聚合酶链反应快速诊断中枢神经系统感染性疾病

应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）对１０６例中枢神经系统感染性疾病进行单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨＳＶ┐Ｉ）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）及结核杆菌（ＴＢ）３项基因检测结果。ＨＳＶ┐Ｉ阳性１０例，ＣＭＶ阳性１３例，ＴＢ阳性１９例，３种病原体总检出率为３９．６％（４２／１０６）。该试验具有特异性强、敏感性高、简便快速等优点，有利于早期诊断，早期治疗     

以聚合酶链反应确诊中枢神经系统白血病一例

患者男,27岁.2004年6月诊断为急性粒细胞白血病,部分分化型(M2型),核型分析示46,XY,t(8;21),AML1-ETO表达(+).化疗达完全缓解后多方案巩固治疗t年.后停止治疗.2007年3月无明显诱因出现双侧臀部及双下肢疼痛麻木,呈放射性,不伴有发热等其他不适,CT示腰椎间盘突出,相应处理后症状稍缓解.     

聚合酶链反应技术诊断中枢神经系统肠道病毒感染

目的：探讨肠道病毒（ＥＶ）在中枢神经系统感染中的致病情况,建立一种检测ＥＶ感染的方法。方法：采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和病毒分离技术检测４０种ＥＶ标准毒株和４６例无菌性脑膜炎、脑炎病人脑脊液（ＣＳＦ）标本。     

巢式聚合酶链反应对白血病融合基因的检测分析

目的:探讨并分析巢式聚合酶链反应在白血病融合基因中的检测与应用。方法:回顾性分析71例白血病患者的临床资料,运用巢式聚合酶链反应,检测患者包括bcr/abl、PML/RARa、AML/ETO所有融合基因融和变异的引物阳性率。结果:38例慢性粒细胞白血病患者,bcr/abl融合基因的总阳性率为83.4%。12例急性早幼粒细胞白血病患者,PML/RARa融合基因的总阳性率为57.1%。6例急性粒细胞白血病M2患者,AML/ETO总阳性率为27.9%。结论:巢式聚合酶链反应具有较高准确性、灵敏性、简便性,为临床治疗提供较高的参考价值。     

应用聚合酶链反应和巢式聚合酶链反应直接检测血清中HIV核酸序列

人免疫缺陷病毒(human immunodeficiencyvirus;HIV)已被确定为艾滋病的病原体。在我国HIV感染主要流行于西南边境地区,中国预防医学科学院曾在瑞丽县一次性查出数百例HIV感染者,这些病例感染途径主要是经静脉吸毒。1989年以来,我们自西南边境地区,包括云南、四川、贵州及西     

半巢式聚合酶链反应在浆膜腔细菌感染诊断中的初步应用

目的观察革兰分型半巢式聚合酶链反应(PCR)在浆膜腔细菌感染诊断中的应用价值。方法对30例浆膜腔积液标本,以细菌16SrRNA基因为靶序列,采用一对通用引物和一条革兰阴性菌特异性引物,以半巢式PCR方法进行检测,并同时作细菌培养。结果以通用引物对30例标本作第1次PCR,11例扩增出371bp长度的DNA片段,阳性率为36.7%;对阳性PCR产物再以革兰阴性菌特异性引物作第2次PCR,9例扩增出353bp的DNA片段即为革兰阴性菌。对此30例标本作细菌培养,阳性率为16.7%,低于PCR扩增法。5例标本细菌分离结果与半巢式PCR革兰分型结果相同。结论革兰分型半巢式PCR方法能够灵敏地检测细菌并作出革兰阴性、阳性分型,对于浆膜腔感染的早期诊断具有较好的应用价值。     

巢式聚合酶链反应在支气管内膜结核诊断的价值

目的：了解巢式聚合酶链反应(NPCR)技术对支气管内膜结核(EBTB)的诊断价值。方法：应用巢式聚合酶链反应(NPCR)对22例支气管内膜活检组织进行结核分支杆菌DNA检测，并与病理检查、刷检涂片、支气管镜检后痰涂片结果比较。对照为26例支气管肺癌患者。结果：22例EBTB活检组织病理检查、刷检涂片、支气管镜检“漱惹”后痰涂片及NPCR检测阳性率分别为9％、18％、27％和64％，后者与前三者相比差异有显著性(P均＜0．01)。22例支气管肺癌患者结核分支杆菌DNA的NPCR均阴性。结论：巢式PCR技术有利于EBTB患者的诊断，尤其对胸片(或CT)正常、痰菌阴性、支气管内膜活检组织未发现结核特异性病理变化者。     

巢式聚合酶链反应在输入性卵形疟诊断和分型中的应用

目的评价巢式聚合酶链反应(Nested--polymerase chain reaction,nested-PCR)在输入性卵形疟诊断和分型中的应用价值。方法采用巢式PCR方法回顾性检测湖北省2013年7月至2015年6月网报疟疾病例,比较疟疾快速诊断试剂盒(Rapid diagnostic tests,RDTs)、显微镜镜检和巢式PCR这三种方法对输入性疟疾的检测效果。结果巢式PCR共检出卵形疟24例,其中经典亚种10例,变异亚种14例;RDTs阳性13例,阴性11例;显微镜检15例诊断为卵形疟,8例为间日疟,1例为三日疟。卵形疟两亚种在RDTs诊断阳性率和镜检准确率差异无统计学意义(P0.05)。结论巢式PCR在输入性卵形疟的诊断和分型上较RDTs和镜检法有显著优势。     

两种逆转录聚合酶链反应技术诊断中枢神经系统肠道病毒感染

目的：探讨一种迅速逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测脑脊液中肠道病毒（ＥＶ）ＲＮＡ。方法：引物序列选自ＥＶ５‘端非编码区。方法（Ａ）采用ＡＭＶ逆转录酶和ＴａｑＤＮＡ聚合酶,逆转录合成ｃＤＮＡ与ＰＣＲ在不同缓冲体系中分两步完成;（Ｂ）逆转录与在同一缓冲液中进行,ＡＭＶ逆转录酶和Ｔｆｌ ＤＮＡ聚合酶同时加入,逆转录后不再开反应管添加试剂。结果：通过检测不同稀释度的脊髓灰质炎病毒Ｉ型,柯萨奇病毒     

应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒

目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛.特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染.方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及165例可疑EV感染的327份临床标本进行检测.结果EV标准株均在电泳中检测到一清晰312bp扩增条带,而非EV标准株则无扩增条带;共有104份标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%;147例病例同时检测了粪便和咽拭子,粪便阳性49例,咽拭子阳性44例,其中粪便和咽拭子同时阳性35例,粪便和咽拭子EV阳性比较无显著性差异(P＞0.05).病例总阳性数64例,阳性率38.8%.结论RT-n-PCR可以准确地检测出肠道病毒,特异性强,用时少,同时检测多份标本可以提高EV阳性率.     

多重巢式聚合酶链反应在β地中海贫血植入前遗传学诊断中的应用

目的探讨应用多重巢式聚合酶链反应(PCR)技术在β地中海贫血(简称β地贫)植入前遗传学诊断(PGD)中的应用。方法获取β地贫基因携带者单个淋巴细胞,建立了稳定的单细胞多重巢式PCR检测技术,可同时检测β珠蛋白基因及与β珠蛋白基因紧密连锁的HumTH01基因,并对4例已出生的重型β地贫患儿及双方均为β地贫基因携带者的夫妇应用多重巢式PCR进行了β地贫的PGD。结果利用单细胞多重巢式PCR,可以同时检测中国人常见的16种β地贫突变类型,单个淋巴细胞平均扩增效率为91．3％,平均等位基因脱扣(ADO)率为17．0％。对4对夫妇进行4个周期PGD,共活检33个胚胎,获得33个卵裂球,其中30个卵裂球扩增成功,扩增效率为90．9％,ADO率为13．3％。26个胚胎经PCR分析后获得明确诊断,移植了8个胚胎,获得1例临床妊娠。孕17周时经脐带血穿刺,证实为完全正常胚胎,现已出生1名正常女婴。结论应用单细胞多重巢式PCR技术可对β地贫进行植入前遗传学诊断,达到优生目的。     

一期梅毒半巢式聚合酶链反应检测的效果

目的 探讨半巢式聚合酶链反应（PcR）在一期梅毒早期诊断中的意义。方法应用半巢式PCR检测一期梅毒溃疡组织液和血清中TP-DNA,与IPPA结果进行比较。结果60例临床诊断为一期梅毒患者,溃疡组织液、血清半巢式PCR和TPPA检测的阳性分别为56例（93．33％）、13例（21．67％）和53例（88．33％）。组织液半巢式PCR检测结果与血清半巢式PCR检测结果比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,与rI胛A结果比较,差异无统计学意义（D0．05）。结论半巢式PCR检测一期梅毒溃疡组织液中TP-DNA较检测血清中的TP-DNA敏感性高、特异强,可做为TPPA诊断早期梅毒的有效补充。     

巢式聚合酶链反应检测不同人群隐匿性乙型肝炎病毒感染

目的：探讨不同人群隐匿性乙型肝炎病毒（HBV）感染情况。方法：采用巢式聚合酶链反应（PER）检测268例健康献血员、386例健康体检自然人群、73例不明原因肝炎患者、26例丙型肝炎患者、38例肝硬化患者和36例肝癌患者血清HBV DNA。结果：隐匿性乙型肝炎病毒感染率分别为0．37％、4．92％、35．62％、19．23％、10．53％和16．67％。隐匿性HBV感染者中,抗HBc或抗HBc和抗HBe阳性者占51．29％。结论：隐匿性HBV感染在不同人群中广泛存在,其与抗HBc存在高度相关。     

巢式聚合酶链反应扩增幽门螺杆菌尿素酶基因

据《中华内科杂志》1995年34卷第4期报道西安市中心医院消化科张沥等,选用位于幽门螺杆菌(Hp)最具特征性和最保守的尿素酶B基因作为扩增对象,利用计算机设计了3个最佳引物序列组成的巢式聚合酶链反应(PCR),成功地对Hp标准     

聚合酶链反应在结核病诊断中的应用

为探索聚合酶链反应(PCR)在结核病诊断中的作用，我们使用PCR对80例结核患检测其痰、积液及纤支镜刷检物中的结核菌，并与传统的涂片抗酸染色检菌法进行比较，结果报告如下。     

应用聚合酶链反应诊断肺炎支原体感染

肺炎支原体（ＭＰ）是呼吸道感染的常见病原。我们应用聚合酶链反应ＰＣＲ）技术检测ＭＰ－ＤＮＡ，该方法具有早期，快速、敏感，特异性高等特点。７５例疑ＭＰ感染患儿的咽分泌物标本，阳性３０例。ＭＰ感染大多数引起鼻咽炎、支气管炎、不典型肺炎、通过分析发病年龄，我们发现５岁－１１岁年龄组感染率最高，１岁－３岁组次之，最小患病年龄为４个月，表明ＭＰ感染向低龄儿方向发展。ＰＣＲ可以早期、快速对ＭＰ感染做出诊断，对     

聚合酶链反应对结核杆菌的诊断应用

利用聚合酶链反应（PCR）对135例多类临床标本（痰、胸水及尿等）进行了检测，临床疑诊为结核病中105例，其中18例结核杆菌涂片阳性，PCR检测均为阳性；87例结核杆菌涂片阴性的标本，57例PCR检测阳性，总阳性率为71.4%，对照的30例非结核病的标本则无阳性，本研究结果表明，PCR在敏感性，特异性方面均优于传统的结核病诊断方法，它简捷、易行、直观、尤其适用于结核病的早期、快速诊断。     

应用聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎

应用聚合酶链反应快速诊断结核性脑膜炎中国医科大学第二临床学院（１１０００３）郭津津，房荣庄，郭阳朝阳市结核病防治院梁志津沈阳市第一结核病院张革平结核性脑膜炎的早期诊断有赖于从脑脊液中检出结核杆菌，传统的涂片抗酸染色法阳性率低，特异性差。常规培养法需８...