NSCLC中EGFR基因突变与表达关系研究

目的 研究非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和蛋白表达的相关性.方法 随机选择北京协和医院胸外科2009年6月至2011年5月收治的非小细胞肺癌(non- small cell lung cancer,NSCLC)患者的石蜡包埋肺癌组织标本71例,分别以直接测序法和免疫组织化学染色法取得表皮生长因子受...     

靶向NSCLC EGFR exon20插入突变的新抗原疫苗筛选和功能研究

目的:筛选具有免疫源性HLA-A^*02限制性表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)exon20插入突变编码的优势表位肽,为携带EGFR exon20插入突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)提供新的免疫治疗手段。方法:通过IEDB、NetMHC 4.0和SYFPEITHI软件,筛选EGFR exon20插入突变编码的HLA-A^*02限制性表位,针对细胞毒性T淋巴细胞表位集中区域设计多肽疫苗,通过体外实验验证其免疫活性。结果:V769_D770insASV为EGFR exon20插入突变最高频突变位点(19.35%),经软件预测其编码的多肽YVMASVASV与HLA-A^*02具有较强的结合力。围绕核心序列设计两条优势表位多肽E-ASV-10和E-ASV-19,体外可诱导HLA-A^*02限制性T细胞的扩增和活化,上调4-1BB⁺CD25⁺...     

miR-370 和EGFR在肺癌中的表达及其临床意义

目的: 探讨miR-370 和EGFR在肺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法: 收集45 例肺癌及对应的正常肺组织标本,采用qPCR检测miR-370 和EGFR mRNA的表达,用双荧光素酶检测系统检测共转染野生型及突变型EGFR 3’UTR质粒和miR-370 mimics 后的荧光强度。分析miR-370 和EGFR的相关性及其与肺癌患者临床病理特征的相关性。结果:miR-370 在肺癌组织中的中位(P25,P75)表达水平显著低于正常肺组织[0.153（0.119,3.068）vs 0.875（0.026,6.145）,P<0.05],EGFR在肺癌组织中的表达水平显著高于正常肺组织[2.974（1.728,2.975）vs 2.081（0.897,4.873）,P<0.05],两者水平呈负相关(r=–0.361,P<0.01)。双荧光素酶检测显示EGFR 3’UTR可与miR-370 结合。miR-370 表达与肺癌患者的年龄、性别、地域、肿瘤分期、肿瘤大小和淋巴结转移等无相关性(P<0.05)。结论: 在肺癌组织中miR-370 低表达、EGFR高表达,两者的表达水平呈负相关,miR-370 表达水平与患者肿瘤分期、病理类型等临床病理特征无相关性。     

晚期NSCLC患者外周血中EGFR突变预测EGFR TKIs一线治疗的疗效的观察

目的：检测NSCLC患者外周血EGFR突变情况,预测EGFR TKIs作为治疗晚期NSCLC的一线疗法的疗效。方法：应用荧光偏振（TDI-FP）法检测51例晚期非小细胞肺癌患者外周血EGFR基因突变情况,口服EGFR TKI进行治疗,分析外周血基因突变结果与EGFR TKI疗效之间的关系。结果：TDI-FP法检测出的外周血EGFR突变率为60.8%（31/51）。经EGFR TKIs一线治疗后,EGFR突变型和EGFR野生型有效率（RR）分别为41.9%和5.0%;疾病控制率（DCR）分别为77.4%和15.0%;中位PFS则分别为13.0和7.0个月。与检测组织中EGFR突变比较,TDI-FP法检测外周血EGFR突变的正确率（π）为84.2%。统计学分析显示,EGFR突变型NSCLC患者应用EGFR TKIs一线治疗能获得更佳疗效。结论：应用荧光偏振法检测NSCLC患者外周血中的EGFR基因突变,对于预测EGFR TKI作为一线治疗的疗效有重要的价值。     

晚期NSCLC患者外周血中EGFR突变预测EGFR TKIs一线治疗的疗效的观察

目的:检测NSCLC患者外周血EGFR突变情况,预测EGFR TKIs作为治疗晚期NSCLC的一线疗法的疗效。方法:应用荧光偏振(TDI-FP)法检测51例晚期非小细胞肺癌患者外周血EGFR基因突变情况,口服EGFR TKI进行治疗,分析外周血基因突变结果与EGFR TKI疗效之间的关系。结果:TDI-FP法检测出的外周血EGFR突变率为60.8%(31/51)。经EGFR TKIs一线治疗后,EGFR突变型和EGFR野生型有效率(RR)分别为41.9%和5.0%;疾病控制率(DCR)分别为77.4%和15.0%;中位PFS则分别为13.0和7.0个月。与检测组织中EGFR突变比较,TDI-FP法检测外周血EGFR突变的正确率(π)为84.2%。统计学分析显示,EGFR突变型NSCLC患者应用EGFR TKIs一线治疗能获得更佳疗效。结论:应用荧光偏振法检测NSCLC患者外周血中的EGFR基因突变,对于预测EGFR TKI作为一线治疗的疗效有重要的价值。     

广西壮族非小细胞肺癌患者EGFR基因突变的研究

目的 研究广西壮族非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况.方法 收集163例广西壮族非小细胞肺癌(NSCLC)组织,采用ARMS( amplification refractory mutation system,ARMS)法PCR扩增检测EGFR基因外显子18、19、20及21的突变,进一步分析其突变与临床特征的关系,并与文献报道国内8个省、市的数据进行比较.结果 163例NSCLC中共检出73例EGFR基因突变,EGFR突变阳性率为44.8%,显著高于文献报道国内8个省市的总体水平(30.O%)(P＜0.05).其中,外显子19和21突变各占突变总数38.4%.腺癌和腺鳞癌突变发生率占突变总数的80.8%,女性EGFR基因突变率(57.7%)显著高于男性(38.7%)(P＜0.05).结论 广西壮族NSCLC患者EGFR基因突变率显著高于中国8个省、市的总体水平,其中以外显子19和21突变为多见.女性、腺癌和腺鳞癌患者是选用EGFR酪氨酸激酶抑制剂的优势人群.     

广西壮族非小细胞肺癌患者EGFR基因突变的研究

目的研究广西壮族非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变的情况。方法收集163例广西壮族非小细胞肺癌（NSCLC）组织,采用ARMS（amplificationrefractorymutationsystem,ARMS）法PCR扩增检测EGFR基因外显子18、19、20及21的突变,进一步分析其突变与临床特征的关系,并与文献报道国内8个省、市的数据进行比较。结果163例NSCLC中共检出73例EGFR基因突变,EGFR突变阳性率为44．8％,显著高于文献报道国内8个省市的总体水平（30．0％）（P〈0．05）。其中,外显子19和21突变各占突变总数38．4％。腺癌和腺鳞癌突变发生率占突变总数的80．8％,女性EGFR基因突变率（57．7％）显著高于男性（38．7％）（P〈0．05）。结论广西壮族NSCLC患者EGFR基因突变率显著高于中国8个省、市的总体水平,其中以外显子19和21突变为多见。女性、腺癌和腺鳞癌患者是选用EGFR酪氨酸激酶抑制剂的优势人群。     

广西南宁地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的:分析广西南宁地区非小细胞肺癌(NSCLCs)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况。方法:采用突变特异性扩增系统(Amplification Refractory Mutation System,ARMS)检测604例NSCLCs EGFR基因第18-21号外显子的突变,同时分析其突变与临床特征的关系。结果:604例NSCLCs共检出242例EGFR基因突变（40.1％）,其中外显子19和21 L858R突变各占突变总数的 50.0％（121/242）和45.5%（110/242）;腺癌和腺鳞癌基因突变率分别为46.0%（203/441）和49.1%(26/53);女性EGFR基因突变率（53.1%,119/224）显著高于男性(32.4%,123/380）。结论:广西南宁地区NSCLCs患者EGFR基因突变主要见于女性、腺癌和腺鳞癌,突变类型以外显子19的缺失突变和外显子21的L858R突变为主。     

广西南宁地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的:分析广西南宁地区非小细胞肺癌(NSCLCs)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的情况。方法:采用突变特异性扩增系统(AmplificationRefractoryMutationSystem,ARMS)检测604例NSCLCsEGFR基因第18-21号外显子的突变,同时分析其突变与临床特征的关系。结果:604例NSCLCs共检出242例EGFR基因突变(40.1%),其中外显子19和21L858R突变各占突变总数的50.0%(121/242)和45.5%(110/242);腺癌和腺鳞癌基因突变率分别为46.0%(203/441)和49.1%(26/53);女性EGFR基因突变率(53.1%,119/224)显著高于男性(32.4%,123/380)。结论:广西南宁地区NSCLCs患者EGFR基因突变主要见于女性、腺癌和腺鳞癌,突变类型以外显子19的缺失突变和外显子21的L858R突变为主。     

免疫检查点抑制剂在EGFR突变非小细胞肺癌治疗应用的研究进展

目前,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)是表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因敏感突变晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的一线治疗标准,但大多数患者最终出现获得性耐药。而针对免疫检查点程序性死亡受体(programmed death-1,PD-1)及其配体(PD-1 ligand,PD-L1)的抑制剂取得突破性进展,改变了NSCLC的治疗模式。多项研究显示,EGFR敏感突变NSCLC患者免疫检查点抑制剂疗效不佳,其可能机制主要包括EGFR敏感突变患者PD-L1的低表达、抑制性免疫微环境、低肿瘤突变负荷等等。通过对EGFR突变NSCLC患者特殊人群的选择,免疫检查点抑制剂与其他药物的联合应用,可能为EGFR敏感突变NSCLC患者的治疗带来希望。本文将对此进行综述,以期为表皮生长因子受体突变的非小细胞肺癌患者的治疗带来新的希望。     

miR-221在胃癌中的表达及临床诊断意义

目的:研究微小RNA-221（microRNA-221,miR-221）在胃癌中的表达及应用于胃癌临床诊断的潜在可能。方法:收集原发性胃癌患者及健康对照组血清标本各30例;miRNA 表达谱分析确定miR-221的差异化表达;利用多元线性回归模型分析miR-221与胃癌临床病理因素(性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、肿瘤部位、淋巴结转移及组织类型等)之间的关系。利用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-221诊断胃癌的敏感性及特异性;通过约登指数(Youden index)确定其最佳诊断截断值(cut-off value)。结果:miR-221在胃癌标本中的表达水平（4.52±1.78）显著高于健康对照组（2.38±1.37）,差异有显著统计学意义（P＜0.01）。miR-221的表达与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位及组织类型等因素无明显相关性;而与TNM分期和淋巴结转移有显著相关性。miR-221诊断胃癌的截断值为4.214,诊断敏感性为76.3%,特异性为87.6%。结论:miR-221在胃癌中存在显著异常高表达,在诊断胃癌方面具有潜在临床应用价值。     

非小细胞肺癌E GF R基因突变的表现及其与肿瘤标记物的相关性

目的：探讨非小细胞肺癌（NSCLC）EGFR基因突变位点状态,分析其与血清肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21－1、TSGF间的关系。方法：回顾性分析240例NSCLC患者组织标本中EGFR不同位点基因突变状态,分析基因突变率与患者性别、年龄、吸烟史和组织分型间的关系及NSCLC患者19、21突变位点与肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21－1、TSGF的相关性。结果：240例标本突变135例,18号外显子突变2例（1．5％）;19号外显子突变47例（34．8％）;20号外显子突变7例（5．2％）;21号外显子突变71例（52．6％）;双突变8例（5．9％）。EGFR突变主要发生在19、21号外显子上,其中19号外显子突变与组织分型有关（P＜0．05）,与年龄、性别、吸烟史无关（P＞0．05）;21号外显子突变与组织分型、吸烟史、性别有关（P＜0．05）,与年龄无关（P＞0．05）。EGFR突变组肿瘤标志物NSE、CEA、CYFRA21－1、TSGF的表达水平与未突变组之间差异无统计学意义（P＞0．05）,19、21号外显子突变的肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21－1、TSGF之间的差异也无统计学意义（P＞0．05）。结论：NSCLC的EGFR突变中19、21号外显子突变率显著高于其他类型,这对于指导临床合理应用EGFR－TKIs药物治疗有重要的意义。而肿瘤标记物NSE、CEA、CYFRA21－1、TSGF在突变组与未突变组之间、19和21号外显子突变之间的差异均无统计学意义。因此,血清肿瘤标记物可能不足以作为评估EGFR突变的指标。     

肿瘤标志物预测NSCLC患者EGFR突变概率数学模型的建立与评价

目的:利用血清肿瘤标志物建立预测非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变概率的数学模型,并评价其临床应用价值。方法:回顾性分析我院经病理学确诊的NSCLC患者107例,对组织标本采用扩增阻滞突变系统实时荧光定量PCR（ARMS-PCR）技术检测EGFR基因突变,采集外周静脉血用化学发光法检测血清肿瘤标志物水平。多因素回归分析筛选出EGFR突变的独立预测因子,建立Logistic回归模型。绘制受试者工作特征曲线（ROC）并计算曲线下面积（AUC）,以评价模型准确性和临床价值。结果:107例NSCLC患者中43.9%为EGFR突变型,56.1%为EGFR野生型。Logistic回归分析显示吸烟史、CEA、CA199和CYFRA21-1在EGFR突变型和野生型组间差异有统计学意义,是EGFR突变的独立预测因子。由此建立预测模型:P=ex/(1+ex),X=-3.664+（3.246×吸烟史）+（2.441×CEA）+（1.866×CA199）-（1.918×CYFRA21-1）,e为自然对数;当截点P为0.478时,模型的敏感度为85.1%,特异性为65.0%。该模型的AUC为0.734（95%CI:0.637～0.830）。结论:非吸烟、CEA和CA199高表达及CYFRA21-1低表达是NSCLC患者EGFR基因突变的独立预测因子。由此建立的数学预测模型准确度较高,可为EGFR基因突变的预测提供有利帮助。     

miR-221的研究进展

miRNA自1993年被发现以来,已逐渐成为调节mRNA稳定和翻译的研究热点.其在发育、凋亡、代谢以及人类疾病方面都起着不容忽视的作用.miR-221作为miRNA的一种,近年来不断有研究表明其在多种肿瘤细胞中过表达,已经成为特有的肿瘤标志物,涉及的靶基因包括p27 Kipl、p57Kipl、PTEN、c-kit以及最近报道的RECK、MGMT等.除此之外,miR-221与增生性血管疾病甚至是人类老龄化都有密切关系.     

VEGF、EGFR的表达与非小细胞肺癌生物学行为的相关性

目的:检测血管内皮生长因子（vascular endothelial factor,VEGF）和表皮生长因子（epidermal growth factor receptor,EGFR）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）中的表达,研究两者与NSCLC生物学行为之间的关系及两者之间的彼此关系。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-perosidase,SP)法检测VEGF、EGFR在112例NSCLC中的表达情况。结果:112例NSCLC中,VEGF、EGFR的阳性表达率分别为56.3%、69.6%。VEGF在NSCLC中的阳性表达与吸烟、分化程度、肿块大小、淋巴结转移及临床分期相关（P<0.05）,而与性别、年龄、病变部位、组织学类型无关（P>0.05）。EGFR的阳性表达与年龄、组织学类型、分化程度、肿块大小、淋巴结转移及临床分期相关（P<0.05）,而与性别、吸烟、病变部位无关（P>0.05）。VEGF、EGFR在NSCLC中的阳性表达呈正相关关系。结论:VEGF、EGFR在NSCLC的发生、发展过程中起重要作用,可以作为初步判断NSCLC预后的独立指标。     

miR-221和miR-222在胃癌中的表达及临床意义

[目的]探讨miR-221和miR-222在胃癌中的表达及与临床病理特征的关系。[方法]应用茎环RT-PCR方法检测32例胃癌及癌旁胃黏膜组织中miR-221和miR-222表达,分析miR-221和miR-222表达与胃癌临床病理指标的关系。[结果]胃癌组织miR-221和miR-222表达明显高于对应的正常胃黏膜组织（P〈0.05）,且胃癌与正常胃黏膜组织中miR-221和miR-222比值也有显著性差异（P=0.05）。miR-222表达与胃癌分化程度相关（P=0.046）;miR-221表达与淋巴结转移相关（P=0.013）。[结论]miR-221和miR-222在胃癌中表达明显上调是胃癌的重要标志,但两者在胃癌发生发展的不同阶段,可能发挥不同的效应。     

非小细胞肺癌少见的EGFR外显子21 L858R复合突变与单一突变的分析研究

目的 比较了少见EGFR外显子21 L858R复合突变与单一突变的临床特征及研究两组对TKI治疗的反应.方法 回顾性分析799例非小细胞肺癌患者,接受EGFR突变测试,443例患者发现有EGFR突变,其中22例(4.97％)有复合突变,详细描述6例EGFR外显子21 L858R复合突变患者和18例单一L858R突变患者的临床特征.结果 疾病控制率和客观反应率L858R复合突变组和单一突变组之间没有差别.log-rank test发现,两组总生存或无疾病进展生存方面比较无显著性差异.结论 复合突变组和单一突变组对EGFRTKIs反应和患者预后无显著差异.     

NSCLC原发肿瘤和转移瘤中EGFR基因突变、基因扩增及KRAS基因突变的Meta分析

目的：检测NSCLC原发肿瘤和转移瘤中EGFR基因突变、基因扩增及KRAS基因突变情况,为临床靶向治疗提供更多的循证医学证据。方法：计算机文献检索中英文数据库,收集国内外公开发表的有关EG-FR-TKI靶向治疗预测性生物标记的文献研究,采用Cochrane协作网提供Review Manager 5.2软件进行Meta分析。结果：筛选文献,共11篇纳入研究。Meta分析结果显示,EGFR基因突变组、基因扩增组及KRAS基因突变组RR值分别为0.86（0.65-1.15）、0.73（0.44-1.20）及1.39（0.95-2.03）。结论：联合检测EGFR基因和KRAS基因在原发肿瘤中的突变情况,可作为EGFR-TKIs一线治疗较好的预测性生物标记。检测转移瘤中EGFR基因的扩增情况能够帮助进一步筛查哪些患者对靶向治疗更加敏感。     

STAT5、VEGF 和 EGFR 在非小细胞肺癌中表达的相关研究

目的：检测信号转导与转录激活因子5（STATS）、血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子受体（EGFR）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况,探讨三者与NSCLC临床病理特征之间的关系。方法：采用免疫组化（sP）法检测62例NSCLC及30例癌旁正常对照组织中STAT5、VEGF和EGFR的表达情况。结果：STAT5、VEGF及EGFR在NSCLC组织中的阳性表达明显高于肺正常组织（P〈0．05）;STAT5阳性表达与NSCLC分化程度、有／无淋巴结转移及TNM分期无关（P〉0．05）,而与组织学类型有关（P〈0．05）;EGFR阳性表达与NSCLC组织学类型、分化程度无关（P〉0．05）,而与有／无淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05）;VEGF阳性表达与NSCLC组织学类型无关（P〉0．05）,而与分化程度、有／无淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05）。结论：STATS、VEGF及EGFR可能在肺癌的发生、侵袭和转移中起重要的作用,抑制其过度表达可望成为阻止肿瘤细胞的生长和转移的新靶点。     

N-glycosylated GPNMB ligand independently activates mutated EGFR signaling and promotes metastasis in NSCLC

Lung cancer is the leading cause of cancer-related death worldwide. As well as the identified role of epidermal growth factor receptor (EGFR), its association with driver mutations has improved the therapeutics for patients with lung cancer harboring EGFR mutations. These patients usually display shorter overall survival and a higher tendency to develop distant metastasis compared with those carrying the wild-type EGFR. Nevertheless, the way to control mutated EGFR signaling remains unclear. Here, we performed membrane proteomic analysis to determine potential components that may act with EGFR mutations to promote lung cancer malignancy. Expression of transmembrane glycoprotein non-metastatic melanoma protein B (GPNMB) was positively correlated with the status of mutated EGFR in non-small-cell lung cancer (NSCLC). This protein was not only overexpressed but also highly glycosylated in EGFR-mutated, especially EGFR-L858R mutated, NSCLC cells. Further examination showed that GPNMB could activate mutated EGFR without ligand stimulation and could bind to the C-terminus of EGFR, assist phosphorylation at Y845, turn on downstream STAT3 signaling, and promote cancer metastasis. Moreover, we also found that Asn134 (N134) glycosylation of GPNMB played a crucial role in this ligand-independent regulation. Depleting N134-glycosylation on GPNMB could dramatically inhibit binding of GPNMB to mutated EGFR, blocking its downstream signaling, and ultimately inhibiting cancer metastasis in NSCLC. Clarifying the role of N-glycosylated GPNMB in regulating the ligand-independent activation of mutated EGFR may soon give new insight into the development of novel therapeutics for NSCLC.