猪源大肠杆菌耐药性及超广谱β-内酰胺酶流行性分析

目的对福建地区分离的猪源大场杆菌进行耐药性测定以及对ESBLs流行性进行分析,以期为临床合理用药科学提供依据。方法采用琼脂稀释法测定373株菌大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法检测ESBLs耐药基因的携带情况以及分析CTX-M阳性菌的种系发育关系。结果分离株对甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、萘啶酸、氟苯尼考及氨苄西林耐药率较高,分别为93.8%、82.8%、73.7%和70.0%;对恩诺沙星、四环素、庆大霉素、多西环素、环丙沙星、卡那霉素、头孢噻呋和头孢噻肟的耐药率依次为54.4%、53.1%、52.0%、46.6%、44.0%、41.0%、35.9%和30.8%。在373株大肠杆菌中,共有122株菌携带有ESBLs耐药基因,检出率为32.7%,其中CTX-M、TEM及OXA的检出率分别是18.0%(67)、12.1%(45)和7.5%(28),其中CTX-M的阳性菌中以CTX-M-14最为流行,其次是CTX-M-65和CTX-M-55;其种系发育显示分离株主要分布在A群。结论福建地区猪大肠杆菌对抗菌药表现出较强的耐药性,ESBLs在猪源大肠杆菌中广泛流行,CTX-M是其主要流行的基因型,并且多数菌以共生型大肠杆菌为主。     

宠物源大肠杆菌产ESBLs流行性调查与耐药机制研究

目的 为了解耐第三代头孢菌素的宠物源大肠杆菌对公共卫生的影响,测定宠物源大肠杆菌耐药性情况、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行性及其分子传播机制,以期对其风险评估提供科学依据。方法 2014年从广州市4个动物医院采集92份患病犬猫的肛门拭子,共分离56株大肠杆菌。通过采用琼脂二倍稀释法测定17种抗菌药物的敏感性;采用PCR方法测定ESBLs的流行性及种族系统进化关系;通过接合转移试验获得CTX-M接合子,并对接合子进行复制子分型。结果 药敏试验结果表明,除黏菌素(7.1%)、头孢西丁(16.1%)和头孢他啶(10.7%)稍敏感外,有11种抗菌药物的耐药率均达到50%以上,其中动物专用的第三代头孢菌素,头孢噻肟和头孢噻呋耐药率分别为55.4%和57.1%。ESBLs检测结果表明,13株携带有CTX-M,检出率为23.2% (13/56),其中主要流行的亚型依次为CTX-M-14、CTX-M-65和CTX-M-55;7株CTX-M基因阳性菌成功接合转移,主要为FIB型复制子。未检测到TEM、OXA和SHV型。种族系统进化关系显示,分离株主要分布在A组和B1组。结论 患病犬猫的肛门拭子分离的大肠杆菌耐药性较为严重,其中以共生型为主。分离株对第三代头孢耐药的机制以产CTX-M-14,CTX-M-65和 CTX-M-55酶为主。提示宠物与人之间耐头孢菌素药物的大肠杆菌的互相传递存在风险。     

福建地区猪源大肠杆菌耐药基因oqxAB流行性分析

目的 调查福建地区猪源大肠杆菌耐药基因oqxAB流行性及阳性菌中其重要耐药基因的流行情况，以期为本地区抗菌药的合理应用提供依据。方法 采集腹泻仔猪肛门拭子分离大肠杆菌，通过琼脂二倍稀释法测定分离株的药物敏感性，并用PCR法检测PMQR(包括oqxAB)、ESBLs及其他耐药基因；对oqxAB阳性菌进行接合转移试验，测定接合子的药物敏感性变化；对阳性菌的种系发育及毒力基因分布进行测定。结果 本研究共分离鉴定大肠杆菌133株，分离株对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率最高(90.2%),对多粘菌素的耐药率最低(24.8%),其余药物的耐药率在26.3%～85.7%;耐药基因检测结果显示，oqxAB基因检出率为29.3%(39/133),在oqxAB阳性菌中还检测出floR(76.9%)、qnrS(71.8%)、CTX-M-1G(59.0%)、mcr-1(56.4%)、fosA3(28.2%)和acc(6′)-Ib-cr(23.1%)等耐药基因，其中59.0%携带6种以上耐药基因，以oqxA+oqxB+qnrS+CTX-M-1G+mcr-1+floR基因型最为流行(38.5%);种系发育显示分离株...     

宁波市耐三代头孢菌素志贺菌携带β-内酰胺酶与基因分型

目的了解本市耐三代头孢菌素志贺菌携带ESBLs及其基因型,为疾病防控提供依据。方法采用直接和增菌培养法,分离患者标本中志贺菌;药敏采用K-B法,ESBLs志贺菌表型确证采用纸片法;CTX-M、OXA、TEM和SHV耐药基因采用PCR法;耐药基因分型采用核苷酸序列法,用BLAST分析比较确定基因型别。结果药敏筛检出69株耐三代头孢菌素志贺菌,占ESBLs志贺菌的74.19%。检出CTX-M(CTX-M-1群和CTX-M-9群)、OXA和TEM耐药基因,检出率分别为79.71%、79.01%和26.09%,未检出CTX-M-2群和SHV耐药基因。DNA序列比对CTX-M-1群以CTX-M-15型为主,还检出7个其它型;CTX-M-9群则以CTX-M-14型多,其它型检出6个;49株OXA和18株TEM耐药基因测序后均为1型(OXA-1型和TEM-1型)。携带2种以上耐药基因的志贺菌21株,占30.43%。结论本市志贺菌对头孢曲松等三代头孢菌素耐药率较高,检出的ESBLs酶型种类多,CTX-M(CTX-M-1群的CTX-M-15型和CTX-M-9群的CTX-M-14型)是主流酶型,且可同时携带多种耐药基因,给疾病防控带来困难。OXA-1型的高携带率,提示我们应加强分析。B群志贺菌无论是表型的耐药性,还是耐药基因检出率均高于D群志贺菌,该发现有助志贺菌的扩散与流行研究。     

河南省人源产ESBLs鼠伤寒沙门菌单相变异株的分子特征研究

目的 分析河南省腹泻病例粪便标本中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs) 的鼠伤寒沙门菌单相变异株耐药情况,并研究其分子学特征。方法 对河南省腹泻粪便中分离的124株鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌,通过肉汤稀释法进行抗生素敏感性试验并筛选产ESBLs菌株;PCR方法检测β-内酰胺酶编码基因携带情况,采用质粒接合试验分析耐药基因的水平转移情况,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行亲缘关系分析。结果 124株鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌耐药严重,其中有16株为产ESBLs菌株。16株产ESBLs菌株均携带CTX-M型耐药基因,并检测出OXA型和TEM型耐药基因;其中9株菌可将CTX-M基因通过质粒转移到大肠埃希菌J53,药敏分析发现其他抗生素的耐药性可以发生共转移。16株产ESBLs 鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌经XbaⅠ酶切后共分为14种带型,无明显的优势带型。结论 检出产ESBLs 的鼠伤寒沙门菌单相变异株沙门菌基因型具有多样性,耐药基因可通过接合性质粒在不同菌属间播散。     

澳门地区鸡源性产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型检测

目的 了解澳门地区鸡源性产超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum β-lactamases, ESBLs)大肠埃希菌的基因型。方法 采用方便抽样的方法购买澳门地区市售的69个鸡源性产品,从中分离鉴定出103株产ESBLs大肠埃希菌,分别用CTX-M、TEM、OXA和SHV的引物对其进行PCR扩增,以此来判断它们的基因型,并用限制性片段长度多态性(RFLP)的方法对CTX-M型的产ESBLs大肠埃希菌进行初步分群, 并以纸片扩散法进行药敏试验。结果 澳门地区89.8%(62/69)鸡源性产品检测出产ESBLs大肠埃希菌,103株产ESBLs大肠埃希菌,经PCR扩增后,非重复株有84株,结果显示CTX-M型、TEM型、OXA型和SHV型分别占98.8%(83/84)、25.0%(21/84)、3.6%(3/84)和0.0%(0/84);其中23.8%(20/84)同时携带CTX-M型和TEM型,3.6%(3/84)同时携带CTX-M型和OXA型。83株CTX-M型的产ESBLs大肠埃希菌中66.3%(55/83)为CTX-M-G1,31.3%(26/83)为CTX-M-G9,CTX-M-G2和CTX-M-G8的检出率均为1.2%(1/83)。药敏试验中亚胺培南和美罗培南全部菌株敏感, 氨苄西林耐药率最高达98.8%, 其次为四环素83.3%(70/84)和阿米卡星78.6%(66/84)。结论 澳门地区鸡源性产ESBLs大肠埃希菌的检出率较高,其基因型以 CTX-M型为主,其次为TEM型,其中CTX-M型分群中以CTX-M-G1为主, 多重耐药的ESBLs大肠菌株普遍存在。     

安徽地区腹泻患者感染肠致病大肠埃希氏菌的耐药特征

目的 对安徽地区腹泻患者粪便标本中肠致病大肠埃希氏菌(EPEC)进行检测,了解本地区EPEC的检出情况、耐药特征及耐药机制。方法 使用多重实时荧光定量PCR法对分离疑似菌株进行鉴定,微量肉汤稀释法对EPEC进行药物敏感性检测,使用双纸片扩散法检测ESBLs,采用多重PCR法检测ESBLs基因型;根据药敏结果,进行基因扩增和测序分析检测喹诺酮类耐药基因。结果 2013-2017年,本地区10家哨点医院共检出不典型EPEC 85株,典型EPEC和艾伯特埃希氏菌各1株;87株菌对红霉素、氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、萘啶酸和头孢噻肟耐药率分别为:100%、51.7%、40.2%、34.5%和20.7%,对亚胺培南、头孢他定、头孢西丁和环丙沙星耐药率分别为:0、3.4%、5.7%和6.9%。87株菌中检测出产ESBLs 18株,TEM阳性14株、CTX-M group 1阳性6株、CTX-M group 9阳性7株。喹诺酮类耐药机制有:药物靶位及编码基因gyrA和parC突变;质粒介导的qnrA、qnrB、qnrS和aac(6′)-Ib耐药基因阳性;药物外排泵qepA和oqxAB基因阳性。结论 EPEC是本地区重要的肠道致病菌之一,对青霉素、红霉素和萘啶酸耐药率较高,对亚胺培南、环丙沙星和阿奇霉素耐药率较低;ESBLs检出率较高,基因型以TEM、CTX-M group 1和CTX-M group 9为主,对喹诺酮类药物耐药机制主要与gyrA、parC突变和Qnr蛋白家族相关,少数与QepA 和OqxAB外排泵相关。     

沙门氏菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因分型及变异研究

目的 通过对不同血清型中沙门氏菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶分子基因型别、脉冲场凝胶电泳(PFGE)溯源分析及CTX-M氨基酸位点变异情况,研究CTX-M各型别流行特征及在超级耐药克隆中的作用。方法 对来源于江苏及周围地区的61株CTX-M阳性的肠炎沙门氏菌(S. enteritidis)、印第安纳沙门氏菌(S. indiana)、汤卜逊沙门氏菌(S. thompson)等进行CTX-M型别鉴定、PFGE分子分型、全基因测序对不同型别CTX-M氨基酸位点变异分析。 结果 61株菌株分为3个CTX-M群6个型。S. indiana含有6种CTX-M基因型,主要型别是CTX-M- 65和CTX-M- 55; S. enteritidis和S.thompson主要型分别为CTX-M- 55、CTX-M- 65。 PFGE聚类分型有19个型。A2型是携带CTX-M-55型S. enteritidis; B4、B8、B9型是携带CTX-M-55型或CTX-M-65型的S. indiana; D2为携带CTX-M-65型的S.thompson。CTX基因组序列分析显示,在CTX-M-1群、CTX-M-9群、CTX-M-64群易变化氨基酸位点分别是4、3、12个。结论 本地区主要CTX型别为CTX-M-55型或CTX-M-65型,S. indiana是CTX基因主要来源。位于质粒上的CTX-M基因复杂且多变是S. indiana超级耐药克隆形成并广泛流行重要原因之一。     

广州市香港海鸥型菌红霉素耐药性与基因分析

目的 了解广州地区香港海鸥型菌分离株对红霉素的耐药性及红霉素耐药基因的分布情况。方法 从青蛙和草鱼肠道中分离的菌株共122株,使用K-B法对香港海鸥型菌分离株进行红霉素抗生素的耐药性测定,用PCR方法检测红霉素耐药株中红霉素抗性基因ereA,ereB,ermA,ermB,ernC,MefA/E,mphA,SAT4的携带情况,并将检测阳性结果的PCR产物进行测序分析。结果 香港海鸥型菌对红霉素耐药率为28.7%,其中蛙源株耐药率为35.1%,鱼源株耐药率为25.9%。对红霉素耐药的35株菌中,蛙源株ereA基因检出率为30.8%,鱼源株没有检出ereA基因。结论 广州地区香港海鸥型菌对红霉素的耐药率较高,蛙源株对红霉素的耐药率比鱼源株高,海鸥型菌蛙源株对红霉素产生的耐药性与ereA基因相关。     

广西宋内志贺菌药敏特性及ESBLs基因检测分析

目的了解广西地区宋内志贺菌的药敏特性及携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因与型别特征,为临床合理用药和控制耐药性的传播提供科学依据。方法采用微量肉汤稀释法对宋内志贺菌分离株进行药物敏感试验;采用PCR方法和毛细管电泳方法检测菌株携带相关ESBLs基因;采用近邻相接法构建系统进化树,分析菌株CTX-M型基因型别;对菌株携带ESBLs基因与特定抗菌药物耐药性的关系进行统计学分析。结果90株宋内志贺菌对环丙沙星敏感率为86.67%,无耐药现象;头孢曲松耐药率为96.67%,阿奇霉素耐药率为96.67%,多重耐药率为98.89%。90株宋内志贺菌中50株检出blaCTX-M-9 group基因,检出率为55.56%,经系统发育分析均为CTX-M-14亚型;1株检出blaTEM基因,检出率为1.11%;未检出blaCTX-M-1 group,blaCTX-M-2 group,blaCTX-M-8 group,blaCTX-M-25 group和blaOXA,blaSHV,blaNDM,blaVIM等β-内酰胺酶基因。blaCTX-M-14基因阳性菌株与blaCTX-M-14基因阴性菌株对头孢噻肟的耐药率差异无统计学意义(χ²=0.000,P>0.05);携带blaTEM基因的菌株对头孢他啶不耐药。结论广西地区的宋内志贺菌对主要治疗药物头孢曲松高度耐药,且多重耐药现象严重;菌株普遍携带ESBLs基因,主要为CTX-M-14亚型;携带单一型别的ESBLs基因与菌株对特定β-内酰胺类抗菌药物耐药无明显关联。     

Molecular characteristics of extended-spectrum β-lactamases in clinical isolates of Enterobacteriaceae from the Philippines

β-Lactamases, including extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) and AmpC β-lactamases, are major resistance mechanisms of Enterobacteriaceae. Emergence of plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) determinants in ESBL-producing isolates poses a global threat. The molecular characterisitcs of ESBL and PMQR determinants in the Philippines are not well characterized. In this study, we investigated ESBLs and AmpC β-lactamases in clinical isolates of Enterobacteriaceae from the Philippines, and analyzed the association between ESBL and PMQR genes. A total of 91 amoxicilin non-susceptible Enterobacteriaceae were collected at the Research Institute for Tropical Medicine of the Philippines from 2006 to 2008. AmpC- or ESBL-producing isolates were screened by detecting a zone diameter for cefoxitin ≤ 14 mm or cefpodoxime ≤ 20 mm, respectively. Possible ESBL-producing strains were assessed by the ESBL confirmation test of the Clinical and Laboratory Standards Institute. PCR and sequencing were performed to detect the ESBL and PMQR genes. The number of ESBL-producers and AmpC-producers confirmed phenotypically was 17 (18.7%) and 61 (67.0%), respectively. Of 17 phenotypic ESBL-producers, 14 isolates had ESBL genes, including 6 of Escherichia coli, 3 of Enterobacter cloacae, 2 of Enterobacter aerogenes, 2 of Klebsiella pneumoniae, and 1 of Klebsiella ozaenae. Among these isolates, there were 13, 4, and 12 with bla(CTX-M), bla(SHV), and bla(TEM), respectively. Of the bla(CTX-M)-positive isolates, bla(CTX-M-15) shows the highest prevalence, followed by bla(CTX-M-3) and bla(CTX-M-14). Of 14 ESBL-producers identified by PCR, 4, 6, and 7 isolates were positive for qnrB, qnrS, and aac(6')-Ib-cr, respectively. The frequency of aac(6')-Ib-cr positivity was significantly higher among CTX-M-15-producing isolates. Thus, we identified bla(CTX-M), aac(6')-Ib-cr, and qnr in ESBL-producing Enterobacteriaceae from the Philippines, and revealed a significant association between bla(CTX-M-15) and aac(6')-Ib-cr. Local epidemiological data are important for implementing appropriate antimicrobial therapy and effective infection control measures. Continuous monitoring of antimicrobial resistance genes in the Philippines will be required.     

不同CTX-M亚群鸡大肠杆菌毒力基因的流行特征

目的了解CTX-M-1亚群,CTX-M-9亚群与不产CTX-M3类鸡源大肠杆菌毒力基因的流行特征.方法 从河南省不同地区分离获得CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌33株,CTX-M-9亚群鸡大肠杆菌31株和不产CTX-M的鸡大肠杆菌23株,以多重PCR技术检测受试菌携带33种毒力基因的情况.结果 3类受试菌毒力基因的携带种类趋于一致,其中feoB,fimH,traT和sitA在3类菌中检出率均较高.CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌中traT和irp-2基因和CTX-M-9亚群鸡大肠杆菌中iroN,iss和irp-2基因的携带著高于不产CTX-M菌株.CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌中cvaC和sfaS的携带率高于CTX-M-9亚群,而iroN和iss的携带率低于CTX-M-9亚群.结论 结果表明CTX-M-1与CTX-M-9亚群大肠杆菌部分毒力基因的携带率明显高于不产CTX-M的菌株,CTX-M-9和CTX-M-1亚群鸡大肠杆菌携带的部分毒力基因差异明显,推测产CTX-M鸡大肠杆菌的致病力可能较强,且菌株的致病力可能还与其携带的CTX-M基因亚型有关.     

浙江省产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌流行情况及耐药性

目的 调查浙江省产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的大肠埃希菌（E.coli）和肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）的流行情况及耐药性。方法 收集各地区临床分离的E.coli和K.pneumoniae共362株,经抑制剂增强的肉汤稀释法筛选出产ESBLs细菌,并用浓度梯度法（E-test）检测其对9种抗菌药物的耐药性。结果 浙江省E.coli和K.pneumoniae中ESBLs检出率分别为37.9%和41.2%,总检出率为39.2%。产ESBLs细菌对头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CTX）、头孢西丁（FOX）、头孢吡肟（FEP）、头孢哌酮/舒巴坦（CFP/SUL）、哌拉西林/他唑巴坦（PZP/TAE）、阿米卡星（AMC）、环丙沙星（CIP）的耐药率比不产酶株都有不同程度地增加,所有菌株对亚胺培南（IMP）都敏感。结论 浙江各地区ESBLs在E.coli和K.pneumoniae中的检出率高。产ESBLs菌对所测试的8种抗菌药物的耐药程度比不产酶株为高,但所有菌株对亚胺培南均敏感。     

北京与杭州地区宋内志贺菌的耐药性及其耐药机制对比研究

目的 了解北京地区与杭州地区宋内志贺菌的耐药状况和基因型的特征.方法 用常规方法 培养、分离细菌,经生化反应和血清凝集试验鉴定到种.用Kirby-Bauer纸片法进行药物敏感性试验.超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)检测采用双纸片确认试验.采用PCR方法 进行...     

中国部分地区铜绿假单胞菌耐药性及主要β内酰胺酶基因型分布

目的 了解中国各地区铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药情况及其主要β内酰胺酶基因型的分布.方法 收集中国16个城市28家医院2006年7月至2007年7月临床分离的铜绿假单胞菌645株.采用Etest法或Kirby-Bauer纸片扩散法测定其对11种常用抗菌药物的敏感性,应用PCR扩增及序列分析确定所有菌株TEM、SHV、CTX-M、OXA等β内酰胺酶的基因型.统计学处理采用SPSS 11.0软件.结果 645株铜绿假单胞菌对11种抗菌药物的耐药率高,仅对阿米卡星及美罗培南的耐药率＜30%.其中对亚胺培南和(或)美罗培南不敏感的菌株为275株,占42.64%,多重耐药铜绿假单胞菌368株,占57.05%,对所检测抗菌药物全部耐药的铜绿假单胞菌菌株为20株,占3.10%.从基因型分布情况来看,阳性率最高的为OXA-10群共51株,其次CARB型37株,TEM型36株,PER型35株,CTX-M型11株,VEB型9株,SHV型5株,金属酶基因型阳性的24株,GES基因型1株,未检测到质粒介导的AmpC酶及其他碳青霉烯酶基因型.并在铜绿假单胞菌中发现了CTX-M-13、CTX-M-14、CTX-M-15、CTX-M-3基因型的超广谱β内酰胺酶基因.结论 中国28家医院临床分离的铜绿假单胞菌耐药情况比较严重.β内酰胺酶基因型以OXA-10及PSE-1为主.在对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的或敏感的铜绿假单胞菌中,β内酰胺酶基因型分布也有所不同.     

Molecular epidemiology of CTX-M producing Enterobacteriaceae isolated from bloodstream infections in Rio de Janeiro,Brazil: emergence of CTX-M-15

ObjectiveThe present study was designed to evaluate the molecular epidemiology of CTX-M producing Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae and Escherichia coli isolated from bloodstream infections at tertiary care hospitals in the State of Rio de Janeiro, Brazil.Material and methodsA total of 231 nonduplicate Enterobacteriaceae were isolated from five Brazilian hospitals between September 2007 and September 2008. The antimicrobial susceptibility testing was performed by disk diffusion method according to the Clinical Laboratory Standard Institute. Isolates showing resistance to third-generation cephalosporins were screened for ESBL activity by the double-disk synergy test. The presence of bla_CTX-M, bla_CTX-M-15 and bla_KPC genes was determined by Polymerase Chain Reaction (PCR) amplification and DNA sequencing. The molecular typing of CTX-M producing isolates was performed by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE).Results and discussionNinety-three isolates were screened as ESBL positive and 85 (91%) were found to carry CTX-M-type, as follows: K. pneumoniae 59 (49%), E. cloacae 15 (42%), and E. coli 11 (15%). Ten isolates resistant for carbapenems in K. pneumoniae were bla_KPC-2 gene positive. Among CTX-M type isolates, CTX-M-15 was predominant in more than 50% of isolates for K. pneumoniae, E. coli, and E. cloacae. PFGE analysis of CTX-M producing isolates showed the predominance of CTX-M-15 in 10 of 24 pulsotypes in K. pneumoniae, 6 of 13 in E. cloacae and 3 of 6 in E. coli. CTX-M-15 was also predominant among KPC producing isolates. In conclusion, this study showed that CTX-M-15 was circulating in Rio de Janeiro state in 2007–2008. This data reinforce the need for continuing surveillance because this scenario may have changed over the years.     

CTX-M extended-spectrum beta-lactamases among clinical isolates of Enterobacteriaceae in a Thai university hospital

This study presents updates on molecular epidemiology of extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) in clinical isolates of Enterobacteriaceae from Srinagarind Hospital, Khon Kaen University, Thailand. All isolates were screened for the presence of ESBL genes, bla(TEM), bla(SHV), bla(VEB) and bla(CTX-M), using PCR followed by nucleotide sequence determination. The results revealed that beta-lactamase genes among 48 isolates collected between 1998 and 1999 were bla(SHV) (79%), bla(CTX-M-9) (52%), bla(TEM-1) (48%) and bla(VEB) (33%), whereas those found in 52 isolates collected in 2003 were bla(TEM-1) (79%), bla(CTX-M-15) (44%), bla(SHV) (36%), bla(VEB) (36%), bla(CTX -M-14) (11%) and bla(CTX-M-9) (10%). In addition, 45 isolates carried at least two different ESBL genes. Using PCR, part of insertion sequence ISEcpl was found in the upstream regions of bla(CTX-M-14) and bla(CTX-M-15). ERIC-PCR analysis revealed that most ESBL-producing isolates were of different strains. This is the first report of CTX-M-9, CTX-M-14 and CTX-M-15 beta-lactamase genes in Enterobacteriaceae in Thailand.