整合素α9与肿瘤的研究进展

整合素(integrin)是跨膜糖蛋白受体,通过与配体的结合介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质 (extracellular matrix,ECM)之间的相互黏附,并介导细胞与ECM之间的双向信号传导.整合素最初是因此类 黏附分子主要介导细胞与细胞外基质的黏附,使细胞得以附着而形成整体(integration)而得名.整合素分子 都是由α(ITGA)亚基和β(ITGB)亚基通过非共价键连接而形成的异二聚体.到目前为止,有18种ITGA亚基 和8种ITGB亚基组成24种不同的整合素分子[1],它们在不同的生理、病理状态下发挥自身的功能.整合素在 机体内广泛表达,大多数细胞表面均可以表达至少一种整合素.整合素α9(ITGA9)是研究较少的整合素亚基 之一,近年来发现ITGA9与肿瘤之间有一定的关系,可能是新的抗肿瘤、抗血管生成治疗的潜在靶点.     

整合素β1在恶性肿瘤组织中的研究进展

整合素β1是细胞粘附分子家族中比较重要的一类分子,是介导细胞和细胞外基质的相互作用的主要的受体,参与细胞信号传导,细胞黏附、迁移,控制细胞分化、增殖及调节及肿瘤血管生成等多个过程。本文就整合素β1在恶性肿瘤的发生、发展中的异常表达及其作用作一综述。     

整合素与肿瘤相关研究进展

整合素介导细胞与细胞外基质、细胞与细胞间的黏附作用,其在肿瘤细胞中表达异常,与肿瘤耐药、血管生成、侵袭转移等相关。对整合素的深入研究可为肿瘤的诊治提供新的思路。     

β1整合素抗体阻断对LoVo细胞与Ⅰ型胶原黏附的影响

目的观察β1整合素在大肠癌LoVo细胞与细胞外基质黏附中的作用。方法采用激光共聚焦显微镜检测β1整合素在LoVo细胞的表达。β1整合素单克隆抗体加入LoVo细胞悬液中37℃反应30min,流式细胞仪分析其与LoVo细胞膜表面β1整合素结合情况。β1整合素单克隆抗体阻断后,观察黏附于Ⅰ型胶原LoVo细胞形态学和数量变化。同时观察LoVo细胞趋化运动的变化。结果激光共聚焦显微镜显示β1整合素表达于LoVo细胞膜。β1整合素单克隆抗体预孵LoVo细胞30min后流式细胞仪检测其结合率为(95.57±6.92)%。β1整合素抗体阻断后,不规则角形黏附细胞减少,主要为圆形或类圆形;45min计数与Ⅰ型胶原黏附LoVo细胞数分别为100±8和153±15(P<0.001);趋化运动细胞分别为18±7和31±9(P<0.001)。结论β1整合素抗体阻断后能抑制LoVo细胞与Ⅰ型胶原的黏附,下调其趋化运动特性,膜表面β1整合素可能为大肠癌黏附、侵袭和转移重要蛋白质分子之一。     

整合素与肿瘤转移

整合素是一类介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞间黏附的细胞黏附分子受体。整合素参与肿瘤转移的多个环节,在肿瘤转移中发挥着重要的作用。全文就整合素与肿瘤转移的关系简要综述。     

β2-整合素与白细胞黏附

β2-整合素是一类介导细胞与细胞及细胞与细胞外基质间黏附的重要的细胞黏附分子。在炎症发生过程中,β2-整合素通过与其配体的相互作用,对于白细胞稳定粘附到血管内皮细胞具有重要作用,为白细胞穿越血管内皮提供了条件。本文就β2-整合素与炎症反应中白细胞的稳定黏附的关系做简要综述。     

整合素β1对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响研究

目的 探讨整合素β1介导的细胞与细胞外基质(extraceUular matrix,ECM)的黏附,及其黏附对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡抑制作用即耐药性的影响研究.方法 利用酶联免疫吸附实验(ELISA)及吖啶橙-溴化乙锭(AO-EB)双荧光染色法分析卵巢癌株型SKOV3、3AO、8910细胞由顺铂诱导的细胞凋亡情况,并采用分组对照的方法检测整合素β1及整合素β1与特异性配体的黏附作用在细胞凋亡中的作用.结果 卵巢癌3株细胞均可由顺铂诱导凋亡(P<0.01).经顺铂(10 μg/mL)作用48 h后,生长于整合素β1的配体-纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)上的3株细胞的富集系数(enrichmentfactor,EF)明显低于生长于非整合素配体一多聚赖氨酸上的细胞EF值;吖啶橙-溴化乙锭双荧光染色法结果显示生长于FN上的细胞凋亡率明显低于生长于多聚赖氨酸上的细胞凋亡率,用整合素β1的特异性阻断抗体封闭过的细胞再次生长于FN上,EF又明显提高(P<0.01).结论 整合素β1介导的细胞与FN的黏附对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡有抑制作用,提示细胞黏附可能通过抑制细胞凋亡而促使细胞产生耐药性.     

β1整合素-绿色荧光蛋白融合基因在角膜上皮细胞的功能性表达

目的:将β1整合素-绿色荧光蛋白(GFP)融合基因转染兔角膜上皮细胞并检测其对各细胞外基质蛋白的黏附能力。方法:构建β1整合素-GFP融合基因真核细胞重组表达质粒,并将其转染至兔角膜上皮细胞。利用RT-PCR、Western印迹和荧光显微镜观察融合基因表达,同时检测转染细胞的增殖情况及对各细胞外基质蛋白的黏附能力。结果:成功将β1整合素-GFP融合基因转染兔角膜上皮细胞并使其过表达;转染β1整合素对角膜上皮细胞增殖无明显影响,但使细胞对各细胞外基质蛋白的黏附能力明显增高。结论:建立了功能性β1整合素-GFP过表达的角膜上皮细胞模型,为研究β1整合素基因在角膜上皮细胞的功能及角膜细胞移植奠定基础。     

硫酸右旋糖苷对人胃癌MKN1细胞的黏附以及整合素β1表达影响的研究

目的通过观察细胞的黏附过程和整合素β1的cDNA的表达,研究硫酸右旋糖苷(DS) 抑制人胃癌MKN1细胞株的黏附过程的机制.方法用位相差显微镜对MKN1细胞在培养盘上的附着过程及形态变化进行了观察.用半定量RT-PCR法对整合素β1 的cDNA的表达水平进行了测定.结果 DS抑制了MKN1细胞在培养盘上的附着,培养48小时后仍有部分细胞处于游离状态.在DS治疗组,黏附细胞和游离细胞内整合素β1的cDNA的表达水平分别减少到非治疗细胞的74% 和38%.结论 DS对人胃癌细胞株MKN1的黏附过程的抑制与对整合素β1 cDNA表达的抑制有关.     

整合素β1介导血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞与单核细胞间黏附作用

目的探讨血小板源生长因子（PDGF）对血管平滑肌细胞（VSMC）与人单核细胞系（THP-1）间黏附作用的影响以及可能的分子机制。方法培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞分别用2．5、5、10和20ng／mlPDGF刺激不同时间后,在无或含有整合素β1单克隆抗体培养液中,加入经PKI-126标记的THP-1细胞与VSMC共培养,测定黏附的THP-1细胞数量。采用Western免疫印迹法检测PDGF对VSMC表达整合素13。的影响。结果PDGF刺激SMC促进THP-1与VSMC的黏附的作用随着浓度的增加而增强,THP-1与血管平滑肌细胞黏附的数量是对照组的1．1、2．1、3．1和4．4倍;在10ng／mlPDGF刺激下,黏附的THP-1细胞数量是对照组的3．1倍（135±47个细胞／视野伽43±14个细胞／视野,P〈0．001）;整合素β1单克隆抗体能显著抑制PDGF刺激的THP．1细胞与VSMC的黏附作用,黏附的细胞数量（54±13个细胞／视野,P〈0．01）;PDGF促进THP-1与VSMC黏附的作用在PDGF刺激后8h达到高峰。免疫印迹显示PDGF能诱导VSMC表达整合素β1,在8h左右达高峰。结论血小板源生长因子能够呈剂量和时间依赖性地促进单核细胞与血管平滑肌细胞的黏附,该作用部分是通过整合素β1介导的,这一效应在动脉粥样硬化发病过程中可能具有重要意义。     

硫酸右旋糖苷对人胃癌MKNl细胞的黏附以及整合素βl表达影响的研究

目的 通过观察细胞的黏附过程和整合素β1的cDNA的表达，研究硫酸右旋糖苷(DS)抑制人胃癌MKNl细胞株的黏附过程的机制。方法 用位相差显微镜对MKNl细胞在培养盘上的附着过程及形态变化进行了观察。用半定量RT—PCR法对整合素β1的cDNA的表达水平进行了测定。结果 DS抑制了MKNl细胞在培养盘上的附着，培养48小时后仍有部分细胞处于游离状态。在DS治疗组，黏附细胞和游离细胞内整合素β1的cDNA的表达水平分别减少到非治疗细胞的74％和38％。结论 DS对人胃癌细胞株MKNl的黏附过程的抑制与对整合素β1 cDNA表达的抑制有关。     

模拟CO2气腹对人子宫内膜癌细胞黏附能力的影响

目的 探讨二氧化碳(CO2)气腹环境对培养人子宫内膜癌细胞黏附能力的影响.方法 体外培养人子宫内膜癌HEC-1-B细胞株,以模拟CO2气腹处理4 h,通过MTT法检测细胞生长变化和细胞黏附改变;应用免疫组织化学方法检测细胞中β1-整合素(β1-integrin)以及E-钙黏素(E-cadherin)的表达变化.结果 CO2处理4 h后,与对照组相比,HEC-1-B细胞生长曲线上移,黏附能力增强,β1-整合素与E-钙黏素的表达均减少.结论 CO2气腹有可能通过减弱子宫内膜癌细胞β1-整合素和E-钙黏素的表达导致其黏附能力增加,从而可能对肿瘤细胞的转移产生一定影响.     

促血管生成素-1对人胃癌细胞黏附和转移作用的研究

目的:探讨促血管生成素-1(Ang-1)对人胃癌细胞中整合素β1(integrin β1)和CD44V6的作用,研究其对肿瘤细胞黏附和转移的影响及可能的作用机制. 方法:利用腺病毒为载体,将已构建成功的、含Ang-1基因的重组腺病毒(Ad-Ang-1)瞬时转染人胃癌细胞株BGC-823,转染含绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-GFP)作为阴性对照,未转染的正常细胞作为空白对照,用细胞黏附法检测转染前后细胞与细胞外基质黏附率的改变,再分别用半定量RT-PCR和Western blot方法对3组细胞中整合素β1和CD44V6的mRNA和蛋白表达水平进行分析. 结果:细胞黏附实验显示,转染Ad-Ang-1后,细胞与细胞外基质之间的黏附率明显增强(P<0.01);RT-PCR、Western blot结果显示整合素β1、CD44V6 mRNA和蛋白的表达在Ad-Ang-1组明显高于空白对照组及Ad-GFP组. 结论:转染Ang-1能明显提高人胃癌细胞BGC-823中整合素β1、CD44V6 mRNA、蛋白的表达,从而促进肿瘤细胞的黏附和转移.     

整合素和N-钙黏素协同调控间充质干细胞极性的力学生物学机制研究

目的 研究整合素和N-钙黏着糖蛋白（N-钙黏素）介导的力学黏附对间充质干细胞极性的协同调控作用,并探索其力学生物学机制。方法 构建双层聚乙二醇（polyethylene glyeol, PEG）水凝胶,分别修饰RGD和HAVDI多肽,实现与整合素和N-钙黏素的力学黏附,模拟整合素介导的细胞-细胞外基质间以及N-钙黏素介导的细胞-细胞间力学相互作用。通过免疫荧光染色表征整合素力学黏附、N-钙黏素力学黏附以及不同细胞内力作用下,有无接触HAVDI多肽的单细胞的极性蛋白磷酸肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）和磷酸化肌动蛋白轻链（phosphorylated myosin light chain, pMLC）,并用Image J分析其表达强度和极性分布情况。结果 整合素力学黏附诱导接触组中PI3K和pMLC蛋白的极性强度高于非接触组,并使得接触组中PI3K蛋白与β-连环蛋白的极性夹角集中在135°～180°之间,pMLC与β-连环蛋白的极性夹角集中在0°～45°之间。抑制整合素的功能会抑制接触组中PI3K的极性分布,但不会改变pMLC蛋白的极...     

整合素αVβ3参与骨肉瘤发生进展机制的研究进展

骨肉瘤是儿童和青少年最常见的恶性原发性骨肿瘤,常伴有高度的侵袭性、转移性和局部复发性,但其发病机制仍不清楚.整合素作为细胞膜表面的一种糖蛋白质受体,是介导细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间黏附作用的重要分子.整合素在骨肉瘤的发生发展中的作用日益受到关注.其中整合素aVβ3是整合素家族的重要成员之一,与肿瘤组织的血管生成、侵袭与转移等现象关系密切,越来越多的研究将其作为肿瘤分子靶向治疗的重要靶点.本文从骨肉瘤肿瘤微环境(TME)的角度出发,针对整合素αVβ3在骨肉瘤发生和进展中的可能机制进行讨论.     

整合素α5β1在苯妥英钠促进大鼠PDLSCs和BMMSCs黏附于牙骨质中的作用

目的 探讨在苯妥英钠(Phenytoin,PHT)促进大鼠牙周膜干细胞(Rat periodontal ligament stem cells,rPDLSCs)、大鼠骨髓间充质干细胞(Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,rBMMSCs)黏附于牙骨质过程中,整合素α5β1(Integrin α5β1)起到的作用。方法 提取大鼠BMMSCs和PDLSCs,培养并纯化。通过细胞鉴定后,将获得的两种细胞各分为4组:40 mg/L PHT处理组、40 mg/L PHT+整合素α5抗体处理组、40 mg/L PHT+整合素β1抗体处理组、PBS处理组,每组细胞放入置有牙骨质片的96孔板处理4 h后,检测黏附于牙骨质片上的细胞量并做以比较。最后,利用qRT-PCR和Western blot检测40 mg/L PHT组与对照组细胞的整合素α5、β1亚基的mRNA与蛋白表达量。结果 40 mg/L PHT可促进rBMMSCs及rPDLSCs黏附于牙骨质片,加入整合素α5、β1抗体后,均明显抑制了40 mg/L PHT对rBMMSCs、rPDLSCs黏附于牙骨质的促进作用(P＜0.01)。qRT-PCR、Western-blot结果显示PHT处理组的整合素α5、β1亚基表达量高于空白对照组(P＜0.05)。结论 40 mg/L PHT能促进rBMMSCs、rPDLSCs黏附于牙骨质,该作用与整合素α5β1的表达上调密切相关。     

整合素与肿瘤的靶向治疗

整合素是细胞表面重要的黏附分子,介导细胞与细胞外基质相互作用,在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用,近年来将整合素作为肿瘤治疗靶点取得了显著的进展。目前采用针对整合素不同亚基的克隆抗体,整合素抑制剂,靶向节调整合素基因表达,整合素介导的溶细胞作用以及肿瘤细胞的整合素疫苗等方法通过调节整合素的生物学作用,促进肿瘤细胞凋亡,阻断肿瘤细胞侵袭迁移,抑制肿瘤血管的生成,从而达到治疗肿瘤的目的。这些研究发现对开拓肿瘤治疗新方案有着重要的意义。     

β1整合素过表达抑制顺铂诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨β1整合素过表达对顺铂诱导肝癌细胞凋亡的影响及其机制。方法功能性β1整合素稳定过表达Hep3B细胞系用于实验。采用WST-1细胞增殖实验试剂盒检测细胞增殖,DNA梯形条带和Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡。结果与亲株、空载体转染Hep3B细胞相比,β1整合素过表达明显抑制顺铂诱导的肝癌细胞凋亡。细胞外信号调节激酶(ERK)抑制物PD98059和p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制物SB203580能够明显减弱β1整合素对细胞凋亡的保护作用,但Jun激酶抑制物SP600125不能减弱β1整合素的保护作用。结论β1整合素能够通过ERK和p38MAPK信号通路抵抗顺铂诱导的肝癌细胞凋亡。β1整合素介导的细胞外基质信号与肝细胞肝癌化疗耐药有关。     

高糖对小鼠足细胞黏附功能的影响及其机制研究

目的探讨高糖（HG）对体外培养的足细胞黏附功能的影响及其可能机制。方法将条件性永生的小鼠足细胞分为正常糖（NG）组、HG组及甘露醇高渗组,分别用荧光定量法和物理离心法检测足细胞黏附功能;同时应用实时定量PCR法及Western印迹法分别检测足细胞α3、β1整合素mRNA和蛋白表达水平。结果HG组足细胞与基底膜蛋白复合物间的黏附功能较NG组显著下降,且呈时间依赖关系（P〈0.05）;HG组足细胞α3、β1整合素mRNA及蛋白表达水平均较NG组明显下降,呈时间依赖关系（P〈0.05）。结论HG对体外培养的足细胞黏附功能具有明显抑制作用,可能与其下调α3、β1整合素表达水平有关。     

整合素β1在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达作用

目的 检测整合素β1在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达情况,探索干细胞相关因子与肿瘤的关系.方法 采用免疫组织化学及细胞学染色方法检测整合素β1在人皮肤鳞状细胞癌组织及人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431中的表达,全反式维甲酸(ATRA)诱导鳞状细胞癌细胞分化,RT-PCR检测分化前后整合素β1变化水平.结果 在高分化鳞状细胞癌中,整合素β1在肿瘤团块外周基底样细胞呈连续性表达,内侧至团块中央可见散在或岛屿状阳性细胞;在低分化鳞状细胞癌组织中,岛屿状阳性细胞明显增多,呈弥漫分布;在A431细胞中,整合素β1散在表达于肿瘤细胞.ATRA诱导24h和48h后,ATRA处理组整合素β1与内参照β-actin的RT-PCR产物电泳光密度值之比分别为0.071±0.025和0.029±0.018,明显低于对照组的0.148±0.027和0.136±0.011(P<0.05).结论 整合素β1在皮肤鳞状细胞癌组织培养肿瘤细胞中具有异质性表达模式,并随肿瘤细胞分化程度增高而表达下降,提示整合素β1与皮肤鳞状细胞癌发生及可能存在的肿瘤干细胞具有密切关系.