NT-3对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡及脊髓损伤修复的作用

【目的】研究神经营养素-3（NT-3）对大鼠皮质脊髓束横断后神经细胞凋亡及脊髓损伤修复的影响及意义。【方法】健康Sprague-Dawley大鼠100只,分为损伤对照组（C组）和损伤NT_3注射组（NT-3组）。各组内分别行BBB评分、神经元中丝蛋白（NF）染色及RT—PCR检测Bax和Bcl-2基因表达的变化。【结果】①损伤后C组和NT-3组Bax及Bcl-2基因转录水平升高;②NT-3组与损伤对照组相比Bax基因转录水平下降而Bcl-2基因转录水平升高;③NT-3组NF平均灰度值小于C组。【结论】NT-3可能通过影响凋亡基因Bax和Bcl-2表达的变化对脊髓损伤起保护作用及修复促进作用。     

脊髓损伤患者神经营养因子、炎症及血清Bcl-2/Bax表达的变化

目的探讨脊髓损伤患 者血清神经营养因子、炎症因子及B淋巴细胞瘤-2基因(Becl-2)/Bel-2相关的X基因( Bax)相关蛋白表达水平的变化及临床意义。方法选择 2016年4月至2019年6月南京市第一医院就诊的48例脊髓损伤患者作为研究对象,根据神经功能分级将其分为完全损伤组(n=21)和不完全损伤组(n=27),另收集同期体检健康者30例作为健康人对照组。采用ELISA法检测并比较各组患者在脊髓损伤1.3.7 d后血清神经营养因子、炎症因子IL-6、TNF-a以及血清Bel-2 、Bax表达水平的变化。结果3 组受试者在脊髓损伤1.3.7 d后血清脑源性神经营养因子( BDNF)、神经营养因子3(NT-3)、Bcl-2的表达水平依次降低,而血清Bax的表达水平逐渐升高,且血清BDNF、NT-3、NT-4、,Bcl-2在完全损伤组、不完全损伤组以及健康人对照组中的表达水平依次下降,而血清Bax在3组中的表达水平依次升高(P<0.05)。完全损伤组、不完全损伤组患者血清IL-6、TNF-a水平在脊髓损伤1d后升高,脊髓损伤3d后达到峰值(P<0.05)。结论急性脊髓损伤 患者血清神经营养因子、炎症因子及Bax/Bcl-2水平均显著升高,其水平变化或可作为临床判断脊髓损伤程度的指标。     

经皮电刺激对脊髓损伤后GFAP和NT-3表达的影响

目的研究经皮电刺激对脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经营养因子-3(NT-3)表达的影响,探讨经皮电刺激对治疗脊髓损伤的意义。方法 60只SD大鼠随机分为3组(每组20只):电刺激组、损伤对照组及正常对照组。电刺激组及损伤对照组采用Allen’s打击致伤方法建立大鼠脊髓损伤模型,建模后损伤对照组只予常规护理,电刺激组给予电刺激治疗:取夹脊穴和足三里穴进行经皮电刺激,每次30min,每天1次。正常对照组不予任何处理。电刺激组及损伤对照组按时间段(第1、3、5、7天)进行灌注取材。标本脱水石蜡包埋,制作石蜡切片,进行免疫组化染色,然后采用Olympus数码照像机采集图像进行图像分析,观察与分析GFAP与NT-3的表达。运动功能评分采用BBB评分法。结果从脊髓损伤后3d开始大鼠后肢功能的恢复电刺激组明显优于损伤对照组(P<0.05)。电刺激组与损伤对照组脊髓组织内GFAP的表达与正常对照组相比前3d无明显变化(P>0.05),此后逐渐增加,脊髓损伤后5d达到高峰,7d已低于5d(P<0.05)。5d和7dGFAP的表达电刺激组明显低于损伤对照组(P均<0.05)。大鼠NT-3免疫阳性细胞数在电刺激组和损伤对照组均随着时间的延长持续增加,分别于7d和5d时达到峰值,但电刺激组大鼠NT-3阳性细胞数在5d和7d均比损伤对照组增加显著(P均<0.05)。结论经皮电刺激可以抑制脊髓损伤后大鼠GFAP的表达,促进NT-3的表达,抑制星形胶质细胞的增殖,可能对大鼠脊髓损伤后神经元的修复、重建及相关功能的恢复有促进作用。     

脊髓损伤后早期应用FK506抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达及细胞凋亡的实验研究

目的:观察FK506对脊髓损伤大鼠后肢运动功能及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达和细胞凋亡的影响。方法:成年雄性Wistar大鼠60只,采用Allen′s法建立脊髓损伤模型后,随机分为应用FK506治疗组(n=30)和应用生理盐水对照组(n=30),于伤后不同时间点取材,行苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组织化学染色检测caspase-3的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡,同时以BBB评分法评价后肢运动功能恢复情况。结果:HE染色显示治疗组脊髓组织病理学改变明显轻于对照组;治疗组和对照组均存在caspase-3的表达和神经细胞凋亡,两者都于伤后24h达高峰,但治疗组较对照组明显减少(P<0.01,P<0.05);治疗组后肢运动功能评分显著优于对照组(P<0.05)。结论:FK506能抑制脊髓损伤后caspase-3的表达和神经细胞凋亡,从而减轻继发性损害,促进脊髓功能恢复。     

神经营养因子-3质粒转染失神经肌肉的表达

目的:观察外源性神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)基因直接转染失神经肌肉的表达及治疗效果。方法:SD大鼠40只,制成腓肠肌失神经支配模型。实验组术后胖肠肌内注射人NT-3质粒10μl(1μg/μl),对照组注射等量生理盐水10μl/d,不同时间点取材采用免疫组化检测蛋白的表达,并进行肌湿重、肌纤维横截面积和运动终板检测。结果:实验组2d后肌细胞出现外源性NT-3免疫组化染色阳性,7 d时达到高峰,14 d和 28 d时有所下降,但与 2 d相比,仍维持在较高水平。而对照组免疫组化染色结果为阴性。实验组与对照组检测指标比较差异有显著性。结论:NT-3基因直接转染可在肌细胞内表达蛋白,为失神经肌肉萎缩的基因治疗提供了初步的理论和实验依据。     

阿伐他汀调节大鼠脊髓损伤后白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3基因的表达

目的:观察阿伐他汀对脊髓损伤后SD大鼠白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3基因表达的影响。方法:实验于2005-05/09在华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科实验室完成。选择健康成年雌性SD大鼠78只,随机数字表法分为假手术组6只,阿伐他汀治疗组36只和生理盐水对照组36只,后两组每组又分损伤后1,4,12h,1,3,7d6个时相点,每个时相点6只。阿伐他汀治疗组于损伤前7d开始用阿伐他汀加生理盐水经口给药(5mg/kg,1次/d)直至处死,生理盐水对照组用相同体积的生理盐水代替。采用Allen打击法造成大鼠脊髓损伤,于术后不同时相点取伤段脊髓组织,用反转录-聚合酶链反应分析脊髓受损部位白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达。结果:纳入动物78只,均进入结果分析。①阿伐他汀治疗组大鼠脊髓损伤后4h白细胞介素1βmRNA表达(A)低于生理盐水对照组(分别为0.480±0.100,2.610±0.330,P<0.01)。②阿伐他汀治疗组大鼠脊髓损伤后1d半胱氨酸蛋白酶3mRNA表达(A)低于生理盐水对照组(分别为0.589±0.056,0.676±0.072,P<0.05)。结论:阿伐他汀能降低大鼠脊髓损伤后炎性细胞因子白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3的基因表达。     

电针对急性脊髓损伤大鼠白细胞介素-1β表达变化的影响

目的 观察电针治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织白细胞介素(IL)-1β表达变化的影响,探究其与脊髓损伤后炎症反应和细胞凋亡的关系.方法 选用2月龄SD大鼠80只.随机将大鼠分为对照组和电针组.采用Allen法建立大鼠急性SCI模型,用免疫组化方法检测两组大鼠脊髓神经元胞浆IL-1β及胱氨酸酶(caspase-3)变化,用比色法检测其脊髓组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,用原位末端标记法(TUNEL)检测两组大鼠脊髓神经元和胶质细胞凋亡.结果 治疗结束时,与对照组相比,电针组IL-1β和caspase-3阳性细胞数明显减少(P<0.01),IL-1β和caspase-3阳性细胞的平均灰度值明显提高(P<0.01);MDA水平明显降低(P<0.01),SOD水平明显升高(P<0.01);TUNEL阳性细胞数明显减少(P<0.01).结论 电针治疗后,急性脊髓损伤大鼠脊髓IL-1β及caspase-3表达减少,减轻了脊髓损伤后炎症反应和细胞凋亡.     

神经营养素-3基因修饰雪旺细胞和神经营养素-3受体基因修饰脊髓间充质干细胞联合移植促进脊髓损伤大鼠神经元存活的研究

目的：探讨神经营养素-3 (NT-3) 基因修饰雪旺细胞（SCs）和神经营养素-3受体 (TrkC) 基因修饰骨髓间充质干细胞（MSCs）联合移植对全横断脊髓损伤（SCI）大鼠的大脑皮质感觉运动区、红核和背核受损伤神经元存活的影响,为细胞治疗和基因治疗的临床应用提供依据。方法：将含有NT-3-SCs和TrkC-MSCs的PLGA高分子支架移植到大鼠脊髓全横断损伤处。在术后第67天,取其大脑和脊髓进行冷冻切片。用免疫荧光组织化学染色方法,检测SCI处SCs和MSCs的存活及其外源性基因的表达,并计算大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层、中脑红核和L1脊髓背核的神经元数量。结果：2个月后,可见SCI处有移植的SCs和MSCs,其中转染的外源性基因NT-3和TrkC可在移植细胞内表达。NT-3-SCs+TrkC-MSCs移植组大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层、中脑红核和L1脊髓背核的神经元数量明显高于其他组。 结论：NT-3基因修饰SCs和TrkC基因修饰MSCs联合移植能够促进全横断SCI大鼠的大脑皮质感觉运动区、中脑红核和脊髓背核受损伤神经元的存活。     

脊髓损伤大鼠脊髓及泌尿生殖道caspase-3和nNOS表达的改变

目的：观察SD大鼠脊髓损伤后脊髓及泌尿生殖道凋亡促进因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和一氧化氮合成酶（nNOS）表达的改变。方法： 成年雄性SD大鼠16只,随机分为对照组（n=8）和脊髓损伤组（n=8）;脊髓损伤组采用改良的重物坠落法（Allen法）制作大鼠T9-T10脊髓节段不完全损伤模型。分别行caspase-3免疫组化及nNOS免疫组化染色,用半定量方法评价正常及脊髓损伤大鼠脊髓、膀胱壁及阴茎组织表达caspase-3和nNOS的改变情况。结果：脊髓损伤后大鼠脊髓内nNOS和caspase-3均表达增强（P<0.001）,而膀胱壁及阴茎组织内caspase-3表达增强（P<0.001）,nNOS表达减弱（P<0.001）。结论：脊髓损伤大鼠脊髓及泌尿生殖道表达caspase-3和nNOS发生了改变,但并非同步,机制各有不同。     

不同时间点电针治疗对脑梗死大鼠Bcl-2 mRNA转录及caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时间点电针治疗对其Bcl-2 mRNA转录水平及caspase-3蛋白表达的影响。方法:SD大鼠100只,随机分为正常组、假手术组、模型组及电针组,每组根据术后干预时间点再分为术后6 h、12 h、24 h、48 h及72 h共5个亚组。线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉栓塞/再灌注模型。电针组各亚组分别于脑缺血再灌注后不同时间点进行电针治疗,其它3组各亚组均于相同时间点进行捆扎,不给予电针治疗。各组大鼠均于治疗14 d后取脑,采用实时荧光定量PCR技术检测脑梗死侧Bcl-2 mRNA的转录水平,免疫组织化学染色检测脑梗死侧caspase-3蛋白的表达。结果:电针组各亚组Bcl-2 mRNA转录水平及caspase-3蛋白表达水平与其它3组相同时间点各亚组比较,差异有统计学意义(P0.05);电针组各亚组间Bcl-2 mRNA转录水平及caspase-3蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P0.05),电针组12 h亚组Bcl-2 mRNA转录水平较高,24 h亚组caspase-3表达水平较低。结论:脑缺血再灌注12 h～24 h内给予电针治疗,能促进脑梗死大鼠Bcl-2 mRNA转录并抑制caspase-3蛋白的表达。     

Preliminary study of a genetically engineered spinal cord implant on urinary bladder after experimental spinal cord injury in rats

The objective of this study was to determine the effect of neurotrophin-secreting Schwann cell implants on the urinary bladder after spinal cord contusion. One hour after severe spinal cord contusion at the T8 to T11 level, carbon filaments containing nonsecreting Schwann cells, brain-derived neurotrophic factor (BDNF)-secreting Schwann cells, neurotrophin-3 (NT-3)-secreting Schwann cells, or Schwann cells secreting both BDNF and NT-3 were implanted into the spinal cord. Untreated spinal cord injured (SCI) rats and noncontused rats (C) were also studied. Two months after spinal cord injury, cystometry was performed and the bladders were studied using light microscopy. SCI rats had significantly increased bladder mass, thickness, and smooth muscle mass compared to C rats. Bladder capacity of SCI rats and rats with spinal cord implants were both significantly greater than that of C rats. This preliminary study suggests that neurotrophin-secreting Schwann cell implants may lead to improved bladder structure after spinal cord injury.     

Effect of controlled delivery of neurotrophin-3 from fibrin on spinal cord injury in a long term model.

The goal of this work was to assess the effect of the controlled delivery of neurotrophin-3 (NT-3) from an affinity-based delivery system in fibrin scaffolds on regeneration following spinal cord injury (SCI). A heparin-based delivery system (HBDS) was used to immobilize NT-3 within fibrin scaffolds via non-covalent interactions. The fibrin scaffolds were implanted in lesions immediately after injury in an adult rat model of SCI (complete ablation of a 2 mm segment of the cord at T9). Delivery of NT-3 was controlled by an affinity-based delivery system that limits drug loss by diffusion and releases the drug via cell-mediated processes. Twelve weeks after injury and treatment, animals treated with fibrin scaffolds and NT-3, with or without the delivery system, did not show functional improvement over saline controls. Substantial cavitation at edges of the lesion was present, and while neuronal fibers were present inside the lesion, traced corticospinal and dorsal sensory tracts did not regenerate into the lesion. Therefore, while previous studies indicate that the controlled delivery of NT-3 from fibrin scaffolds may increase the short term regenerative response, the continued degeneration of the cord, indicative of the severity of the injury, limits the long term regeneration stimulated by this treatment. Chronic or repeated treatments or a less severe injury model may prove useful in assessing the utility of controlled delivery systems for the treatment of spinal cord injury.     

神经营养素-3基因修饰骨髓间充质干细胞的明胶海绵圆柱体支架移植促进大鼠全横断脊髓损伤部分结构和功能修复的研究

目的:探讨神经营养素-3(NT-3)基因修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)的明胶海绵圆柱体支架移植对大鼠全横断脊髓损伤部分结构和功能修复的影响。方法:选取15只SD大鼠,随机分成3组:①NT-3基因修饰MSCs联合明胶海绵圆柱体支架移植组(NT-3-MSCs组);②MSCs联合明胶海绵圆柱体支架移植组(MSCs组);③单纯明胶海绵圆柱体支架移植组(control组)。在脊髓全横断后施行上述支架移植,在一定时间点比较3组动物功能恢复情况及其脊髓损伤区的结构变化。结果:NT-3-MSCs组BBB功能评分、移植的MSCs存活数、神经丝蛋白-200(NF-200)阳性纤维计数和平均空洞面积均优于其余组别(P<0.05)。结论:NT-3基因修饰MSCs联合明胶海绵圆柱体支架移植能够促进大鼠脊髓损伤部分结构和功能的修复,为临床治疗脊髓损伤提供实验依据。     

Spontaneous Wheel Running Exercise Induces Brain Recovery via Neurotrophin-3 Expression Following Experimental Traumatic Brain Injury in Rats

[Purpose] The aim of the present study was to investigate the expression of neurotrophin-3 (NT-3) after applying spontaneous wheel running exercises (SWR) after experimental traumatic brain injury (TBI). [Subjects and Methods] Thirty male Sprague-Dawley rats were divided into 3 groups; 20 rats were subjected to controlled cortical impact for TBI, and then, animals were randomly collected from the SWR group and subjected to wheel running exercise for 3 weeks. Ten rats were not subjected to any injury or running exercise to compare with the effect of TBI and SWR. Immunohistochemistry, Western blotting, skilled ladder rung walking test, and 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride staining analysis for the evaluation of NT-3 expression were used to assess brain damage and recovery. [Results] The TBI-induced decrease in NT-3 expression was recovered by wheel running exercise. Moreover, decreased ischemic volume and progressive neurobehavioral outcome were observed in the SWR group. [Conclusion] Spontaneous running exercise promotes brain recovery and motor function through an increase in expression of NT-3.Key words: Neurotrophin-3, Traumatic brain injury, Wheel running exercise     

生长相关蛋白在电针治疗大鼠脊髓损伤中的表达及意义

[目的]探讨生长相关蛋白(Gap-43)在电针治疗大鼠脊髓损伤(SCI)中的变化及意义.[方法]以2个月龄Wistar大鼠(96只)为受试对象,随机分为对照组(A组)、损伤组(B组)、治疗对照组(C组)和电流刺激治疗组(D组).B、C、D组于T9处行脊髓全横断,D组予电针治疗.用Western-blot测定各组损伤段脊...     

神经营养素-3修复脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤的修复是神经科学研究领域的一大难题,原因之一是损伤脊髓的再生能力极其有限。近年来大量实验证明神经营养素－3（NT－3）对脊髓损伤的再生修复具有至关重要的作用,其中又以其基因移植效果为佳。本文就NT－3对脊髓损伤的修复研究进展作一综述。     

孕酮对大鼠脊髓损伤后早期细胞凋亡的影响

目的:探讨孕酮对大鼠脊髓损伤后早期细胞凋亡的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分成假手术组、损伤组、孕酮组,采用改良的Allen’s撞击法制作脊髓损伤模型。孕酮组在造模成功后1、6、24、487、2 h腹腔注射16 mg/kg孕酮。术后6、24、48、75 h取材,采用HE染色观察脊髓形态学的变化,免疫组织化学法检测Caspase-3的表达,原位末端标记法(TUNEL染色)检测细胞凋亡。结果:假手术组大鼠脊髓形态正常,偶见凋亡细胞及Caspase-3阳性细胞;与损伤组相比,孕酮组术后各时间点的凋亡指数下降,Caspase-3阳性细胞数显著减少,差异有统计学意义。结论:抑制脊髓损伤后的细胞凋亡可能是孕酮的神经保护作用机制之一。     

Delivery of neurotrophin-3 from fibrin enhances neuronal fiber sprouting after spinal cord injury.

Neurotrophins have been shown to promote axonal growth and regeneration after spinal cord injury. The therapeutic utility of neurotrophins may be enhanced by using a controlled delivery system to increase the duration of neurotrophin availability following injury. Such a delivery system can be incorporated into a bioactive scaffold to serve as a physical bridge for regeneration. This study assessed the effect of controlled delivery of neurotrophin-3 (NT-3) from fibrin scaffolds implanted in spinal cord lesions immediately following 2-mm ablation injury in adult rats. Nine days after injury, fibrin scaffolds containing the delivery system and NT-3 (1000 ng/mL) elicited more robust neuronal fiber growth into the lesion than did control scaffolds or saline (1.5- to 3-fold increase). Implantation of fibrin scaffolds resulted in a dramatic reduction of glial scar formation at the white matter border of the lesion. Hindlimb motor function of treated animals did not improve relative to controls at 12 weeks post-injury. Thus, controlled delivery of NT-3 from fibrin scaffolds enhanced the initial regenerative response by increasing neuronal fiber sprouting and cell migration into the lesion, while functional motor recovery was not observed in this model.     

不同年龄大鼠坐骨神经损伤后睫状神经营养因子对脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达的影响

背景天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3是一种促进细胞凋亡的半胱氨酸蛋白酶,睫状神经营养因子具有多种生物活性,能保护损伤后多种神经元特别是运动神经元,减少神经细胞损伤的发生.目的观察睫状神经营养因子对天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3在坐骨神经损伤后不同年龄大鼠脊髓组织中的表达以及在不同年龄阶段的变化规律和调控特点.设计随机对照动物实验.单位解放军第三军医大学野战外科研究所大坪医院超声科、第五研究室.材料实验于2000-04/2001-12在解放军第三军医大学野战外科研究所完成.Wistar大鼠,体质量30～100 g的幼年大鼠(鼠龄20 d)、200～350 g的成年大鼠(鼠龄4个月)、400～800 g的老年大鼠(鼠龄18～24个月)各270只,雌雄不限,共810只.方法[1]实验动物分组各年龄组大鼠随机分为正常组(n=18)、睫状神经营养因子组(n=126)和生理盐水组(n=126),睫状神经营养因子组和生理盐水组分为术后1 d、3 d、1周、2周、4周、8周、12周组.[2]动物模型制作睫状神经营养因子组和生理盐水组切除2mm右侧坐骨神经,用硅胶管连接近、远侧神经残端制作神经再生小室,睫状神经营养因子组再生小室内注入25 mg/L重组睫状神经营养因子15 μL,生理盐水组再生小室内注入生理盐水15μL.[3]待测标本的制作及检测分别取各组动物6只,取脊髓L3-5节段,进行天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3免疫组织化学检测、天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性检测和Western blotting检测.主要观察指标[1]免疫组织化学检测的各组大鼠脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的表达.[2]Western blotting检测脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的分布与表达强度变化.[3]天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性变化.结果810只大鼠进入结果分析.[1]免疫组织化学检测各组大鼠脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的表达损伤后各年龄组生理盐水组伤侧神经元天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3染色表达增强,伤后2周、4周明显增多、增强,8周、12周较少神经元表达阳性;睫状神经营养因子组损伤后各年龄组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达增强,伤后2周、4周最为明显.[2]Western blotting检测脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3的分布与表达强度变化各年龄正常组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达差异无显著性意义(P＞0.05).与同龄正常组及对侧未伤侧比较,各年龄组生理盐水组及睫状神经营养因子组损伤后1周、2周、4周天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3表达增强,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01);睫状神经营养因子组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3幼年于损伤后1周、2周、4周,成年于2周、4周,老年于4周表达较生理盐水组减弱,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).各组对侧未伤侧与正常组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).[3]天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性变化幼年、成年、老年生理盐水组伤侧脊髓天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性升高,各时相点幼年大鼠天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性高于老年组及成年组(P＜0.05～0.01),幼年、成年、老年组睫状神经营养因子组天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性低于生理盐水组(P＜0.05～0.01).损伤后生理盐水组及睫状神经营养因子组对侧未伤侧天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3活性,除幼年伤后12周较正常组低外(P＜0.05),其余各组与正常组比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论坐骨神经损伤后不同鼠龄大鼠脊髓组织中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3蛋白表达及活性增高,外源性睫状神经营养因子可减少脊髓神经元中天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶3蛋白表达及活性,起保护脊髓神经细胞的作用,其作用在幼年组、成年组及老年组依次减弱.