miR-101靶向甲基化转移酶3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭

背景与目的：miR-101在胃癌、结肠癌、乳腺癌以及前列腺癌中表达下调,有类似抑癌基因样作用,然而,其在卵巢癌中的作用尚未明确。该研究旨在探讨miR-101是否通过靶向调控甲基化转移酶3A(DNMT3A)抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭,从而进一步揭示miR-101的抑瘤机制。方法：采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测22例卵巢癌组织及癌旁正常卵巢组织中miR-101的表达改变;将miR-101 mimics转染于卵巢癌SKOV3细胞,以DNMT3A siRNA为阳性对照,采用蛋白［质］印迹法(Western blot)检测外源过表达miR-101对DNMT3A蛋白表达水平的影响;采用噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)和Transwell侵袭实验检测外源高表达miR-101对人卵巢癌细胞生长与侵袭能力的影响。结果：qRT-PCR检测结果显示,miR-101在22例卵巢癌组织中的表达水平较癌旁正常组织明显下调;Western blot检测结果显示,外源过表达miR-101或沉默DNMT3A能下调SKOV3细胞DNMT3A蛋白的表达水平;MTT检测结果显示,转染miR-101 mimics或沉默DNMT3A 48、72和96 h后D值与对照组比较明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验显示,转染miR-101 mimics或沉默DNMT3A 36 h后穿过基底膜的细胞数分别为(105±7)个和(107±13)个,与对照组(213±11)个比较能明显减缓SKOV3细胞的穿膜能力,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-101通过靶向调控DNMT3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭。     

miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:分析miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法:采用生物信息学方法对miR-194-3p的表达情况以及预后信息进行统计分析。采用荧光定量PCR检测胃癌细胞系中miR-194-3p的表达情况;采用CCK-8实验、克隆形成实验和流式细胞技术检测miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡能力的影响;Western blot检测过表达miR-194-3p后Caspase3的表达情况。结果:与癌旁组织相比,miR-194-3p在胃癌组织中显著高表达。TCGA预后分析显示,miR-194-3p的高表达与良好的预后相关。与GES-1相比,miR-194-3p在6种胃癌细胞系中均显著低表达。CCK-8和克隆形成实验结果显示,与空载组相比,慢病毒转染过表达miR-194-3p后显著抑制胃癌细胞增殖。流式细胞术显示,miR-194-3p可显著促进胃癌细胞凋亡。Western blot结果显示,Caspase3的表达在miR-194-3p过表达的胃癌细胞中显著增加。结论:miR-194-3p在胃癌细胞中低表达,miR-194-3p的过表达可显著抑制胃癌细胞的增殖,并促进细胞凋亡。其中miR-194-3p促进凋亡的机制可能是通过Caspase3的凋亡相关通路发挥作用。     

miR-122靶基因IL-1A3'UTR插入/缺失多态性与脑胶质瘤关联分析

目的:调查miR-122靶基因白细胞介素1A(IL-1A)3’翻译区(3'UTR)插入(ins)/缺失(del)多态性(rs3783553)与脑胶质瘤的关联.方法:采用聚合酶链反应检测161例脑胶质瘤患者和206名正常对照组人群rs3783553多态性.结果:对照组中del/del、ins/del和ins/ins基因型频率分别为37.9％、48.1％和14.1％;脑胶质瘤组中各基因型频率分别为47.8％、44.7％和7.5％.与del/del基因型相比,ins/ins基因型显著降低了脑胶质瘤的发病风险,OR=0.42,95％CI:0.20～0.88,x2 =5.45,P=0.02.对照组中del和ins等位基因频率分别为61.9％和38.1％;脑胶质瘤组中两等位基因频率分别为70.2％和29.8％.与del等位基因相比,ins等位基因显著降低了脑胶质瘤的发病风险,OR=0.69,95％CI:0.51～0.94,x2 =5.50,P=0.019.根据脑胶质瘤病理分级进行分层分析,ins和del等位基因在Ⅰ～Ⅱ级中的频率分别为69.5％和30.5％,在Ⅲ～Ⅳ级中的频率分别为71.2％和28.8％,两者相比差异无统计学意义,P＞0.05.结论:miR122靶基因IL-1A 3'UTR区插入/缺失多态性(rs3783553)与脑胶质瘤发病相关.     

miR-137 通过靶向Wnt5a 调控宫颈癌细胞的增殖、迁移及侵袭

[摘要] 目的: 探讨miR-137 在宫颈癌组织和细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其机制。方法: 选用2017 年1 月至2018 年3 月东莞市人民医院妇产科32 例手术切除的宫颈癌组织及对应的癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa 及宫颈上皮永生化细胞株H8,用RT-PCR 法检测宫颈癌组织和细胞系中miR-137 的表达水平。将miR-137mimics、miR-137 NC质粒转染到C33A和HeLa 细胞,用CCK-8 法、Transwell 迁移及侵袭实验观察上调miR-137 表达对C33A和HeLa 细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。用荧光素酶报告基因及WB实验检测miR-137 和Wnt5a 在宫颈癌中的靶向调控关系。构建Wnt5a 过表达载体,观察同时过表达Wnt5a 和miR-137 对宫颈癌细胞系C33A和HeLa增殖、迁移和侵袭的影响。结果: 在宫颈癌组织和细胞系中miR-137 表达水平明显低于癌旁组织和H8 细胞（均P<0.05）。上调miR-137 表达能够显著抑制C33A和HeLa 细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.05）。萤光素酶报告基因实验确定Wnt5a 与miR-137 的靶向关系。过表达Wnt5a 后,可以在一定程度上逆转miR-137 对宫颈癌细胞系C33A和HeLa 的增殖、迁移和侵袭能力。结论: miR-137 通过靶向Wnt5a 抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其可能是宫颈癌治疗的潜在靶点。     

miR-194-5p调控LMNB1抑制肺腺癌细胞的生长转移

目的:探究miR-194-5p调控LMNB1对肺腺癌细胞生长转移的作用。方法:实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验检测肺腺癌组织和癌旁组织中miR-194-5p、LMNB1表达水平。体外培养肺腺癌细胞A549,分为对照组、miR-194-5p mimics阴性对照组、miR-194-5p mimics组。转染处理后,CCK-8实验检测各组A549细胞增殖情况,比较各组细胞活力;流式细胞实验检测各组A549细胞凋亡率;细胞划痕及Transwell小室侵袭实验分别检测各组A549细胞迁移、侵袭力,比较各组细胞迁移、侵袭数;免疫印迹实验检测各组A549细胞凋亡蛋白caspase-3、Bax和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白E-cadherin、Vimentin表达;qRT-PCR实验及免疫印迹实验分别检测各组A549细胞miR-194-5p、LMNB1 mRNA表达及LMNB1蛋白表达。结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中miR-194-5p表达水平明显降低（P＜0.05）,LMNB1表达水平明显升高（P＜0.05）。相比对照组,miR-194-5p mimics组A549细胞活力、细胞迁移数、细胞侵袭数、LMNB1 mRNA表达水平、Vimentin和LMNB1蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、miR-194-5p表达、caspase-3、Bax和E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。miR-194-5p mimics阴性对照组A549细胞上述各指标与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:miR-194-5p可下调LMNB1表达,抑制肺腺癌细胞增殖,促进其凋亡,并降低其迁移及侵袭能力。     

5 Aza CdR通过DNMT1调控卵巢癌细胞ERCC1基因甲基化及其表达

目的:研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)在卵巢癌细胞系SKOV3中对核苷酸切除交叉修复互补基因1(exeision repair cross complementation group 1,ERCC1)表达的影响及可能的机制.方法:设计特异性针对DNA甲基转移酶1(DNAmethyhransferase 1,DNMT1)基因的shRNA转染人人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,Western blotting检测SKOV3细胞DNMT1以及ERCC1的表达变化;利用不同浓度5-Aza-CdR于不同时间点处理卵巢癌SKOV3细胞,Western blotting检测DNMTI和ERCC1蛋白在处理前后的变化,利用亚硫酸氢钠法检测ERCC1基因启动子区域甲基化水平.结果:0.5、1.0、2.0、4.0μmol/L的5-Aza-CdR作用于SKOV3细胞后,DNMT1表达水平呈浓度依赖性降低,而ERCC1表达水平呈浓度依赖性升高;使用终浓度为1.0 μmol/L的5-Aza-CdR处理SKOV3细胞12、24、36 h后,DNMT1表达水平呈时间依赖性降低,而ERCC1表达水平呈时间依赖性升高,亚硫酸氢钠法检测示药物处理前ERCC1启动子区域处于高甲基化水平,在用1.0μmol/L的5-Aza-CdR处理后,其启动子发生了去甲基化.结论:5-Aza-CdR通过DNMT1调控卵巢癌SKOV3细胞中ERCC1基因的甲基化及其表达水平.     

miR-409-3 p调控靶基因Beclin-1抑制小细胞肺癌细胞的自噬进而抑制其生长和转移

目的:探究miR-409-3p及其靶基因对小细胞肺癌细胞自噬、生长和转移的影响.方法:qRT-PCR检测miR-409-3p在HPAEpiC、SBC-5、NCI-H446、HOP-92细胞中的表达,SBC-5细胞中转染miR-409-3p mimic和miR-NC,CCK8法检测转染后细胞增殖,Transwell小室法...     

miR-1290通过抑制干扰素调节因子-2调控非小细胞肺癌的增殖

  目的  探讨微小RNA-1290（miR-1290）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达及其相关调控机制。  方法  采用实时荧光定量PCR检测成都市双流区第一人民医院2014年6月至2017年6月41例NSCLC患者癌组织、癌旁组织以及NSCLC细胞株A549、H460及正常支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-1290表达;qPCR、Western blot检测癌组织、癌旁组织IRF2 mRNA和蛋白表达;将A549和H460细胞分为miR-1290 mimic组（转染miR-1290 mimic）、miR-1290 inhibit组（转染miR-1290 inhibit）和miR- 1290 NC组（不转染）。分别于转染24、48、72、96 h后采用CCK-8法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数,Transwell小室检测细胞侵袭数,双荧光素酶报告基因实验检测miR-1290与干扰素调节因子-2（interferon regulatory factor,IRF2）3′-UTR结合情况,qPCR检测不同miR-1290表达水平的A549和H460细胞IRF2 mRNA表达。  结果  癌组织miR-1290相对表达量明显高于癌旁组织,IRF2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于癌旁组织,差异具有统计学意义（P < 0.05）;NSCLC组织miR-1290表达与IRF2 mRNA、蛋白表达呈显著负相关（P < 0.05）。NSCLC患者中,淋巴结转移者miR-1290表达明显高于无淋巴结转移者,Ⅲ/Ⅳ期患者miR-1290表达明显高于Ⅰ/Ⅱ期,差异具有统计学意义（P < 0.05）。转染72、96 h后,A549和H460细胞miR-1290 mimic组增殖能力明显高于miR- 1290 NC组,miR-1290 inhibit组增殖能力明显低于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。A549和H460细胞中miR-1290 mimic组细胞克隆数和侵袭细胞数明显高于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组克隆数和侵袭细胞数明显低于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。双荧光素酶报告基因实验显示miR-1290能与IRF2 3′-UTR结合,明显降低荧光值（P < 0.05）。A549和H460细胞中,miR-1290 mimic组IRF2相对表达量明显低于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组IRF2相对表达量明显高于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。  结论  miR-1290在NSCLC组织和细胞中高表达,miR-1290可能通过与IRF2结合,促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。      

沉默B7-H3基因表达对人肝癌细胞侵袭能力的影响

目的 研究靶向沉默B7-H3基因表达对HepG2细胞侵袭能力的影响及可能机制。方法 设计针对B7-H3基因的shRNA沉默质粒,转染HepG2细胞,下调B7-H3的表达。划痕修复实验检测转染前后HepG2细胞移行能力的变化,Transwell实验检测基因沉默对细胞侵袭能力的影响,MST-1法和ELISA凋亡试剂盒分别检测细胞增殖和凋亡水平变化。通过Western blot实验和明胶酶谱实验检测侵袭相关分子MMP-2、MMP-9的表达和活性变化。结果 成功构建B7-H3 shRNA沉默质粒并转染HepG2细胞。与对照质粒转染组和未转染组比较,沉默B7-H3基因表达后,B7-H3 shRNA转染组HepG2细胞的移行（24 h: P=0.001; 48 h: P<0.001; 72 h: P<0.001）和侵袭（P<0.001）能力受到显著抑制,细胞的增殖和凋亡水平没有明显变化（P>0.05）。MMP-2、MMP-9的蛋白表达（MMP-2: P<0.001; MMP-9: P=0.007）和活性（MMP-2: P<0.001; MMP-9: P<0.001）均显著下降。结论 通过B7-H3 shRNA沉默质粒靶向沉默B7-H3的基因表达能抑制HepG2细胞的侵袭能力,其机制可能与抑制MMP-2、MMP-9的表达和活性有关。     

小细胞肺癌中miR-194-5p的表达及与MEX3a的相关性

目的:检测小细胞肺癌中微小RNA-194-5p(miR-194-5p)的表达,探讨其临床意义,并关注其与重组人类核糖核酸结合蛋白3a(MEX3a)的关系.方法:选择小细胞肺癌患者共51例作为观察组,分别选择大细胞癌10例、典型类癌10例、不典型类癌5例作为对照组.应用实时荧光定量PCR法检测miR-194-5p的表达,...     

miR-124 and miR-506 inhibit colorectal cancer progression by targeting DNMT3B and DNMT1

miR-124 and miR-506 are reportedly down-regulated and associated with tumor progression in many cancers, but little is known about their intrinsic regulatory mechanisms in colorectal cancer (CRC). In this study, we found that the miR-124 and miR-506 levels were significantly lower in human CRC tissues than in controls, as indicated by qRT-PCR and in situ hybridization histochemistry. We also found that the overexpression of miR-124 or miR-506 inhibited tumor cell progression and increased sensitivity to chemotherapy in vitro. Increased miR-124 or miR-506 expression also inhibited tumor cell proliferation and invasion in vivo. Luciferase reporter assays and western blotting were used to determine the association between miR-124, miR-506 and their target genes, DNMTs. We further identified that miR-124 and miR-506 directly targeted DNMT3B and indirectly targeted DNMT1. The overexpression of miR-124 and miR-506 reduced global DNA methylation and restored the expression of E-cadherin, MGMT and P16. In conclusion, our data showed that miR-124 and miR-506 inhibit progression and increase sensitivity to chemotherapy by targeting DNMT3B and DNMT1 in CRC. These findings may provide novel avenues for the development of targeted therapies.     

miR-24-3p通过靶向STAT3抑制鼻咽癌细胞增殖

目的:探究miR-24-3p是否通过调控STAT3抑制鼻咽癌细胞增殖。方法:荧光素酶报告基因验证miR-24-3p与STAT3的3' UTR结合,qPCR、Western Blot法检测miR-24-3p对STAT3的mRNA和蛋白表达量的影响,CCK8法检测miR-24-3p对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用,并检测过表达STAT3是否逆转miR-24-3p的抑制增殖效果。结果:miR-24-3p与STAT3的3' UTR可直接结合,过表达miR-24-3p可减少STAT3表达量,而抑制miR-24-3p可增加STAT3表达量,过表达miR-24-3p抑制鼻咽癌细胞增殖,这一效果可被过表达STAT3逆转。结论:miR-24-3p通过直接靶向STAT3抑制鼻咽癌细胞增殖。     

高表达的miR-301b和miR-769-5p对非小细胞肺癌A549细胞生长的影响

目的:探讨高表达的miR-301b和miR-769-5p对非小细胞肺癌A549细胞生长的影响。方法:采用实对荧光定量聚合酶链反应检测A549细胞中miR-301b和miR-769-5p的表达;使用 qRT-PCR检测增殖相关基因miRNA表达的变化,并将实验组miR-301b和miR-769-5p表达量上调(与阴性对照组比较);采用MTT法检测并对比A549细胞增殖的改变;采用流式细胞仪检测并对比A549细胞周期以及凋亡的改变。结果:qRT-PCR结果表明,浸染了miR-301b和miR-769-5p过表达载体的A549细胞中miR-301b和miR-769-5p水平明显高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.01)。miR-301b过表达使G0/G1期的A549细胞增加,S和G2/M期的细胞减少;miR-769-5p过表达使G0/G1和G2/M期细胞增加,S期细胞减少。结论:miR-301b对靶基因FOXF2具有调控作用,miR-769-5p对靶基因ARID1A具有调控作用。miR-301b和miR-769-5p的过表达对肺癌A549细胞的细胞周期产生了明显影响,但没有影响细胞增殖和凋亡,miR-301b和miR-769-5p有可能成为肺癌分子靶向治疗调控效应靶点,可以进一步探索研究。     

miR-1297 inhibits osteosarcoma cell proliferation and growth by targeting CCND2

Cyclin D2 (CCND2) is abnormally overexpressed in many tumor types and has been associated with tumor cell proliferation. Although the important role of miR-1297 is well established, the molecular mechanism between CCND2 and miR-1297 in osteosarcoma (OS) has not been determined. In the present study, we found CCND2 was highly expressed in OS cells, and its downregulation suppressed cell proliferation, resulting in G1 phase cell cycle arrest. In contrast, miR-1297 was lowly expressed in OS compared to normal tissue. Several data platforms predicted that CCND2 was a target of miR-1297, which was validated by a dual-luciferase reporter assay that revealed miR-1297 could bind with CCND2-3’UTR. miR-1297 overexpression greatly inhibited CCND2 protein expression and exerted the same phenotypic effect as CCND2 downregulation in OS cells. Furthermore, miR-1297 inhibition could also be rescued by CCND2. Nude mice injected cells stable overexpressing miR-1297 OS cells showed lower size and tumor weight. Moreover, lower fluorescence activity recorded by in vivo imaging system and bone erosion revealed by microCT in the miR-1297 group demonstrated miR-1297 inhibited OS tumor growth via CCND2. Our findings demonstrated that miR-1297 can inhibit proliferation and tumor growth in OS by directly targeting CCND2, which indicates that miR-1297 may represent a novel therapeutic target for OS.     

miR-124-3p靶向FOXQ1抑制宫颈鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的机制研究

目的:探讨miR-124-3p在宫颈鳞状细胞癌（cervical squamous cell carcinoma,CSCC）中的表达水平及对细胞增殖、侵袭能力的影响,初步阐明miR-124-3p对癌基因叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)的靶向调控机制。方法:收集2015年1月至2017年12月手术切除的CSCC组织标本61份,分别应用RT-qPCR和IHC检测癌组织和癌旁组织中miR-124-3p和FOXQ1蛋白的表达水平,分析miR-124-3p和FOXQ1 mRNA表达的相关性;RT-qPCR检测miR-124-3p和FOXQ1 mRNA在人CSCC细胞株（SiHa和CaSki）及人宫颈永生化鳞状细胞株（Ect1/E6E7）中的表达水平;应用miR-124-3p模拟物转染CaSki细胞,分别采用CCK-8法和Transwell小室检测miR-124-3p对细胞增殖和侵袭能力的影响;采用Western blot检测miR-124-3p对FOXQ1、E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的影响;最后,应用双荧光素酶报告基因验证miR-124-3p对FOXQ1的靶向调控作用。结果:miR-124-3p在CSCC组织的表达水平低于癌旁组织（P＜0.05）,在人CSCC细胞株（SiHa和CaSki）中的表达水平也均低于人宫颈永生化鳞状细胞株（Ect1/E6E7）（P＜0.05）;与转染阴性对照细胞比较,转染miR-124-3p模拟物的CaSki细胞的增殖和侵袭能力明显受到抑制（P＜0.05）。FOXQ1 mRNA和蛋白在CSCC组织中的表达水平均显著高于癌旁组织(P＜0.05),相关性分析显示,FOXQ1 mRNA的表达水平与miR-124-3p呈负相关(r=-0.882,P＜0.05)。在转染miR-124-3p模拟物后,CSCC细胞株CaSki中FOXQ1和Vimentin蛋白表达水平均降低,而E-cadherin蛋白表达增高。双荧光素酶报告基因试验确认miR-124-3p可通过与FOXQ1 mRNA的3' UTR直接结合,靶向调控FOXQ1的表达。结论:miR-124-3p在CSCC中表达下调,其通过靶向调控FOXQ1的表达影响细胞的上皮间质转化状态,从而影响CSCC细胞的增殖和侵袭。     

沉默INHBA-AS1靶向miR-335-3p抑制外阴鳞状细胞癌细胞增殖、迁移

目的:探讨沉默长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）INHBA反义RNA1（INHBA antisense RNA1,INHBA-AS1）对外阴鳞状细胞癌细胞SW954生物学行为的影响及机制。方法:37例外阴鳞状细胞癌组织中INHBA-AS1、miR-335-3p表达运用qRT-PCR检测,高迁移率族蛋白2（high mobility group AT-hook 2,HMGA2）蛋白的表达运用Western blotting检测。实验分为con组、si-NC组、si-INHBA-AS1组、miR-NC组、miR-335-3p mimic组、si-INHBA-AS1+miR-335-3p inhibitor组。应用CCK-8实验检测SW954细胞增殖抑制率,克隆形成实验检测SW954细胞克隆形成,Transwell实验和划痕实验检测SW954细胞迁移,流式细胞术检测SW954细胞凋亡。双荧光素酶报告实验鉴定INHBA-AS1与miR-335-3p、miR-335-3p与HMGA2的靶向关系。结果:外阴鳞状细胞癌组织中INHBA-AS1、HMGA2蛋白的表达水平远高于癌旁组织,miR-335-3p的表达水平低于癌旁组织（P＜0.05）。转染si-INHBA-AS1沉默INHBA-AS1或转染miR-335-3p mimic过表达miR-335-3p后,miR-335-3p表达水平、SW954细胞抑制率及凋亡率升高,HMGA2蛋白的表达水平、SW954细胞克隆形成数、迁移细胞数及划痕愈合率降低（P＜0.05）。INHBA-AS1靶向miR-335-3p,miR-335-3p靶向HMGA2。沉默INHBA-AS1处理的SW954细胞增殖、迁移、凋亡的影响被抑制miR-335-3p所逆转。结论:沉默外阴鳞状细胞癌细胞SW954中的INHBA-AS1通过miR-335-3p靶向HMGA2,抑制SW954细胞增殖、迁移,并诱导其凋亡。     

LncRNA DARS-AS1靶向miR-758-3p促进骨肉瘤细胞增殖并抑制凋亡

目的:探讨LncRNA DARS-AS1对骨肉瘤细胞增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。方法:qRT-PCR法检测骨肉瘤组织、瘤旁组织、人成骨细胞hFOB 1.19、人骨肉瘤细胞Saos2、U2OS、HOS中LncRNA DARS-AS1、miR-758-3p的表达量;对Saos2细胞进行转染,根据不同转染物分为si-NC组、si-LncRNA DARS-AS1组、miR-NC组、miR-758-3p组、si-LncRNA DARS-AS1+anti-miR-NC组、si-LncRNA DARS-AS1+anti-miR-758-3p组;MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;双荧光素酶报告实验检测LncRNA DARS-AS1与miR-758-3p的靶向调控关系。结果:与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中LncRNA DARS-AS1的表达量升高(P<0.05),miR-758-3p的表达量降低(P<0.05);与hFOB 1.19细胞比较,Saos2、U2OS、HOS细胞中LncRNA DARS-AS1的表达量升高(P<0.05),miR-758-3p的表达量降低(P&...     

miR-1243通过靶向hnRNPA2B1调控肝癌HepG2细胞增殖和迁移

目的：探讨miR-1243通过靶向调控核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2B1)表达对肝癌HepG2细胞增殖、迁移的影响及其分子机制。方法：用q PCR和WB法检测40例肝癌组织及其癌旁组织（2019年1月至2021年8月在武汉市第三医院首义院区手术切除标本）和正常人肝细胞QSG-7701与肝癌细胞HepG2、Hep3b、HuH-7中miR-1243、hnRNPA2B1 m RNA水平及hnRNPA2B1、cyclin D1、MMP-2蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-1243和hnRNPA2B1的靶向关系。HepG2细胞分为对照组（不转染）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-1243 mimic组（转染miR-1243 mimic）、miR-1243 mimic+pcDNA3.1组（转染miR-1243 mimic和pcDNA3.1）、miR-1243 mimic+pc-hnRNPA2B1组（转染miR-1243 mimic和pc-hnRNPA2B1）后进行相应转染;WB法检测肝癌组织及细胞和转染后各组细胞的hnRNPA2B1、cyclin D1、MMP-...