荧光定量PCR方法检测脑脊液中结核菌DNA的临床意义

目的探讨应用荧光定量PCR方法检测脑脊液中结核菌DNA(TB-DNA)对结核性脑膜炎的临床意义。方法采用荧光定量PCR方法对68例结核性脑膜炎患者及32例非结核性脑膜炎患者的脑脊液标本进行检测,并与涂片、培养法比较。结果荧光定量PCR方法的敏感性显著高于涂片及培养,阳性率分别为57.4%、2.9%、8.9%(P<0.001)。结论荧光定量PCR方法可以通过标准品制定标准曲线,根据标准曲线可换算出标本中原始的靶DNA值,同时具有较高的特异性和敏感性,对结核性脑膜炎的诊断具有重要的临床指导意义。     

荧光定量PCR检测结核分枝杆菌

目的比较荧光定量PCR与抗酸染色、结核抗体检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,评价荧光定量PCR检测临床标本中结核杆菌的应用价值。方法对48例临床确诊的结核病患者和21例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用荧光定量PCR法和痰涂片抗酸染色法检测,并分离患者外周血血清检测结核抗体,对3种检测方法的结果进行分析比较。结果抗酸染色法检测结核杆菌阳性率为22.9%,特异性为100%;血清结核抗体检测阳性率为77.1%特异性为85.7%;荧光定量PCR检测阳性率为52.1%,特异性为100%。结论荧光定量PCR是一种快速、防污染、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用

目的 探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)在结核分枝杆菌检测中的价值.方法 收集患者痰液、灌洗液、胸水和尿液等标本,分别作涂片检测(萋纳染色和荧光染色)和FQ-PCR检测,比较两者的阳性率.结果 169例标本中,萋纳染色阳性共7例(4.1%),38例疑似标本中荧光染色阳性共15例,FQ-PCR检测结核分枝杆菌 DNA阳性共17例(10.1%),FQ-PCR与荧光染色符合率为88.2%.结论 涂片检查结核分枝杆菌阳性率较低,FQ-PCR法检测结核分枝杆菌 DNA阳性率高于涂片法,可列入结核分枝杆菌实验诊断的常规项目.     

荧光定量PCR技术在结核分枝杆菌检测中的应用

目的探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)在结核分枝杆菌检测中的价值。方法收集患者痰液、灌洗液、胸水和尿液等标本,分别作涂片检测(萋纳染色和荧光染色)和FQ-PCR检测,比较两者的阳性率。结果169例标本中,萋纳染色阳性共7例(4.1%),38例疑似标本中荧光染色阳性共15例,FQ-PCR检测结核分枝杆菌DNA阳性共17例(10.1%),FQ-PCR与荧光染色符合率为88.2%。结论涂片检查结核分枝杆菌阳性率较低,FQ-PCR法检测结核分枝杆菌DNA阳性率高于涂片法,可列入结核分枝杆菌实验诊断的常规项目。     

脑脊液细胞计数与实时荧光定量 PCR 检测结核菌在结核性脑膜炎诊断中的相关性分析

目的：分析结核性脑膜炎（tuberculous meningitis，TBM）脑脊液细胞数变化，探讨其与脑脊液中结核分枝杆菌实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR）检测阳性的相关性。方法选取确诊的结核性脑膜炎患者81例，应用全自动血液－体液细胞分析仪进行脑脊液细胞总数计数、离心甩片作脑脊液细胞涂片，光学显微镜图像分析系统分类计数，应用 FQ-PCR 法检测脑脊液中结核分枝杆菌，两者进行相关性分析。结果 FQ-PCR 法检测 TB-DNA 阳性率为50．6％（41／81），其中 FQ-PCR 阳性组中白细胞总数高于阴性组（P ＜0．05）。且白细胞数与 FQ-PCR 拷贝数呈正相关。FQ-PCR 阳性中脑脊液细胞学表现：以混合型细胞反应为主，其中淋巴细胞比例0．590，中性粒细胞比例0．366。结论结核性脑膜炎脑脊液细胞学大多以淋巴细胞反应为主，脑脊液白细胞数的变化可以反映疾病的严重程度，与 FQ-PCR 联合检测对早期诊断结核性脑膜炎有一定的意义。     

3种方法检测结核分枝杆菌的比较

目的比较荧光定量PCR与抗酸染色、结核抗体检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,及在临床诊断中的应用价值.方法对48例临床确诊的结核病患者和21例非结核呼吸系统疾病患者的痰标本应用荧光定量PCR法和痰涂片抗酸染色法检测,并分离患者外周血血清检测结核抗体,对3种检测方法的结果进行分析比较.结果抗酸染色法检测结核杆菌阳性率为22.9%,特异性为100%;血清结核抗体检测阳性率为77.1%,特异性为85.7%;荧光定量PCR检测阳性率为52.1%,特异性为100%.结论荧光定量PCR是一种快速、防污染、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值.     

GeneXpert MTB/RIF检测结核性脑膜炎患者脑脊液标本的临床应用价值

目的 探讨GeneXpert MTB/RIF（以下简称“GeneXpert”）检测结核性脑膜炎患者的脑脊液应用价值。方法 选取2014 年12 月至2019 年12 月在沈阳市第十人民医院住院治疗的初诊为结核性脑膜炎患者120 例作为研究对象,收集患者的脑脊液标本,进行脑脊液抗酸杆菌涂片检测、脑脊液结核分枝杆菌960 培养及脑脊液GeneXpert 检测,分析GeneXpert 的检测效能。结果 脑脊液抗酸杆菌检测阳性9 例,阴性111 例;脑脊液结核分枝杆菌960 培养阳性40 例,阴性80 例;脑脊液GeneXpert 检测阳性39 例,阴性81 例。以脑脊液涂片为标准,GeneXpert检测的灵敏度及特异度分别为100.00%和72.97%;以脑脊液960 培养为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为97.50%和100.00%;以临床诊断为标准,GeneXpert 检测的灵敏度及特异度分别为95.12%和100.00%。结论 脑脊液GeneXpert 检测灵敏度和特异度较高、检测时间短,有利于临床早期诊断结核性脑膜炎。     

三种方法检测结核分枝杆菌的比较

目的比较PCR技术与抗酸染色法、改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌的灵敏度和特异性,及在临床诊断中的应用价值。方法对108例临床确诊的结核病患者、90例结核性胸膜炎患者的痰标本和50例非结核患者痰标本应用PCR法、痰涂片抗酸染色法和改良罗氏培养法检测,对3种检测方法的结果进行分析比较。结果抗酸染色法检测结核杆菌阳性率为44.4%,改良罗氏培养法阳性率为57.4%,PCR技术检测阳性率为80.5%。结论 PCR技术是一种快速、敏感性高、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法,在临床上有重要应用价值。     

噬菌体生物扩增法与涂片法在快速检测结核分支杆菌的应用比较

目的研究噬菌体生物扩增法与涂片法对结核诊断价值的比较。方法对52份临床诊断为结核(包括肺结核、结核性胸膜炎、结核性腹膜炎、结核性脑膜炎)的患者的痰标本、胸腔积液、支气管肺泡灌洗液、腹水、脑脊液等标本以及COPD急性发作、肺癌、急性支气管炎患者的痰液16例同时进行噬菌体生物扩增法与涂片法检测。结果52份结核标本,有29份标本通过噬菌体生物扩增法检测结果为阳性,阳性率56%(29/52),显著高于涂片法染色的阳性率23%(12/52),(P<0.05),其中12例涂片法阳性的标本均为痰标本,而胸腔积液、支气管肺泡灌洗液、腹水、脑脊液等标本涂片法检测则均为阴性。噬菌体生物扩增法法对涂片阴性的标本的检出率高达48%(19/40)。16例非结核患者的痰液无一例为阳性。结论噬菌体生物扩增法与传统的涂片法相比,具有较高的特异性和敏感性,是一种值得推广和很有前景的结核分支杆菌快速快速检测方法。     

五种检测方法在结核病诊断中的应用评价

目的评估涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF法、结核分枝杆菌RNA荧光定量PCR法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法在结核病诊断中的应用价值。方法对374例疑似肺结核病患者、120例肺结核患者及70例非结核病患者的痰液标本分别用涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNAPCR、TB-DNA PCR进行结核分枝杆菌检测,将检测结果进行分析和比较。结果涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测374例疑似肺结核病患者痰液标本阳性率分别为6.68%、13.37%、20.05%、19.25%、22.73%,其中XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测阳性率差异无统计学意义(χ2=1.51,P0.05),TB-RNA PCR阳性率高于改良罗氏培养基培养法(χ2=4.75,P0.05),改良罗氏培养基培养法高于涂片抗酸染色法(χ2=9.28,P0.05)。五种方法检测120例肺结核患者及70例非结核病患者的敏感性分别为20.83%、35.00%、50.83%、47.50%、54.17%,特异性分别为100.00%、100.00%、98.57%、100.00%、98.57%。结论 XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR与涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法相比,具有敏感、快速、可定量的特点,可以作为结核病辅助诊断的有效检测方法。     

应用PCR快速诊断小儿结核性脑膜炎的研究

作者报道特异性寡核苷酸引物引导聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ。所用引物来自于编码结核杆菌的６５ＫＤａ蛋白质抗原基因，产生特异的３８３ｂｐ片段。对１０倍连续稀释的人型结核杆菌ＤＮＡ进行ＰＣＲ，可检测出１ｐｇ结核杆菌ＤＮＡ，相当于１０～１００个细菌。应用ＰＣＲ检测４２例结脑脑脊液，阳性率为５７．１４％，直接涂片镜检和细胞培养阳性率分别为７．１４％和１４．２８％；４６例非结脑脑脊液中，３种检测结果均阴性。研究结果表明，ＰＣＲ检测脑脊液中结核杆菌ＤＮＡ有较高的敏感性和特异性，它快速、简便，有望成为一种临床常规检测结核杆菌方法。     

PCR技术快速检测结核性脑膜炎患者脑脊液中结核分枝杆菌的研究

采用 PCR 技术体外 DNA 扩增,检测结核分枝杆菌,扩增片断为165 bp,非肺结核分枝杆菌及其它细菌结果阴性,证实其具有较高的特异性。通过与常规 DNA 制备方法的比较,证明对脑脊液标本煮沸后进行直接圹增,方便、快捷,节省费用,不影响实验结果,值得推广。通过对33例结核性脑膜炎(结脑)及26例非结脑患者脑脊液进行结核分枝杆菌 DNA 检测,并与其它诊断方法进行比较,结果显示 PCR 的阳性率为84.8%(28/33),染色镜检3%(1/33),抗原检测60.6%(20/33),抗体检测54.5%(18/33),对照组无一例扩增阳性,表明 PCR 技术在特异性和敏感性方面均优于其它方法(P<0.01),可望成为结脑可靠的诊断手段。     

酶联免疫斑点技术辅助诊断小儿结核性脑膜炎的临床意义

目的:探讨酶联免疫斑点技术(ELISPOT)在小儿结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法:收集0~14岁疑似结核性脑膜炎患儿共17例进行ELISPOT检测,对最终确诊病例进行分析,并与头颅CT/MRI检查、结核菌纯蛋白衍生物试验(PPD)试验、脑脊液检查、结核抗体检查、胸片结果相对比。结果:在最终确诊的13例结核性脑膜炎中,头颅CT/MRI、PPD、脑脊液、结核抗体、胸片在入院5d内的检查阳性率分别为30.8%、30.8%、23.1%、12.5%、30.8%,而ELISPOT阳性率为76.9%,显著高于其它辅助检查方法(P<0.05)。结论:ELISPOT检查灵敏、快速,对于小儿结核性脑膜炎有早期诊断价值。     

联检TB-DNA、LAM-IgG和ADA诊断小儿结核性脑膜炎

目的评价联检脑脊液结核杆菌DNA(TB-DNA)、抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体(LAM-IgG)和腺苷脱氨酶(ADA)指标诊断小儿结核性脑膜炎(结脑)及评价病情的价值。方法结脑组67例、非结核组38例,脑脊液标本应用聚合酶链反应法检测AFB、斑点免疫金渗滤试验法检测LAM-IgG、酶动力学终点法检测ADA。结果TB-DNA LAM-IgG诊断结脑的特异性为100%、阳性率为86.1%。结脑病情进展,ADA呈升高趋势;病情好转,ADA呈下降趋势。结论在诊断结脑方面,TB-DNA LAM-IgG联合试验的应用价值明显高于经典方法;在动态了解病情方面,ADA有较高的应用价值。三者联合应用可提高对小儿结脑诊断和评价的价值。     

结核性脑膜炎的诊治探讨

目的:研究结核性脑膜炎的临床表现和各项实验室检查结果对结核性脑膜炎的诊断价值,并探讨其治疗,尤其是重症结核性脑膜炎的治疗。方法:对1998年至2005年收治的46例结核性脑膜炎进行了回顾性的研究。结果:46例病人在肺部均可发现结核病灶,其中以发热、头痛起病45例,32例脑脊液白细胞10×106/L～500×106/L,34例蛋白1.0g/L～5.0g/L,糖降低21例,氯化物降低27例。24例聚合酶链反应(PCR)检测结核菌DNA(TB DNA),阳性19例。46例治疗好转44例,2例死亡。结论:由于脑脊液中找到结核杆菌的阳性率较低,结核性脑膜炎的诊断仍需综合各方面的临床资料。治疗方面宜注意控制颅内高压,对于陷入重度昏迷的重症患者宜行颅骨钻孔脑脊液引流及冲洗。     

结核杆菌核酸定量检测与T-SPOT.TB检测在肺外结核病诊断中的应用

目的 探讨结核杆菌核酸定量与结核感染T-细胞培养(T-SPOT.TB)联合检测在肺外结核病诊断中的应用价值。方法 选择2013-02-01～2015-10-31,在我院已经确诊的各类肺外结核病住院患者共109例作为研究对象(其中结核性胸膜炎69例,结核性脑膜炎23例,肾结核17例)。所有受试者根据感染部位不同,同时检测体液(胸腹水、脑脊液、尿液)结核杆菌涂片、体液核酸定量与全血T-SPOT.TB。结果 109例患者中,结核杆菌涂片检查为阳性的有22例,阳性率20.1%,体液结核杆菌核酸定量检测结果提示有诊断意义的有104例,阳性率95.4%,全血T-SPOT为阳性的有108例,阳性率99.1%,与传统涂片检查结果比较,P＜0.05,具有显著差异。同时体液结核杆菌核酸定量与全血T-SPOT检测结果比较,P＞0.01,无显著差异,呈现高度一致性。结论 结核杆菌核酸定量与全血T-SPOT.TB联合检测,对于肺外结核病的诊断具有重要意义。     

支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌检测的方法比较

目的：用刷片、集菌、培养、聚合酶链反应等四种方法检测支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中结核分枝杆菌，对其结果进行比较。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法对４６例肺结核患者及３２例非结核病患者的标本进行检测，并与刷片、集菌、培养法比较。结果：ＰＣＲ的敏感性显著高于刷片、集菌、培养法。结论：支气管肺泡灌洗液ＰＣＲ结果阳性，可作为早期诊断结核病的重要指标。     

检测结核杆菌六种实验方法的比较分析

应用聚合酶链反应（PCR）、涂片抗酸染色、BACTEC快速培养、L－J法培养、ELISA测PPD－IgG和结核杆菌抗原六种方法对57例临床部病人和36例中枢神经系统（CNS）感染病人检测结核杆菌。结果表明，对肺部病人还是CNS感染病，PCR检测结核杆菌的阳性率最高，PCR对肺结核病人的敏感性和特异性分别为96．7％和100％，对结核性脑膜炎病人的敏感性和特异性均为100％，六种方法中敏感性最低的是涂片法，肺结核为33％，结核性脑膜炎为20％，BACTEC快速培养法敏感性（痰76．7％，CSF50％）L－J法（痰60％，CSF25％）；免疫学方法敏感性较高，但存在一定假阳性。实验结果表明，PCR技术是早期、快速和准确地诊同的有效方法。     

三种快速实验室检测技术在儿童结核性脑膜炎早期诊断中的价值

目的评价三种快速实验室检测技术对儿童结核性脑膜炎的早期诊断价值。方法收集沈阳市胸科医院2017年6月～2019年12月收治的疑诊儿童结核性脑膜炎病例52例,分别进行血T-SPOT.TB、脑脊液LAMP和脑脊液Xpert MTB/RIF检测。结果采用SPSS18.0软件进行统计分析,计算三种检测方法在诊断结核性脑膜炎的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率。结果在52例患者中,血T-SPOT.TB诊断结核性脑膜炎的敏感度为93.75%,特异度8.33%,阳性预测值31.25%,阴性预测值75.00%,一致率34.62%。脑脊液LAMP诊断结核性脑膜炎的敏感度为81.25%,特异度75.00%,阳性预测值59.09%,阴性预测值90.00%,一致率76.92%。脑脊液Xpert MTB/RIF诊断结核性脑膜炎的敏感度为87.50%,特异度88.89%,阳性预测值77.78%,阴性预测值94.12%,一致率88.46%。结论血T-Spot、脑脊液LAMP和脑脊液Xpert MTB/RIF检测对儿童结核性脑膜炎的早期诊断具有一定的价值,值得临床推广。