酸性成纤维细胞生长因子的浓度对其促血管内皮细胞增殖影响的实验研究

目的 :探讨不同浓度的酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)对体外培养的大鼠主动脉内皮细胞生长的影响。方法 :通过组织块培养法获取主动脉内皮细胞。将浓度分别为 5ng/ml ,10ng/ml ,2 0ng/ml的aFGF加入内皮细胞的培养液中作为实验组 (Ⅰ～Ⅲ组 ) ,不加aFGF的组作为对照组。分别在 2 4h、48h和 72h应用MTT法进行细胞计数。结果 :从大鼠主动脉成功地获取了内皮细胞。 3d内 ,实验组和对照组的主动脉内皮细胞都有不同程度的增殖 :培养 2 4h ,实验各组与对照组比较 ,P >0 0 5 ;48h和 72h ,Ⅱ、Ⅲ组与对照组以及与Ⅰ组两两比较 ,P <0 0 0 1;各时间段内 ,Ⅰ组与对照组 ,Ⅲ组与Ⅱ组比较 ,P >0 0 5。结论 :一定浓度的aFGF有非常明显的促进血管内皮细胞生长的作用 ,可能对缺血性心脏病的促血管形成治疗有较大的帮助     

高密度脂蛋白对严重烫伤大鼠脑组织的保护作用研究

目的：探讨高密度脂蛋白（HDL）对严重烫伤大鼠脑功能的保护作用。方法：120只Wistar大鼠随机分为对照组和实验组，每组各60只，均于背部造成30％TBSAⅢ度烫伤创面，实验组伤后立即经尾静脉注入HDL（80mg／kg），对照组及实验组于伤后30min经腹腔补充平衡盐溶液（50ml／kg）。检测对照组及实验组大鼠伤后脑组织病理学变化。结果：烧伤后大鼠对照组及实验组12h、24h、48h、72h脑组织中均可见小血管扩张出血，血管内皮细胞肿胀，以48h改变最为明显。实验组和对照组比较，脑组织病理变化无显著差异。结论：HDL对严重烫伤大鼠脑组织没有明显的保护作用，这可能与血脑屏障影响HDL的通透性有关。     

无血清培养促进脂肪干细胞向血管内皮细胞分化

背景：无血清培养对大鼠脂肪干细胞向血管内皮细胞诱导分化影响的报道甚少。目的：观察无血清培养大鼠脂肪干细胞后向血管内皮细胞诱导分化的情况。方法：采用酶消贴壁培养法获得雄性SD大鼠脂肪干细胞,传代培养至第3代。实验组细胞无血清培养24h,对照组用含体积分数10％胎牛血清的L-DMEM完全培养基培养。然后应用血管内皮细胞诱导培养基培养3周。结果与结论：大鼠脂肪干细胞经体外培养可呈多角形或梭形贴壁生长,并能稳定传代。传代后大鼠脂肪干细胞极低表达细胞表面标志CD31。大鼠脂肪干细胞定向血管内皮细胞诱导分化后细胞呈鹅卵石样,CD31阳性表达明显上升且实验组明显高于对照组。实验组诱导后大鼠脂肪干细胞能够吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白及在基质胶上形成2D小管样结构,其能力明显强于对照组。结果证实无血清培养可促进体外大鼠脂肪干细胞向血管内皮细胞诱导分化。     

运动训练对大鼠出血性脑损伤BDNF基因及其蛋白表达的影响

目的：观察运动训练对脑出血（ICH）大鼠脑源性神经营养因子（BDNF）及其蛋白表达的影响。方法：实验动物用健康雄性SD大鼠155只。其中120只随机分为3组：实验组（出血后运动n=40）、对照组（出血后不运动 n=40）、假手术组（无出血不运动n=40只）。各组又分为术后第7天、第14天、第21天、第28天共4个时相点，每个时相点5只用于免疫组化检测，5只用于RT-PCR检测。实验组大鼠于术后第72h开始跑笼训练，其余大鼠在标准笼内自由活动。另外35只随机分为脑出血后第6小时、 第12小时、 第24小时、 第48小时、第72小时，假手术和正常组，每组5只，用于免疫组化和RT-PCR检测。结果：①免疫组化结果：BDNF阳性细胞表达为细胞浆着棕黄色，阳性细胞主要分布于血肿周围和大脑皮质的神经元。脑出血后第12h BDNF曾一度升高，第72h基本恢复正常。实验组随运动训练时间延长表达有上调趋势，第28d达高峰，较对照组相比有差异有显著性（P<0.05），实验组和对照组与假手术组相比差异有显著性（P<0.05）。②RT-PCR 结果：实验组与对照组和假手术组的BDNFmRNA表达（第21—28d）相比差异有显著意义（P<0.05），但对照组与假手术组相比无显著性意义（P>0.05）。结论：BDNF参与了脑出血后神经可塑性的发生，运动训练可促进BDNF基因及其蛋白表达，从而改善神经功能。     

神经节苷脂对实验性颅脑外伤大鼠的保护作用及机制

摘要 目的：通过观察神经节苷脂（GM1）对实验性颅脑外伤大鼠大脑海马区神经巢蛋白（nestin）、神经生长因子（NGF）表达的影响,探讨GM1促进脑神经修复的可能机制。 方法：选择出生7d雄性SD大鼠180只,随机分为三组：空白组（假手术组）60只,无颅脑外伤;对照组60只（颅脑外伤,腹腔注射生理盐水）;实验组60只（颅脑外伤,腹腔注射GM1）。分别在术后第0、2、4、8、12、16、24小时不同时间点利用免疫组化方法检测大鼠大脑海马区nestin、NGF表达情况和整个实验过程中颅脑外伤动物模型造模情况。 结果：①实验组颅脑外伤造模后自然死亡率10%,明显低于对照组的25%（P＜0.05）;②实验组大鼠大脑海马区的nestin 第0—24小时表达与对照组比较无显著差异（P＞0.05）,实验组和对照组大鼠大脑海马区的nestin 第0—24小时表达明显高于空白组,差异有显著性（P＜0.05）;③实验组大鼠大脑海马区NGF的表达均明显高于对照组和空白组,差异有非常显著性（P＜0.01）,另外实验组大脑海马区NGF的表达随着时间的增加而调低,至第24小时接近空白组水平但仍高于对照组水平。 结论：预防性地使用GM1不仅可使颅脑外伤模型大鼠大脑海马区NGF表达明显增高,同时能降低颅脑外伤造模大鼠的死亡率,这可能是通过GM1提高实验性颅脑外伤大鼠的NGF表达并延长表达时间来实现的。     

中药血必净对多器官功能障碍综合征大鼠血管性血友病因子和环氧化酶-2及转化生长因子-β1表达的影响及意义

目的 多器官功能障碍综合征（MODS）是急危重症常见疾病,通过观察活血化瘀中药血必净对MODS大鼠的血管性血友病因子（vWF）、环氧化酶-2（COX-2）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响,探讨其对保护内皮细胞,改善凝血功能,减轻炎症反应的作用.方法 将144只SD大鼠（雄性）采用随机化原则分成3组,即假手术对照（对照组）组（48只）,MODS（模型组）组（48只）,MODS＋血必净（实验组）组（48只）,每组大鼠再次随机化分为4组,即12 h、24h、36 h和48 h组四个时间点,每组12只大鼠.每组于造模后处死相应时间点动物.取血清用酶联免疫吸附法测定大鼠vWF因子、COX-2因子、TGF-β1因子水平.数据结果采用SPSS 17.0统计软件进行统计学分析.结果 与对照组相比,模型组及实验组大鼠各时间点的vWF、COX-2和TGF-β1表达水平明显增加,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,实验组vWF表达水平于24h起明显下降,TGF-β1和COX-2表达水平在48h明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 中药血必净能明显保护MODS大鼠内皮细胞,改善MODS大鼠的凝血功能,减轻MODS大鼠的炎症反应.     

HCMV感染致内皮细胞粘附分子表达的变化

目的探讨HCMV感染对体外培养内皮细胞粘附分子表达的影响。方法应用双抗体夹心酶联免疫分析法及细胞ELISA方法检测体外培养人脐静脉血管内皮细胞在感染HCMV后,血管内皮细胞粘附因子(VCAM-1)及可溶性细胞间粘附因子1(sICAM-1)表达的变化。结果感染组细胞培养液sICAM-1 24小时和对照组相比明显升高达10.7±2.4μg/L,而正常对照为5.7±3.1μg/L,而后48小时、72小时均高于相应对照组(P<0.05)。VCAM-1在感染12小时开始表达升高,48小时和72小时和对照组相比明显增高(P<0.05)。结论体外情况下HCMV感染可上调内皮细胞粘附分子表达,这可能在HCMV致动脉粥样硬化的病理过程中发挥重要作用。     

新生儿头皮血肿与胆红素之间的关系分析

目的 分析新生儿头部血肿与胆红素升高之间的关系.方法 选择我院2023年1月至2023年4月经阴道分娩的新生儿为研究对象.其中有头部血肿的新生儿50例作为实验组,头部无血肿的新生儿50例作为对照组.统计分析两组新生儿24小时、48小时、72小时的胆红素以及胆红素峰值.结果 实验组新生儿24小时、48小时及72小时胆红素平均值明显高于对照组,且实验组新生儿胆红素峰值明显高于对照组(P<0.05).治疗后实验组新生儿胆红素水平及峰值均低于治疗前(P<0.05).结论 新生儿头皮血肿可间接影响胆红素的上升.     

高密度脂蛋白对严重烧伤大鼠肝组织保护的组织学观察

目的：探讨高密度脂蛋白（HDL）对严重烧伤大鼠肝脏的保护作用。方法：制作大鼠30％体表Ⅲ度烫伤模型，观察正常对照组（不作任何处理），烧伤组（烫伤后30min补充平衡溶液）及实验组（烫伤后立即静脉注入HDL）。伤后12、24、48、72h4个时间点的肝组织学变化和细胞间粘附分子1（ICAml）的表达。结果：（1）组织学观察：烫伤后各组大鼠肝细胞均有不同程度损伤，其中以烧伤组伤后24h最重，肝窦扩张充血，窦内炎细胞浸润，肝细胞变性，点灶性坏死，实验组24h肝组织学改变与烧伤组比较上述损伤明显改善。正常对照组肝组织结构基本正常。（2）ICAm-1免疫组化检测：正常对照组无表达，烧伤组与实验组ICAm-1平均表达率分别为81．6％（49／60）及36．6％（22／60），两组24h时段的表达率分别为86．6％（13／15）及20％（3／15），烧伤组表达强度明显高于实验组（P〈O．01），而两组各其他时段表达强度差异无显著性（P〉0．05）。结论：严重烧伤大鼠早期应用HDL对抑制肝细胞中ICAm-1的表达，减少肝细胞免疫损伤有良好的效果。     

透明质酸寡糖片段促进血管内皮细胞增殖的研究

目的：研究分离纯化的透明质酸寡糖片段（o-HA）对血管内皮细胞增殖的作用。方法：选用猪髂总动脉内皮细胞（PIEC）做为靶细胞，人胚肾293细胞做为对照细胞，应用本实验室分离纯化的o-HA（4-12-mer）配成一系列浓度（0、1、3、5、10及20μg／ml），加入靶细胞及对照细胞继续培养不同时间（0、6、12、24、48、72及96h），从细胞计数、细胞周期分布和单层血管内皮细胞损伤修复来观察血管内皮细胞的增殖情况。结果：10μg／mlo-HA作用于PIEC时能显著促进增殖，继续增加o-HA的浓度，增殖作用未随之增强；o-HA刺激培养12hPIEC即明显增生，至72h达高峰（P〈0．05）；oHA对PIEC损伤模型也有显著的促愈合作用。结论：o-HA能显著促进血管内皮细胞的增殖。     

激活素A在人皮肤微血管内皮细胞中的表达及对其增殖的抑制作用

目的将真核表达质粒pEGFP-AetivinA以脂质体介导转染人皮肤微血管内皮细胞,观察能否在细胞内表达,为进一步研究其作用奠定基础。方法pEGFP-AetivinA扩增和酶切鉴定;原代培养人皮肤微血管内皮细胞,以脂质体介导将真核表达质粒pEGFP-AetivinA转染该细胞,于一定时间内在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,MTT法检测基因转染对人皮肤微血管内皮细胞增殖的影响。结果转染后48h在荧光显微镜下人皮肤微血管内皮细胞可见发出绿色荧光,72h发出绿色荧光的细胞增多,强度增强;转染后48h与72h,转染组与对照组比较细胞增殖有明显的抑制,差异有显著性（P〈0．05）。结论脂质体可介导pEGFP-AetivinA转染人皮肤微血管内皮细胞,并在细胞内有较高表达,pEGFP-AetivinA基因转染抑制了人皮肤微血管内皮细胞的增殖。     

香烟提取物影响大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子的表达

背景：血管平滑肌细胞增殖是心血管系统组织变化的基础。目的：观察不同浓度香烟提取物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响。方法：取第3代大鼠主动脉平滑肌细胞,分别用体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物进行干预。结果与结论：实时定量RT-PCR结果显示,体积分数2.5%,5%,10%,20%的香烟提取物作用12h均可促进大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,以体积分数5%香烟提取物的作用最明显,且其刺激大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达在24h内呈时间依赖性。提示香烟提取物可上调大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA的表达,导致大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖。     

Zebularine对K562细胞的增殖及凋亡的影响

[目的]探讨药物zebularine对白血病细胞株K562增殖及凋亡的影响.[方法]选择白血病细胞株K562,试验分为对照组(未加入zebularine组)、实验组 (zebularine终浓度分别为 250 μM,500 μM)组3个组.MTT试剂盒检测12 h、24 h、36 h、48 h和 72 h后K562细胞...     

Bovine aortic endothelial cells elaborate an inhibitor of the generation of lipopolysaccharide-stimulated human blood monocyte procoagulant activity.

We examined the effect of bovine aortic endothelial cell culture supernatants upon the generation of procoagulant activity by human blood monocytes. Confluent endothelial monolayers were cultured for up to 96 h. At timed intervals, culture supernatants were collected and incubated for 5 h with lipopolysaccharide-stimulated human peripheral blood mononuclear cells. The procoagulant activity of mononuclear cell lysates was determined in a one-stage clotting assay. In five experiments, procoagulant activity with culture supernatant (time 0) was 2,294 +/- 761 U/ml (mean +/- SEM). Culture supernatants from endothelial cells incubated for 24-96 h strongly inhibited mononuclear cell generation of procoagulant activity. Indomethacin (10 microM) added to endothelial cells delayed the appearance of procoagulant inhibitor for 72 h. Bovine aortic smooth muscle cell culture supernatants did not inhibit procoagulant activity. The inhibitor was heat stable, effective at 1:50 dilution, soluble, and acid sensitive, with a molecular weight of less than 1,500. Further studies on subpopulations of mononuclear cells demonstrated that endothelial inhibitor selectively decreased the generation of monocyte procoagulant activity and interfered with T lymphocyte amplification of monocyte production of procoagulant activity. Thus, we have demonstrated that endothelial cells elaborate a potent inhibitor of monocyte procoagulant activity.     

平瘤康方剂对C6胶质瘤细胞增殖的抑制作用

目的探讨中药方剂平瘤康含药血清对体外培养的C6胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法2.5%、5%、10%和20%平瘤康含药血清处理体外培养的C6胶质瘤细胞24h、48h和72h后,应用MTT比色法检测C6胶质瘤细胞增殖;PI染色后,应用流式细胞仪观测细胞周期时相。结果10%和20%的含药血清能抑制C6胶质瘤细胞的增殖;10%和20%的含药血清处理C6细胞48h、72h后,S期细胞百分率下降,呈剂量依赖性。结论平瘤康含药血清可能通过阻滞细胞周期而抑制胶质瘤细胞增殖。     

芹菜素对胶质瘤细胞增殖抑制作用的研究

目的 探讨芹菜素对人胶质瘤细胞U251的增殖抑制作用.方法 用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,检测不同浓度(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)的芹菜素作用不同时间(24h、48h、72h),对人胶质瘤细胞株U251生长的影响.结果 低剂量的芹菜素(20μmol/L)无明显抑制胶质瘤U251细胞增殖的作用,而中剂量(40μmol/L)及高剂量的芹菜素(80μmol/L)能抑制胶质瘤U251细胞增殖,且抑制作用呈剂量和时间依赖性.结论 芹菜素有抑制人胶质瘤细胞U251增殖的作用.     

骨髓间质干细胞培养液上清对肝星状细胞增殖及纤维化的影响

背景：利用骨髓间质干细胞治疗肝纤维化的研究取得了一定的效果,但研究其培养液上清治疗肝纤维化的并不多。目的：观察大鼠骨髓间质干细胞培养液上清抑制肝星状细胞增殖及活化的可能性。方法：实验组1,2将骨髓间质干细胞培养液上清加入6孔板内处理肝星状细胞,分别为2mL培养液上清/孔,1mL培养液上清＋1mL完全培养基/孔;对照组为肝星状细胞单独培养（2mL完全培养基/孔）。流式细胞仪分析细胞周期并观察抑制效果,RT-PCR检测肝星状细胞内转化生长因子β、金属蛋白酶抑制因子2、胶原蛋白ⅠmRNA的表达情况。结果与结论：加入骨髓间质干细胞培养液上清后,实验组1中的肝星状细胞增殖与对照组相比受到抑制,且抑制率随处理时间的延长而增多（处理72h〉处理48h〉处理24h,P〈0.05）;实验组的肝星状细胞内转化生长因子β、金属蛋白酶抑制因子2、胶原蛋白ⅠmRNA的表达较对照组均下调,且下调程度随培养液上清增多而增大（实验组1〉实验组2〉对照组）。     

酸性成纤维细胞生长因子对大鼠肠缺血再灌注损伤影响的研究

目的　观察外源性酸性成纤维细胞生长因子 ( a FGF)对肠缺血再灌注损伤肠道保护效应及与组织损伤修复的关系。方法　采用肠系膜上动脉 ( SMA)夹闭 4 5 m in后松夹方法制备肠缺血再灌注损伤动物模型。将 Wistar大鼠随机分为假手术组、单纯肠缺血再灌注组及 a FGF治疗组。假手术组分离 SMA但不夹闭 ,4 5 min后取血并活杀动物 ;其余两组分别松夹形成血流再灌注 ,缺血再灌注组从尾静脉注射 0 .15 ml生理盐水 ,a FGF治疗组则从尾静脉给予 0 .15 m l( 4 g) a FGF。于再灌注后 0 .5、1、2、6、12和 2 4 h取血检测血浆D乳酸水平 ;活杀动物后取小肠组织行苏木素伊红 ( HE)染色 ,光镜下观察组织病理形态学改变 ;观察两组大鼠肠缺血再灌注损伤后不同时间点的存活率。结果　与肠缺血再灌注组各时间点比较 ,a FGF治疗组动物存活率均高于对照组 ,以 2 4 h最为显著 ,有统计学意义 ( P<0 .0 5 ) ;血浆 D 乳酸水平于再灌注后 1h则明显低于缺血再灌注组 ,至 2 4 h仍呈降低趋势 ( P均 <0 .0 5 ) ;小肠黏膜病理形态学改变较缺血再灌注组轻。结论　外源性 a FGF对肠缺血再灌注损伤有保护作用 ,其机制可能与体内诱导细胞促分裂效应与非促分裂激素样活性有关     

基底膜蛋白多糖对成骨细胞增殖及BMP-2分泌影响

目的研究基底膜蛋白多糖对成骨细胞增殖及其分泌骨形态发生蛋白2（BMP-2）的影响。方法体外培养大鼠成骨细胞,随机分为基底膜蛋白多糖抑制剂组（A组）、空白对照组（B组）、低氧状态下基底膜蛋白多糖抑制剂组（C组）、低氧状态下对照组（D组）。各组分别进行相应处理,培养24、48、72、96h。采用细胞增殖检测方法（CCK-8法）和ELISA法,检测并比较各组成骨细胞增殖和分泌BMP-2的变化。结果培养24、48h,A组与B组比较、C组与D组比较成骨细胞增殖活性均降低,差异有显著性（t=4.51~18.04,P〈0.05）;培养72h,各组差异无显著性（P〉0.05）。培养96h内,A组与B组比较、C组与D组比较成骨细胞分泌BMP-2降低,差异有显著性（t=6.61~30.50,P〈0.05）。结论在成骨细胞增殖早期基底膜蛋白多糖对成骨细胞增殖活性有显著影响,并对成骨细胞分泌BMP-2有促进作用。     

C肽对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的:探讨C肽对体外高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1生长的影响。方法:对照组仅含低糖MEM培养液;实验组:高糖MEM培养液含不同浓度的C肽,分别培养24h,48h,72h,用四甲基偶氮唑盐光吸收法(MTT)检测细胞系HBZY-1的增殖情况。结果:高糖诱导大鼠系膜细胞系HBZY-1的增殖;不同浓度的C肽对高糖诱导的细胞系HBZY-1增殖影响程度不同。10,50,300nmol/LC肽作用24h可明显抑制细胞增殖(P<0.05),而0.5,900nmol/L作用不显著。结论:C肽可抑制高糖诱导的大鼠系膜细胞系HBZY-1的增殖;呈时间、剂量依赖效应。C肽可能对糖尿病肾病的防治起到有益的作用。