胎兔、孕兔、成年兔伤口愈合中肿瘤坏死因子和表皮生长因子含量分析

目的：探索胎兔伤口无瘢痕愈合的可能机理及条件。方法：采用孕22－23d的母兔及所孕胎兔皮肤伤口无瘢痕愈合的动物模型及成年兔皮肤伤口愈合模型，以放射免疫法测定其表皮生长因子（EGF）和肿瘤坏死因子（TNF）含量。结果：胎儿伤口中的EGF和TNF术后3d明显升高（P＜0．05），并维持至术后7d；孕兔及成年兔仅在术后3d升高（P＜0．05），术后7d降到接近正常水平。结论：胎兔皮肤伤口中特有的细胞因子水平是胎儿伤口无瘢痕愈合的重要因素。     

胎兔伤口无瘢痕愈合的形态学和胶原构成研究

目的：探讨胎兔伤口无瘢痕愈合的可能机理及条件。方法：用22－23d的孕兔建立胎兔伤口无瘢痕愈合的动物模型,并与孕兔、成年兔伤口愈合进行比较,对各组兔皮肤切口组织进行光镜和透射电镜检查,胶原含量测定（羟脯氨酸法）及分型。结果：①胎兔切口无急性炎症反应,成纤维细胞（FB）出现早,伤口无瘢痕一期愈合。②胎兔伤口中胶原含量及构成变化不显著;孕兔、成年兔胶原在术后7d时升高（P＜0．05）。结论：无急性炎症反应、皮肤中的FB及胶原构成是胎兔伤口无瘢痕愈合的重要因素。     

胚胎兔、成兔皮肤在正常发育及创伤愈合过程中IgG的表达

目的 分析胚胎兔，成兔胚皮肤在便伤愈合过程中IgG表达的差异，为胎儿型及成人型愈合机制的研究提供依据。方法 在建立胎兔皮肤创伤模型的基础上，采用皮肤均化的方法，提取正常及创伤组织中的免疫球蛋白IgG，用双抗体夹心ELISA法进行含量测定。结果 随正常胎兔（孕23－28天）孕期的延长，皮肤中IgG有合成增加的趋势，而正常成免皮肤的IgG含量显著高于胎兔（P＜0．01）；胎兔皮肤创伤后不同时间（1－6d)的IgG含量与对应的正常胎兔（孕23－28天）相比，只伤后第1，2天增高（P＜0．01），而不同孕期的创伤胎兔之间差异无显著意义。成兔皮肤创伤后从第2天起IgG合成量明显高于正常成兔（P＜0．01），并呈现明显的上升趋势，对胎，成兔皮肤创伤后IgG变化趋势的动态发现胎兔呈平坦线性，成兔呈上升线性。结论 在胚胎发育成熟的过程中，免疫系统日臻完善，虽然IgG在较低水平，但在创伤后仍表现出一定的免疫反应，而成兔在创伤后却表现出强烈的免疫反应，不仅含量高而且趋势显著，免疫反应的不同是胎儿愈合与成人型愈合的本质差别之一。     

透明质酸含量在兔正常皮肤及皮肤创伤愈合过程的变化

目的　分析透明质酸在创伤愈合过程中的含量变化以及胎儿型愈合和成人型愈合的机理。方法　通过胎兔创伤模型及皮肤均化的方法，提取游离及结合的透明质酸（ＨＡ） ，应用透明质酸结合蛋白（ ＨＡＢＰ） 技术，对胚胎兔、成年兔皮肤在正常及创伤愈合过程中用放射免疫法测定游离、结合及ＨＡ 的总量。结果　⑴不同孕期正常胎兔皮肤的游离ＨＡ 及ＨＡ 总量的差异均无显著意义，结合ＨＡ 有显著的波动，而且均比正常成兔增高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ；⑵胎兔皮肤创伤后不同愈合时间的游离ＨＡ 及ＨＡ 总量的差异均无显著意义，结合ＨＡ 的组成亦有显著变化；⑶创伤胎兔与正常胎兔相比，各组分ＨＡ 均增高（ Ｐ＜ ０ ．０５） ；⑷创伤成年兔游离ＨＡ 及ＨＡ 总量均比正常成年兔显著增高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，而在创伤成年兔内部游离ＨＡ 及ＨＡ 总量呈“山峰型”变化；⑸胎兔、成年兔皮肤创伤后对应比较发现，ＨＡ 总量均为胎兔高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，而游离ＨＡ 则第２ 、３ 天差异无显著意义。结论　ＨＡ 的增高是胎儿型愈合不可缺少的内部机制，其中游离ＨＡ 起主导作用，但结合ＨＡ 随孕期的延长以及在创伤后不同愈合时间所发生的显著变化，对于临床控制瘢痕形成具有很重要的意义     

一氧化氮在成兔与胚胎兔创面愈合过程中含量的比较

目的:分析胚胎无瘢痕愈合的潜在原因,研究NO(一氧化氮)在成人型和胚胎型愈合过程中的差别.方法:在已建立的胎兔创伤模型的基础上,用一氧化氮酶法试剂盒检测胚胎兔和成兔皮肤匀浆液中NO的含量,并对结果进行比较.结果:①正常胎兔不同孕期皮肤中NO含量无差别.②正常胎兔皮肤中NO含量高于正常成兔皮肤中NO含量(P＜0.01).③创伤胎兔皮肤中NO含量高于正常胎兔皮肤中NO含量(P＜0.01).④创伤成兔皮肤中NO含量高于正常成兔皮肤中NO含量(P＜0.01).⑤创伤胎兔皮肤中NO含量高于创伤成兔皮肤中NO含量(P＜0.01).结论:NO参与了胚胎和成年动物的创面愈合过程,并在两种愈合过程中存在差别.     

一氧化氮在成兔与胚胎兔创面愈合过程中含量的比较

目的 :分析胚胎无瘢痕愈合的潜在原因 ,研究NO(一氧化氮 )在成人型和胚胎型愈合过程中的差别。方法 :在已建立的胎兔创伤模型的基础上 ,用一氧化氮酶法试剂盒检测胚胎兔和成兔皮肤匀浆液中NO的含量 ,并对结果进行比较。结果 :①正常胎兔不同孕期皮肤中NO含量无差别。②正常胎兔皮肤中NO含量高于正常成兔皮肤中NO含量 (P <0 .0 1)。③创伤胎兔皮肤中NO含量高于正常胎兔皮肤中NO含量 (P <0 .0 1)。④创伤成兔皮肤中NO含量高于正常成兔皮肤中NO含量 (P <0 .0 1)。⑤创伤胎兔皮肤中NO含量高于创伤成兔皮肤中NO含量 (P <0 .0 1)。结论 :NO参与了胚胎和成年动物的创面愈合过程 ,并在两种愈合过程中存在差别     

胚胎兔和成年兔伤口愈合中肌成纤维细胞的表达

胚胎动物与成年动物的创伤愈合存在差别 ,表现在炎症反应轻、创面不收缩和无瘢痕形成[1,2 ] 。本实验在光镜和电镜下观察胚胎兔和成年兔伤口愈合过程中肌成纤维细胞(ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＭＦＢ)的表达 ,以期探讨胎兔伤口不收缩的原因以及胎兔无瘢痕愈合的机制。材　料　和　方　法1.动物模型及分组 :选择怀孕 2 3ｄ的日本大耳白兔 6只 ,随机分为两组 ,每组 3只 ,每只孕兔取两只胎兔做创伤 ,分别于创伤后 3、6ｄ行剖宫产手术取出创伤胎兔 ,在取出创伤胎兔的同时 ,每只孕兔还剖取两只正常胎兔作对照。另取普通成年日本大耳白兔 12只 ,…     

CD44及其配体HA在瘢痕与胎儿皮肤表达的相关进展

皮肤是人体最大的器官，受到一定程度的损害后，瘢痕形成是创面愈合的必然结果，但过度修复产生的增生性瘢痕，常常破坏人体表面的完整性或伴有各种程度的功能障碍，无瘢痕愈合则是人类组织修复最理想的结果。与成人皮肤创伤后形成瘢痕不同的是胎儿皮肤具有无瘢痕愈合特点，从而使对胎儿皮肤无瘢痕愈合的研究成为重点。CD４４和透明质酸（HA）作为蛋白分子，被认为在胚胎的形成、正常组织的维持、伤口愈合等方面具有重要作用。近年来，随着胎儿外科研究的逐步深入，HA在伤口愈合中的作用倍受关注。１胎儿皮肤无瘢痕愈合１９７１年，Burri…     

外源性透明质酸对创面愈合组织的影响

目的：研究外源性透明质酸对创面愈合组织中生化组分的影响，以期探索外源性HA在创伤愈合中的作用及其机制。方法：在小型猪背部的去中厚皮创面上应用不同浓度和剂型的外源性HA，并于术后第3、7、14、21、28天切取创面组织及正常皮肤，测定其糖胺多糖、HA及Ⅲ型胶原的含量变化。结果：愈合过程中，实验组创面愈合组织中的GAG、HA含量逐渐升高，1周时达峰值并能维持3周；创面对照组术后3天也见增高，但随后即迅速下降。实验组的Ⅲ型胶原含量也始终明显高于对照组，其中又以1．0％、2．0％HA组最高。结论：外源性HA能显著增高愈合组织中HA、Ⅲ型胶原含量并能维持较长时间，从而有利于创伤愈合及减轻瘢痕形成。     

透明质酸刺激因子对成纤维细胞活性功能和胶原合成的影响

目的 研究透明质酸刺激因子（HASF）对正常皮肤及瘢痕成纤维细胞活性和胶原合成的影响。方法 层析法从兔羊水及胎兔血清中提取HASF并做活性鉴定;用嗜银蛋白（AgNORs)染色法、^3H-脯氨酸掺入法和羟脯氨酸（HYP）测定法观察不同浓度的HASF对细胞增殖活性和胶原蛋白合成的影响。结果 HASF使两类细胞的AgNORs含量减少;两类细胞实验组脯氨酸掺入率与HYP含量均较对照组低,两种胶原测定法相关性好。结论 HASF对正常皮肤及瘢痕成纤维细胞的活性功能及胶原合成有抑制作用,可能影响伤口愈合中瘢痕的形成。     

胎儿和成人皮肤及其创面愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子的表达及意义

目的　探讨胎儿和成人皮肤及其创面愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)的表达及其意义。方法　将孕龄 2 0～ 2 4周胎儿皮肤移植至 BAL B/ C裸鼠背部皮下 ,皮片成活后制造创面 ,建立胎儿无瘢痕愈合动物模型 ,定期获取相应标本。对临床所取正常成人皮肤及创面愈合皮肤标本 ,采用免疫组织化学染色方法 ,观察 b FGF的表达情况。　结果　正常胎儿皮肤及创伤后胎儿皮肤中均未见明显的 b FGF阳性表达。正常成人皮肤中血管周围可见阳性表达 ;创伤后成人皮肤也可见阳性表达 ,尤其成纤维细胞和血管内皮细胞创伤后表达明显增强。高倍镜视野随机观察计数b FGF阳性表达细胞数 ,正常胎儿皮肤为 2 .1± 0 .1,创伤后 12小时 ,1、3天和 1周胎儿皮肤分别为 2 .2± 0 .1、2 .1± 0 .3、2 .1± 0 .3和 2 .0± 0 .1;正常成人皮肤为 2 3.2± 4 .2 ,创伤后成人皮肤为 4 0 .5± 3.6 ,胎儿正常皮肤和创伤皮肤 b FGF表达与正常成人皮肤和创伤后皮肤 b FGF表达比较 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。　结论　 b FGF的阴性表达可能是胎儿皮肤无瘢痕愈合的重要原因之一。     

Wound healing in a fetal,adult, and scar tissue model: A comparative study

Early gestation fetal wounds heal without scar formation. Understanding the mechanism of this scarless healing may lead to new therapeutic strategies for improving adult wound healing. The aims of this study were to develop a human fetal wound model in which fetal healing can be studied and to compare this model with a human adult and scar tissue model. A burn wound (10 × 2 mm) was made in human ex vivo fetal, adult, and scar tissue under controlled and standardized conditions. Subsequently, the skin samples were cultured for 7, 14, and 21 days. Cells in the skin samples maintained their viability during the 21‐day culture period. Already after 7 days, a significantly higher median percentage of wound closure was achieved in the fetal skin model vs. the adult and scar tissue model (74% vs. 28 and 29%, respectively, p<0.05). After 21 days of culture, only fetal wounds were completely reepithelialized. Fibroblasts migrated into the wounded dermis of all three wound models during culture, but more fibroblasts were present earlier in the wound area of the fetal skin model. The fast reepithelialization and prompt presence of many fibroblasts in the fetal model suggest that rapid healing might play a role in scarless healing.     

用基因芯片研究不同皮肤组织创面愈合过程中同源异形框基因的差异表达

目的 探讨人胎儿及成人皮肤创面愈合过程中同源异形框基因的差异表达.方法 采用包含有14000个靶基因cDNA克隆的基因芯片技术,对正常成人和胎儿及其创面愈合过程中同源异形框基因族的表达进行对比观察.结果 正常成人和胎儿及其创面愈合过程中同源异形框基因族呈现差异表达,其中以PRX-2、HOXB13、HOXB6和HOXB7的差异表达为显著.结论 同源异形框基因的差异表达表明正常成人和胎儿皮肤的发育生物学状态存在差异,可能是胎儿和成人皮肤不同创面愈合方式的根本原因.     

嵌合体大鼠诱导异种皮肤移植免疫耐受的初步研究

目的 探讨嵌合体大鼠诱导异种皮肤移植免疫耐受的可行性。方法 采集兔骨髓干细胞，经行宫内胎鼠移植以及对新生子鼠行肝内注射，制作兔骨髓干细胞嵌合体大鼠模型。6周后将15只嵌合体大鼠分为A组（8只）、B组（7只）。将A组大鼠皮肤移植给供髓兔，将7只非嵌合体大鼠皮肤移植给非供髓兔作A组对照；将B组大鼠、7只非嵌合体大鼠（B组对照）皮肤同时移植给供髓兔。记录移植后皮片成活时间、创面愈合时间。结果A组对照移植皮片成活（9．3±1．8）d，创面于（20．9±2．1）d愈合；A组移植皮片成活（15．1±2．6）d，创面于（18．5±1．3）d愈合。B组及其对照移植皮片的成活时间、创面愈合时间与A组相似。与各自对照皮肤移植相比，A、B组皮片成活时间延长（P〈0．01），创面愈合时间缩短（P〈0．05或P〈0．01）。结论 嵌合体大鼠行异种皮肤移植后能诱导移植皮片免疫耐受．使其成活时间明显延长．创面愈合时间缩短。     

胎儿及成人皮肤创面愈合过程中PDGF和EGF表达的对比性研究

目的 探讨人胎儿和成人皮肤及其创面愈合过程中PDGF和EGF的表达及意义。方法 利用已建立的人胎儿无瘢痕愈合动物模型，获取相应标本，结合临床所取成人皮肤标本，采用免疫组化染色方法，观察PDGF，EGF的表达情况。结果 ①正常胎儿皮肤中未见明显的PDGF阳性染色；创伤后12h、1d的胎儿表皮及真皮浅层可见PDGF的弱阳性表达；创伤后3d、1周的胎儿皮肤中PDGF的表达呈阴性；正常成人皮肤可在成纤维细胞，巨噬细胞及毛细血管见到阳性表达；创伤后表达加强；②正常胎儿皮肤表皮全层和毛囊，皮脂腺及汗腺细胞可见EGF的阳性表达；创伤后的胎儿皮肤中EGF的表达未见到明显变化；正常成人皮肤可见表皮基底层有中度阳性表达，毛囊，汗腺细胞也可见到轻度表达，创伤后表达有所减弱。结论 生长因子在胎儿和成人皮肤创面愈合过程中的差异表达可能是胎儿无瘢痕愈合的重要原因之一。     

人创面愈合过程中同源异形框基因的表达及意义

目的 探讨人胎儿及成人皮肤创面愈合过程中，几种同源异形框基因的表达及在胎儿无瘢痕愈合中的作用。方法 采用原位杂交方法，对正常成人和胎儿皮肤及创面愈合过程中PRX—2、H0XBl3、H0X2．2和H0X2．3的表达进行观察。结果 (1)在正常胎儿和成人皮肤中可见PRX—2阳性表达，以前阳性程度为强。分布部位有所不同，在正常胎儿皮肤中，阳性表达主要见于真皮乳头层毛干部周围细胞，表皮中也可见阳性表达；而在正常成人皮肤中，表皮基底层细胞呈弱阳性表达，真皮组织中未见阳性表达。胎儿皮肤创伤后，接近切口的组织中阳性表达明显增强，而成人皮肤创伤后，阳性表达未见明显变化，仍局限于表皮基底层细胞；(2)在正常胎儿及成人皮肤均可见H0XBl3阳性表达，真皮部分主要集中在毛囊细胞，表皮部分主要集中在基底层细胞，创伤后其表达明显减弱，尤其是胎儿皮肤；(3)在正常胎儿皮肤中H0X2．2和H0X2．3阳性表达主要见于表皮全层，表皮基底层阳性表达比较强，真皮中可见弱阳性表达，创伤后近切口的组织中，表达增强。在正常成人皮肤及其创面，未见到阳性表达。结论 同源异形框基因作为与发育生物学密切相关的基因，在人胎儿及成人皮肤创面愈合过程中的表达有所不同，这可能是二创面愈合差异的根本原因。     

Analysis of collagen content in the fetal wound

The absence of apparent scar formation following the creation of surgical wounds in utero appears to be a phenomenon peculiarly privileged as a sequela of fetal wound healing. Little information exists to explain this disparity from our knowledge of adult wound healing. Therefore, following creation of surgical wounds in fetal rats, at different intervals the healing wounds were harvested and analyzed for collagen content and types. The average proportion of type III collagen was elevated in normal (26.5%) as well as wounded fetal skin (33.8%) when compared with normal levels for the adult (15%). The total collagen content was markedly diminished in the fetal wound. Although embryonal collagen synthesis apparently does exist in fetal reparative processes, the relationship to the lack of gross scarring remains undetermined.     

Ultrastructural analysis of fetal rabbit wounds

Fetal wound healing proceeds rapidly with minimal inflammation and fibroplasia and little or no scar formation. These observations have led to the hypothesis that fetal wound healing more closely resembles regeneration rather than adult wound repair. To test this hypothesis, this study used ultrastructural analysis of fetal and adult fibroblasts and collagen to gain greater insight into differences in the healing processes. Full-thickness, primarily closed linear incisions were created dorsally on 24-day gestational age fetal rabbits (n = 9). The fetuses were killed 5 days later, and the wounds were excised and evaluated with transmission electron microscopy. Similarly, uninjured fetal skin of the same gestational age was obtained and analyzed. Adult rabbit dermal wounds were analyzed after 8 days of healing. Resting adult dermal fibroblasts had features of quiescent, inactive cells, whereas adult wound fibroblasts were highly active and filled with secretory vesicles. In contrast, both fetal normal dermal and wound fibroblasts appeared highly active and contained numerous secretory vesicles. In the adult wound, collagen fibril diameter was only 45% of the diameter of normal dermal collagen. However, fetal wound collagen fibrils were basically the same as normal dermal collagen, having a diameter that was 82% of the size of dermal collagen. These observations suggest that fetal wound fibroblasts do not require activation from an inactivated state and that fetal wound collagen deposition undergoes more rapid organization and maturation. These findings have significance in extending our understanding of the rapidity and functional superiority of fetal wound healing compared with adult wound healing.