不宜采用混合血清以ELISA检测HBsAg

有少数检验部门为了减轻工作量、节省成本 ,采取将 5人份或 10人份血清等体积混合后再测ＨＢｓＡｇ(以下简称混合法 ) ,有关文献[1] 也指出其方法不妥 ,但该文献[1] 对结果的解释尚欠完整。为此我们对采用混合法检测ＨＢｓＡｇ的影响原因进行了实验探讨。1　材料与方法1 1　试剂　ＨＢＶ血清标志物 (ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ)检测试剂为科华公司 (批号 :ＨＢｓＡｇ2 0 0 0 0 5 0 5 ;抗 ＨＢｓ 2 0 0 0 5 2 5 )。1 2　仪器　Ｅｌｘ80 0酶标仪 (ＢＩＯ ＴＥＫ)。1 3　方法1 3 1　ＨＢｓＡｇ强阳性和抗 ＨＢｓ强阳性混合血清标本的制备　将每次…     

原发性肝癌组织HBVDNA存在状态及HBsAg,HBcAg表达的检测

本文采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术检测原发性肝癌（ＰＨＣ）组织ＨＢＶＤＮＡ存在状态，同时应用免疫组化染色检测ＰＨＣ组织内ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ表达，并比较ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ在ＰＨＣ组织与癌旁肝组织的定位分布。结果显示：整合型ＨＢＶＤＮＡ在３２例ＰＨＣ组织检出率７１．９％（２３／３２），癌旁组织检出率４０．７％（１１／２７）；ＰＨＣ组织内检出ＨＢＳＡｇ阳性细胞１２例（３７．５％）未检出ＨＢＣＡｇ；癌组织检出ＨＢｓＡｇ２６例（９６．３％），ＨＢｃＡ９５例（１８．５％）。结果提示：ＨＢＶ感染与ＰＨＣ发生密切相关，ＨＢＶ可能通过整合于宿主细胞染色体对ＰＨＣ发生起一定作用。     

酶免疫竞争一步法检测抗乙型肝炎病毒核心抗体的影响因素探讨

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)ｅ抗体 (抗 ＨＢｅ)是观察乙型肝炎大三阳疗效和传染性强弱的指标之一。以往我们使用酶免疫竞争 (ＥＩＡ)二步法检测抗 ＨＢｅ[1] ,反应时间相对较长。而近几年普遍使用ＥＩＡ一步法检测抗 ＨＢｅ ,操作简便 ,反应时间仅需 30ｍｉｎ ,但易出现ＨＢＶｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)、抗 ＨＢｅ同时阳性或同时阴性 ,对此我们进行了研究。一、材料和方法1.标本来源 :12 7份本院ＨＢＶ表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)阳性病人血清。其中 72份ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ同时阳性 ;35份ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ同时阴性 ;2 0份ＨＢｅＡｇ阴性 ,抗 …     

菏泽市2000-2002年饮食行业从业人员乙肝感染情况调查分析

在我国乙肝的感染情况较为严重 ,其平均感染率为 5 9 5 % ,ＨＢｓＡｇ阳性率平均为 9 8% ,而食品从业人员ＨＢｓＡｇ携带者是乙型肝炎流行环节中的重点人群 ,是食品监督工作的重点对象。为了系统掌握我市食品从业人员的健康状况 ,了解不同年龄、不同性别以及不同级别饮食单位食品从业人员ＨＢｓＡｇ携带的分布情况 ,更好地发挥对监督执法的指导作用。我们对我市 2 0 0 0 - 2 0 0 2年食品从业人员ＨＢｓＡｇ携带情况进行了调查分析。材料与方法1 材料来源 :2 0 0 0 - 2 0 0 2年 3年检测的食品从业人员 6744人ＨＢｓＡｇ感染情况的实验室记录…     

北京市南苑地区不同人群HBsAg携带状况分析

为了解南苑地区不同人群中ＨＢｓＡｇ携带情况 ,加强对乙型肝炎的防治和管理 ,降低乙型肝炎的发病率。我们从 1 999年 1月 - 2 0 0 0年 6月收集南苑地区 6组不同人群 550 5例标本进行ＨＢｓＡｇ的检测 ,部分ＨＢｓＡｇ阳性标本做ＨＢｅＡｇ的检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1 标本来源 :健康人群 1 32 4例 ,取自到我院进行健康体检标本 ,其中男性 644例 ,女性 680例 ,年龄 1 9- 65岁。孕产妇 1 0 4 0例 ,取自我院妇产科门诊及住院病人。幼儿 557例 ,取自到我院保健科进行入托体检的幼儿。其中男 30 1例 ,女 2 56例 ,年龄 1 5- 3岁。小…     

ELISA结合MEIA能有效检测低水平HBsAg

对于乙型肝炎病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)浓度介于 0 5ｎｇ/ｍｌ～ 5ｎｇ/ｍｌ的血清标本 ,ＥＬＩＳＡ显色较弱 ,不易判断 ;小于0 5ｎｇ/ｍｌ者 ,ＥＬＩＳＡ更会漏检。我们对ＨＢｓＡｇ浓度在 5ｎｇ/ｍｌ以下的血清标本用ＥＬＩＳＡ结合微粒子酶免疫试验(ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｅｎｚｙｍｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ ,ＭＥＩＡ)进行检测 ,现对其应用情况作初步报告 ,并对ＨＢｓＡｇ浓度在 5ｎｇ/ｍｌ以下的病例存在情况进行初步分析。1　材料与方法1 1　标本来源　 1998年 6月～ 2 0 0 1年 5月期间本院门诊体检及非因乙型肝炎住院病人 1…     

EBER-1与LCA双标记技术

原位杂交技术和免疫组化技术都可在组织细胞原位检测核酸分子或蛋白质分子。免疫组化是一种抗原抗体反应 ,检测的是蛋白质水平的表达 ;而原位杂交则是碱基配对 ,是基因或转录水平的检测。将这两种方法联合应用 ,可在同一细胞中显示某种ｍＲＮＡ或相应的蛋白质、多肽及其它抗原。我们用ＥＢＥＲ 1和ＬＣＡ在同一切片上进行双标记 ,获得了满意的结果。1　材料与方法1.1　材料选自我科 1997年以来的淋巴瘤标本 ,4%甲醛固定 ,常规石蜡包埋ＳＰ试剂盒为鼠抗　ＤＡＢ显色试剂盒 (ＬａｂＶｉｓｉｏｎＵ Ｓ Ａ ) ;ＬＣＡ工作浓度为 1∶2 0 0 ;原位杂…     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的 用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱ－ＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎疾病（ＨＢＶ）的数量和免疫指标以指导临床,方法 设计合成了ＨＢＶＦＱ－ＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本,结果 经ＦＱ－ＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原,ｅ抗原,ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ,ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢ     

标本固定时间对免疫组化染色结果的影响

目前最常用的组织标本固定剂是4%甲醛液,其甲醛醛基交联封闭抗原作用对免疫组化染色的影响是众所周知的。在适宜的固定时间内可使抗原保存完好,固定时间过短或过长则免疫组化染色减弱以至消失。本文选择23个固定时相点的人体正常胃组织标本,用7种常用抗体进行标记,试图进一步证明固定时间对免疫组化染色结果的影响,寻找适用于多数抗原表达的组织固定时间段,为提高免疫组化染色方法的准确性和稳定性提供参考依据。1材料与方法11材料外科手术切除的新鲜正常胃壁组织5例。已固定1~10年的陈旧胃壁组织9例。7种常用抗体,分别为CK(AE1/AE3)(Dak…     

晴隆县饮食服务人员携带HBsAg调查分析

为了加强对饮食服务行业从业人员的健康检查 ,加强食品卫生管理 ,我站 1 993～ 2 0 0 0年每年 3～ 6月对上述人员进行ＨＢｓＡｇ和ＡＬＴ检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1 材料来源 :收集 1 993～ 2 0 0 0年 8年检测的晴隆县饮食服务行业从业人员 4685人的ＨＢｓＡｇ和ＡＬＴ。2 实验方法 :采用反向间接血凝 (ＲＰＨＡ)法检测ＨＢｓＡｇ。冻干ＨＢｓＡｇ血球与稀释液由上海实业科华生物技术有限公司提供 ,在有效期内使用。ＡＬＴ采用赖氏法 ,按常规方法检测。判断标准 ,ＨＢｓＡｇ滴度以 >1∶8,且中和试验阳性为阳性 ;ＡＬＴ>2 5ｕ为…     

乙肝病毒感染与婚前保健

预防乙肝病毒感染 ,提高婚姻保健质量 ,是婚前检查的一项重要内容。本文总结了我市自 1 997年 4月全面开展婚前检查门诊以来对ＨＢＶ感染的检查结果。材料与方法1 材料来源 :1 997年 4月至 2 0 0 0年 1 2月来我院进行婚前检查的 962 4人。检出ＨＢｓＡｇ( + )者81 2人 ,其中 785人作了乙肝五项检测2 检测项目 :ＨＢｓＡｇ筛查用ＥＬＩＳＡ法 ;ＨＢｓＡｇ、抗 -ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗 -ＨＢｅ、抗 -ＨＢｃ采用ＥＬＩＳＡ法 ,试剂均由上海科华实业公司提供。3 诊断标准 :参照ＨＢＶ感染与婚育指导及婚前保健工作指导。结　　果1 ＨＢｓＡｇ…     

如何解释新生儿中单项乙型肝炎病毒e抗原阳性结果?

答 :新生儿的乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染一般来自于母体的垂直传播 ,通常乙型肝炎病毒ｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)阳性者ＨＢｓＡｇ也应出现阳性。但在实际工作中 ,有时会发现单项ＨＢｅＡｇ阳性。其原因有 3种 :一是病人血清中ＨＢｅＡｇ浓度很高 ,而所用一步法ＨＢｓＡｇ试剂盒有“钩状”效应 (高浓度的标本反而检测为阴性 ,即所谓的“前带现象”)。要判断是否有这种现象 ,只要将血液作适当的稀释 (如 1∶10 0 ,1∶10 0 0 )后 ,再检测即可。如稀释后测定为阳性 ,说明所用试剂盒有“钩状”效应 ,建议换用无“钩状”效应的两步法试剂或“钩状”效应…     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的数量和免疫指标,以指导临床。方法设计合成了ＨＢＶＦＱＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本。结果经ＦＱＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原、ｅ抗原、ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢＶＤＮＡ也全部阳性,平均ＨＢＶＤＮＡ拷贝数为１．１×１０８／ｍｌ;９８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性的标本,其阳性率为７３％（７１例）,平均拷贝数为８．６×１０５／ｍｌ,而常规ＰＣＲ只有３３％的阳性率;６７例ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性标本的平均拷贝数为２．３×１０５／ｍｌ。结论能够避免ＰＣＲ后处理导致的假阳性污染,并实现准确定量。ＦＱＰＣＲ可以检测ＨＢＶ的真实感染和复制情况,对于乙型肝炎的临床诊断,治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。     

多次重复加样对HBsAg测定结果的影响

实验室在利用半自动生化分析仪测定生化项目的试验中存在着部分手工操作。按照相应试剂盒中的说明书进行手工加样本加试剂 ,反应一定时间后在半自动生化分析仪上进行比色测定。这样同一份血清标本往往要经过多次重复加样。为探讨其对定性试验ＨＢ ｓＡｇ检测结果的影响 ,作者对多次重复加样后的血清标本进行了ＨＢｓＡｇ复检 ,结果报告如下。资料与方法1 .1 .一般资料作者收集了乙肝患者ＨＢｓＡｇ阳性血清 87例 ,健康体检者ＨＢｓＡｇ阴性血清 87例。1 .2 .方法1 .2 .1 .将 87例ＨＢｓＡｇ阳性血清与 87例ＨＢｓＡｇ阴性血清进行分组 ,按照…     

295份HBsAg阳性者HBeAg血清流行病学调查

为了解招远市食品、公共场所从业人员ＨＢｓＡｇ阳性者携带ＨＢｅＡｇ的关系 ,我站于1 997年 7月至 1 999年 7月对从业人员健康体检中 2 95份ＨＢｓＡｇ阳性血清ＨＢｅＡｇ进行检测和分析 ,现将ＨＢｅＡｇ检测结果报告如下。材料与方法1 血清来源于本市食品、公共场所从业人员体检中ＨＢｓＡｇ阳性血清 2 95份 ,其中男性 1 0 4份 ,女性 1 91份。2 ＨＢｓＡｇ采用ＲＰＨＡ法 ,从滴度 1∶8以上判定为阳性 ,诊断血球由上海科华生物技术有限公司生产 ;ＨＢｅＡｇ采用ＥＬＩＳＡ法 ,试剂盒由洛阳华美生物工程公司生产 ,操作及结果判定均按说明…     

南京市饮服从业人员乙肝病毒及梅毒感染情况

我国是乙型肝炎病毒感染的高发区 ,而梅毒的发病率近年也呈上升趋势。本文介绍了 2 0 0 0年至今的南京市饮服从业人员乙型肝炎病毒及梅毒的发病情况。材料与方法1 调查对象 :南京市饮服从业人员 ,抽取静脉血待检。2 检测方法 :ＨＢｓＡｇ用反向间接血凝法 ,以 >1∶6 4为阳性 ,ＨＢｅＡｇ用ＥＬＩＳＡ法 ,试剂由上海科华有限公司提供 ,梅毒用ＲＰＲ法初筛 ,试剂由南京军事医学研究所提供 ,阳性用乳胶凝集试验确认 (ＴＰＰＡ由日本富士公司提供 )。结　　果1 不同年份ＨＢｓＡｇ阳性率 :2 0 0 0年共检测血清30 80 0份 ,ＨＢｓＡｇ阳性 5 77份…     

乙型肝炎感染患者B型超声图像分析

我们于 1 996年 2月至 1 999年 1 1月在疗养保健体检中 ,对 1 30例乙型肝炎感染患者肝、胆超声图像进行了观察 ,现将结果报告如下。资料与方法本组男 89例 ,女 4 1例 ;年龄 2 3～ 57岁 ,平均 38.6岁。均经血清免疫学检测乙肝病毒 (ＨＢＶ )标志物(ＨＢｓＡｇ ,ＨＢｅＡｇ ,抗—ＨＢｓ,抗—ＨＢｅ ,抗—ＨＢｃ)证实为大三阳 4 6例 ,小三阳 84例 ,其中伴有谷丙转安酶升高( >50单位 ) 9例。病程 1个月至数年不等 ,均无明显临床症状及体征。用ＢＩＯＳＯＵＮＤＣＦＭ/ＩＩ型彩色多普勒显像仪和ＡＬＯＫＡＳＳＤ 630型超声显像仪 ,扇形和线形探头…     

镇宁县人群HBsAg检测情况报告

我县人群中ＨＢｓＡｇ携带为 5 5 5 % ,检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原 (ＨＢｓＡｇ) ,对乙型肝炎的预防 ,流行病学调查、临床诊断以及预后等具有重要的意义。但检测方法不同 ,其结果差异较大 ,为了选择特异性强、灵敏度高、操作简便 ,适宜基层单位开展的检测方法 ,作者于 1 999年 6～ 1 2月在统一方法、统一标准和统一试剂的基础上 ,用酶联免疫法 (ＥＬＩＳＡ )与原用的反向间接血凝法(ＲＰＨＡ) ,对ＨＢｓＡｇ同时进行检测比较 ,现将结果报告如下。材料与方法1　来我站接种乙肝疫苗及预防性健康体检者的 1 1 0 0份血清标本。2　检测方法…     

农村中小学生HBsAg携带情况调查

根据《河南省乙型肝炎疫苗接种行动计划》 ,为配合接种乙肝疫苗 ,我院检验科于 2 0 0 1年 5月中旬对我县所辖范围内的 3所中学 ,2 6所小学的学生血样标本 ,进行了ＨＢｓＡｇ携带情况检查 ,并对所辖范围内的中小学生的ＨＢｓＡｇ携带情况进行了分析 ,现将结果报告如下。1　对象与方法1 1　对象　郾城县 3所初级中学和 2 6所小学的在校学生13 62 6人。1 2　方法　ＨＢｓＡｇ携带用反向间接血凝试验方法检测 ,采取标本全部为耳垂血 ,以滴度≥ 1∶16凝集者确诊为ＨＢｓＡｇ阳性携带。单克隆抗体制剂厂家为卫生部上海生物制品研究所 ,( 91)卫药准…     

猪苓多糖对HBV转基因小鼠HBsAg表达的影响

目的：探讨乙型肝炎病毒转基因小鼠在抗病毒免疫调节剂研究中的应用价值。方法：ＨＢＶ转基因小鼠腹腔注射猪苓多糖０．２５ｍｇ／只,隔日一次,连续治疗２０天,用ＥＬＩＳＡ的方法检测小鼠血清ＨＢｓＡｇ,Ｎ ｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法检测肝组织中ＨＢＶｍＲＮＡ。结果：用药组小鼠血甭ＨＢｓＡｇ水平明显降低,肝组织中的ＨＢＶｍＲＮＡ明显减少,结论：猪苓多糖对ＨＢＶ转基因小鼠中ＨＢｓＡｇ的表达有一定抑制作用,ＨＢＶ