美国NCCLS 2002年版抗生素药敏试验操作标准更新内容

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 2 0 0 2年出版的抗生素药敏试验操作标准Ｍ1 0 0 Ｓ1 2文件[1 ] ,变更内容归纳如下。一、仅有“敏感”判定标准的细菌和抗生素的总评论迄今为止 ,一些细菌对某些抗生素尚未发现“中介度”和“耐药”菌株 ,因此在标准中只有“敏感”的判定折点 ,而未设定“中介度”和“耐药”的判定折点。如果临床遇到如下所列的细菌与相应抗生素药敏试验结果不敏感时 ,应当重复菌株的鉴定和药敏结果 ,同时将菌株送往参考实验室 ,用ＮＣＣＬＳ参考稀释法确认结果。仅有“敏感”判定标准的细菌和抗生素及判定折点…     

肿瘤患者酵母样真菌的测定及药敏试验

酵母样真菌已成为医院内感染的主要病原菌之一。体外药敏试验对合理使用抗真菌药物、发现耐药菌株等有重要意义。本实验室对临床检测出的 47株酵母样真菌进行了药敏测定 ,并对检测的临床意义做了初步评价 ,现报告如下。1　材料和方法1 1　菌株的来源及鉴定方法　本实验室自 1998年 10月至2 0 0 0年 10月 ,从各类临床标本分离出白色念珠菌 2 1株、热带念株菌 15株、光滑念株菌 8株、新型隐球菌 2株 ,红色酵母菌 1株。采用ＡＰＩ2 0ＣＡＵＸ鉴定上述菌株。1 2　标准菌株　白色念珠菌ＡＴＣＣ 90 0 2 8,购自吉林省临床检验中心。1 3　Ｅｔｅｓ…     

86株酵母菌鉴定及药敏结果分析

抗生素、免疫抑制剂和激素的广泛使用 ,导致酵母菌引起的医院感染率不断上升 ,且随着抗真菌药物的使用 ,这类细菌的耐药性也日趋普遍。现将本院 2 0 0 0年 9月～ 2 0 0 1年 6月从各类标本分离的 86株酵母菌鉴定及药敏结果报道如下。材料与方法1　菌株来源　 86株酵母菌来自本院 2 0 0 0年 9月～2 0 0 1年 6月各类临床标本 ,包括痰 48份 ,尿液 1 3份 ,各种分泌物 2 1份 ,血 2份 ,粪便 2份。2　分离鉴定　标本接种于科玛嘉念珠菌显色培养基 ,30℃培养 2 4～ 48h,可直接根据菌落形态、颜色初步判断 [1]。再进行厚膜孢子、芽管产生试验 ,同时用 …     

阴沟肠杆菌高活性β内酰胺酶检测与相关耐药表型分析

阴沟肠杆菌是医院感染的重要病原菌。我们对我院临床分离的部分阴沟肠杆菌进行ＡｍｐＣ酶和超广谱 β内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)的检测 ,并结合临床药敏试验 ,进行耐药表型及耐药机制分析 ,为合理使用药物提供参考依据。一、材料与方法1 菌株来源 :1 999年 1月至 2 0 0 1年 5月从住院患者各类标本中分离的阴沟肠杆菌 ,选择其中头孢西丁小于等于中介或 /和三代头孢 (头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟 )两种以上中介或耐药的 1 38株菌作为试验菌。大肠埃希菌ＡＴＣＣ2 592 2作为三维试验指示菌。试验质控株有肺炎克雷伯菌ＡＴＣＣ70 0 60 3(ＳＨＶ 1…     

产孢丝状真菌NCCLS药敏试验方法的应用

美国国家临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)于 1997年推出了关于酵母菌的液体培养基稀释 (多量法与微量法 )抗真菌药敏试验方案Ｍ2 7 Ａ ,建立了被众多实验室认同的重复性好、准确性较高的标准化体外药敏试验方法。但由于丝状真菌本身的诸多特点如产孢条件难以控制、接种量难以精确量化、孵育时间长等 ,使其试验方法标准化具有一定难度。近年来ＮＣＣＬＳ分会成员以Ｍ2 7 Ａ的微量法为基础进行了多中心广泛深入研究[1 ,2 ] ,于 1998年提出了《产孢丝状真菌的液基稀释抗真菌药敏试验参考方案》(Ｍ38 Ｐ)。该方案在提出了一些建设性意见的…     

66株阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶的检测

我们从 6 6株阴沟肠杆菌检出产超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬ) 8株 ,并对头孢噻肟、泰能等 8种抗生素作药敏试验 ,报告如下。1　材料与方法1.1　菌株　 6 6株阴沟肠杆菌从我院临床送检的 875份标本中分离得到 ,常规分离按《全国临床检验操作规程》 ,采用ＡＰＩ2 0Ｅ系统手工法鉴定。1.2　药敏纸片　头孢他啶 (ＣＡＺ) ,头孢他啶 /棒酸 ;头孢噻肟(ＣＴＸ) ,头孢噻肟 /棒酸 ,泰能安灭菌均为Ｏｘｏｉｄ产品。质控菌株ＡＴＣＣ 2 5 92 2大肠埃希菌及ＡＴＣＣ 70 0 6 0 3肺炎克雷伯菌。1.3　方法　药敏试验Ｋ Ｂ法。ＥＳＢＬ的检测程序为纸片扩…     

46株酵母菌的分离鉴定及药敏结果分析

目前,酵母菌的感染率不断上升,已成为医院感染的主要病原之一。但国内对酵母菌的鉴定及药敏试验在方法、材料上尚存在许多不足。1998年1月我科引进了API-20CAUX酵母菌鉴定系统及ATB-Fungus酵母菌药敏系统(法国Bio-Mérieux)。现报告46株酵母菌的鉴定和药敏试验结果。材料和方法一、样品来源　均为我院1998年1月至1998年12月的病人中尿、分泌物、粪便、咽拭子、痰、血液、脑脊液等1658份标本。二、标准质控菌株　近平滑念珠菌ATCC22019、克柔念珠菌ATCC6258(购自四川省临床检验中心)。三、方法　API半自动鉴定系统、API-20CAUX…     

采用NCCLS M27-A方案微量法检测念珠菌对抗真菌药物的敏感性

为了解我国临床分离菌株对常用抗真菌药物的敏感性、观察氟康唑耐药株对伊曲康唑和酮康唑是否存在交叉耐药[1] ,本试验采用美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)1997年公布的Ｍ2 7 Ａ方案的微量稀释法测定了 6种常用抗真菌药物对 80株念珠菌的ＭＩＣ值。一、材料与方法1.试验菌株 :本试验所采用的菌株及其来源如下 :受试菌株为 80株念珠菌 ,包括 :白念珠菌 (Ｃａｎｄｉｄａａｌｂｉｃａｎｓ) 4 7株(临床分离株 40株、ＡＴＣＣ模式株 2株和 5株氟康唑耐药株 )、近平滑念珠菌 (Ｃ .ｐａｒａｐｓｉｌｏｓｉｓ) 9株 (临床分离株 7株、ＡＴＣ…     

318株呼吸道真菌感染分析

近年来 ,深部真菌感染日益严重 ,特别是呼吸道真菌感染尤为突出。本文对一年来 ,西南医院检验科细菌室的呼吸道培养标本进行回顾分析 ,现将结果报告如下。1　材料和方法1 1　标本　为 2 0 0 0年 7月至 2 0 0 1年 7月的呼吸道痰合格标本[1] 、咽拭子、口腔分泌物。1 2　试剂　ＡＰＩ 2 0ＣＡＵＸ生化鉴定板和ＡＴＢＦＵＮＧＵＳ药敏板 ,由法国梅里埃公司出品。药敏板含有 6种抗真菌药即 5 氟胞嘧啶 (5 ＦＣ)、两性霉素Ｂ(ＡＭＢ)、制霉菌素 (ＮＹＳ)、咪康唑(ＭＩＺ)、益康唑 (ＥＣ0 )、酮康唑 (ＫＥＴ)。1 3　方法　取合格标本 ,按 [全国…     

结核分枝杆菌快速检测仪检测非结核分枝杆菌

我们用结核分枝杆菌快速检测仪 (ＢＡＣＴＥＣ) ,对 2 0 1株抗酸杆菌做 ρ 硝基 α 乙酰氨基 β 羟基苯丙酮 (ＮＡＰ)试验 ,初选非结核分枝杆菌 (ＮＴＭ ) ,并以常规法对照。另用ＢＡＣＴＥＣ做 11株ＮＴＭ药敏试验 ,现报告如下。一、材料和方法1 标本来源 :2 0 1株抗酸杆菌获自我院 1996年 3月～2 0 0 1年 2月结核科、内科病人。2 试验材料 :(1)ＢＡＣＴＥＣ检测仪、12Ｂ培养瓶、ＮＡＰ培养瓶和药物纯品 [利福平 (ＲＦＰ)、链霉素 (ＳＭ )、乙胺丁醇(ＥＭＢ)、异烟肼 (ＩＮＨ) ]均购自美国Ｂ Ｄ公司。 (2 )改良罗氏培养基、对硝基苯甲酸…     

204株肠球菌鉴定及其药敏试验研究

由于肠球菌对广谱抗菌药物耐药 ,对高浓度氨基糖甙类抗生素及万古霉素的耐药性的流行 ,医院感染率呈逐年上升趋势。笔者根据马俊春等[1] 的鉴定肠球菌的方法 ,并对其耐药性进行分析。菌株 :从临床分离肠球菌 2 0 4株 ,其中从尿液标本分离10 0株 ,咽拭子 2 7株 ,手术伤口分泌物 2 5株 ,腹腔积液 14株 ,胆汁 13株 ,非手术伤口分泌物 9株 ,宫颈、阴道分泌物 7株 ,胸腔积液 4株 ,血液 3株 ,脑脊液 2株。标准菌株为ＡＴＣＣ2 5 92 3(金黄色葡萄球菌 )、ＡＴＣＣ2 92 12 (粪肠球菌 )购自卫生部临床检验中心。药敏试验 :采用Ｍ Ｈ琼脂平板培养基 ,…     

显色培养法与形态学方法结合鉴定临床常见酵母菌

我们用常规鉴定法与CHROMagar念珠菌显色方法鉴定了临床标本中常见的 16种酵母菌 ,选择并结合两种方法的优点 ,探索一个简便、快速、准确的鉴定临床酵母菌的方法。1　材料和方法1 1　菌株来源　所试菌株为标准菌 (11种 )或本实验室从临床标本中分离的菌株 (5种 )。临床标本分离菌株经芽管试验、厚膜孢子或假菌丝观察等形态学以及生化反应鉴定(VITEKAMSYBC卡或 2 0CAUX系统 )。1 2　培养基　CHROMagar念珠菌显色培养基、玉米 吐温 80培养基。1 3　仪器　NikonMicrophot FX多功能显微镜。1 4　鉴定方法　将所试菌株分别接种于CHR…     

简介美国临床实验室标准化委员会最新推荐厌氧菌药敏试验方法及评价

由于厌氧菌的分离、鉴定和药敏试验技术较复杂 ,并受试验成本高等条件限制[1] ,国内很多实验室不能开展厌氧菌鉴定和药敏试验工作[2 7] 。即使是国外 ,多数临床医生治疗的依据 ,也是凭经验和文献资料。然而 ,近 10年来 ,厌氧菌的耐药率不断增高。本讲将探讨常见厌氧菌对常用于治疗厌氧菌抗生素的耐药机制 ;简要介绍美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ) 2 0 0 1年最新推荐的药敏试验方法 ,以及对 2种适合常规使用的药敏方法的评价 ,供临床和实验室参考。一、厌氧菌耐药机制厌氧菌耐药机制的形成主要是产酶 ;细胞壁通透性改变 ,使抗生素…     

微量法检测曲霉对六种抗真菌药物的敏感性

１９９７年美国国家临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）公布了Ｍ２７Ａ方案,即酵母菌的液体培养基稀释法抗真菌药物敏感试验标准方案,表明酵母菌的体外药敏试验已趋于标准化,而丝状真菌药敏试验还在不断发展。我们以此方案中的微量法为基础,探讨并建立曲霉的标准化药敏试验方法。一、材料和方法１－试验菌株来源：受试菌株３１株：烟曲霉１４株、黄曲霉８株、黑曲霉５株、构巢曲霉３株和土曲霉２株。试验菌株由临床株和环境株组成,主要由北京医科大学第一医院、中国科学院微生物研究所等提供。２－抗真菌药物包括：５氟胞嘧啶（５…     

应用氟康唑对丹麦ROSCO公司与美国临床实验室标准化委员会酵母菌纸片扩散法药敏试验比较分析

目的评价丹麦ROSCO酵母菌纸片扩散法药敏试验及其判定标准在我院应用的可行性。方法以美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）酵母菌纸片扩散法药敏试验为参照，采用丹麦ROSCO纸片扩散法药敏试验检测氟康唑对80株临床分离酵母菌的药敏试验。结果ROSCO纸片扩散法药敏试验选取基本判读标准，氟康唑药敏结果与NCCLS结果差异无统计学意义（P〉0．05）；而ROSCO选取严格判读标准，白念珠菌的氟康唑药敏结果与NCCLS结果存在差异，热带念珠菌结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论丹麦ROSCO酵母菌纸片扩散法药敏试验基本判读标准结果与美国NCCLS判读结果相符合，适合我院临床菌株的结果判读；而对于严重系统感染菌株所选取的严格判读标准，不适合白念珠菌的结果判读。     

简介美国NCCLS抗生素药敏试验操作标准(2001年版)变更内容

美国临床实验室标准化委员会 (ＮＣＣＬＳ)在 2 0 0 0年召开的抗生素药物敏感试验委员会分会上 ,对 1999年以及以前出版的需氧菌的纸片扩散法 (Ｍ2 )和稀释法 (Ｍ7)药敏试验文件、表格等部分内容作了重要变更 ,更改内容编入 2 0 0 1年 1月出版的第 11版信息增刊 (Ｍ10 0 Ｓ11) [1] 。在Ｍ2文件中有新增的信息 2 2处 ,更改 9处和删除 1处 ;Ｍ7文件中有新增信息 2 2处 ,更改 6处和删除 1处。现将Ｍ10 0 Ｓ11文件中变更之处摘录整理 ,供读者参考。Ａ组主要试验及报告的抗生素 (Ａ组 ) ;Ｂ组主要试验及选择性报告的抗生素 (Ｂ组 ) ;Ｃ组补充试…     

对血培养阳性标本直接检测的评估

菌血症和败血症是临床上严重危及患者生命的疾病 ,进展迅速、死亡率较高[1 ] 。快速准确地检测出血液中细菌进行鉴定和药敏试验 ,是临床有效诊断和治疗的关键。对此 ,我们对ＢＡＣＴＥＣ90 50全自动血培养仪检出阳性瓶培养液 ,直接用于美国德灵公司ＷａｌｋＡｗａｙ40型自动鉴定系统上机进行药敏试验。报告如下。1 标本来源 :自 2 0 0 0年 1 1月～ 2 0 0 1年 8月本院急诊及各病区发热有全身感染症状患者的 30 2份血标本。2 血培养瓶 :一次性全封闭树脂血培养瓶 ,采用ＢＤ公司ＢＡＣＴＥＣ90 50系统培养仪 ;细菌鉴定和药敏试验鉴定板 :采用…     

耐万古霉素肠球菌表型检测及基因分析

肠球菌可引起菌血症、心内膜炎以及泌尿系、腹腔和伤口感染 ,并已成为医院感染的主要病原菌[1] 。由于产 β 内酰胺酶的肠球菌及耐高浓度氨基糖苷类抗生素肠球菌 ,特别是耐万古霉素的肠球菌 (ＶＲＥ)的出现 ,给临床治疗造成了极大的困难。本研究比较ＶＲＥ常见的几种分型结果 ,了解本院ＶＲＥ的流行状况 ,为临床治疗提供依据。一、材料与方法1 菌株 :(1)试验用临床菌株 :收集本院 1999年 9月～2 0 0 0年 4月血、脓液、尿、痰、肛周分泌物、胆汁、创面、前列腺液、腹水等临床标本中分离的 2 0 0株肠球菌。 (2 )标准菌株 :ＡＴＣＣ2 92 12 (粪…     

三种方法检测酵母菌对氟康唑药敏试验一致性的研究

目的:对比研究3种酵母菌体外药敏试验在测定酵母菌对氟康唑药物敏感的可靠性及实用性。方法:以美国实验室标准协会(CLSI)酵母菌纸片扩散法药敏试验(M44-A)为参照,采用丹麦ROSCO纸片扩散法、法国梅里埃ATB FUNGUS3药敏试验,检测82株临床分离的酵母菌对氟康唑的药物敏感度。采用WHONET-5.4和SPSS13.0软件对结果进行分析,比较ROSCO纸片扩散法、ATB FUNGUS3与M44-A结果间的一致性。结果:ROSCO纸片扩散法检测82株临床分离酵母菌对氟康唑的药敏结果与CLSI M44-A检测结果间差异无统计学意义(P>0.05),一致率为80.5%;ATBFUNGUS3检测的药敏结果与CLSIM44-A检测结果间差异有统计学意义(P<0.01),一致率为74.4%,其中光滑假丝酵母菌和白假丝酵母菌的检测结果与参照差异较大。结论:在检测酵母菌对氟康唑体外药物敏感度方面,ROSCO纸片扩散法与M44-A的一致性较好;对部分菌株,则需进一步应用微量肉汤稀释法M27-A2检测,以确定其最低抑菌浓度(MIC)。     

慢性特发性血小板减少性紫癜患者血清心磷脂抗体阳性临床分析

本院 1996年 1月至 2 0 0 0年 5月收治慢性特发性血小板减少性紫癜 (ＣＩＴＰ)共 60例 ,其中血清心磷脂抗体 (ＡＣＡ)阳性者 13例 ,占 2 1.67% ,现报道如下。1　临床资料1.1　一般资料　ＣＩＴＰ患者均符合文献诊断标准[1] 。男性 8例 ,女性 52例 ,平均年龄 4 5.57( 17～ 78)岁 ,初治者 56例 ,复治者 4例。其中ＡＣＡ阳性患者 13例 ,占 2 1.67% ;男性 3例 ,女性 10例 ,平均年龄 4 2 .52 ( 2 8～ 4 5)岁。1.2　检验方法　ＡＣＡ酶联免疫吸附试验检测试剂盒由南京军区总医院全军医学检验中心研制生产。ＡＣＡ阳性确定必须至少间隔 2个月 ,且两…