Enzyme release by Trichophyton rubrum depends on nutritional conditions

Enzymes liberated by growing dermatophytes are of pathogenetic importance in tinea. To investigate the influence of nutrients on this enzyme release, Trichophyton rubrum was grown in media containing peptone, keratin and lipids, to which glucose was added in separate assays. The culture supernatants were compared for extracellular enzyme activities by use of the api-zym test. Our results clearly show that the extracellular enzyme activity is dependent on the nutrients supplied. Seven different enzymes were released when keratin was supplied, as compared with only five and two respectively when lipids or peptone were available. Among these enzymes alkaline phosphatase and N-acetyl-beta-glucosaminidase were detected in all cultures lacking glucose. Enzyme release was inhibited completely when glucose was added to the media, except for N-acetyl-beta-glucosaminidase in peptone cultures. This dependency of enzyme release on fungal nutrition can be expected to occur in vivo too. In addition, it has to be considered for in vitro cultural conditions. Alkaline phosphatase and acetylglucosaminidase may be more important in tinea than has been assumed so far.     

Culture Media for the Study of the Effects of Azole Derivatives on Germ Tube Formation and Hyphal Growth of C. albicans/Nährböden zur Untersuchung der Wirkungen von Azolderivaten auf die Keimschlauchbildung und das Hyphenwachstum bei C. albicans

Summary: Culture media are described which promote the selective formation of either blastoconidia, hyphae or germ tubes of C. albicans. The hyphal and germ tube promoting media do not need special circumstances such as a CO₂ atmosphere or high humidity. For both media N-acetylglucosamine, the precursor of the polysaccharide chitin, is the most important compound. Glucose is found to promote the blastoconidia formation. Due to their simplicity and their stability after autoclavation, these media are useful for selective cultivation, in vitro inhibition studies with azole derivatives e.g. itraconazole and the study of factors affecting the dimorphic properties of C. albicans.
Zusammenfassung: Die beschriebenen Nährböden fördern die selektive Bildung von Blastokonidien, Hyphen bzw. Keimschläuchen von C. albicans. Nährböden, die Hyphen und Keimschläuche fördern, benötigen keine speziellen Bedingungen, wie eine CO₂-Atomosphäre oder einen hohen Feuchtigkeitsgrad. Für beide Medien gilt N-Acetylglucosamin, die Vorstufe des Polysaccharide Chitin, als wichtigster Stoff. Glucose hat sich als Förderer der Blastokonidienbildung erwiesen. Aufgrund ihrer Unkompliziertheit sowie ihrer Stabilität bei Autoklavierung haben sich diese Nährböden für eine selektive Kultivierung, für in vitro-Hemmstudien mit Azolen z.B. Itraconazole, sowie für die Untersuchung von Faktoren, die die dimorphen Eigenschaften von C. albicans beeinflussen können, als nützlich erwiesen.     

Prüfung der Keimschlauchbildung und anderer zellmorphologischer Kriterien der Sproßpilze auf einem chemisch-definierten Agar-Medium nach Wickerham (Mycoplate MS >Roche<): Testing of Germe Tube Formation and other Cell-Morphological Criteriae of Yeasts on a Chemical Defined Medium by Wickerham (Mycoplate MS >Roche<)

Zusammenfassung: Mycoplate MS Roche, ein chemisch-definierter Agarnährboden der Formulierung, wie sie von Wickerham für zellmorphologische Untersuchungen an Hefen erarbeitet worden ist, wurde vergleichend mit 2 Tierseren, einem Pepton-Agar und einem Reisagar auf seine Eignung geprüft, die morphologischen Unterscheidungsmerkmale medizinisch wichtiger Sproßpilzarten zu erfassen. Hinsichtlich Pseudomycelbildung der hierzu befähigten Arten ergaben sich zwischen den geprüften Medien keine Unterschiede. Hinsichtlich Keimschlauchbildung von Candida albicans war Mycoplate MS den Tierseren und dem Pepton-Agar ebenbürtig. Der Keimschlauchnachweis erwies sich als ebenso sicheres diagnostisches Kriterium für C. albicans wie der Chlamydosporennachweis auf Reisagar. Die Arthrosporenbildung von Trichosporon-Stämmen war neben Pepton-Agar auf Mycoplate MS am sichersten zu erkennen. Bei der Überprüfung in der Routine-Diagnostik an 220 frischisolierten Stämmen bewährte sich Mycoplate MS ebenfalls. Nur bei einem von 116 C. albicans-Stämmen war keine Keimschlauchbildung zu beobachten. Als Vorteil gegenüber Serum erwies sich die Aussage über die Reinheit der Kultur bereits nach 4 h, so daß Fehlerquellen durch bakterielle Kontaminationen oder Mischkulturen von Sproßpilzen bei der biochemischen Prüfung entfallen. Summary: Mycoplate MS Roche contains a chemically defined medium based on the formulation of Wickerham used to investigate the cell-morphology of yeasts. Mycoplate MS was compared with sera of two kinds of animals, a pepton agar and with rice agar for it ability to distinguish morphological differences among the medically important yeast strains. There were no differences in pseudomycel formation among these media. In forming germ tubes by C. albicans, Mycoplate MS was as good as the sera of animals and pepton agar. The detection of germ tubes as a diagnostical criteria for C. albicans has proven as reliable as the forming of chlamydospores on rice agar. Arthrospore formation by Trichosporon species was best observed on pepton agar and Mycoplate MS.