0μmol/LAs2O3均可抑制PC-3细胞增殖,在处理24,48,72h后,细胞生长抑制率间差异具有统计学意义(P<0.01).检测0.5,1.0,2.0μmol/L As2O3处理48h的PC-3细胞株细胞凋亡率分别为11.47%±1.81%,38.47%±1.60%,58.93%±3.35%,相比较差异具有统计学意义(P<0.01).As2O3处理48h时0.5,1.0,2.0μmol/L As2O3组的XIAP mRNA表达水平分别为0.67±0.12,0.25±0.15,0.03±0.01,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05).[结论]As2O3可抑制PC-3细胞增殖,诱导细胞凋亡,此作用可能与As2O3抑制PC-3细胞XIAP基因的表达有关联.     

姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

目的：探讨姜黄素(curcumin) 对人前列腺癌PC-3M细胞生长抑制及凋亡调控的作用。方法：按姜黄素浓度分为10、20、30和40 μmol•L^-14个处理组和对照组（未加姜黄素）,处理PC-3M细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况;荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪（FCM）进行细胞周期时相分析;免疫组化SP法检测细胞内caspase-3蛋白的表达水平。结果：与对照组比较,姜黄素处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,姜黄素处理组随着浓度的增加和作用时间延长,对PC-3M细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.01）;荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个姜黄素不同浓度处理组凋亡率分别为（9.83±1.53）%、（19.50±1.00）%、（24.83±2.52）%、（30.17±2.08）%和（38.50±2.65）%;流式细胞术显示,停滞在S、G₂/M期细胞增加,而G₀/G₁期细胞减少;免疫组化结果显示,随着姜黄素浓度增加,caspase-3 蛋白表达增强,呈剂量依赖性（P<0.01）。结论：姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞的生长具有明显抑制作用。上调caspase - 3 蛋白的表达,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

PSA及PSA mRNA在前列腺癌诊断中的价值

目的 评价前列腺特异性抗原(PSA)及PSA mRNA对前列腺癌的诊断价值.方法 选取老年男性前列腺癌患者53例作为受试对象,同时选取前列腺增生患者30例作为对照组,采用ELISA法检测血清PSA水平,采用反转录聚合酶链反应检测其mRNA的表达.结果 前列腺增生患者总PSA小于10 ng/ml,而前列腺癌患者总PSA大于10 ng/ml.当PSA小于4 ng/ml和大于10ng/ml时,PSA和PSAmRNA对前列腺癌的诊断与金标准相比,无统计学意义(P＞0.05).当PSA在诊断灰区4-10 ng/ml之间时,PSA mRNA与金标准相比,无统计学意义,而PSA低于金标准(P＜0.05).结论 血清PSA及PSA mRNA的检测对前列腺癌的诊断具有极其重要的作用,检测PSA的同时进行PSA mRNA的检测,有助于前列腺癌的诊断,尤其对PSA在诊断灰区的前列腺癌患者.     

E6-AP对前列腺癌细胞株LNCaP细胞增殖和细胞周期的影响

目的:研究E6相关蛋白(E6-AP)对前列腺癌细胞增殖和细胞周期的影响,阐明E6-AP在雄激素受体通路中的作用机制及在前列腺癌发生发展中的作用.方法:采用电穿孔方法制备tTA及E6-AP稳定转染细胞株;利用强力霉素(DOX)的调节作用,通过MTT实验观察E6-AP过表达及低表达对LNCaP细胞增殖的影响;利用流式细胞仪...     

前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达

目的：检测前列腺癌患者及对照者外周血单个核细胞前列腺特异性抗原(PSA）mRNA表达,并探讨其临床意义。方法：选择39例前列腺癌患者,12例健康体检者作为对照,取5 mL静脉血,肝素抗凝,Ficoll密度梯度离心分离外周血单个核细胞,RT-PCR检测PSA mRNA表达。结果：①39例前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA表达阳性检出率66.7%（26/39）,其中血清PSA＞20.0 μg·L^-1者23例,PSA mRNA表达阳性检出率87.9%（20/23）;血清PSA≤20.0 μg·L^-1者16例,PSA mRNA表达阳性检出率37.5%（6/16）。对照组未见阳性表达。②16例血清PSA≤20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者PSA mRNA阳性表达的Gleason评分为：1~4分0/3,5~7分1/8,8~10分5/5,6例阳性者均为中、低分化癌。 结论：外周血单个核细胞PSA mRNA的检测在血清PSA＞20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者中具有较高的敏感度,是一种可靠的检测方法。血清PSA≤20.0 μg·L^-1的前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA的检测可以预示微转移的发生。     

前列腺癌相关长链非编码RNA在前列腺癌中的表达及生物学功能

目的 探讨前列腺癌相关长链非编码RNA(prostate cancer related long non-coding RNA,PCRL)在前列腺癌中的表达情况及其潜在的生物学功能。方法 采用qRT-PCR检测PCRL在前列腺癌组织、癌旁组织及其他组织中的表达,同法检测并比较PCRL在雄激素依赖(LNCaP-AD) 与雄激素非依赖(LNCaP-AI) 前列腺癌细胞和正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)中的表达差异。以siRNA干扰PCRL后,采用qRT-PCR方法检测LNCaP-AI细胞和LNCaP-AD细胞中雄激素受体的表达变化。结果 PCRL在前列腺及前列腺癌组织中特异高表达,LNCaP-AI细胞中PCRL水平高于LNCaP-AD细胞和RWPE-1细胞。干扰PCRL后LNCaP-AI细胞和LNCaP-AD细胞中雄激素受体的表达量上升(前者P<0.000 1)。结论 在前列腺癌中特异高表达的PCRL与前列腺癌的进展有关,PCRL和雄激素受体之间可能存在一定的调控关系。     

激素递减法成功建立雄激素非依赖性LNCaP细胞亚系

目的:利用激素递减法对LNCaP细胞进行去雄环境培养,建立雄激素非依赖的LNCaP细胞(LNCaP-AI)亚系并予以鉴定.方法:利用活性炭处理的血清培养模拟去雄细胞环境,逐步递减培养基中激素10 d,后完全在非雄培养,共连续培养3个月,直到LNCaP细胞重新进入快速生长期,利用CCK-8法、放免法、RT-PCR法分别测定细胞生长曲线、PSA及雄激素(AR)表达情况.结果:LNCaP细胞在激素递减后,生长缓慢,呈神经内分泌样改变和成簇生长,经过共3个月的连续非雄培养,细胞重新恢复以前的形态及生长.CCK-8测定提示LNCaP-AI细胞能够在去雄环境中生长,放免法提示LNCaP-AI细胞能够在去雄环境中恢复分泌PSA功能,RT-PCR方法提示LNCaP-AI细胞显著高表达AR.结论:激素递减方法可以3个月左右有效地建立雄激素非依赖的LNCaP细胞亚系.     

前列腺癌单克隆抗体与平阳霉素偶联物导向化疗的体外作用

目的 探讨导向化疗对前列腺癌细胞系LNCaP的体外作用.方法 以葡聚糖为中介体制备抗前列腺癌单克隆抗体7E11C5.3与平阳霉素(PYM)的偶联物,用间接ELISA法测定其免疫活性,2,3,5-氯化三苯基四氮唑法测定其抑菌活性.四唑盐法测定其体外细胞毒作用.结果 偶联物中7E11C5.3和PYM的摩尔比为1:54,偶联后单抗的免疫活性降低了10%～20%,偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的25%,偶联物和游离PYM对体外培养的LNCaP细胞50%抑制浓度分别为(9.41±1.98)μg/ml和(29.92μ7.88)μg/ml.结论 7E11C5.3-PYM偶联物的体外抗前列腺癌作用强于游离PYM.     

去除雄激素对前列腺癌中凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-XL表达的影响

目的：探讨去除雄激素对人前列腺癌（PCa)细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达的影响。方法：采用雄激素依赖PCa细胞株LNCaP为研究对象,雄激素非依赖PCa细胞株PC－3为对照;以Western印迹法检测去除雄激素后Bcl-2和Bcl-XL蛋白的表达。结果：在LNCaP中去除雄激素12h后Bcl-2蛋白的表达开始升高,到24h最明显,而去除雄激素10h后Bcl-XL蛋白表达开始降低,在24h达最低,而在PC－3中去除雄激素前后未见Bcl-2和Bcl-XL蛋白表达改变,结论：去除雄激素可促PCa细胞中Bcl-XL蛋白表达降低,可能是手术或药物去势治疗前列腺癌的机制之一,Bcl-2蛋白的表达升高可能和后期PCa雄激素非依赖性生长有关。     

Proliferative response of human prostate cancer cell to hormone inhibited by androgen receptor antisense RNA

Background The failure of endocrine treatment for advanced prostate cancer might be related to aberrant activation of androgen receptor (AR). Prostate cancer cell line LNCaP contains AR that can be activated by androgen, estrogen and progesterone. This study was set to investigate the effects of antisense AR RNA on growth of LNCaP cultured in medium containing varied concentrations of R1881, 17β-estradiol, and progesterone, respectively. Methods LNCaP cells transfected with antisense AR RNA retroviral vector pL-AR-SN were designated as LNCaPas-AR. LNCaP cells containing empty vector pLXSN served as LNCaPNeo. LNCaP and LNCaPNeo were taken as controls. In vitro cell growth assay, proliferative cells of LNCaP and tranfected LNCaPs were counted by typan staining when they cultured with synthetic androgen R1881, 17β-estradiol, and progesterone, respectively. Results Growth of LNCaPas-AR was inhibited significantly (P&lt;0.05) compared with that of LNCaP and LNCaPNeo at 1 nmol/L R1881, 10 nmol/L 17β-estradiol, and 1 nmol/L progesterone, respectively. No difference was seen between LNCaP and LNCaPNeo（P＞0.05）. Microscopic observation showed that LNCaP and LNCaPNeo cells grew well, but only few LNCaPas-AR cells were alive. Conclusions Our observations indicate that antisense AR RNA retroviral vector pL-AR-SN could change androgen-independent characteristics of LNCaP cells, which might shed some novel insights into the treatment of androgen-independent prostate cancer.     

microRNA在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌是男性泌尿生殖系最常见的恶性肿瘤之一,日益成为人类男性健康的威胁.microRNA由于其特异性的转录后调节作用,在生命进化、发育以及肿瘤的发生、进展中都发挥着重要作用.研究表明,前列腺癌中异常表达的microRNA在前列腺癌的发生和发展中起到了重要作用.本文就microRNA在前列腺癌中的表达谱改变、与去势抵抗性前列腺癌的进展和化疗药耐药的关系以及临床应用等方面作一综述.     

前列腺癌患者PSA、PSAD、PSAT测定

目的：探讨前列腺特异抗原（PSA）及前列腺特异抗原密度（PSAD）、前列腺特异抗原移行区密度（PSAT）作为前列腺癌肿瘤标志物的临床价值。方法：选择前列腺癌患者30例、前列腺增生患者30例、健康志愿者20例，采用放射免疫法检测PSA并计算PSAD、PSAT，比较3组间的变化情况。结果：前列腺增生组PSA升高，与对照组相比差异有统计学意义（P＜0．05），前列腺癌组PSA、PSAD、PSAT均升高，与对照组及前列腺增生组对比差异有统计学意义（P＜0．001）。结论：PSA作为前列腺癌肿瘤标志物有重要临床价值，但单纯测定血PSA含量有时不易区分前列腺增生与前列腺癌；PSAD、PSAT在前列腺增生与前列腺癌的鉴别诊断中优于PSA。     

Expression of nucleostemin in prostate cancer and its effect

Background Nucleostemin is essential for the proliferation and survival of stem and cancer cells, but it is unknown whether this newly identified molecule is involved in prostate cancer pathogenesis.
Methods Total RNA and protein were extracted from prostate cancer tissues and PC-3, LNCap and DU145 cell lines. The nucleostemin mRNA and protein expression were measured by RT-PCR and Western blot. Immunohistochemistry was also used to detect the nucleostemin protein expression in prostate cancer tissues and PC-3 cells. A nucleostemin specific, short hairpin RNA, expression plasmid was used to transfect PC-3 cells. The changes of nucleostemin gene were detected and the oroliferative capacitv of the cells was determined.
Results Nucleostemin was highly expressed in prostate cancer tissues and cell lines. Nucleostemin expression level in the silencer group PC-3 cells remarkably reduced. The proliferation rate of silencer group PC-3 cells decreased and the percentage of G1 stage cells increased. The neoplasm forming capacity in nude mice of the silencer group PC-3 cells decreased significantly. Conclusions Nucleostemin is highly expressed in prostate cancer tissues and cell lines. The proliferative capacity of PC-3 cells is remarkably reduced after silencing nucleostemin gene expression.     

外泌体在前列腺癌诊疗中的研究进展

前列腺癌起病隐匿,发现时多为晚期且治疗困难,亟需研发更有效的前列腺癌诊治手段.外泌体是由多种活细胞分泌的直径为30～100nm的细胞外囊泡.在肿瘤患者的多种体液中均能检测到肿瘤相关外泌体,其在肿瘤的发生、侵袭、转移和耐药性中发挥了重要作用.研究发现,外泌体应用于肿瘤治疗时表现出能穿过天然屏障、细胞靶向性、循环系统中可稳定存在等优势,表明外泌体在前列腺癌治疗方面具有巨大潜力.本文综述了外泌体的主要特点和功能及其在前列腺癌诊疗方面的研究进展.     

人前列腺癌中P21CIP1/WAF1, Rb的表达意义

目的：研究P21^CIP1/WAF1及Rb在人前列腺癌标本中的表达以及两的相关性,以阐述它们与前列腺癌的病理分级及临床分期的关系。方法：应用免疫组化SABC法染色技术对36例前例腺癌标本进行检测,观察P21^CIP1/WAF1及Rb在前列腺癌各病理分级,临床分期中的表达及相关性。结果：在36例人前列腺癌标本中,P21^CIP1/WAF1和Rb免疫组化阳性染色为棕黄色或棕褐色,分别定位于细胞质和细胞核,其中P21^CIP1/WAF1阳性19例,阳性率52.8%。Rb阳性17例,阳性率47.2%。在不同病理分级、临床分期之间差异均有显性,但实验结果未发现P21^CIP1/WAF1与Rb有显相关性。结论：P21^CIP1/WAF1,Rb的表达与前列腺癌细胞的病理学分级、临床分期呈负相关性,在前列腺癌分子发病机制中可能涉及到P21^CIP1/WAF1,Rb调节通道的异常。     

糖皮质激素抑制人前列腺癌PC-3细胞系增殖的可能机制

目的:观察地塞米松对前列腺癌PC-3细胞中转录因子NF-κB及其下游靶基因cyclinD1的调节作用,探讨其抑制PC-3细胞增殖的可能机制.方法:MTT法检测地塞米松对PC-3细胞增殖的影响;转染和报告基因的方法比较多种肿瘤细胞中NF-κB的基础转录活性并检测地塞米松对PC-3细胞NF-κB转录活性的调节;Western 印迹法检测地塞米松对PC-3细胞cyclinD1蛋白表达的影响.结果:地塞米松抑制PC-3细胞的增殖;PC-3细胞中NF-κB处于组成型激活状态,地塞米松抑制PC-3细胞中转录因子NF-κB的转录活性;地塞米松下调PC-3细胞中cyclinD1蛋白的表达.结论:地塞米松抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,这可能与其抑制转录因子NF-κB的转录活性及其下游的靶基因cyclinD1的蛋白表达有关.