黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导大鼠 心肌肥厚的保护作用研究

摘要：目的 探讨黄芪甲苷对异丙肾上腺素（ISO）诱导的大鼠心肌肥厚的保护作用机制。方法 健康SPF级SD 大鼠24只,随机分为4组,对照组（与ISO组等体积的生理盐水腹腔注射,之后与黄芪甲苷组等体积生理盐水灌胃）、 ISO组［ISO 3 mg/ （kg·d）腹腔注射,与黄芪甲苷等体积生理盐水灌胃］、黄芪甲苷组［与ISO等体积生理盐水腹腔注射, 黄芪甲苷溶液5 mg/ （kg·d）灌胃］、黄芪甲苷+ISO组［ISO 3 mg/ （kg·d）腹腔注射,黄芪甲苷溶液5 mg/ （kg·d）灌胃］,每 组6只,共处理14 d。处理结束后取大鼠左心室,计算左心室质量指数（左心室质量/体质量）。HE染色观察左心室心 肌肥厚情况,比较心肌横截面积的差异。以二氯荧光素（DCF）为探针检测心肌线粒体活性氧（ROS）生成速率; Western blot 法检测大鼠心肌NADPH氧化酶4（NOX4）和心房利钠肽（ANP）蛋白表达水平;RT-qPCR检测大鼠心肌 ANP在转录水平的表达情况。结果 与对照组相比,ISO组左心室质量指数明显升高,心肌横截面积扩大,心肌线粒 体ROS生成速率加快,NOX4蛋白、ANP mRNA及蛋白表达水平均明显升高（P < 0.05）。而ISO+黄芪甲苷组与ISO组 相比,上述指标均明显改善,主要表现为心肌横截面积缩小,ROS生成速率减慢,NOX4蛋白、ANP mRNA及蛋白表达 明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 黄芪甲苷对ISO诱导的大鼠心肌肥厚具有确切的保护作用,且该 保护作用可能与黄芪甲苷降低氧化应激反应相关。     

茶多酚对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚的保护作用

目的观察茶多酚对大鼠心肌肥厚的保护作用并讨论其相关可能作用机制。方法采用皮下注射异丙肾上腺素（ISO）建立大鼠心肌肥厚模型,将28只SD大鼠随机分为对照组、模型组、美托洛尔组、茶多酚组,灌胃给药连续14d后,取心脏称重后计算全心重量指数及左心重量参数;分别检测测定心肌组织一氧化氮合酶（NOS）活性及心肌组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）及钙调神经磷酸酶（CaN）的水平。结果与模型组相比,茶多酚能显著改善心脏质量指数,心肌组织NOS活性显著升高、AngⅡ含量降低、CaN活性明显降低。结论茶多酚对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚具有保护作用,其作用机制可能与提高NO水平、降低CaN活性、抑制AngⅡ有关。     

裙带菜多糖保护异丙肾上腺素诱导的心脏纤维化研究

目的：探讨裙带菜多糖在异丙肾上腺素（ISO）诱导的心脏纤维化中的作用。方法将40只C57BL／6J小鼠随机分为对照组、ISO组、ISO＋裙带菜多糖组、裙带菜多糖组。ISO组连续皮下注射ISO 14 d（前3 d 10 mg·kg－1·d－1,后11 d 5 mg· kg－1·d－1）,ISO＋裙带菜多糖组除做上述ISO处理外,ISO处理前7 d开始给予裙带菜多糖200 mg·kg－1·d－1灌胃,持续到ISO皮下注射第14天;裙带菜多糖组连续21 d裙带菜多糖200 mg·kg－1·d－1灌胃;对照组以生理盐水代替ISO皮下注射。心脏超声检测各组小鼠心功能的改变,病理染色检测心脏纤维化程度,实时定量PCR检测转化生长因子-β（TGF-β）、Ⅰ型胶原α（CollagenⅠα）和Ⅲ型胶原（CollagenⅢ）的mRNA表达量的变化,Western Blot检测各组小鼠心脏自噬的改变。结果裙带菜多糖明显改善心功能,减少ISO诱导的心脏纤维化程度,心脏胶原蛋白CollagenⅠα和CollagenⅢ的mRNA表达量比ISO组显著降低（P＜0．05）,且裙带菜多糖能减少ISO诱导的心脏自噬。结论裙带菜能减轻ISO诱导的心脏纤维化,其主要是通过降低ISO诱导的心脏自噬而发挥作用的。     

白藜芦醇对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的作用研究

目的 探讨白藜芦醇对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的保护作用及其相关机制.方法 将H9 C2心肌细胞随机分为3组:正常组、模型组和实验组.模型组和实验组的细胞用异丙肾上腺素(ISO)10μmol·L-1作用48 h造成心肌细胞肥大.实验组在造模的同时给予白藜芦醇(Res)10μmol·L-1.检测各组心肌细胞表面积,用...     

荞麦叶总黄酮对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚的影响

目的　研究荞麦叶总黄酮 (TFBL)对异丙肾上腺素所致心肌肥厚大鼠的保护作用及机制。方法　皮下注射异丙肾上腺素 5mg·kg-1·d-1,以建立大鼠心肌肥厚模型 ,同时用荞麦叶总黄酮灌胃 (ig)给药 (0 .1、0 .2、0 .4g·kg-1·d-1) ,连续 2周。测定心脏重量指数 ,心室RNA、AngⅡ、MDA的含量、SOD活性 ,血清心肌酶活性及心肌病理改变。结果　TFBL能明显减轻心脏重量、缩短心肌纤维直径 ,减少心室RNA、AngⅡ、MDA的含量并升高SOD活性、抑制血清乳酸脱氢酶 (LDH)和肌酸磷酸激酶 (CK)的活性。结论　TFBL对异丙肾上腺素所致心肌肥厚具有抑制作用。     

左卡尼汀对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚的保护作用及机制研究

目的观察左卡尼汀(L-carnitine)对异丙肾上腺素(Iso)诱导的大鼠心肌肥厚的保护作用,并探讨其心肌保护作用的可能机制。方法应用异丙肾上腺素(Iso)制备SD大鼠心肌肥厚模型。40只健康大鼠,随机分成正常对照组(空白组)、异丙肾上腺素组(Iso组)、左卡尼汀组(L-carni-tine组)和普萘洛尔组(propranolol组)各10只。除空白组外各组大鼠均皮下注射(sc)Iso 10 d制成心肌肥厚模型。大鼠饲养到期后,检测心脏功能和心脏重量指数;制备心室肌石蜡切片,行Masson染色,光镜下观察心肌形态;测定大鼠心肌组织中的游离脂肪酸(FFA)、乳酸(LAC)和羟脯氨酸(Hpy)水平。分离心肌细胞进行线粒体膜电位(MMP)的测定。结果相比Iso组,L-carnitine组大鼠心脏功能改善,心脏重量指数降低;光镜下观察:心肌细胞肥大程度较Iso组减轻,心肌纤维排列整齐,胶原纤维增生较少;脂肪酸(FFA)、乳酸(LAC)和羟脯氨酸(Hpy)水平增高;心肌线粒体膜电位升高。结论应用L-carnitine在一定程度上可以抑制心肌肥厚的发展,其机制可能与改善能量代谢和细胞线粒体的功能有关。     

间硝苯地平和硝苯地平对异丙肾上腺素所致心肌肥厚的影响

异丙肾上腺素(Iso) 0.02 mg·kg^-1每日2次, 连续sc 5 wk可引起大鼠左心室肥厚(LVH), 降低心肌顺应性; 并使心肌僵硬度常数增加92%, 冠脉流量降低14%. 与对照组相比, Iso还使心肌线粒体, 主动脉和尾动脉壁Ca²⁺含量分别增加了95%, 73%和69%. 大鼠于Iso sc 1 wk后分别给予间硝苯地平和硝苯地平10 mg·kg^-1 ig每日2次4 wk, 均显著减轻Iso引起的LVH, 改善冠脉血液供应, 降低心肌僵硬度, 提高心肌顺应性, 并减少心肌细胞线粒体, 主动脉和尾动脉壁的Ca²⁺含量. 二药的上述作用可能与其阻止Ca²⁺内流有关.     

间硝苯地平和硝苯地平对异丙肾上腺素所致心肌肥厚的影响

异丙肾上腺素（Ｉｓｏ）０．０２ｍｇ·ｋｇ－１每日２次，连续ｓｃ５ｗｋ可引起大鼠左心室肥厚（ＬＶＨ），降低心肌顺应性；并使心肌僵硬度常数增加９２％，冠脉流量降低１４％．与对照组相比，Ｉｓｏ还使心肌线粒体，主动脉和尾动脉壁Ｃａ２＋含量分别增加了９５％，７３％和６９％．大鼠于Ｉｓｏｓｃ１ｗｋ后分别给予间硝苯地平和硝苯地平１０ｍｇ·ｋｇ－１ｉｇ每日２次４ｗｋ，均显著减轻Ｉｓｏ引起的ＬＶＨ，改善冠脉血液供应，降低心肌僵硬度，提高心肌顺应性，并减少心肌细胞线粒体，主动脉和尾动脉壁的Ｃａ２＋含量．二药的上述作用可能与其阻止Ｃａ２＋内流有关     

槲皮素对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚的影响

目的　研究槲皮素（ Ｑｕｅ） 对异丙肾上腺素（ Ｉｓｏ） 所致大鼠心肌肥厚的抑制作用及作用机制。方法　 Ｉｓｏ ００２ ｍｇ·ｋｇ－ １ ,每日两次,连续ｓｃ ６ ｗｋ ,形成大鼠心肌肥厚模型,分别测定心脏各重量参数、心肌过氧化脂质（ Ｌ Ｐ Ｏ） 含量、超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 活性及心肌 Ｃａ２ ＋ 和主动脉 Ｃａ２ ＋ 含量,培养乳鼠心肌细胞,应用 Ｆｕｒａ ２／ Ａ Ｍ 钙荧光指示剂技术测定心肌细胞内游离钙浓度。结果　 Ｉｓｏ 连续ｓｃ ６ ｗｋ 后,心肌和左心室重量明显增加,心肌 Ｌ Ｐ Ｏ 含量显著增加, Ｓ Ｏ Ｄ 活性下降,心肌 Ｃａ２ ＋ 和主动脉 Ｃａ２ ＋ 含量明显增加,给 Ｑｕｅ ７５ ｍｇ·ｋｇ－ １ ,１５０ ｍｇ·ｋｇ － １ 和维拉帕米１０ ｍｇ·ｋｇ － １ 后均能明显减轻心肌肥厚,降低 Ｌ Ｐ Ｏ 含量,增加 Ｓ Ｏ Ｄ 活性,降低心肌 Ｃａ２ ＋和主动脉 Ｃａ２ ＋ 的含量,应用 Ｆｕｒａ ２／ Ａ Ｍ 钙荧光指示剂技术发现 Ｉｓｏ 和 Ｈ２ Ｏ２ 能引起培养乳鼠心肌细胞内游离钙浓度明显升高。槲皮素对心肌细胞静息钙无明显影响,能抑制 Ｉｓｏ和 Ｈ２ Ｏ２ 致培养乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的升高。结论　 Ｑｕｅ 能抑制 Ｉｓｏ 所引起的心肌肥厚, 该作用与清     

环维黄杨星D对异丙肾上腺素致小鼠心肌肥厚保护作用的初步研究

目的：初步研究环维黄杨星D（Cvb—D）对小鼠心肌肥厚的保护作用。方法：皮下注射异丙肾上腺素（Iso）1mg·kg^-1,bid,连续14d,制备小鼠心肌肥厚模型,各治疗组分别给予环维黄杨星D（6,9,12mg·kg^-1）和阳性对照卡托普利（100mg·kg^-1）灌胃给药,末次给药24h后处死小鼠,测量小鼠心脏质量指数（全心质量／体质量）和左心室质量指数（左心室质量／体质量）,并观察心肌组织病理形态学改变,以评价Cvb—D对小鼠心肌肥厚的保护作用。结果：与空白对照组比较,Iso模型组小鼠心脏重量指数明显升高,病理切片可见心肌肥厚改变。与Iso组相比,Cvb—D高剂量组能明显降低小鼠心脏质量指数和左心室质量指数（P〈0．05或0．01）,病理切片可见损害较模型组减轻。结论：环维黄杨星D对Iso诱导的小鼠心肌肥厚具有一定的保护作用,其机制有待进一步研究阐明。     

Akt-Kv4.3-CaMKⅡ在有氧运动抑制压力负荷小鼠 心肌肥厚中的作用及其机制

目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）-离子通道Kv4.3（Kv4.3）-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号 通路在有氧运动抑制压力负荷小鼠心肌肥厚中的作用及其机制。方法 60只实验小鼠均分为5组：假手术（SHAM） 组、主动脉缩窄手术（TAC）组、假手术+有氧运动（SHAM+E）组、主动脉缩窄术+有氧运动（TAC+E）组,主动脉缩窄术+ 有氧运动+ Akt抑制剂Perifosine（TAC+E+Peri）组。高分辨率小动物超声系统评价小鼠心功能及肥厚程度,麦胚凝集 素（WGA）染色检测心肌细胞横截面积;荧光定量PCR（RT-qPCR）检测ANP表达,Western blot检测蛋白心房钠尿肽 （ANP）、p-Akt、Kv4.3、p-CaMKⅡ表达水平。结果 与SHAM组相比,TAC促进心肌肥厚,恶化心功能（P＜0.01）。给 予有氧运动训练后,TAC+E组较TAC组小鼠心功能改善,心肌肥厚程度减轻（P＜0.01）。同时Western blot检测显示, TAC组较SHAM组p-Akt、Kv4.3表达降低,p-CaMKⅡ上调（P＜0.01）;TAC+E组p-Akt和Kv4.3表达较TAC小鼠增加, p-CaMKⅡ下调（P＜0.01）。而给予Akt抑制剂Perifosine后,相比于TAC+E组,TAC+E+Peri组心功能恶化、心肌肥厚 程度和ANP表达增加,心肌细胞横截面积增大,同时伴随Kv4.3表达降低、p-CaMKⅡ增高（P＜0.01）。结论 有氧运 动训练能够通过调节Akt-Kv4.3-CaMKⅡ信号通路抑制压力负荷心肌肥厚。     

异丙基肾上腺素导致的心肌肥厚大鼠心肌牛磺酸转运障碍

目的　观察异丙基肾上腺素 (isoproterenol,Iso)导致的心肌肥大大鼠的心肌细胞牛磺酸 (taurine ,TAU)跨膜转运功能的改变。方法　Iso诱导大鼠心肌肥厚 ;氨基酸分析仪测牛磺酸含量 ;用3H标记的牛磺酸测定心肌牛磺酸转运及牛磺酸与心肌浆膜结合功能。结果　Iso组动物较对照组的血浆和组织牛磺酸含量分别升高 49% (P <0 0 1)和降低35 % (P <0 0 1) ,心肌3H 牛磺酸摄入减少。 5min时释放量与总摄入百分比高于对照组 6 0 % (P <0 0 1) ,Iso组释放量增加。Iso心肌浆膜3H 牛磺酸结合量较对照组低 ,最大结合速率 (Bmax)较对照组低 45 % (P <0 0 5 ) ,治疗组较Iso组Bmax值增加 116 % (P <0 0 1) ,Kd值无明显差异。结论　Iso诱导的心肌损伤存在牛磺酸转运障碍 ,给予外源性牛磺酸可以有效防治其心肌牛磺酸转运障碍     

灯盏花素对异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥大的保护作用

目的:研究灯盏花素对异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥大的保护作用。方法:以皮下注射异丙肾上腺素(3 mg.kg-1)诱发小鼠心肌肥大,小鼠灌胃灯盏花素药后30 min,给予异丙肾上腺素连续5 d。末次给药24 h后,处死小鼠,称取小鼠全心重量及左心室(含室间隔)重量,取左心室匀浆测定丙二醛(MDA)、超级氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性和血清中天冬氨酸转氨酶(AST)。HE染色病理组织检查。结果:大剂量(60 mg.kg-1)灯盏花素和小剂量(30 mg.kg-1)灯盏花素均可降低心脏脏器指数,使心肌中MDA、AST水平降低,SOD、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高(与对照组比较,P<0.05),病理检查心肌损害有明显改善。结论:灯盏花素可有效地预防异丙肾上腺素过量所导致的心肌肥大,与其抗氧化、改善心肌能量代谢有关。     

Telmisartan attenuates isoproterenol-induced cardiac remodeling in rats via regulation of cardiac adiponectin expression

Aim:

To investigate whether telmisartan (Telm) pretreatment attenuates isoproterenol (Iso)-induced postinfarction remodeling (PIR) in rats, and whether the effect of Telm is associated with cardiac expression of adiponectin.

Methods:

PIR was induced in male Wistar rats with two consecutive injections of Iso (80 mg/kg, sc) at an interval of 24 h. Primary culture of ventricular myocytes from neonatal rats was prepared. Iso-induced cardiomyocyte injury was assessed based on cell growth and lactate dehydrogenase (LDH) activity. Cardiac adiponectin expression was measured using qRT-PCR and immunoblot analysis.

Results:

In the rats with PIR, Telm (10 mg·kg⁻¹·d⁻¹, po for 65 d) suppressed Iso-induced increases in gravimetric parameters, cardiomyocyte diameter and collagen volume fraction, but had no effect on Iso-induced myocardial hypertrophy and interstitial fibrosis. The protective effect of Telm was associated with enhanced protein expression of cardiac adiponectin. In cultured cardiomyocytes, Telm (5–20 μmol/L) inhibited the cell death and LDH release induced by Iso (10 μmol/L), and reversed Iso-induced reduction in adiponectin protein expression. In cardiomyocytes exposed to Iso (20 μmol/L), GW9662 (30 μmol/L), a selective antagonist of PPAR-γ, blocked the effects of Telm pretreatment on adiponectin protein expression, as well as the protective effects of Telm on Iso-induced cell injury.

Conclusion:

Telm attenuates Iso-induced cardiac remodeling and cell injury, which is associated with induction of cardiac adiponectin expression.     

miR-34a改变自噬通路AMPK/mTOR的活性在心肌细胞肥大中的作用

目的 研究 miR-34a 与自噬通路磷酸腺苷蛋白激酶（AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶点（mTOR）在血管紧张素（Ang）Ⅱ 诱导的原代大鼠心肌细胞肥大中的作用。 方法 体外培养原代大鼠心肌细胞, 分成 3 组： 阴性对照慢病毒（NC）组、AngⅡ 刺激+阴性对照慢病毒（AngⅡ +NC）组、AngⅡ 刺激+miR-34a 过表达慢病毒（AngⅡ +miR-34a）组。激光共聚焦检测心肌细胞肥大变化; 利用荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测 miR-34a、心房钠尿肽（ANP）和 β- 肌球蛋白重链（β-MHC）表达; 利用蛋白印迹（Western blot）测定 AMPK/mTOR 信号通路的活性变化。 结果 与 NC 组比较, AngⅡ +NC 组心肌细胞表面积明显增大（P＜ 0.05）; 与 AngⅡ +NC 组比较, AngⅡ +miR-34a 组心肌细胞表面积减少（P＜ 0.05）。 与 NC 组比较, AngⅡ +NC 组的 miR-34a 表达下调, ANP 和 β-MHC 表达上调（均 P＜ 0.05）; 而与 AngⅡ +NC 组比较, AngⅡ +miR-34a 组的 miR-34a 表达上调, ANP 和 β-MHC 表达下调（均 P＜ 0.05）。 与 NC 组比较, AngⅡ +NC 组 p-AMPK/AMPK 增加, p-mTOR/mTOR 减少（均 P＜ 0.05）; 与 AngⅡ +NC 组比较, AngⅡ +miR-34a 组 p-AMPK/AMPK 减少, p-mTOR/mTOR 增加（均 P＜ 0.05）。 结论 miR-34a 能抑制 AngⅡ 诱导的心肌细胞肥大, 其作用部分是通过改变 AMPK/mTOR 的活性来实现的。     

低聚葡萄籽原花青素对异丙肾上腺素诱导大鼠心室重构的影响

研究低聚葡萄籽原花青素(oligomeric grape seed proanthoc yanidins,GSP)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致大鼠心室重构的保护作用并初步探讨其机制。采用皮下注射ISO致大鼠心室重构模型,以GSP(50,100及150mg·kg-1)灌胃给药,PowerLab监测大鼠心功能,计算大鼠全心重量指数(HW/BW)和左心重量指数(LVW/BW),观察心肌病理学改变,测定左心室心肌组织中羟脯氨酸(Hyp)含量、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明,与空白对照组相比,ISO组大鼠心功能明显受损,心脏重量指数HW/BW和LVW/BW、心肌细胞横截面积(CSA)、心肌间质胶原容积分数(CVF)和心肌血管周围胶原面积(PVCA)、心肌组织Hyp含量明显升高,血清SOD活性下降,MDA含量升高。与ISO组相比,GSP能明显改善心功能,降低心脏HW/BW和LVW/BW、CSA、CVF、PVCA和左心室心肌组织中Hyp含量,增加血清SOD活性,降低血清MDA含量。GSP对ISO诱导的大鼠心室重构具有明显的逆转作用,其机制可能与抗氧化应激,提高机...     

高糖对去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的促进作用

目的　利用体外培养的乳鼠心肌细胞 ,观测高浓度葡萄糖对去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的影响 ,根据所得结果来推测高糖与心肌细胞肥大之间的相互关系及可能作用机制。方法　以培养的乳鼠心肌细胞为模型分组给药后 ,用Lowrys法测心肌细胞的蛋白质含量 ;用消化分离法 ,利用计算机图像分析系统测心肌细胞的体积 ;用 [3 H]leucine标记法测定心肌细胞蛋白的合成。结果　与对照组相比 ,高糖组心肌细胞蛋白含量、体积、蛋白合成均有明显增加 ,NE组心肌细胞蛋白含量、体积、蛋白合成增加更为明显 ;而与高糖组或NE组相比较 ,高糖加NE组心肌细胞蛋白含量、体积、蛋白合成增加则最为显著。结论　单纯高糖培养可明显促进心肌细胞肥大 ,同时高浓度葡萄糖可在去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大的基础上促使其进一步肥大 ,且两者间作用效果具有不完全叠加性