槲皮素降低肾小球周期素激酶抑制剂p27水平改善糖尿病肾病

目的　探讨槲皮素改善糖尿病肾病与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法　腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分为DM +Qu组 ( 6只 )及DM组 ( 6只 ) ,分别给予槲皮素 10 0mg·kg-1·d-1及同体积的生理盐水灌胃 8周 ;对照组 (正常大鼠 6只 )予等体积生理盐水灌胃 8周。采用蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液 p2 7蛋白水平 ,采用ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白。结果　DM组大鼠肾小球 p2 7水平为 18.5± 4.3 ,尿白蛋白排泄为 ( 3 9.62± 3 .68) μg/ 2 4h ,肾重 /体重比例为 ( 14.87± 2 .0 2 )× 10 -3,均较其他 2组明显增加 ,ECM蛋白水平也较其他 2组明显增加。与DM组相比 ,DM +Qu组肾小球 p2 7水平 ( 10 .6± 3 .1)、ECM蛋白水平、尿白蛋白排泄 [( 17.62± 3 .0 2 ) μg/ 2 4h]及大鼠肾重 /体重比例 [( 11.3 5± 1.76)× 10 -3]均明显降低 (P <0 .0 1) ;DM +Qu组的血糖水平无明显改变。结论　槲皮素可能通过降低肾小球 p2 7水平改善糖尿病肾病     

周期素激酶抑制剂p21和糖尿病肾病

肾脏肥大是糖尿病肾病（Diabetic nephropathy，DN）早期的主要表现之一。包括肾小球和肾小管的肥大，其调控最终发生在细胞周期水平上。p21是已知的具有最广泛激酶抑制活性的细胞周期负调控蛋白，与早期DN肾脏肥大密切相关。直接影响DN的发生、发展。对此深入研究为DN的防治提供新的启示。     

α-酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系

目的　探讨α 酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法　腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分别予正常蛋白 (蛋白占饲料重量的 10 % ,NPD组 )、低蛋白 (蛋白占饲料重量的 5 % ,LPD组 )、α 酮酸 +低蛋白 (蛋白占饲料重量的 5 % ,其中α 酮酸提供1%的蛋白 ,LPD +α KA组 )饮食治疗 8周。蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液p2 7蛋白水平 ,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,采用图像分析系统测定肾小球面积。结果　各组DM大鼠肾小球 p2 7水平及ECM蛋白水平均增高 ,尿白蛋白排泄增多 ,肾重 /体重比例增高 ,肾小球面积增大 ,但LPD组及LPD +α KA组大鼠的变化较NPD组轻。LPD +α KA组肾小球p2 7水平 (8.6± 2 .3)较LPD组 (11.1± 3.6 )显著降低 (P <0 .0 1) ,ECM蛋白水平进一步下降 ,尿白蛋白排泄减少更明显 (P <0 .0 1) ,DM大鼠肾重 /体重比例下降更显著 (P <0 .0 5 ) ,肾小球面积进一步减少 (P <0 .0 5 )。DM大鼠肾小球 p2 7水平与肾重 /体重比例呈直线相关。LPD组、LPD +α KA组和NPD组间的血糖水平及血白蛋白水平差异无显著性。结论　α 酮酸配伍低蛋白饮食可能通过降低肾     

氨基胍通过降低周期素激酶抑制剂P27水平减轻高糖培养系膜细胞肥大程度

目的:研究氨基胍(AG)减轻高糖培养系膜细胞(MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂P27的关系.方法:Western 印迹方法测定MC裂解液P27水平,[3H]胸腺嘧啶核苷([3H]TdR)及[3H]亮氨酸([3H]Leu)掺入方法测定MC肥大情况.结果:同正常糖(100 mg/dl)培养相比,高糖(450 mg/dl)培养MC中P27水平增高(P<0.01),MC肥大;[3H]Leu掺入增加及[3H]TdR掺入降低(P<0.01);AG(0.25 mmol/L)降低高糖培养MC中P27水平[(2.5±0.6 ) vs (4.0±0.8),P<0.05],使MC肥大程度减轻;[3H]leu掺入降低,[(3 426±532) vs (4 652±309) cpm/孔,P<0.01],[3H]TdR掺入增加[(1 233±69) vs (543±27) cpm/孔,P<0.01].结论:AG可能通过降低高糖培养MC中P27水平减轻MC肥大程度.     

系膜增生性肾炎大鼠肾小球周期素激酶抑制剂P27的变化及意义

目的:探讨周期素激酶抑制剂P27在系膜增生性肾炎模型Thy1肾炎大鼠系膜细胞(MC)增生中的作用.方法:利用抗胸腺细胞抗体制成Thy1肾炎模型,Western印迹法测定肾小球裂解液P27蛋白水平, RT-PCR方法测定肾小球P27 mRNA,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质(ECM)蛋白(纤维连接蛋白及Ⅳ型胶原).结果:Thy1肾炎第1天P27水平即有明显下降,第3天(MC增生最为明显)P27水平最低,第5天(MC增生开始消散)P27水平有所回升,提示P27水平与MC增生程度有关;Thy1肾炎第3天肾小球P27 mRNA与正常对照组比较无明显差别;而Thy1肾炎大鼠肾小球纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原均升高(P<0.01),在第3天达峰值,第5天略有回降,但仍显著高于正常对照组(P<0.01).结论:P27水平下降可能在Thy1肾炎MC增生中起重要作用.     

依那普利及氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏周期素激酶抑制剂p27kip1蛋白表达的影响

目的：研究应用依那普利和氯沙坦治疗后糖尿病大鼠肾脏p27^kipl蛋白表达的变化，探讨糖尿病肾病的发病机制。方法：实验大鼠分4组：正常对照组（A组）、糖尿病大鼠组（B组）、糖尿病大鼠应用依那普利治疗组（C组）和氯沙坦治疗组（D组）、B、C和D组腹腔一次性注射链脲佐菌素复制糖尿病模型，于4周内留取血液和肾脏标本，应用免疫组织化学方法检测肾脏组织中p27^kipl蛋白的表达，放射免疫方法检测肾脏和血浆中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的水平。结果：B组大鼠肾小球固有细胞p27^kipl水平在第1周升高（P＜0．05），至4周时仍维持较高水平，肾小管细胞中p27^kipl表达无显著差异；肾重／体重比值和肾小球面积在该组大鼠第1周起即明显上升；肾脏AngⅡ水平亦呈显著性增加。依那普利和氯沙坦治疗组上述指标明显下降。结论：周期素激酶抑制剂p27^kipl可能参与糖尿病肾病肥大的病理过程，它与内源性AngⅡ水平密切相关，提示降低p27^kipl表达可能是ACEI及ATla延缓肾脏疾病进展的作用机制。     

低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其机制探讨

目的:探讨低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系.方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型,分别予正常蛋白(NPD组,n=6)、低蛋白(LPD组,n=6)饮食8周,同时对正常大鼠(正常对照组,n=6)予正常蛋白饮食8周.蛋白印迹方法测定肾小球裂解液P27蛋白水平,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质(ECM)蛋白(Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白)和尿白蛋白,氧化酶法测定血糖,溴甲酚绿法测定血白蛋白,采用图像分析系统测定肾小球面积.结果:与正常对照组相比,NPD组和LPD组大鼠肾小球P27水平及ECM蛋白水平均增高,尿白蛋白排泄增多,肾质量/体质量比例增高,肾小球面积增大.同NPD组相比,LPD组大鼠肾小球P27水平降低[(11.1±3.6) vs (19.6±5.1),P<0.01],纤维连接蛋白水平[(9.8±2.9) vs (17.1±3.9)pg/mg, P<0.01]及Ⅳ型胶原水平[(99.6±23.5) vs (150.6±47.1)pg/mg, P<0.01]下降,尿白蛋白排泄减少[(18.13±3.23) vs (40.18±3.79) μg/24 h,P<0.01],大鼠肾质量/体质量比例下降[(12.03±1.85) vs (15.62±2.13),P<0.01],肾小球面积减少[(721±75) vs (815±97)μm2,P<0.01].DM大鼠肾小球P27水平与肾质量/体质量比例呈直线相关.正常对照组、LPD组和NPD组间大鼠血糖水平及血白蛋白水平无明显差别.结论:LPD可能通过降低肾小球P27水平抑制DM肾脏肥大,从而改善糖尿病肾病.     

槲皮素与糖尿病肾病

糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy，DN)是糖尿病(Diabetic Mellitus，DM)微血管并发症之一，以肾小球系膜区扩张，细胞外基质积聚，基底膜增厚及肾小球硬化为特征。DN所引起的肾衰是DM患者的主要死亡原因之一，迄今尚无有效的西药能阻止DN肾功能损害的自然进程。中药及中     

大黄素抑制系膜细胞增生与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的:探讨周期素激酶抑制剂p27在大黄素抑制肾系膜细胞(mesangial cell,MC)增生中的作用.方法:蛋白印迹(western 杂交)方法测定MC裂解液p27蛋白水平,3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)测定MC增生的情况,观察不同浓度大黄素(50 mg/L、100 mg/L )对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的MC中p27水平及增生程度的影响. 结果: TNF-α (20万U/L)使无血清培养24 h的MC中p27水平降低,同时使3HTdR掺入增加;大黄素提高TNF-α刺激的 MC中p27水平,同时使3HTdR掺入减少.大黄素的上述作用随剂量的增大而增强. 结论: 大黄素可能通过提高p27水平抑制 TNF-α诱导的MC增生.     

膀胱癌中P27表达及其临床意义

目的 :探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂P2 7在膀胱癌发病过程中的作用。方法 :应用免疫组化方法检测膀胱癌和正常膀胱黏膜中P2 7,cyclinE ,cdk2和PCNA的表达 ;应用DNA图像定量分析技术进行膀胱癌中DNA定量检测。结果 :膀胱癌中P2 7阳性率为 4 6 .6 % ,显著低于正常的 88.9%。P2 7表达与肿瘤分级、数目、术后复发、G0 /G1期细胞比率、DNA含量和PCNA指数之间均存有相关性。P2 7低表达及cyclinE或cdk2高表达者术后复发率高。结论 :P2 7异常表达参与膀胱癌的发生发展过程 ,而且具有一定的预后评估价值     

细胞周期调节负控蛋白P27在肾小球系膜细胞增殖中的调控作用

目的探讨lL-13,ET-1,甲基强的松龙及肝素钠对肾小球系膜细胞膜表达细胞周期负控p27的变化.方法不同浓度IL-13(10ng/ml,100ng/ml),ET-1(10-7mol/L),甲基强的松龙0.5μg/ml,肝素钠100mg/L和200mg/L,作用于培养的系膜细胞.流式细胞仪检测p27表达水平.结果IL-13 10 ng/ml组和100ng/ml浓度组p27表达为(46.74±3.25)和(23.8±2.56),与对照组比较有明显差异(P＜0.001,P＜0.05),两浓度组之间有显著差异(P＜0.01).ET-1刺激14h和18h后p27的表达分别为(14.76±1.49)和(12.18±1.30),与对照组比较均有明显差异(P＜0.05,P＜0.05).甲基强的松龙48h及72 h p27表达为(9.9±1.01)和(9.12±0.93),与对照组比较明显降低,P＜0.001.肝素钠100mg/L和200 mg/L浓度p27的表达分别为(26.94±1.23)和(28.04±0.99),较对照组明显升高(P＜0.05),不同浓度组间比较无明显差异.结论肾小球系膜细胞受不同因素作用后细胞周期调节负控蛋白p27表达水平不同.p27在调节系膜细胞增殖过程中起重要作用.     

阿托伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小球细胞增殖的影响及其意义

目的探讨阿托伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小球细胞增殖的影响及意义。方法将40只SD雌性大鼠随机分为四组:糖尿病肾病组(DN组)、预防组、治疗组、对照组,每组10只。DN组、预防组和治疗组糖尿病造模成功后,预防组和治疗组分别给予不同剂量的阿托伐他汀干预,对照组仅注射柠檬酸缓冲液。第8周测定相关生化指标,观察肾组织病理改变后,通过免疫组化法分析大鼠肾小球增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果预防组和治疗组相关生化指标较DN组好转,肾脏病变减轻,PCNA表达于肾小球固有细胞。DN组肾小球中PCNA的表达均较预防组、治疗组、对照组明显上调。而预防组、治疗组肾小球中PCNA的表达较DN组下调,且预防组PCNA的下调更为显著。结论阿托伐他汀通过下调肾小球PCNA表达,抑制肾小球细胞增殖实现对DN的保护作用。     

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

目的 研究糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的变化及醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对它的影响。方法 采用腹腔内注射STZ法制作糖尿病大鼠模型，将大鼠分为模型组、Sorbinil组、糖适平＋洛汀新组和正常对照组。8周后处死大鼠，分离肾小球，分别测定各组肾小球细胞浆和细胞膜PKC活性。结果 糖尿病模型组细胞浆PKC活性显著降低，细胞膜PKC活性显著升高。用两组西药治疗后，洛汀新＋糖适平组无明显改善．而Sorbinil组可显著提高细胞浆PKC活性、降低细胞膜PKC活性。结论 Sorbinil可通过改善多元醇代谢而降低PKC活性，同时，亦或存在其它途径如直接对PKC的抑制作用等等。Sorbinil通过调节多元醇代谢等途径间接或直接降低PKC活性，是其治疗糖尿病肾病的作用机制之一。     

伊贝沙坦对糖尿病大鼠肾小球毛细血管基底膜改变的影响

目的 :探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂伊贝沙坦 (Irb)对链脲佐菌素 (STZ)诱导的糖尿病大鼠肾小球毛细血管基底膜 (GBM)改变的影响。方法 :将SD大鼠随机分成正常对照 (N)组、糖尿病肾病 (DN)组和DN加Irb治疗 (DNI)组 3组。大鼠单侧肾切除后 ,腹腔注射STZ诱导糖尿病模型 ,观察治疗后第 4、8、12周的血糖、体重、尿白蛋白排泄、肌酐清除率变化 ,同时观察 12周时肾重、肾脏肥大指数、肾组织总蛋白含量、GBM厚度的改变。结果 :DN组尿白蛋白排泄量较N组明显增加 (P <0 .0 1) ,肾重、肾脏肥大指数、肾组织总蛋白含量均较N组显著增加 (P <0 .0 5或 <0 .0 1)。DNI组较DN组尿白蛋白排泄量减少 (P <0 .0 1) ,肌酐清除率水平下降 (P <0 .0 1) ,肾重、肾脏肥大指数、肾组织总蛋白含量均减少 (P <0 .0 1) ,糖尿病组GBM较正常对照组明显增厚 (P <0 .0 1) ,Irb可显著抑制GBM的增厚 (P <0 .0 1)。结论 :早期应用Irb对糖尿病大鼠有肾保护作用 ,并可能与抑制GBM增厚有关。     

益肾汤对糖尿病大鼠肾脏细胞周期调节蛋白p27表达的影响

目的观察中药复方益肾汤对糖尿病大鼠肾脏细胞周期调节蛋白p27表达的影响。方法将41只SD大鼠随机分为正常对照组与糖尿病组。后者以链脲佐菌素腹腔内注射诱导糖尿病大鼠模型,成模大鼠按干预方法不同分为:益肾汤、缬沙坦、糖尿病未治疗3组。干预8周,观察大鼠体重、肾重、血糖、24 h尿总蛋白、24 h尿白蛋白、尿素氮、肾组织p27表达等指标。结果与糖尿病未治疗组比较,益肾汤及缬沙坦组肾组织p27表达显著减少,尿白蛋白含量降低;肾组织p27的表达量与24 h尿白蛋白浓度呈显著正相关。结论益肾汤防治糖尿病肾病的作用与降低肾脏p27表达有关。     

儿童急性淋巴细胞白血病P21WAF1、P27KIP1蛋白表达及其临床意义

目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子P21WAF1、P27KIP1在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达情况及意义.方法:采用免疫细胞化学S-P染色法测定骨髓单个核细胞P21WAF1、P27KIP1表达情况,分别观察阳性率及阳性细胞积分.结果:P21WAF1、P27KIP1阳性率及在阳性病例中的阳性细胞积分均低于对照组(P＜0.05),随访部分病例,经诱导化疗达到完全缓解后,两种蛋白有阳转或表达增强现象,治疗前后两种蛋白阳性率及阳性细胞积分均有显著性差异(P＜0.05).结论:P21WAF1、P27KIP1在儿童急性淋巴细胞白血病表达减低,可作为其化疗疗效的分子学指标.