β-谷甾醇抗肿瘤作用研究

β-谷甾醇对肿瘤的发生发展有防治作用,可抑制肿瘤的发生、发展并诱导肿瘤细胞的分化,对肿瘤细胞的抗增殖活性与激活鞘磷脂循环、细胞周期阻滞、刺激肿瘤细胞凋亡、抗氧化活性和免疫功能的调节等相关,β-谷甾醇可作为有效的化学预防药物治疗肿瘤.     

糖原合成激酶-3β与肿瘤的发生发展

近年来许多研究证实糖原合成激酶-3β(GSK-3β)在多种肿瘤的发生发展中起重要作用,它可通过多种机制调节肿瘤细胞的生长活性.在某些肿瘤中,GSK-3β的激活可抑制肿瘤细胞的生长;而在另一些肿瘤中,GSK-3β的激活可促进肿瘤细胞的生长,同时GSK-3β也能调节肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.因此,GSK-3β有希望成为肿瘤治疗的新靶点.     

肿瘤微环境在肿瘤细胞有氧糖酵解中的作用

肿瘤的发生发展和细胞代谢异常密切相关。肿瘤细胞摄入大量的葡萄糖,即使有足够的氧份供应,也主要借助糖酵解途径产生能量满足快速生长的需求。肿瘤细胞糖酵解受多方面因素影响,肿瘤微环境即为其中之一。近年来,有证据表明在肿瘤细胞糖代谢中,肿瘤微环境的免疫/炎症因子,转化生长因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-4(Interleukin,IL-4)和白细胞介素-6(Interleukin,IL-6)等通过调控肿瘤细胞有氧糖酵解产生的能量与物质使细胞快速增殖,在肿瘤细胞糖代谢中起着至关重要的作用。因此,从肿瘤微环境中的免疫/炎症因子调控肿瘤细胞糖酵解的角度关注肿瘤的发生发展,可能为肿瘤的控制及临床治疗提供新思路。     

血管内皮生长因子受体-1与肿瘤

血管内皮生长因子受体-1（VEGFR-1）通过其酪氨酸激酶活性调节肿瘤血管的新生从而影响肿瘤的发生、发展和转移。近年研究发现一些肿瘤细胞本身也可以表达VEGFR-1,抗VEGFR-1抗体不仅可以对表达VEGFR-1的肿瘤血管内皮发生直接的抗血管生成活性,也可以通过旁分泌的配体活化VEGFR-1阳性肿瘤细胞而直接影响肿瘤的发生、发展。     

Dickkopf-1与肿瘤

Dickkopf-1(DKK-1)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)经典信号传导途径以及Wnt非经典信号传导途径在体内诱导多种肿瘤细胞凋亡,调控多种肿瘤细胞的骨转移以及促进某些肿瘤细胞的浸润和侵袭,从而在肿瘤的发生和发展方面发挥重要作用.     

TGF-β/Smads信号传导通路与肿瘤关系的研究

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一种具有多功能生物学活性的细胞因子,在调节多种类型细胞的分化、增殖、凋亡、粘附和细胞外基质的合成中发挥重要的作用[1-2].研究表明:Smads蛋白是细胞内TGF-β信号级联反应的基本组分,其主要功能是将信号从细胞膜表面传递到细胞核内,从而完成TGF-β的生物学效应.当TGF-β信号通路发生异常时,将会导致肿瘤的发生.TGF-β对大多数类型的细胞都具有较强的生长抑制作用,但有证据表明TGF-β不仅是肿瘤的抑制因子,同时还能促进肿瘤细胞的浸润和转移.     

核因子-κB与胃癌

核因子-κB与多种肿瘤的发生、发展和转移有关,并参与了肿瘤细胞抵抗放化疗的作用机制.将核因子-κB作为肿瘤治疗的新靶点,对其活性进行选择性调控,为包括胃癌在内的肿瘤治疗开辟了一条新途径.     

转化生长因子-β与肿瘤

研究表明,转化生长因子-β (TGF-β)在肿瘤初期通过抑制肿瘤细胞增殖、去分化以及促进细胞凋亡等发挥抑癌作用.但在肿瘤发展中,随着TGF-β通路相关分子发生变异以及TGF-β自身发生转变,其促癌作用逐步显现.TGF-β通路抑制剂具有抗肿瘤作用,但其临床疗效及不良反应仍有待观察.     

核因子-κB与胃癌

核因子-κB与多种肿瘤的发生、发展和转移有关，并参与了肿瘤细胞抵抗放化疗的作用机制。将核因子-κB作为肿瘤治疗的新靶点，对其活性进行选择性调控，为包括胃癌在内的肿瘤治疗开辟了一条新途径。     

TGF-β／Smads信号传导通路与肿瘤关系的研究

转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）是一种具有多功能生物学活性的细胞因子,在调节多种类型细胞的分化、增殖、凋亡、粘附和细胞外基质的合成中发挥重要的作用。研究表明：Smads蛋白是细胞内TGF-β信号级联反应的基本组分,其主要功能是将信号从细胞膜表面传递到细胞核内,从而完成TGF-β的生物学效应。当TGF-β信号通路发生异常时,将会导致肿瘤的发生。TGF-β对大多数类型的细胞都具有较强的生长抑制作用,但有证据表明TGF-β不仅是肿瘤的抑制因子,同时还能促进肿瘤细胞的浸润和转移。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA抑制乳腺癌细胞MDA-MB-435增殖及促凋亡的作用机制

目的 观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435增殖、凋亡等的作用及其相关分子机制。方法 不同浓度的SAHA作用于MDA-MB-435细胞后,采用MTT、流式细胞分析、Western blot、荧光定量PCR等方法检测细胞增殖、凋亡、周期阻滞情况及相关蛋白及mRNA表达。 结果 MTT检测结果表明SAHA可呈剂量依赖性抑制细胞增殖,流式细胞分析发现SAHA可导致G2/M期周期阻滞、线粒体膜电位下降、活性氧（ROS）产生并发生早期凋亡。同时,SAHA可下调周期蛋白cyclinB、活化p38-MAPK及JNK,抑制p53的表达且可能不是通过PI3K通路、P38 MAPK通路、ERK1/2通路和NF-κB 、JNK通路起作用。结论 SAHA能抑制MDA-MB-435细胞增殖,诱导其周期阻滞及早期凋亡,活化细胞内相关增殖分子,可作为乳腺癌潜在的候选药物。     

诃子水提取物对肺癌A549细胞抑制作用的实验研究

目的：探讨诃子水提物对人肺癌细胞A549体外增值的影响和作用机制。方法：利用MTT法检测不同剂量组的诃子水提物对肺癌A549细胞增殖的影响,通过倒置显微镜观察肺癌A549细胞的形态学变化,流式细胞仪测定各浓度组诃子水提物对肺癌细胞A549作用后的周期变化。结果：诃子水提物对人肺癌细胞A549的增殖具有抑制作用,且有浓度和时间依赖性;在显微镜下观察到典型的凋亡细胞形态特征;流式方法测定的结果显示,诃子水提物阻滞肺癌A549细胞于G0／G1期。结论：诃子水提物对人肺癌细胞A549增殖具有抑制作用,其机制是诃子水提物使细胞周期阻滞于G0／G1期并诱导细胞凋亡。     

α-干扰素与肉桂酸对人肺癌细胞增殖的抑制作用

背景与目的:有研究表明肉桂酸对肿瘤细胞有抑制作用。本实验拟进一步研究α-干扰素(alpha-interferon,α-IFN)与肉桂酸(cinnamicacid,CINN)单独及联合作用对人肺腺癌细胞增殖的抑制作用。方法:用α-IFN和CINN处理人肺腺癌A549细胞,通过绘制生长曲线、软琼脂集落形成实验、甲基绿-派洛宁染色、流式细胞术(FCM)测定等方法来研究其对细胞的增殖抑制作用。结果:与对照组相比,α-IFN和CINN能明显抑制A549细胞增殖(P<0.05),促进细胞分化(P<0.05),α-IFN和CINN联合应用时抑制作用较二者单独作用时强;细胞在软琼脂中集落形成率明显下降(P<0.05);FCM显示细胞周期移行被阻滞于G1/G0期。结论:CINN联合α-IFN能抑制肺腺癌细胞增殖,α-IFN和CINN两药联合作用效应强于α-IFN或CINN单独作用。     

芒柄花素对不同亚型乳腺癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的研究芒柄花素对人乳腺癌细胞MDA-MB-468、MCF-7、SK-BR-3的增殖及细胞周期影响。方法以三种乳腺癌细胞为研究对象,经MTT法观察不同浓度芒柄花素对乳腺癌细胞的增殖抑制情况;Western blot法检测增殖细胞核抗原（PCNA）表达情况;TUNEL法检测细胞凋亡情况;流式细胞仪观察细胞周期的改变情况。结果芒柄花素用药浓度大于20 μM时,抑制3种乳腺癌细胞的增殖, 降低PCNA蛋白的表达,G1期细胞比例均明显增多。结论芒柄花素可将细胞周期阻滞于G1期、减少PCNA蛋白的表达,从而抑制乳腺癌细胞增殖。     

Reduced succinate dehydrogenase B expression is associated with growth and de-differentiation of colorectal cancer cells

Succinate dehydrogenases (SDH), including SDHA, SDHB, SDHC, and SDHD, form the respiratory complex II in the mitochondria and play an important role in cell growth and homeostasis. In order to evaluate the expression and functional significance of SDH in colorectal cancer, the expression of four SDH subunits was analyzed, and SDHB protein was found to be significantly lower in colorectal cancer tissues. In vitro experiments including cell growth assay, colony formation assay, cell cycle analysis, and nude mouse xenograft of SDHB-transfected colorectal cancer cell line SW620 were performed. Notably, reduced SDHB expression in tumor tissues was associated with tumor de-differentiation, and restoration of SDHB could inhibit the growth of cancer cells both in vitro and in vivo. Furthermore, cDNA microarray of SDHB-transfected cell line showed that most of the differentially expressed genes are related to cell cycle control and cell proliferation. Thus, we conclude that SDHB expression is significantly decreased in human colorectal cancer tissues, and reconstitution of SDHB in colorectal cancer may be a potential therapeutic approach to inhibit aggressiveness of colorectal cancer.     

增殖细胞核抗原与p55PIK结合调控乳腺癌细胞MCF7增殖的研究

目的 观察p55PIK对乳腺癌细胞MCF7细胞周期及增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法 通过转染质粒或特异性siRNA,在乳腺癌MCF7细胞中过表达或低表达p55PIK,继而通过免疫印迹法检测p55PIK的表达,通过BrdU/PI双掺入法测定细胞DNA合成及细胞周期,并用CCK-8（cellcounting kit-8）试剂盒检测细胞增殖,最后通过免疫共沉淀技术检测明确p55PIK是否可以与增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）相结合。 结果 p55PIK过表达质粒及siRNA可分别使MCF7细胞中p55PIK成功过表达或低表达,而且过表达p55PIK可加快MCF7细胞的DNA合成,p55PIK组[DNA合成比率为（56.33±1.63）%]与Vector组[DNA合成比率为（26.27±1.85）%]比较差异有统计学意义（P<0.01）,过表达5PIK促进MCF7细胞从G0/G1期进入S期,从而调节其增殖,p55PIK组[OD450nm:（1.46±0.04）]与Vector组[OD450nm:（1.16±0.16）]比较差异有统计学意义（P<0.05）,而低表达p55PIK可抑制上述过程。免疫共沉淀证实p55PIK与PCNA之间可以相结合。 结论 p55PIK可促进乳腺癌细胞MCF7细胞周期进程及增殖,而且p55PIK可与PCNA相结合。     

奥曲肽对人肺癌细胞株A549化疗增效作用的体外研究

目的：探讨生长抑素类似物奥曲肽能否提高化疗药物对于人肺癌细胞株A549敏感性。方法：以体外培养的人肺癌细胞株A549为靶细胞,运用四氮唑盐法（MTT法）观察奥曲肽单独作用及与化疗药物顺铂共同作用对于A549生长的影响,并以流式细胞仪分析其对细胞周期的影响。结果：MTT法结果显示奥曲肽抑制A549的生长,浓度0.098mg/L-25mg/L范围内,呈剂量依赖性,与顺铂共同作用后,能够增强顺铂对于A549的敏感性。流式细胞仪测定结果显示：奥曲肽作用后,G0/G1期细胞比例增加,G2/M期细胞比例减少,二者共同作用后,此趋势更加明显。结论：奥曲肽能够抑制体外培养的人肺癌细胞株A549增殖,且与顺铂有协同作用,其机制可能是发生G0/G1期阻滞。     

The effects of cyclooxygenase-2 gene silencing by siRNA on cell proliferation, cell apoptosis, cell cycle and tumorigenicity of Capan-2 human pancreatic cancer cells

The prognosis of pancreatic cancer is still very poor. No specific effective gene therapy for pancreatic cancer has been found. As a key enzyme of the metabolic process of arachidonic acid, cyclooxygenase-2 (COX-2) has been found to be closely related to the tumorigenesis of epithelial cancers. However, the antitumor effect of small interfering RNA (siRNA) targeting COX-2 in pancreatic cancer has not yet been verified. Therefore, the aim of this study was to investigate the effects of COX-2 gene silencing by siRNA on cell proliferation, cell apoptosis, cell cycle and tumorigenicity of pancreatic cancer cells. COX-2 mRNA was detected by RT-PCR and real-time PCR. COX-2 protein was detected by Western blotting. The cell proliferation was measured by cell counting using microscopy. The cell apoptosis and cell cycle were measured by flow cytometry. The tumorigenicity of Capan-2 pancreatic cancer cells transfected with COX-2 siRNA was evaluated using a nude mouse xenograft model. The expression of COX-2 mRNA as well as COX-2 protein were downregulated after COX-2 siRNA transfection. COX-2 siRNA could inhibit the growth of Capan-2 cells significantly by decreasing the cell proliferation, increasing cell apoptosis and regulating cell cycle as well. In vivo experiments demonstrated that the mean volume and weight of subcutaneous xenografts in nude mice derived from Capan-2 cells transfected with COX-2 siRNA were significantly decreased. COX-2 siRNA could inhibit the growth of Capan-2 pancreatic cancer cells and also decrease the tumorigenicity of Capan-2 cells, implicating a new potential therapeutic target in pancreatic cancer.     

二甲双胍与结直肠癌

二甲双胍是治疗2型糖尿病的一线用药,除发挥降糖作用外,还具有抑制结直肠癌等肿瘤细胞增殖的作用。近年来大量证据表明二甲双胍能降低结直肠癌等肿瘤的发病风险及死亡率,其机制主要包括激活单磷酸腺苷活化的蛋白激酶通路,干扰细胞周期,改善胰岛素抵抗,抑制炎症反应,杀伤结直肠癌干细胞等。