肝素对大鼠肾小球系膜细胞增殖和核因子κB的抑制作用

<正>肾小球系膜细胞增殖在肾小球肾炎的发生发展中起重要的病理作用。有研究表明,核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)与系膜细胞增殖密切相关[1,2]。近年来有不少体外、体内试验证实肝素能抑制系膜细胞增殖,减轻肾脏病变[3,4],但其是否能通过NF-κB起作用,目前还没有明确报道。本研究通过研究肝素对大鼠肾小球系膜细胞NF-κB的作用及其对系膜细胞增殖的影响,旨在探讨肝素抑制系膜细胞增殖的细胞内机制。     

芪益强肾饮对肾炎大鼠系膜细胞中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的影响

目的探讨芪益强肾饮对实验大鼠肾炎模型的治疗作用及对大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子α（TNF—α）和白细胞介素6（IL-6）的影响。方法实验大鼠完全随机分为对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组;采用胃肠道综合免疫方法建立大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型;测定大鼠24h尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐;采用HE及免疫组织化学方法进行染色观察。结果芪益强肾饮第9周、第11周尿蛋白分别为（72．50±20．44）mg／24h,（77．40±13．27）mg／24h,第11周血肌酐与血尿素氮分别为（82．20±10．87）mmol／L,（9．36±1．48）mmol／L与模型组相比明显降低（P〈0．05）;TNF—α、IL-6呈弱阳性（P〈0．05）,与HE显示的病变程度一致。结论芪益强肾饮能明显改善系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能,减轻模型大鼠肾小球结构损伤,其机制可能与提高系膜增生性肾小球肾炎大鼠免疫力,抑制TNF-α、IL-6的分泌有关。     

芪益强肾饮对肾炎大鼠系膜细胞中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的影响

目的 探讨芪益强肾饮对实验大鼠肾炎模型的治疗作用及对大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的影响.方法 实验大鼠完全随机分为对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组;采用胃肠道综合免疫方法 建立大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型;测定大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐;采用HE及免疫组织化学方法 进行染色观察.结果 芪益强肾饮第9周、第11周尿蛋白分别为(72.50±20.44)mg/24 h,(77.40±13.27)mg/24 h,第11周血肌酐与血尿素氮分别为(82.20±10.87)mmol/L,(9.36±1.48)mmol/L与模型组相比明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6呈弱阳性(P<0.05),与HE显示的病变程度一致.结论 芪益强肾饮能明显改善系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能,减轻模型大鼠肾小球结构损伤,其机制可能与提高系膜增生性肾小球肾炎大鼠免疫力,抑制TNF-α、IL-6的分泌有关.     

芪益强肾饮对肾炎大鼠系膜细胞中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的影响

目的 探讨芪益强肾饮对实验大鼠肾炎模型的治疗作用及对大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的影响.方法 实验大鼠完全随机分为对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组;采用胃肠道综合免疫方法 建立大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型;测定大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐;采用HE及免疫组织化学方法 进行染色观察.结果 芪益强肾饮第9周、第11周尿蛋白分别为(72.50±20.44)mg/24 h,(77.40±13.27)mg/24 h,第11周血肌酐与血尿素氮分别为(82.20±10.87)mmol/L,(9.36±1.48)mmol/L与模型组相比明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6呈弱阳性(P<0.05),与HE显示的病变程度一致.结论 芪益强肾饮能明显改善系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能,减轻模型大鼠肾小球结构损伤,其机制可能与提高系膜增生性肾小球肾炎大鼠免疫力,抑制TNF-α、IL-6的分泌有关.     

芪益强肾饮对肾炎大鼠系膜细胞中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的影响

目的 探讨芪益强肾饮对实验大鼠肾炎模型的治疗作用及对大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的影响.方法 实验大鼠完全随机分为对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组;采用胃肠道综合免疫方法 建立大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型;测定大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐;采用HE及免疫组织化学方法 进行染色观察.结果 芪益强肾饮第9周、第11周尿蛋白分别为(72.50±20.44)mg/24 h,(77.40±13.27)mg/24 h,第11周血肌酐与血尿素氮分别为(82.20±10.87)mmol/L,(9.36±1.48)mmol/L与模型组相比明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6呈弱阳性(P<0.05),与HE显示的病变程度一致.结论 芪益强肾饮能明显改善系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能,减轻模型大鼠肾小球结构损伤,其机制可能与提高系膜增生性肾小球肾炎大鼠免疫力,抑制TNF-α、IL-6的分泌有关.     

芪益强肾饮对肾炎大鼠系膜细胞中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的影响

目的 探讨芪益强肾饮对实验大鼠肾炎模型的治疗作用及对大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的影响.方法 实验大鼠完全随机分为对照组、模型组、芪益强肾饮组、肾炎康复片组;采用胃肠道综合免疫方法 建立大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型;测定大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、肌酐;采用HE及免疫组织化学方法 进行染色观察.结果 芪益强肾饮第9周、第11周尿蛋白分别为(72.50±20.44)mg/24 h,(77.40±13.27)mg/24 h,第11周血肌酐与血尿素氮分别为(82.20±10.87)mmol/L,(9.36±1.48)mmol/L与模型组相比明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6呈弱阳性(P<0.05),与HE显示的病变程度一致.结论 芪益强肾饮能明显改善系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾功能,减轻模型大鼠肾小球结构损伤,其机制可能与提高系膜增生性肾小球肾炎大鼠免疫力,抑制TNF-α、IL-6的分泌有关.     

中西医结合治疗系膜增生性肾小球肾炎34例临床观察

目的观察中西医结合治疗系膜增生性肾小球肾炎的临床疗效。方法将68例系膜增生性肾小球肾炎患者分为对照组34例和治疗组34例，对照组给予常规治疗，治疗组在此基础上加黄芪针治疗，进行I临床疗效观察。结果治疗组治愈率82．4％，总有效率87．1％；对照组治愈率55．9％，总有效率69．4％，治疗组疗效明显优于对照组，两组差异有统计学意义，P〈0．05。结论中西医结合治疗系膜增生性肾小球肾炎临床疗效好，值得临床推广应用。     

活性维生素D3对大鼠系膜增生性肾炎细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究活性维生素D3对系膜增生性肾小球肾炎细胞增殖与凋亡的影响。方法：72只雄性SD大鼠随机分为对照组、肾炎组、活性维生素D3干预组,每组24只,分别于造模和给药后第1,3,7,14天每组随机处死6只大鼠,肾组织标本HE染色确定肾脏病理损害分级,免疫组化法检测PCNA、Bcl-2在肾组织中的分布,Westernblot检测PCNA蛋白的表达量。结果：与对照组相比,肾炎组PCNA和Bcl-2表达明显增强（P〈0．01）;活性维生素D,干预组PCNA和Bcl-2表达明显减少（P〈0．01）。PCNA、Bcl．2表达与病理分级呈正相关（P〈0．01）,PCNA、Bcl-2各指标问的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：活性维生素D3可以通过抑制PCNA的表达而抑制系膜细胞增生,减少Bcl-2表达促进凋亡,延缓疾病的进展。     

蒙药萨日嘎日迪对系膜增生性肾小球肾炎肾小球系膜区细胞凋亡及相关调控因素Bcl-2、Fas基因表达的影响

目的：探讨蒙药萨日嘎日迪对实验性大鼠系膜增生性肾小球肾炎肾小球系膜区细胞凋亡及相关调控因素Bcl-2、Fas基因表达的影响,阐明蒙药萨日嘎日迪治疗系膜增生性肾小球肾炎的可能机制。方法：基于文献,采用腹腔多次注射BSA及皮下多次注射福氏佐剂制造系膜增生性肾炎动物模型,模型建立后,随机将大鼠分为4组,即空白组、模型组、蒙药（蒙药萨日嘎日迪）治疗组、醋酸地塞米松组（地米组）,各组进行相应干预;通过TUNEL法检测系膜细胞凋亡现象;免疫组化SABC法检测Bcl-2和Fas基因的表达情况,分析蒙药萨日嘎日迪对系膜增生性肾小球肾炎的作用机制。结果：空白组Bcl-2和Fas与模型组比较有显著性差异（P〈0.01）;蒙药萨日嘎日迪治疗组Bcl-2和Fas与地塞米松组相比无显著性差异（P〉0.05）。结论：蒙药萨日嘎日迪可能通过下调Bcl-2和上调Fas基因表达,诱导增生的系膜细胞凋亡,对系膜增生性肾小球肾炎产生疗效。     

Apelin-13抑制高糖引起的肾小球系膜细胞炎症

目的:在高糖刺激的肾小球系膜细胞MES13和HBZY-1中研究Apelin-13抑制高糖引起的细胞炎症。方法:在高糖诱导的MES13和HBZY-1细胞中给予不同剂量的Apelin-13,通过real time-PCR技术检测各实验组2种系膜细胞中Icam-1和Mcp-1基因的mRNA水平变化。结果:(1)与空白对照组细胞相比,高糖组MES13和HBZY-1细胞中Icam-1和Mcp-1基因的mRNA水平显著性上升(P<0.05);给药Apelin-13(300 pmol·L^-1)能显著性抑制高糖刺激的MES13和HBZY-1细胞中Icam-1和Mcp-1基因的mRNA水平(P<0.05)。(2)与空白对照组细胞相比,通过免疫组化实验检测高糖组MES13和HBZY-1细胞中促炎蛋白p38的磷酸化水平上升(P<0.05);给药Apelin-13(300 pmol·L^-1)能显著性抑制高糖引起MES13和HBZY-1细胞中促炎症蛋白p38的磷酸化(P<0.05)。结论:Apelin-13抑制高糖引起的MES13和HBZY-1细胞中p38的激活,从而抑制高糖所引起的炎症反应(Icam-1和Mcp-1基因水平)。     

来氟米特片联合肾易通颗粒治疗系膜增生性肾小球肾炎临床疗效分析

目的分析来氟米特片联合肾易通颗粒治疗系膜增生性肾小球肾炎的临床效果。方法采用病例对照分析研究,将65例患者随机分为来氟米特组(25例)、来氟米特加肾易通组(20例)、肾易通组(20例)。观察临床症状、体征以及尿常规、尿红细胞计数、24 h尿蛋白定量、血清白蛋白(ALB)、血常规、血尿素氮、血肌酐(Ser)、谷丙转氨酶、谷草转氨酶的变化以及用药期间不良反应。结果来氟米特组各疗程有效率虽较肾易通组高,但差异无显著性(P>0.05);来氟米特加肾易通组治疗6个月后的疗效(100%)不仅优于肾易通组(P<0.05),而且优于来氟米特组(P<0.05)。结论来氟米特联合肾易通颗粒对系膜增生性肾小球肾炎患者具有疗效好、不良反应少的特点,值得临床推广。     

乙醇抑制原代大鼠星形细胞神经营养因子的基因表达

为了阐明乙醇中毒对神经系统损害的机理 ,用0 .5- 5.0 g· L-1浓度的乙醇处理原代培养的 CD新生大鼠大脑皮层星形细胞 ,用反转录 PCR和Northern印迹杂交方法同时测定神经营养因子( NGF)的基因表达水平 .结果显示 0 .5g·L-1乙醇在染毒 2 4 h后 ,NGF m RNA水平开始降低 ,5.0 g· L-1在染毒 48或 72 h后 ,NGF m RNA水平与对照组比较降低了 50 % - 58% .结果表明 ,乙醇中毒在体外可降低新生大鼠星形细胞 NGF m RNA的生成 ,这种作用可干扰神经元与胶质细胞间的正常交互作用并可能与胚胎发育期乙醇接触导致的神经病理改变有关 .     

Recombinant human hepatocyte growth factor (HGF), but not rat HGF,elicits glomerular injury and albuminuria in normal rats via an immune complex‐dependent mechanism

1. Hepatocyte growth factor (HGF) has the therapeutic potential to improve renal fibrosis and proteinuria in rodents with chronic kidney disease. In contrast, long‐term administration of human HGF to normal rats reportedly elicits proteinuria. Thus, the role of HGF during proteinuria remains contentious. The aim of the present study was to demonstrate that human HGF is antigenic to rodents and that immune complex formation causes proteinuria. 2. We administered either human or rat HGF to normal rats for 28 days. Albuminuria was evaluated by sodium dodecyl sulphate–polyacrylamide gel electrophoresis. The renal phenotypes of the two HGF treatments were examined using histological techniques. 3. Administration of human HGF (1 mg/kg per day, i.v.) to rats led to severe albuminuria and glomerular hypertrophy in association with increased blood levels of anti‐human HGF IgG and IgG deposition in mesangial areas. Furthermore, an immune complex between human HGF and anti‐human HGF IgG stimulated the production of proteinuric cytokines (including transforming growth factor‐β) in rat cultured mesangial cells. In contrast, treatment of healthy rats with rat HGF for 4 weeks caused neither mesangial IgG deposition nor elevated anti‐HGF IgG in the blood. Overall, rat HGF did not provoke albuminuria. 4. We conclude that human HGF produces pseudotoxic effects in normal rat kidneys via an immune complex‐mediated pathway, whereas syngenic HGF is safe due to less deposition of glomerular IgG. Our results affirm the safety of the repeated use of syngenic HGF for the treatment of chronic organ diseases, such as renal fibrosis and liver cirrhosis.     

银屑病患者皮肤间充质干细胞胰岛素样生长因子结合蛋白5mRNA表达的研究

目的研究银屑病患者皮肤间充质干细胞胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)的mRNA表达,以了解银屑病皮损局部血管形成异常的分子机制。方法分离扩增银屑病皮损及正常皮肤间充质干细胞,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IGFBP5 mRNA表达。结果银屑病患者皮肤间充质干细胞IGFBP5 mRNA表达水平较对照组明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论银屑病患者皮肤间充质干细胞IGFBP5 mRNA表达降低可能与皮损局部血管形成增加及角质形成细胞增殖活性增高有关。     

糖基化终产物对人肾小球系膜细胞细胞外基质金属蛋白酶促进因子基因表达的影响

目的 探讨糖基化终产物(AGEs)对人肾小球系膜细胞(HMRC)细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)基因表达的影响.方法 在培养的人肾系膜细胞(HRMC)中分别加入不同浓度AGEs干预24 h和同一浓度AGEs干预HRMC不同的时间点,以无血清培养基(DMEM)和相应浓度的牛血清白蛋白(BSA)为对照.RT-PCR法检测EMMPRIN mRNA的表达水平.结果 与对照组相比,经各浓度及各时间点AGEs干预后, HMRC的EMMPRIN mRNA水平与对照组相比有显著差异(P＜0.01),且随AGEs浓度以及干预时间增加,EMMPRIN mRNA水平也明显逐渐降低(P＜0.05).结论 EMMPRIN可能是AGEs所致糖尿病肾病的因素之一.     

厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子及膜型基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂厄贝沙坦对高糖刺激的大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)和膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)表达的影响。方法体外培养的大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和厄贝沙坦干预,采用RT-PCR及Western blot法分别检测CTGF和MT1-MMP的mRNA及蛋白的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清中Ⅳ型胶原的含量。结果与对照组相比,高糖组各时间点系膜细胞CTGF表达明显上调,Ⅳ型胶原的分泌增加,且二者随时间持续增高;而MT1-MMP的表达则随时间呈明显下降趋势。厄贝沙坦能够抑制高糖引起的上述变化。结论高糖可诱导肾小球系膜细胞CTGF表达增加,抑制MT1-MMP的表达。厄贝沙坦抑制肾小球系膜细胞基质分泌的作用可能部分通过抑制CTGF,增加MT1-MMP的表达而实现。     

丙泊酚对高糖诱导的人肾小球系膜细胞氧化应激和炎症反应的影响

目的探讨丙泊酚对高糖诱导的人肾小球系膜细胞损伤的影响。方法该研究于 2021年 3月至 2022年 3月进行。体外培养人肾小球系膜细胞,采用 30 mol/L葡萄糖诱导建立人肾小球系膜细胞细胞损伤模型,用丙泊酚浓度 10、20、40 μmol/L处理细胞,细胞分为对照组、高糖组、高糖 +低、中、高剂量丙泊酚组。酶联免疫吸附测定( ELISA)检测超氧化物歧化酶( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-PX)、丙二醛、活性氧、白细胞介素( IL)-10、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)IL-1β表达;蛋白质印迹法检测诱导型一氧化氮合酶( iNOS)、细胞间黏附分子 -1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白 -1(MCP-1)、 IL-10、TNF-α、IL-1β蛋白表达。结果高糖组的丙二醛［( 16.7±1.7)mmol/L比( 3.8±0.4)mmol/L］、活性氧［( 9.6±0.9)μg/L比( 3.5±0.3)μg/L］、 IL-10［( 65.3±6.9)ng/L比(26.9±3.2)ng/L］、 TNF-α［( 105.6±10.9)ng/L比( 42.8±4.8)ng/L］和 IL-1β［( 79.7±8.2)ng/L比( 31.2±3.6)ng/L］明显高于对照组; iNOS、ICAM-1、MCP-1、IL-10、TNF-α、IL-1β蛋白表达明显高于对照组; SOD、GSH-Px明显低于对照组,均 P<0.05。高糖 +低剂量丙泊酚组、高糖 +中剂量丙泊酚组、高糖 +高剂量丙泊酚组的丙二醛、活性氧、 IL-10、TNF-α和 IL-1β明显低于高糖组; iNOS、 ICAM-1、MCP-1、IL-10、TNF-α、IL-1β蛋白表达明显低于高糖组,均 P<0.05;SOD、GSH-Px明显高于高糖组,均 P<0.05。结论丙泊酚能减轻高糖诱导的人肾小球系膜细胞氧化应激和炎症反应,发挥保护肾脏的作用。     

人免疫球蛋白联合万古霉素对新生儿败血症免疫功能和外周血清炎性因子的影响

目的 研究人免疫球蛋白联合注射用盐酸去甲万古霉素对新生儿败血症免疫功能和外周血清炎性因子的影响。方法 选择2013年1月—2017年12月在荆州市中心医院进行诊治的61例新生儿败血症患儿作为研究对象,随机分为对照组（31例）和观察组（30例）。对照组患儿静脉滴注注射用盐酸去甲万古霉素,对于日龄<7 d的新生儿静脉滴注的剂量为10 mg/kg,2次/d,对于日龄>7 d的新生儿静脉滴注的剂量为10 mg/kg,3次/d;观察组在对照组基础上联合静脉滴注人免疫球蛋白,每天400 mg/kg,两组均治疗5 d。观察两组患儿的临床疗效,比较两组住院时间、症状改善时间及治疗前后的外周血清炎性因子水平、免疫功能指标。结果 治疗后,观察组的有效率为86.67%,明显高于对照组的67.74%,两组有效率比较差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后,观察组神经系统症状改善时间、住院时间、拒奶改善时间以及体温改善时间均明显短于对照组,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后,两组外周血清白介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-23水平均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）;且观察组以上指标明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后,两组CD4⁺/CD8⁺、CD3⁺和CD4⁺均明显升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义（P<0.05）;且观察组免疫功能指标明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 人免疫球蛋白联合注射用盐酸去甲万古霉素可有效改善新生儿败血症的免疫功能,降低外周血清炎性因子水平,提高临床效率,值得临床推广应用。     

双歧杆菌四联活菌辅助治疗对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者BODE指数及免疫炎症因子的影响

目的 探究双歧杆菌四联活菌辅助治疗对慢性阻塞性肺疾病（COPD）稳定期患者BODE指数及免疫炎症因子表达的影响。方法 选取2019年6月—2021年6月在解放军总医院第六医学中心诊治的稳定期COPD患者112例,随机数字表法将研究对象分为对照组和试验组,每组56例。对照组采用常规治疗,试验组在对照组基础上加用双歧杆菌四联活菌辅助治疗。比较两组疗效、治疗前后BODE指数、肺功能［第1秒用力呼气量（FEV₁）、最大呼气流速峰值（PEF）、最大肺活量（FVC）］、免疫功能（CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺）、炎症因子水平［C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、可溶性血管细胞黏附分子1（sVCAM-1）］、不良反应发生率。结果 试验组总有效率96.43%,较对照组82.14%显著升高（P＜0.05）;治疗后试验组BODE指数较对照组显著降低（P＜0.05）;治疗后试验组FEV₁、PEF、FVC较对照组显著升高（P＜0.05）;治疗后,试验组患者免疫功能明显优于对照组,差异显著（P＜0.05）;治疗后试验组血清CRP、IL-6、sVCAM-1水平较对照组显著降低（P＜0.05）;两组药物不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 双歧杆菌四联活菌辅助治疗稳定期COPD患者,临床效果好,可以很好缓解患者的症状,改善免疫功能和肺功能,减轻机体炎症,安全性高。