国产甲肝减毒活疫苗免疫接种后抗体水平检测分析

目的　了解本市 1～ 7岁儿童甲肝抗体水平 ,评价国产甲肝减毒活疫苗的接种效果。方法　采用酶联免疫吸附试验对接种国产甲肝减毒活疫苗后 3个月的 1～ 7岁儿童进行甲肝IgG抗体检测。结果　共检测 185 2人 ,总抗体阳性率为 6 3.8% ;抗体阳性率与接种次数关系明显 ;但与年龄变化不大 (P >0 .0 5 ) ;免疫接种后 3年内抗体阳性率下降不明显。结论　我市 1～ 7岁儿童甲肝抗体阳性率较低 ,不能形成很好的免疫屏障 ,对接种国产甲肝减毒活疫苗的儿童在间隔 6个月左右再加强免疫一针 ,能明显提高其抗体阳性率     

甲肝减毒活疫苗不同滴度的免疫效果评价

甲肝减毒活疫苗不同滴度的免疫效果评价方蕙，康来仪，潘启超，金子辰，郑晓虹，薛以乐，蒋清，张玮，张建民，程萍，沈菊华，万宗举预防和控制甲肝流行最有效的方法是接种甲肝疫苗。目前我国用于接种人体的甲肝减毒活疫苗的减毒株主要是Ｈ２和Ｌ－Ａ－１两株。从７０年代...     

甲肝减毒活疫苗流行病学效果初步研究

采用随机、对照的方法，考核了国产甲肝减毒活疫苗（Ｈ２株）的流行病学效果。初步的结果表明：疫苗的保护率为７０．９％（９５％可信限：５５．８％～８６．０％）。     

甲肝减毒活疫苗应用10年的效果观察

目的：调查推广应用甲肝疫苗的流行病学效果。方法：对甲肝疫苗接种前后10年的发病情况、甲肝疫苗接种率、人群甲肝抗体水平等资料进行比较分析。结果：2002年与1992年相比，人群甲肝抗体水平明显提高，甲肝发病率显著下降，甲肝发病年龄出现后移。结论：接种甲肝疫苗可有效控制甲肝发病，应在全人群推广应用，但应避免无效接种，建议改进免疫程序以提高甲肝疫苗免疫效果。     

利用Labworks凝胶成像分析系统判断甲肝减毒活疫苗RT-PCR滴度

目的利用Labworks凝胶成像分析系统判断甲肝减毒活疫苗RT-PCR滴度,并比较此方法与常规组织培养法的相关性.方法通过对RT-PCR反应液的离子浓度、pH值等条件进行优化,建立了检测甲肝减毒活疫苗滴度的RT-PCR一步法;利用Labworks凝胶成像分析系统的半定量功能判断结果,并与常规组织培养法比较.结果利用Labworks凝胶成像分析系统判断结果的RT-PCR一步法与常规组织培养法检测甲肝减毒活疫苗滴度灵敏度相仿,检测结果无显著差异.结论此法与常规RT-PCR法相比具有更简便,判断标准更客观的优点,可代替组织培养法检测甲肝减毒活疫苗滴度.     

国产甲肝减毒活疫苗接种后3年流行病学效果研究

目的：了解国产甲肝减毒活疫苗大规模接种后的流行病学效果。方法：采用分组对照的方法，进行了连续3年的流行病学效果研究，结果：接种组发病1例，发病率为8．77／10万；对照组发病12例，发病率为46．29／10万，保护率为81．0％，效果指数为5．26，结论：国产甲肝减毒活疫苗具有良好的流行病学保护效果。     

微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度

[目的]建立一种简便、灵敏的微量免疫荧光法检测甲肝减毒活疫苗感染性滴度。[方法]取适宜稀释度病毒接种细胞已成致密单层的96孔培养板,至增殖高峰时直接在板上固定细胞/病毒系统,用间接免疫荧光法观察结果,以Reed-Muench公式计算CCID50。[结果]随着培养时间的延长,感染性滴度逐渐增高,18d可达增长高峰,比常规组织培养ELISA法提前1周左右;此法的重复性良好,灵敏度与常规组织培养法相似(P>0.05);可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。[结论]此法具有简便、灵敏、省时的优点,可代替常规组织培养ELISA法应用于甲肝减毒活疫苗感染性滴度检测中。     

冻干甲肝减毒活疫苗免疫原性及持久性分析

浙江省宁波市地处东南沿海,历史上是甲型肝炎(甲肝)高发区,常见甲肝周期性流行.2000年宁波市将甲肝疫苗接种纳入计划免疫管理,推广满2周岁儿童接种甲肝疫苗的免疫策略.新型冻干甲肝减毒活疫苗(H2株)是本地区推广接种的疫苗之一.该疫苗是在规范化液体甲肝疫苗(H2株)基础上研制的一种新剂型甲肝减毒活疫苗[1.2].它在稳定性、有效期及保证疫苗滴度方面比液体剂型有明显提高[3,4].为了进一步考核在甲肝流行区接种该疫苗的血清流行病学效果,验证现有免疫策略的合理性.2002～2006年在宁波市北仑区进行了冻干甲肝疫苗免疫原性及免疫持久性观察.结果报告如下.     

放射免疫法检测2～5岁儿童甲肝减毒活疫苗免疫效果

目的：研究甲肝减毒活疫苗接种后免疫效果。方法：按照随机数字表将２～５岁５６０名儿童随机平分成两 组,一组为接种组,一组为对照组,均为２８０名。接种组皮下接种１ｍｌ甲肝减毒活疫苗,１年后与对照组均抽取静脉血,应 用放射免疫法监测血清中抗ＨＡＶ－ＩｇＧ抗体,同时接种组全部儿童均再次接种１ｍｌ甲肝减毒活疫苗,再次抽静脉血做监 测。结果：接种组 ２８０名,接种 １针甲肝疫苗 １年后抗ＨＡＶ－ＩｇＧ阳转率为 ２７． ８９％,非接种组 ２８０名,自然阳转率为 １９．２８％,经卡方检验,Ｐ＞０．０５,无明显差异。对接种组均复种甲肝疫苗,１年后再次查血清抗ＨＡＶ－ＩｇＧ阳转率,较前明 显提高为８０．００％,与对照组比较经卡方检验Ｐ＜０．０５,有显著差异。结论：接种１针甲肝减毒活疫苗,血清中抗ＨＡＶ－ ＩｇＧ抗体阳转率与对照组无明显差异,复种后阳转率明显提高,与对照组及接种 １针甲肝疫苗组比较均有明显差异。说 明甲肝减毒活疫苗接种１针（１ｍｌ）不能产生满意效果,需复种,复种后免疫学效果比较理想。     

甲肝减毒活疫苗免疫效果血清学调查

甲型肝炎是由甲型肝炎病毒引起的急性传染病，主要通过粪-口途径传播，HAV-IgG是在甲肝病毒感染以后，在康复期出现，并能提供终身免疫，接种甲肝疫苗也能产生保护性抗体。上城区2004年前使用的为液体甲肝减毒活疫苗，免疫程度为1周岁接种1针。为了解我区儿童接种液体甲肝减毒活疫苗后的甲肝抗体水平，2006年从幼儿园、小学中采集不同年龄儿童血清标本进行HAV-IgG的检测，现报告如下。     

RT—PCR法检测甲肝疫苗滴度

建立快速灵敏特异的甲肝减毒活疫苗滴度的ＲＴ－ＰＣＲ检测法。方法：以编码甲肝病毒（ＨＡＶ）ＶＰ３羧基端的基因区为目标区，运用ＲＴ－ＰＣＲ法对甲肝疫苗病毒进行检测，并与ＴＣＩＤ５０检测法进行比较。结果：ＲＴ－ＰＣＲ法灵敏度和特异性均与ＴＣＩＤ５０法相似，...     

一步单管反转录PCR快速检测水中甲型肝炎病毒

本研究采用一种新的方法提取核酸，提取的病毒ＲＮＡ纯度高，增加了结果的稳定性；而且操作简单，整个过程只需要１０ｍｉｎ。反转录（ＲＴ）与聚合酶链式反应（ＰＣＲ）在一个反应管中一步操作即可完成，减少了污染机会，提高了反应敏感性和特异性。关键词：聚合酶链式反...     

HAV H2株不同代次减毒活疫苗的免疫应答和接种反应

将132名甲型肝炎易感儿童随机分为3个组。每组44人。第1组儿童接种H_2M_(20)K_16疫苗,第2组接种H_2M_(20)K_7疫苗。全程接种1针,皮下注射,剂量为10~(6·5)TCID_(50)/1ml。第3组为对照组不接种疫苗。两组疫苗接种均安全。免后1～2个月的抗-HAV阳转率均达80％以上。在观察地区发生甲型肝炎流行时,两组疫苗的保护率分别为100.00％和80.02％。说明在甲型肝炎流行季节前接种H_2M_(20)K_(16)或H_2M_(20)K_7疫苗均可达到有效控制甲型肝炎的流行。     

一种无RNA纯化步骤TaqMan RT—PCR方法用于快速检测登革病毒

目的 建立一种简便、快速的登革病毒核酸检测方法。方法 设计合成LNA探针，替代MGB探针，建立一步法TaqManRT—PCR方法，并用已知的登革病毒标准毒株进行方法的优化；用商品化的纯化试剂盒和简单的热释放法获取登革病毒细胞培养液和模拟含登革病毒血清中RNA。以优化的TaqManRT—PCR方法进行检测，比较有或无RNA纯化步骤检测的敏感性和重复性。结果 LNA探针TaqMan RT—PCR有较好的PCR扩增效率（104％）、较广的线性范围（10^0-10^-7样品稀释度）、较高的敏感性（0．003TCID50／反应）和较好的重复性（CV值小于4．53％），新方法检测经简单热释放RNA的细胞培养液和模拟含登革病毒血清中登革病毒也有较高的敏感性（0.03TCID50／反应）和较好的重复性（CV值小于6．36％）。结论 新型LNA探针可替代MGB探针用于TaqMan RT—PCR反应。简便的热释放RNA方法结合高敏感性的TaqMan RT—PCR可满足登革病毒快速检测的需要。     

转移因子对甲肝疫苗的热稳定性及免疫佐剂作用

转移因子(TF)具有增强甲肝疫苗热稳定性的作用,其效果与1M的MgCl₂相当,加入TF的甲肝疫苗在4～8℃保存6个月、室温保存21天、37℃保存7天,滴度基本不变,仍在6.5LgCCID₅₀/ml的合格范围内.当提高保存温度时,这种作用效果更明显;另外,TF还具有一定的免疫佐剂作用,甲肝疫苗与TF混合后免疫小白鼠,阳转率(10/10)比对照组(8/10)高,几何平均滴度是对照组的1.63倍.     

胶州湾菲律宾蛤仔甲型肝炎病毒污染调查及对策研究

为查明胶州湾菲律宾蛤受ＨＡＶ污染情况，于１９９１．７～１９９２．８月间，在湾内设６个监测点，每月定时、定点采集标本共７５份。经核酸斑点杂交试验，ＨＡＶ分离及ＰＣＲ法检测ＨＡＶ前体ＲＮＡ，结果表明：胶州湾的一定海域，一定时间的菲律宾蛤有ＨＡＶ污染迹象，但已失去生物活性。同时流行病学调查证实，菲律宾蛤不是青岛市区甲型肝炎（甲肝）发病和流行的直接原因。但鉴于市民生活污水直接排入胶州湾内，必须加强市区生活污水治理和对市民食用海产品的饮食卫生教育。     

PCR法制备地高辛标记探针原位杂交在人结核杆菌Edman株基因检测中的应用

目的 建立一种用于临床上检测人感染结核杆菌Edman株的快速敏感的PCR探针原位杂交方法.方法 根据NCBI报道的人结核杆菌编码序列,以结核杆菌Edman株Ag85A基因150~841 bp之间的基因序列为靶序列,采用PCR法制备对人结核杆菌特异性高的地高辛标记DNA探针(690 bp),并对探针进行电泳和测序鉴定.分离培养结核杆菌,通过原位杂交检测所制备探针的特异性;对结核杆菌做10倍比稀释,运用探针对其进行敏感性检测.结果 所制备的探针对结核杆菌的杂交反应呈阳性,以dNTP代替地高辛标记探针作为对照组的杂交反应为阴性;通过基因序列测定证实了PCR产物的特异性;PCR法制备地高辛标记探针原位杂交法检测结核杆菌A_g85A基因下限为1.0 x 10.c妯ml. 结论 本研究建立的地高辛标记探针原位杂交法对结核杆菌Edman株Ag85A基因的检测具有快速、特异、敏感白勺特点,适合结核分枝杆菌的临床检测.     

甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价

目的评价佐剂吸附甲型肝炎成品疫苗有效免疫剂量。方法将4个厂家的4批甲型肝炎灭活疫苗进行解离吸附后，检测比较HAV抗原含量；通过小白鼠体内效力实验，计算半数有效稀释倍数，比较评价各组疫苗的免疫效力。结果体外吸附解离HAV抗原含量与体内免疫效力相偏离，传统概念上的半数有效剂量(ED50)不能用作比较评价指标。结论体内半数有效稀释倍数可用于甲型肝炎灭活疫苗有效剂量的评价。     

贝类海产品中诺如病毒快速检测方法研究

目的：寻找和建立贝类产品中诺如病毒的敏感特异的快速检测方法。方法：通过对报道的3种贝类中病毒提取方法的提取效率进行比较，确定最终的提取方法。设计特异性和敏感性相对较高的套式PCR方法进行病毒检测，检测结果经核酸序列测定证实。结果：3种方法中用PBS-三氯三氟乙烷-PEG处理回收率较高。设计的套式PCR方法可成功检测到病毒，其敏感性可比单轮PCR高100倍。结论：该研究建立了敏感特异的诺如病毒检测方法。