家用微波炉及金属溶液在恢复陈旧石蜡包埋组织抗原性中的应用

应用家用微波炉及饱和硫氰酸铅溶液对３５倒不同陈旧性甲醛固定石蜡包埋组织切片进行免疫组化染色，其中间叶性恶性肿瘤组织５例，流行性出血热肺、肾上腺、甲状腺组织各１０例，分别使用Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ、Ｃ１同相应组织中的抗原反应，同时与常规免疫组化进行对照。结果表明：改良的免疫组化法与常规免疫组化法相比，不需要酶的消化处理，阳性染色强度大，范围广。提示，应用微波炉及金属槽液能促使陈旧性石蜡包埋组织中抗原的恢复，其染色效果明显优于常规酶液处理之方法。     

石蜡包埋组织逆转录PCR技术在病毒感染性疾病中的应用

逆转录PCR(RT-PCR)的高度敏感性为包括陈旧的临床材料在内的固定石蜡组织(PET)标本的分子研究提供了条件.用于RT-PCR的PET组织的制备理论上非常简单,首先溶解组织切片中石蜡,然后处理干组织释放DNA或RNA,在感染性病原分析时一般不做核酸纯化以减少样品污染的风险.对PET标本作RT-PCR为基础的研究成功与否取决于固定剂、固定时间、蜡块保存时间、扩增的片段长度等诸多因素[1].目前,在临床上,由于一次大量收集标本困难、低温保存难于实现等条件的限制,PET组织常常成为可用于以RT-PCR为基础的各种医学研究唯一的标本来源.许多学者在病毒感染性疾病中以石蜡包埋组织为来源进行以RT-PCR为基础的研究,以进一步明确致病因子、传染性疾病的发病机制和传播机制.本文对利用石蜡包埋组织进行进行RT-PCR技术在病毒感染性疾病的运用情况作一综述.     

碎小组织石蜡包埋的改进

在制作组织切片中,技术人员对于碎小组织的包埋普遍感到棘手,原因之一是多个碎小组织往往不能包埋在同一平面;其二是在包埋过程中组织容易丢失,且在染色过程中碎小组织容易脱落,从而导致病理诊断的不全面或误诊,继而延长诊断时间,延误病人的治疗。笔经过半年的临床实践,取得     

组织材料在石蜡包埋切片中的有效利用

目前 ,在组织学与病理学实验教学中以及诸多科研项目中 ,仍以传统的石蜡包埋切片镜下观察为主 ,应用量很多 ,并且种类繁多 ,这样材料的来源便成了一大难题 ,尤其是某些不易获取的材料则更显得极为珍贵 ,技术人员常常为如何利用仅有的一点材料制成更多、更优质的切片而大伤脑筋     

一次性塑料包埋盒在石蜡组织包埋中应用的体会

一次性塑料包埋盒因其自身的特点在病理科已得到广泛的应用。但在使用中有时会出现组织脱落、蜡块断裂及蜡块与包埋盒分离等问题，给病理制片造成困难。现将我科室的应用体会报告如下。     

石蜡包埋全眼球切片在免疫组化中的应用

传统全眼球切片，通常采用火棉腔包埋。由于该方法有切片较厚，不宜观察精细的细胞结构，旦制作程序复杂、费时较长等诸多缺点，限制了该法在临床活检及科研工作中的应用。石蜡包埋则由于全眼球标本富有大空腔，易于萎陷，眼球各部组织结构精细、脆弱，相互同依附性较差，因而在制作过程由易引起变形及移位，较难得到完整满意的切片。     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的 探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段.方法 采用石蜡切片进行脱蜡,修复抗原直接免疫荧光染色,将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较.结果 石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100%,而石蜡切片具有组织结构保存好,免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点.结论 石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段.     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段。方法采用石蜡切片进行脱蜡，修复抗原直接免疫荧光染色，将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较。结果石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100％，而石蜡切片具有组织结构保存好，免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点。结论石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段。     

用RT-PCR技术检测石蜡包埋组织中的肠道病毒RNA

目的:应用逆转录PCR技术(RT-PCR)在石蜡包埋的心肌组织切片中检测肠道病毒(柯萨奇病毒B3,CVB3)RNA.方法:用Trizol法从石蜡包埋的心肌组织切片中提取CVB3RNA,用适当的引物合成cDNA第一链,从中取出适量进行聚合酶链反应(PCR).PCR结果用琼脂糖凝胶电泳检测并将PCR产物做核苷酸序列分析.阳性对照采用CVB3感染的人羊膜细胞.结果:用RT-PCR技术可扩增出一条约500 bp(540 bp)的核苷酸片段,测序结果表明是CVB3的一个片段.结论:RT-PCR技术应用于长期保存的石蜡包埋的组织切片进行肠道病毒的检测可获得较满意结果,可将RT-PCR技术用于回顾性研究.     

微小活检组织的石蜡包埋及切片的制作方法

 介绍一种环保、简易、有效的微小组织的石蜡包埋方法。     

两种石蜡包埋组织DNA提取方法的比较

目的 比较两种不同的DNA提取方法 对DNA质量的影响.方法 选取石蜡包埋的病理组织24例,采用二甲苯脱蜡法和改良TES水浴法提取DNA.通过对所提DNA的浓度、纯度及完整性的检测,比较两种DNA提取方法 的优劣.结果 二甲苯脱蜡法提取样品D260/D280比值在1.6～1.8之间的为62.5%,电泳条带清晰可见;改良TES水浴法提取样品D2eo/D280比值在1.6～1.8之间的为41.2%,电泳条带模糊不清.结论 二甲苯脱蜡法提取DNA简单快速,需要的组织样品少,是一个值得推荐的石蜡包埋组织DNA的提取方法 .     

不同方法提取石蜡包埋组织DNA的比较分析

目的:比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种提取DNA的方法对DNA质量和回收率的影响,探讨一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法. 方法:选取新疆医科大学第一附属医院2004～2007年手术切除的10%甲醛固定石蜡包埋甲状腺癌组织标本,分别以试剂盒法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳分析. 结果:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得样本DNA的OD260/OD280比值为(1.82±0.15),改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法为(1.86±0.17),两者比较无明显差异(P>0.05);分别与试剂盒法(1.75±0.14)相比,差异有统计学意义(P<0.01).改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得 DNA产量和质量均高于试剂盒法. 结论:改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯法简单快捷,是较理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法.     

石蜡包埋口腔粘膜活检组织制片技术的改良法及应用

目的：探讨石蜡包埋口腔粘膜（Oralmucous)活检组织制片技术改良法在临床口腔诊断和实验室教学研究中的应用。方法：选用口腔唇,舌,颊,腭粘膜,组织用10％福尔马林固定,70％－100％乙醇梯度脱水,二甲苯透明,浸蜡后切片,HE染色,光镜观察。结果：能真实反映出口腔唇,舌,颊,腭粘膜上皮层,底基层,固有层,粘膜下层各层次的细胞形态结构特征。结论：用石蜡包埋口腔粘膜组织制片技术改良法效果好,为临床口腔病理诊断提供有用的依据及对实验室教学研究有一定的作用。     

PCR-RFLP技术在甲醛固定石蜡包埋组织中的应用

目的:探讨mtDNA分析技术在甲醛固定石蜡包埋组织中的应用.方法:应用限制酶RsaI和MnlI消化mtDNA D-LOOP区(HVI16106-16297)PCR扩增产物,聚丙烯凝胶电泳进行RFLP分型的方法,对随机个体血液样品150例.正常组织10例和甲醛固定石蜡包埋组织5例进行检验.结果:在150例随机个体中,Rs...     

石蜡组织块透射电镜标本快速包埋法

作者在石蜡组织块作成的电镜切片上,选择需作电镜观察的组织部位,从石蜡块上取下该组织部位,用1％四氧化锇-二甲苯混合液脱蜡再固定,环氧树脂618快速包埋,按电镜常规切片、染色,作成电镜观察用的切片,经电镜观察,效果较为满意,可达到电镜病理诊断要求。本法步骤简单易行,省时,全过程仅需两个半小时。     

石蜡包埋皮肤组织DNA提取方法的改进

医学研究中,有时新鲜材料取材困难,故常选择石蜡包埋组织用于回顾性研究。从石蜡包埋组织中提取基因组DNA有一定难度,尤其像皮肤这样纤维成分含量较高的组织DNA提取更加困难。传统的酚氯仿抽提DNA,其弊端是过程长、标本损失量相对     

活检小组织石蜡包埋的快速制片及染色方法

1　材料1.1　组织块大小 :直径小于 1cm组织。1.2　组织块脱水剂及医用固体石蜡。1.3　苏木素一伊红染色液及染色架 (半年内配制 )。1.4　医用纱布、固体石蜡、10 %甲醛液。2　方法与步骤2 .1　固体　将小标本用 2 5 cm× 2 5 cm医用纱布包裹 ,浸入10 %甲醛溶液中 2 0 m in。2 .2　脱水方法和时限　将组织块浸入 85 %乙醇 3 min,室温。然后分别放入 95 %乙醇 ,95 %乙醇 ;无水乙醇 ,无水乙醇 ;各 2 0 min,再分别放入二甲苯 ,二甲苯 ,各 5 min。温度控制在 80℃。注意 :更换每步骤前 ,必须控干液体 ;脱水时间及温度要严格控制 ;液体浓度…     

石蜡包埋组织切片原位核酸杂交研究

目的 :探讨石蜡包埋组织切片的原位核酸杂交方法 ,以检测克山病 ( KSD)尸检心肌中的RNA。方法 :应用生物素标记的人工合成寡核苷酸探针 ,对 72例心肌石蜡包埋组织切片进行原位核酸杂交。结果 :各型克山病心肌石蜡组织切片的阳性杂交信号为 80 %～ 87.9% ,而正常对照仅为 14.3%。结论 :应用人工合成寡核苷酸之原位核酸杂交技术 ,对长期保存的石蜡组织进行回顾性研究是可行的。     

广泛标记系统在石蜡包埋膀胱癌组织比较基因组杂交中的应用

目的 探讨广泛标记系统（ULS）在石蜡包埋组织比较基因组杂交（CGH）中的应用价值,研究膀胱癌石蜡包埋组织中染色体基因组非平衡性情况.方法 对比实验：正常膀胱黏膜组织基因组DNA,用DNA酶进行酶切至适当大小的片段作为探针,用广泛标记系统直接标记DNA探针,并按1：1的量与经缺口平移标记的同一个组织的DNA探针进行CGH.提取膀胱移行细胞癌石蜡包埋组织中基因组DNA,经测定浓度、纯度,并经琼脂糖电泳筛选出20例适合于CGH的标本.同法进行ULS标记,并与缺口平移法标记的正常参照DNA进行CGH.结果 对比实验中,同一个正常膀胱黏膜组织应用2种标记方法进行CGH后,荧光强度相同,不需要调整探针的量.在所有膀胱癌组织中均检测到基因组DNA的畸变,其中发生频率较高的染色体增益区段或位点位于1q、3q、5p、8q、17q;缺失区段或位点位于8p、9q、11q、11p、17p.结论 膀胱癌中存在染色体基因组的不平衡.应用石蜡包埋的组织进行间接法CGH时,ULS标记系统是一种非常有价值的标记方法.这为充分利用石蜡档案进行CGH的研究提供了良好的方法.