异氟醚对老龄和成龄大鼠海马synaptotagmin-Ⅰ蛋白质的影响

目的探讨异氟醚对成龄及老龄大鼠海马synaptotagmin-Ⅰ(Syt-Ⅰ)蛋白表达的影响。方法用蛋白质印迹方法对吸入2h异氟醚的全身麻醉模型和吸氧对照的成龄及老龄大鼠,取24h后的海马组织检测Syt-Ⅰ蛋白的表达水平。结果异氟醚麻醉后24h老龄大鼠海马组织Syt-Ⅰ蛋白质与对照组比较表达量下调(P<0.05),而成龄大鼠海马组织Syt-Ⅰ蛋白质表达量与对照组比较没有明显变化。结论异氟醚麻醉后的老龄大鼠早期海马Syt-Ⅰ蛋白质可能参与异氟醚麻醉后延迟相大鼠的学习和记忆功能改变。     

不同浓度异氟醚对大鼠海马乙酰胆碱释放的影响

麻醉药可影响颅内神经递质的水平,如多巴胺、去甲肾上腺素和乙酰胆碱(Ach)。异氟醚对颅内神经递质的影响尚未完全阐明。本研究拟观察不同浓度异氟醚对大鼠海马Ach释放的影响。 材料和方法 微透析导引管植入 选择6只成年雄性SD大鼠,体重300-350 g。将SD大鼠置入充有异氟醚的密封罐中,待其意     

异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响

目的 探讨异氟醚对老龄大鼠海马蛋白质组的影响.方法 清洁级老龄雌性SD大鼠75只,22月龄,随机分为对照组(C组,n=35)和异氟醚组(I组,n=40).C组吸入含40%氧气的空气2 h,I组通过异氟醚挥发罐的调节使麻醉箱内异氟醚浓度为3%,待翻正反射消失后将异氟醚浓度降至1.2%,维持2 h.I组苏醒后24 h采用Y型迷宫实验检测认知功能,麻醉结束后24 h和72 h分别随机取5只大鼠,取海马行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 与c组比较,I组麻醉结束后24 h和48 h正确反应次数和主动回避次数降低,全天总反应时间延长(P＜0.05);学习能力I组低于C组(P＜0.05).2组麻醉结束后24 h差异表达蛋白17种,其中6种蛋白质表达上调,11种蛋白质表达下调;2组麻醉结束后72 h差异表达蛋白16个,其中10种蛋白质表达上调,6种蛋白质表达下调.结论 异氟醚麻醉后早期老龄大鼠认知功能下降具有可逆性,这种现象可能与海马蛋白质组变化有关.     

异氟醚麻醉对新生大鼠海马BDNF和磷酸化ERK表达的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对新生大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)表达的影响.方法 出生7d的SD大鼠48只,体重12～17 g,雌雄不拘,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=24):对照组(C组)和异氟醚麻醉组(1组).Ⅰ组吸入2.5％异氟醚3 min,然后吸入1.5％异氟醚4h;C组吸入空气4h.麻醉结束即刻每组取4只大鼠,抽取动脉血样,行血气分析,并检测血糖浓度.分别于麻醉结束即刻和麻醉结束后6、24和48 h(T-4)时各处死大鼠5只,取海马组织,采用Western blot法检测钾离子-氯离子联合转运体2(KCC2)、钠离子-钾离子-氯离子联合转运体1( NKCC1)、BDNF和p-ERK的表达,计算NKCCI/KCC2比值.结果 麻醉结束即刻两组大鼠均未发生酸碱失衡、低氧和低血糖等.与C组比较,Ⅰ组T3和T4时海马KCC2表达下调,NKCC1/KCC2比值升高,T1和T2时海马BDNF和p-ERK的表达下调(P＜0.05),各时点海马NKCC1表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚麻醉通过下调BDNF和p-ERK的表达,导致新生大鼠海马神经元发育延迟.     

异氟醚麻醉对大鼠海马蛋白质组的影响

目的 研究异氟醚麻醉后大鼠海马蛋白质组的变化.方法 将10只8月龄SD大鼠随机均分为异氟醚组(I组)和对照组(C组).1组大鼠以1.2%异氟醚吸入麻醉2 h,C组吸氧对照.于麻醉处理或吸氧对照结束后24 h取海马组织行双向凝胶电泳和质谱分析以鉴定差异蛋白点.结果 双向凝胶电泳结果显示I和C组差异蛋白质点共有17(4/13)个,MAL DI-TOF-MS分析后鉴定出12种蛋白质.结论 异氟醚麻醉可以引起大鼠海马蛋白质组变化,这些蛋白质变化可能具有一定的神经元保护作用.     

异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强的影响

目的 评价异氟醚对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)的影响.方法 雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备厚400 μm的海马脑片.采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS).取28张脑片,随机分为4组(n=7):用正常的人工脑脊液(ACSF)灌流海马脑片,记录正常的PS,待其稳定后,对照组继续灌流ACSF,不同浓度异氟醚组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚0.5组)的ACSF灌流,记录PS幅值.另取70张脑片,随机分为10组(n=7):用正常ACSF灌流海马脑片,记录稳定正常的PS 30 min,LTP组继续灌流ACSF,其余各组分别用含异氟醚0.125 mmol/L(异氟醚LTP 0.125组)、0.25 mmol/L(异氟醚LTP 0.25组)、0.5 mmol/L(异氟醚LTP 0.5组)、印防己毒素0 μmol/L(印防己毒素组)、荷包牡丹碱10 μmol/L(荷包牡丹碱组)、CGP353485 μmol/L(CGP35348组)、印防己毒素50 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(印防己毒素+异氟醚组)、荷包牡丹碱10 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(荷包牡丹碱+异氟醚组)、CGP353485 μmol/L+异氟醚0.25 mmol/L(CGP353485+异氟醚组)的ACSF灌流,记录PS 30 min后,施以100 Hz的高频强直刺激(HFS),记录PS幅值.结果 与对照组比较,异氟醚0.125组给药后10～45 min PS幅值降低,异氟醚0.25组和异氟醚0.5组给药后5～45 min PS幅值降低(P＜0.05或0.01).LTP组HFS后5～60 min PS幅值增高,较刺激前增加了(52±12)%(P＜0.01).与HFS前比较,异氟醚LTP 0.125组、异氟醚LTP 0.25组和异氟醚LTP 0.5组给予HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,3组PS幅值降低(P＜0.01).与HFS前比较,印防己毒素组、荷包牡丹碱组和CGP 35348组HFS后PS幅值增加(P＜0.01);与LTP组比较,3组PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).与HFS前比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05);与LTP组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05),CGP353485+异氟醚组HFS后PS幅值降低(P＜0.01);与异氟醚LTP 0.25组比较,印防己毒素+异氟醚组和荷包牡丹碱+异氟醚组HFS后PS幅值增加(P＜0.01),CGP 353485+异氟醚组HFS后PS幅值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚可通过激活大鼠海马GABAA受体,抑制LTP的形成,从而影响记忆功能.     

异氟醚麻醉对老龄大鼠海马淀粉样β蛋白表达的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对老龄大鼠海马淀粉样β蛋白(Aβ)表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠61只,18～ 19月龄,体重400～500 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组,异氟醚组(Ⅰ组,n=31):1.4％异氟醚麻醉2h,于麻醉前5d和麻醉后2d分别行Morris水迷宫实验以评价认知功能;对照组(Ⅱ组,n=20):仅行Morris水迷宫实验;空白组(Ⅲ组,n=10):不行异氟醚麻醉和Morris水迷宫实验.根据是否发生认知功能障碍将Ⅰ组分为2亚组:认知功能障碍组(P亚组)和非认知功能障碍组(NP亚组).行为学测试结束后,处死大鼠,分离海马,测定海马Aβ40、Aβ42、β内分泌酶(BACE)、胰岛素降解酶(IDE)和中性内肽酶(NEP)的水平.结果 三组大鼠麻醉前Morris水迷宫实验结果比较差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅰ组和Ⅱ组游泳速度比较差异无统计学意义(P＞0.05),P亚组平台所在原象限停留时间短于NP亚组和Ⅱ组(P＜0.01),NP亚组和Ⅱ组平台所在原象限停留时间比较差异无统计学意义(P＞0.05);三组大鼠海马Aβ40、Aβ42、BACE、NEP和IDE水平比较差异无统计学意义,P亚组与NP亚组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚麻醉对老龄大鼠海马Aβ表达无影响,提示异氟醚诱导的老龄大鼠认知功能障碍与Aβ通路无关.     

JNK信号通路在异氟醚预处理和七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤中的作用

目的 评价c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在异氟醚预处理和七氟醚预处理减轻大鼠海马脑片缺氧无糖(OGD)损伤中的作用.方法雄性成年SD大鼠,体重270～290 g,断头处死,剥离海马,制备海马脑片.取大鼠海马脑片96张,采用随机数字表法,将其随机分为8组(n=12):对照组(C组)、OGD组、异氟醚预处理组(Iso组)、七氟醚预处理组(Sevo组)、SP600125+异氟醚预处理组(SP+Iso组)、SP600125+七氟醚预处理组(SP+Sevo组)、二甲基亚砜(DMSO)+异氟醚预处理组(DMSO+Iso组)和DMSO+七氟醚预处理组(DMSO+Sevo组).采用电生理技术,细胞外记录CA1区群锋电位(PS)波幅,计算PS恢复程度.采用碘化丙啶染色法,测定细胞活力.结果 与C组比较,其余各组PS恢复程度和细胞活力降低(P＜0.01);与OGD组比较,Iso组、Sevo组、SP+Iso.组、SP+Sevo组、DMSO+Iso组和DMSO+Sevo组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01);与180组比较,SP+Iso组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01),DMSO+Iso组PS恢复程度和细胞活力差异无统计学意义(P＞0.05);与Sevo组比较,SP+Sevo组PS恢复程度和细胞活力升高(P＜0.01),DMSO+Sevo组PS恢复程度和细胞活力差异无统计学意义(P＞0.05).结论 异氟醚预处理和七氟醚预处理可通过抑制JNK信号通路,减轻大鼠海马脑片缺氧无糖损伤.

Abstract：

Objective To evaluate the role of c-Jun N-terminal kinase (JNK) signaling pathway in the protective effect of isoflurane preconditioning and sevoflurane preconditioning against oxygen-glucose deprivation (OGD) injury in rat hippocampal slices. Methods Male adult SD rats weighing 270-290 g were anesthetized with ether and decapitated. The hippocampi were removed and sagittally sliced (400 μm thick) and placed in artificial cerebral spinal fluid aerated with 95% O2-5% CO2 . Ninety-six hippocampal slices were randomly divided into 8 groups (n = 12 each): control group (group C), OGD group, isoflurane preconditioning group (group Iso),sevoflurane preconditioning group (group Sevo) , SP600125 + isoflurane preconditioning group (group SP + Iso),SP600125 +sevoflurane preconditioning group (group SP + Sevo), DMSO + isoflurane preconditioning group (group DMSO + Iso) and DMSO + sevoflurane preconditioning group (group DMSO + Sevo). Electrophysiological technique was used to record the amplitude of population spike ( PS) in the stratum pyramidale of CA1 region and the degree of recovery of PS was calculated. The cell viability was determined by propidium iodide staining. Results Compared with group C, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly decreased in the other groups ( P ＜ 0.01) . Compared with group OGD, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in groups Iso, Sevo, SP+Iso, SP+Sevo, DMSO+ Iso and DMSO + Sevo (P＜ 0.01). Compared with group Iso, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in group SP+Iso ( P ＜ 0.01) , while no significant change was found in group DMSO + Iso ( P ＞ 0.05) . Compared with group Sevo, the degree of recovery of PS and cell viability were significantly increased in group SP + Sevo ( P ＜ 0.01) , while no significant change was found in group DMSO + Sevo ( P ＞ 0.05). Conclusion Isoflurane preconditioning and sevoflurane preconditioning can attenuate the OGD injury to rat hippocampal slices through inhibiting JNK signaling pathway.     

异氟醚预处理改善大鼠海马脑片缺氧损伤

目的以大鼠海马脑片为研究对象,采用微电极记录技术,观察异氟醚预处理对海马脑片缺氧损伤后顺向群锋电位(OPS)以及缺氧损伤电位(HIP)的影响。方法 SD大鼠60只,随机均分为五组:空白对照组(C组);实验对照组(EC组);异氟醚预处理组(IP组);iNOS阻断剂氨基胍(AG)组(AG组);异氟醚预处理+iNOS阻断剂组(IPAG组)。IP组给予3h异氟醚预处理,AG组给予iNOS阻断剂处理,IPAG组给予3h异氟醚预处理,同时给予iNOS阻断剂,取脑片后分别给予14min的缺氧处理,观察不同处理对海马脑片OPS恢复以及HIP的不同效应。结果 IP组的OPS的恢复程度、恢复率明显高于C组、EC组、AG组和IPAG组(P<0.05),IP组HIP持续时间明显长于C组、EC组、AG组和IPAG组(P<0.05),HIP的出现时间五组差异无统计学意义。结论异氟醚预处理可明显减轻海马脑片缺氧损伤;用iNOS阻断剂可去除这种保护作用,证明这种预处理作用与异氟醚预处理产生的iNOS有关。     

褪黑素对异氟醚麻醉大鼠海马胆碱乙酰基转移酶的影响

目的 探讨褪黑素对异氟醚麻醉大鼠海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)的影响.方法雄性SD大鼠60只,体重390～440 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为5组(n=12):对照组(C组)、1%异氟醚组(Ⅰ组)、1%异氟醚+褪黑素组(IM组)、2%异氟醚组(J组)和2%异氟醚+褪黑素组(JM组).IM组和JM组腹腔注射褪黑素10 mg/kg,1次/d,连续7 d,C组、Ⅰ组和J组给予等容量生理盐水.Ⅰ组、IM组第7天吸入1%异氟醚4 h,J组、JM组第7天吸入2%异氟醚4 h.于麻醉次日行Morris水迷宫实验,测试逃避潜伏期及原平台象限探索时间;水迷宫实验结束后取血浆及脑组织,采用ELISA法测定血浆褪黑素浓度,Western blot法测定海马ChAT表达水平,采用比色法测定海马ChAT活性,采用免疫荧光法测定海马CA1区和齿状回的ChAT阳性神经元数量.结果 与C组比较,Ⅰ组血浆褪黑素浓度、ChAT表达水平和活性降低(P＜0.01);J组逃避潜伏期延长,原平台象限探索时间缩短,血浆褪黑素浓度、ChAT表达水平和活性降低(P＜0.05或0.01).与Ⅰ组比较,IM组逃避潜伏期缩短,原平台象限探索时间延长,褪黑素浓度升高,ChAT表达水平和活性升高(P＜0.05或0.01).与J组比较,JM组逃避潜伏期缩短,褪黑素浓度升高,ChAT活性升高(P＜0.05或0.01).海马CA1区和齿状回的ChAT阳性神经元数量与ChAT表达水平变化一致.结论 褪黑素可减轻异氟醚麻醉对ChAT表达水平及活性的抑制,从而改善异氟醚麻醉后大鼠的认知功能.

Abstract：

Objective To investigate the effects of melatonin on choline acetyltransferase (ChAT) in rat hippocampus after isoflurane anesthesia. Methods Sixty male SD rats weighing 390 - 440 g were randomized into 5 groups (n = 12 each): control group (group C), 1% isoflurane group (group Ⅰ), 1% isoflurane + melatonin group (group IM) , 2% isoflurane group (group J) and 2% isoflurane + melatonin group (group JM) . In IM and JM groups, melatonin 10 mg/kg was administered intraperitoneally once a day for 7 consecutive days, while equal volume of normal saline was given intraperitoneally instead of melatonin in C, I and J groups. Groups Ⅰ and IM inhaled 1% isoflurane and groups J and JM 2% isoflurane for 4 h on 7th day. All the rats underwent Morris water maze test on the day after anesthesia for assessment of learning and memory ability (escape latency and probe time) . The training test was performed 4 times a day for S days. Six rats randomly selected from each group were sacrificed the end of the test. The blood samples were collected for detection of plasma melatonin level by ELISA.The brain tissues were removed for determination of the expression and activity of ChAT in hippocampus by Western blot or colorimetric assay. The left rats were selected and sacrificed for determination of the number of ChAT positive neurons in hippocampal CA1 region and entate gyrus by immunofluorescence. Results The plasma melatonin level and expression and activity of ChAT were significantly lower in group I than in group C ( P ＜ 0.01) . The escape latency was significantly longer, the probe time was significantly shorter, and the plasma melatonin level and expression and activity of ChAT were significantly lower in group J than in group C ( P ＜ 0.05 or 0.01) . The escape latency was significantly shorter, the probe time was significantly longer, and the plasma melatonin level and expression and activity of ChAT were significantly higher in group IM than in group Ⅰ ( P ＜ 0.05 or 0.01). The escape latency was significantly shorter and the plasma melatonin level and ChAT activity were significantly higher in group JM than in group J ( P ＜ 0.05 or 0.01) . The results of immunofluorescent staining showed that the number of ChAT positive neurons in hippocampal CA1 region and dentate gyrus wag consistent with the changes in the measured ChAT expression. Conclusion Melatonin can reduce isoflurane-mediated inhibition of ChAT expression and activity and thus improve spatial memory impaired by isoflurane anesthesia in rats.     

瑞芬太尼致小鼠急性阿片类药物耐受时脑组织cAMP和PKA水平的变化

目的 探讨cAMP/PKA通路是否参与瑞芬太尼致急性阿片类药物耐受的形成.方法 雄性昆明小鼠56只,体重25～35 g,随机分为5组:生理盐水对照组(C组,n=8)、吗啡组(M组,n=8)、低剂量瑞芬太尼组(R1组,n=8)、中剂量瑞芬太尼组(R2组,n=8).和高剂量瑞芬太尼组(R1组,n=24),M组腹腔输注吗啡0.6 μg·kg-1·min-1,R1组、R2组和R3组分别腹腔输注瑞芬太尼0.4、0.8或1.6 μg·kg-1·min-1,C组给予等容量生理盐水,给药时间均为120 min.各组取8只动物,分别在给药前(基础状态)、给药30、60、90、120 min时和停药后15、30、45、60 min时测定热刺激甩尾潜伏期,并于停药后60 min处死,R3组的另外16只动物分别于停药后30、45 min时处死8只,测定大脑皮层、下丘脑和纹状体cAMP含量和蛋白激酶A(PKA)活性.结果 与基础值比较,给药期间M组、R1组、R2组和R3组热刺激甩尾潜伏期延长,M组停药后15 min时热刺激甩尾潜伏期延长,R3组停药后30 min时热刺激甩尾潜伏期缩短,R2组停药后45 min时热刺激甩尾潜伏期缩短,R3组停约后30、45 min时热刺激甩尾潜伏期缩短(P<0.05或0.01).与C组比较,M组和R1组停药后60 min时大脑皮层PKA活性降低,R2组停药后60 min时大脑皮层cAMP和PKA水平降低,下丘脑和纹状体PKA活性降低,R,组停药后60 min时大脑皮层cAMP和PKA水平降低(P<0.05).结论 腹腔输注瑞芬太尼可诱发小鼠痛觉过敏,产生了急性阿片类药物耐受,其受体后cAMP/PKA通路没有出现上调现象,不同于慢性阿片类药物耐受.     

异氟醚麻醉对老龄大鼠海马突触体蛋白质组的影响

目的 评价异氟醚麻醉对老龄大鼠海马突触体蛋白质组的影响.方法 雌性SD大鼠27只,22月龄,体重480～550 g,采用随机数字表法,将其随机分为2组:对照组(C组,n=6)和异氟醚麻醉组(Ⅰ组,n=21).C组吸入含80％氧气的空氧混合气体2h,Ⅰ组吸入3％异氟醚麻醉诱导后,经口明视气管插管,吸入2％异氟醚+80％氧气维持麻醉2h.麻醉结束后24h时,进行Y型迷宫实验测试大鼠认知功能,记录训练次数.以训练次数＞ 75次为判断认知功能低下的标准,将Ⅰ组大鼠分为2组:认知功能低下组(IA组)和认知功能未低下组(IB组).Y型迷宫实验结束后,处死大鼠,取双侧海马组织,提取突触体,进行双向凝胶电泳和质谱分析.结果 Ⅰ组有6只大鼠发生认知功能低下,有13只大鼠未发生认知功能低下.与C组和IB组比较,IA组训练次数增多(P＜0.05);C组和IB组间比较训练次数差异无统计学意义(P＞0.05).IB组和IA组差异表达的蛋白质有21个,其中11个蛋白质表达上调,10个蛋白质表达下调.C组和IA组差异表达的蛋白质有19个,其中12个蛋白质表达上调,7个蛋白质表达下调.经质谱分析鉴定出31个蛋白质.结论 异氟醚麻醉导致老龄大鼠认知功能低下可能与突触部位能量代谢相关蛋白、突触部位的细胞骨架结构及调节蛋白的改变有关.     

异氟醚对大鼠海马高级糖基化终末产物受体表达的影响

目的 探讨异氟醚对大鼠海马高级糖基化终末产物受体(RAGE)表达的影响.方法 雄性老龄SD大鼠45只,月龄24月;雄性成年SD大鼠45只,月龄4月,分为老龄组和成年组(n=45),每组再分为3个亚组(n=15):老龄对照组(OC组)和成年对照组(AC组)吸入含30%氧气的空氧混合气体;老龄单次吸入异氟醚组(OS组)和成年单次吸入异氟醚组(AS组)吸入1.5%异氟醚2 h;老龄多次吸入异氟醚组(OR组)和成年多次吸入异氟醚组(AR组)吸入1.5%异氟醚3次,2 h/次,每天1次.吸入异氟醚后1 d各组随机取8只大鼠行Morris水迷宫实验测定认知功能,余大鼠处死取海马,采用RT-PCR法检测RAGE mRNA的表达水平,免疫组织化学法检测RAGE蛋白的表达水平.结果 与OC组比较,OS组和OR组认知功能减退,海马RAGE mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05);与AC组比较,AS组和AR组认知功能减退,AR组海马RAGE mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05);与OS组比较,OR组认知功能减退,海马RAGE mRNA表达上调(P＜0.05);与AS组比较,AR组认知功能减退,海马RAGE mRNA及其蛋白的表达上调(P＜0.05).结论 异氟醚可导致老龄和成年大鼠认知功能降低,尤其对老龄大鼠影响明显,可能与其上调海马RAGE表达有关.     

异氟醚对大鼠脑3’5’-环腺苷酸含量的影响

目的 了解异氟醚对大鼠脑３’５’－环腺苷酸（ｃＡＭＰ）含量的影响。方法 ＳＤ大鼠４０只,随机分为五组,分别在未吸入异氟醚（对照组）,吸入１．４％异氟醚翻正反射消失时（翻正反射消失组）,吸入１．４％异氟醚平衡３０ｍｉｎ时（麻醉组）,吸入１．４％异氟醚平衡３０ｍｉｎ后将动物取出自制麻醉箱待翻正反射恢复时（恢复Ⅰ组）和吸入１．４％异氟醚平衡３０ｍｉｎ后将动物取出自制麻醉箱后３０ｍｉｎ时（恢复Ⅱ组）断头取     

异氟烷对大鼠皮层、海马及脊髓氨基酸类递质的影响

目的 通过观察异氟烷对大鼠皮层、海马及脊髓氨基酸类递质含量的影响，从在体水平探讨异氟烷麻醉作用的可能机制。方法 16只SD大鼠随机分2组，A组吸入1MAC异氟烷30min后，取皮质、海马及脊髓并测定其递质含量。B组除不吸异氟烷外均同A组。结果 与B组比，A组皮层、海马的Asp、Glu含量降低；而海马、脊髓的Gly含量则增高。结论 异氟烷可能通过抑制中枢系统兴奋性氨基酸突触传递增强抑制性氨基酸突触传导而产生麻醉应用。     

当归对大鼠心肌缺血/再灌注损伤蛋白激酶C的影响

目的 目的研究当归抗心肌缺血／再灌注损伤的分子生物学机制。方法 结扎／开放左冠状动脉前降支结扎４０ｍｉｎ／开放１２０ｍｉｎ建立心肌缺血／再灌注模型。选用ＳＤ大鼠４０只,随机分成三组：对照组（Ａ组,ｎ＝１０只）,丝线穿过冠状动脉前降支但不结扎;缺血／再灌注组（Ｂ组,ｎ－１５只）,缺血／再灌注前舌静脉注射生理盐水０．８ｍｌ／１００ｇ。采用免疫组化ＳＰ法测定蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）含量和同位素标记法测定ＰＫ     

蝇蕈醇和荷苞牡丹碱对大鼠吸入异氟醚时脑环腺苷酸含量变化的影响

目的 观察 GABAA受体激动剂蝇蕈醇和GABAA受体拮抗剂荷苞牡丹碱对大鼠吸入异氟醚时脑cAMP含量变化的影响。方法SD大鼠48只,随机分为对照组,异氟醚组,蝇蕈醇+异氟醚组,荷苞牡丹碱+异氟醚组,蝇蕈醇组和荷苞牡丹碱组。采用cAMP竞争蛋白结合分析法测定大鼠不同脑区cAMP含量。结果 与异氟醚组比较,蝇蕈醇+异氟醚组的翻正反射消失时间明显缩短(P<0.05),而荷苞牡丹碱+异氟醚组却明显延长(P<0.01)。异氟醚组的大脑皮层、脑干的cAMP含量较对照组明显升高(P<0.01)。蝇蕈醇+异氟醚组的大脑皮层、脑干的cAMP含量分别较对照组和异氟醚组升高131％、34％和83％、22％(P<0.05或0.01)。荷苞牡丹碱+异氟醚组的大脑皮层、脑干cAMP含量明显高于对照组,分别较对照组升高41％和60％(P<0.01),其两脑区的cAMP含量与异氟醚组比较却无明显不同。结论 大鼠吸入异氟醚的中枢抑制作用至少部分与GABA能神经元有关。     

异氟醚麻醉对大鼠血皮质醇及海马脑源性神经营养因子和神经生长因子的影响

目的 探讨异氟醚麻醉对大鼠血皮质醇及海马脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)的影响.方法 成年SD雄性大鼠36只,10周龄,体重250～280 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组:正常对照组(C组,n=6)、O2组(O组,n=6)和异氟醚组(I组,n=24).I组通入2％异氟醚2h,纯氧流量3 L/min,O组仅通入纯氧.O组于停止通入纯氧后进行水迷宫实验,Ⅰ组分别于停止给药后2h、1、7、14 d取6只大鼠、进行水迷宫实验,定位航行实验中记录逃避潜伏期和游泳总路程,空间探索实验中记录穿越平台次数和游泳总路程.每个时点水迷宫实验结束后,取眼眶血,测定血浆皮质醇浓度;取海马组织,测定BDNF和NGF的含量.结果 与C组比较,O组空间探索实验中穿越平台次数减少,游泳总路程缩短,血浆皮质醇浓度降低,Ⅰ组于停止给药后1d时定位航行实验中逃避潜伏期和游泳总路程均延长,空间探索实验中穿越平台次数减少,游泳总路程缩短、海马BDNF含量降低(p＜0.05或0.01).结论 异氟醚麻醉对大鼠认知功能短期内有一过性抑制作用,其机制与促进皮质醇释放与海马BDNF合成有关,而与海马NGF合成无关.     

环腺苷酸-蛋白激酶A在大鼠内毒素性急性肺损伤时血红素加氧酶-1表达上调中的作用

目的 探讨环腺苷酸-蛋白激酶A(cAMP-PKA)在大鼠内毒素性急性肺损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)表达上调中的作用.方法 健康清洁级雄性SD大鼠48只,体重180 ～ 220 g,2.5 ～ 3.0月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=12)∶正常对照组(C组)股静脉注射生理盐水(LPS溶媒)0.5 ml,2h后皮下注射生理盐水(H89溶媒)0.5 ml;内毒素性急性肺损伤组(ALI组)股静脉注射10 mg/kg LPS 0.5 ml,2h后皮下注射生理盐水0.5 ml; H89+内毒素性急性肺损伤组(H+ALI组),股静脉注射10 mg/kg LPS 0.5 ml,2h后皮下注射5 mg/kg H89 0.5 ml; H89组(H组)股静脉注射生理盐水0.5 ml,2h后皮下注射5 mg/kg H89 0.5 ml.静脉注射LPS后6h时处死大鼠,取肺组织,行病理学评分,测定肺组织含水量;采用Western blot法测定HO-1和PKA表达;采用荧光定量PCR法测定HO-1mRNA表达.结果 与C组比较,ALI组和H+ALI组肺组织含水量和病理学评分升高,肺组织PKA、HO-1和HO-1 mRNA表达上调(P＜0.05),H组上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05);与ALI组比较,H+ALI组肺组织含水量和病理学评分升高,肺组织PKA、HO-1和HO-1 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 大鼠内毒素性急性肺损伤时HO-1表达上调的机制与cAMP-PKA信号通路活化有一定关系.