六味地黄丸对自杀基因系统治疗黑色素瘤的增效作用

【目的】研究六味地黄丸对HSV1-tk/GCV自杀基因系统治疗黑色素瘤的增效作用,以期探讨建立中西医结合肿瘤自杀基因联合治疗方案的可行性。【方法】培养病毒包装细胞PT67/tk,病毒上清感染黑色素瘤细胞株B16,G418筛选2周,获得抗性细胞克隆,命名为B16/tk并进行体外GCV杀伤试验;证明具有杀伤活性后,将B16/tk与野生型B16按1∶4的比例混合后接种于C57BL/6J小鼠右腋下皮下组织内,以复制小鼠移植性黑色素瘤模型。将复制模型的小鼠分为模型对照组、六味地黄丸组、自杀基因tk/GCV治疗组和联合治疗组(N=11),六味地黄丸从接种第2天起治疗25 d,tk/GCV从接种第7天起治疗20 d,另设正常对照组观察疗效。【结果】体外杀伤实验显示,GCV对B16/tk肿瘤细胞具有明显的杀伤效应,而对野生型B16肿瘤细胞无明显的杀伤作用,表明体外病毒感染黑色素瘤细胞成功,病毒携带的外源性自杀基因已表达且具有生物学活性。联合治疗(自杀基因联合六味地黄丸)对小鼠移植性黑色素瘤生长具有明显抑制作用,联合治疗组肿瘤质量与模型对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05),其抑瘤率达到87.1%;而单纯自杀基因组和六味地黄丸组肿瘤质量与模型对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),抑瘤率分别为62.8%和54.4%。病理检查结果显示,肉眼见治疗组肿瘤体积减小,以联合治疗组更明显。光镜下见治疗组肿瘤细胞密度相对较低,肿瘤周围有较多纤维结缔组织增生及炎症细胞浸润,其中联合治疗组更明显。结果表明:自杀基因联合六味地黄丸治疗对小鼠移植性黑色素瘤生长具有抑制作用,其疗效优于单纯自杀基因治疗或单纯六味地黄丸治疗。【结论】六味地黄丸可能通过自杀基因疗法旁杀伤效应的免疫机制或其他机制对肿瘤自杀基因疗法起到增效作用。该研究工作初步证明了建立自杀基因联合中医药疗法的中西医结合肿瘤基因治疗方案具有可行性。     

脑胶质瘤自杀基因疗法研究进展

自杀基因疗法是近年来备受关注的一种治疗胶质瘤的方法，可分为单自杀基因疗法和融合基因疗法．本对这两种自杀基因疗法的原理及其在治疗胶质瘤中的运用进行综述，并介绍了其临床运用和进一步发展方向．胶质瘤(gnoma)是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，其传统治疗以手术为主，辅以放疗、化疗等辅助治疗，疗效欠佳．基因治疗(gene therapy)作为治疗胶质瘤的一种新的辅助手段，逐渐受到人们的重视和关注．自杀基因疗法(suicide genetherapy)是众多基因治疗策略中疗效最明显的一种，也是最有前途的治疗策略之一.本就近年来胶质瘤自杀基因疗法研究进展作一综述。     

自杀基因联合中医药疗法治疗肿瘤的设想

自杀基因疗法是一种具有良好应用前景的肿瘤治疗新措施。但如何有效提高疗效是目前仍须解决的关键性问题。由于免疫机制在自杀基因疗法旁杀伤效应中的重要作用，激活荷瘤机体的免疫功能，改善自杀基因抗肿瘤作用的炎症免疫微环境，是提高肿瘤自杀基因疗法疗效的主要策略。中医中药在调节机体免疫状态方面具有肯定的作用，与其他方法比较具有明显优势。因而，将自杀基因疗法与中医中药联合应用，有可能起到提高肿瘤自杀基因疗法疗效，防止肿瘤复发的作用。提出了自杀基因联合中医药疗法治疗肿瘤的新设想，为肿瘤基因治疗提供了一种新的思路和模式。     

六味地黄丸对小鼠移植性肝癌自杀基因治疗增效作用的病理学研究

【目的】探讨六味地黄丸对小鼠移植性肝癌HSVt-k/GCV自杀基因治疗增效作用的病理学机制。【方法】昆明种小鼠90只,随机分为5组:正常对照组、模型对照组、六味地黄丸治疗组(剂量为10 g.kg-1.d-1)、自杀基因治疗组(腹腔注射丙氧鸟苷100 mg.kg-1.d-1)、联合治疗组;选用H22与H22/tk细胞株皮下接种建立小鼠荷肝癌模型,以自杀基因疗法联合六味地黄丸进行治疗并观察疗效;对肿瘤组织进行病理学观察和半定量分析;采用免疫组化技术及原位末端标记(TUNEL)技术观察肿瘤细胞增殖核抗原(PCNA)的表达及凋亡情况。【结果】HSVt-k/GCV自杀基因系统联合六味地黄丸治疗较单独应用HSVt-k/GCV系统或六味地黄丸能更显著地抑制肿瘤生长;免疫组化及凋亡TUNEL染色结果表明联合治疗组对肿瘤细胞增殖的抑制及对肿瘤细胞凋亡的诱导作用与模型对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。【结论】六味地黄丸对实验性肝癌的自杀基因治疗具有增效作用,其机制可能与六味地黄丸抑制了自杀基因治疗过程中肿瘤细胞的加速增殖有关,也与协同促进自杀基因治疗诱导的肿瘤细胞凋亡有关。     

人参总皂苷对黑色素瘤自杀基因治疗的增效作用

[目的]观察人参总皂苷联合自杀基因HSV-tk/GCV治疗系统对小鼠黑色素瘤的生长抑制效应,探讨人参总皂苷对黑色素瘤自杀基因治疗的增效作用.[方法]选用85只C57BL/6J雄性小鼠,除正常组5只外其他均接种含20%B16tk+细胞的tk+和tk-混合细胞,造模成功后随机分为模型组、人参总皂苷组、tk/GCV组、人参总...     

基因治疗胰腺癌的研究

胰腺癌的基因治疗是继手术、放疗和化疗等传统疗法之后肿瘤治疗的新模式,本文从自杀基因疗法和免疫基因治疗这两种主要治疗方法方面对近年来胰腺癌基闪治疗现状作简要综述.     

六味地黄丸对小鼠移植性肝癌自杀基因治疗的增效作用

【目的】观察六味地黄丸对小鼠皮下移植性肝细胞癌自杀基因治疗的增效作用,探讨建立中西医结合肿瘤自杀基因联合治疗方案的可行性。【方法】培养病毒包装细胞PT67/tk,病毒上清感染肝细胞癌细胞株H22后用G418筛选2周,获得抗性细胞克隆,命名为H22/tk并进行体外丙氧鸟苷(GCV)杀伤试验;证明杀伤活性后,将H22/tk与野生型H22按1∶4的比例混合后接种于昆明种小鼠皮下组织内造模,分为模型对照组、自杀基因治疗组、六味地黄丸治疗组和联合治疗组(N=20),并设正常对照组(N=10);六味地黄丸治疗从接种第2天起共15 d,GCV治疗从接种第6天起共11 d,观察疗效。【结果】体外实验中GCV对H22/tk肿瘤细胞具有明显的杀伤效应,表明体外病毒感染肝癌细胞成功,病毒携带的外源性自杀基因已表达且具有生物学活性。体内实验中于接种肿瘤细胞后第6天各组能触摸到肿瘤,成瘤率100%。自杀基因联合六味地黄丸治疗对小鼠移植性肝细胞癌生长速度具有明显抑制作用,以瘤块质量计算,其抑瘤率为63.0%(P<0.05);而单纯六味地黄丸治疗和单纯自杀基因治疗抑瘤率分别为46.3%和37.4%,但两者与模型组比较差异均无显著性意义。病理检查:各治疗组肉眼可见肿瘤体积均较模型对照组肿瘤体积小,以联合治疗组更明显。镜下可见各治疗组肿瘤细胞密度相对较低,肿瘤周围有较多纤维结缔组织增生及炎症细胞浸润,联合治疗组更明显,各组间差别以炎症细胞浸润最突出。【结论】六味地黄丸对小鼠移植性肝癌自杀基因治疗具有一定的增效作用,其疗效优于单纯自杀基因疗法或单纯六味地黄丸治疗。     

结肠癌肝转移基因治疗研究进展

肝脏是结肠癌的常见转移器官,结肠癌一旦发生肝脏转移,常规治疗方法包括手术、化疗、放疗等效果均不理想,基因治疗为这类患者的治疗提供了一种新的治疗方法,目前研究较多的有自杀基因治疗、免疫基因治疗、抑癌基因治疗、溶细胞性基因治疗等,部分已进行临床实验,联合应用这些疗法以获得更佳的疗效,有着广阔的前景。     

恶性黑色素瘤基因治疗的研究进展

恶性黑色素瘤（MM）多发生在成人,是一种恶性程度很高的恶性肿瘤,对放疗、化疗不敏感,且其疗效持续时间短,临床治疗很棘手。基因治疗级MM病人带来了希望,人们把MM选择为第一个基因治疗临床试用的目标,在短短10年内,MM的基因治疗已取得了长足的进展。按所用的基因可分为免疫基因治疗、反义核酸与抗癌基因治疗、自杀基因治疗及联合基因治疗,本就近几年来这几方面的研究进展作一个综述。     

乳腺癌基因治疗进展

基因治疗的方式有两类:(1)基因矫正和置换;(2)基因增补。目前研究的基因治疗方法主要有免疫基因治疗、癌基因拮抗治疗、化学基因治疗(多药耐药基因治疗和自杀基因治疗)、抗肿瘤血管形成基因治疗、使用溶瘤病毒的治疗等措施。目前还没有一种基因治疗可代替常规疗法,基因治疗与常规疗法相结合,是乳腺癌治疗的发展趋势。随着乳腺癌发病机制的深入研究,乳腺癌相关基因的不断发现,乳腺癌基因治疗将取得更多突破,为临床治疗提供新的途径。     

结直肠癌的基因治疗

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,目前治疗以外科手术为主,辅以放、化疗,术后5年生存率在50%左右。肿瘤基因治疗发展迅速,作为一种新的辅助治疗手段有重要意义。结直肠癌中研究比较多的是免疫基因治疗、自杀基因治疗、抑癌基因的应用等。基因疗法可以有效地杀伤肿瘤细胞,联合传统治疗方法可延长结直肠癌患者的生存时间,提高生活质量。     

自杀基因系统联合六味地黄丸对肝癌细胞杀伤的协同作用

[目的]观察六味地黄丸含药血清协同HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统杀伤大鼠肝癌CBRH7919细胞的作用,探讨建立自杀基因联合中药方药的肿瘤基因治疗联合方案的可行性.[方法]构建HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统,确定丙氧鸟苷(GCV)工作浓度(39.2 μmol/L);选用SD大鼠灌胃制备六味地黄丸含药血清和空白血清,并观察含药血清和空白血清对肿瘤细胞生长的影响.设空白对照组、GCV对照组、自杀基因治疗对照组,以上3组均为无大鼠血清的对照组.空白血清组、GCV加空白血清组、自杀基因系统加空白血清组、含药血清组、GCV加含药血清组、自杀基因系统联合含药血清组中,所有大鼠的空白血清和含药血清再分为体积分数5%和7.5%2种浓度,每组设6个复孔.将大鼠肝癌细胞CBRH7919/tk 和CBRH7919/tk-混合,使tk 细胞的比例分别占0%、5%、10%,按3×103个/孔细胞分别接种到96孔板,用完全培养基培养细胞24 h后,相应加入体积分数5%或7.5%的大鼠空白血清和含药血清,孵育J2 h,加入GCV,培养60 h,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,用Q值(实测药效与理论药效的比值)分析自杀基因系统与含药血清联合的相互作用是否具有协同性(0.85≤Q＜1.15为相加作用,Q≥1.15为协同作用).[结果]空白血清和含药血清浓度在体积分数20%以下时未显示明显细胞毒性;血清浓度为体积分数5%和7.5%时,自杀基因系统联合含药血清组与单独含药血清组及自杀基因系统加空白血清组比较,联合组对肿瘤细胞的杀伤作用均强于其他非联合组,细胞存活率均有显著性差异(P＜0.01),而且自杀基因系统联合含药血清的作用具有明显的协同性(Q＞1.15).[结论]HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统联合六味地黄丸对杀伤肿瘤细胞具有协同增效作用.     

神经胶质瘤基因治疗的研究进展

脑胶质瘤基因治疗按所用的基因可分为细胞因子基因治疗、抑癌基因治疗、反义核酸治疗、自杀基因治疗、抗肿瘤血管生成治疗及联合基因治疗,本文就其研究进展做以综述。     

胶质瘤的基因治疗进展

胶质瘤即神经上皮组织肿瘤,是最常见的颅内肿瘤。目前手术、放疗、化疗等常规治疗效果差,而随着基因技术的不断深入研究,如何能利用基因有效治疗胶质瘤成为研究热点,其基因治疗的分子策略主要包括细胞周期调节、自杀基因疗法、免疫基因疗法、抑癌基因治疗、抗血管生成治疗、PKR途径等,     

骨肉瘤基因治疗及载体系统研究现状

近年来,有关骨肉瘤基因治疗的研究在基因治疗方法、基因载体、载体导入途径等方面取得了较大进展。骨肉瘤的基因治疗主要有免疫基因治疗、反义基因治疗、抑基因治疗、自杀基因治疗及联合基因治疗等。基因载体包括病毒载体和非病毒载体。     

自杀基因治疗肺癌研究进展

随着外科手术技术的日益完善，先进设备的广泛应用，外科手术禁区已经越来越少，与手术本身有关的并发症及死亡率将不再是主要问题。然而恶性肿瘤治疗的远期疗效却一直不能得到有效提高。随着分子生物学的发展，各种疾病的基因治疗已经成为一项跨世纪的工程，而恶性肿瘤的基因治疗更是目前医学界十分关注的热点问题。基因疗法可能是根治恶性肿瘤的有效途径。而利用自杀基因治疗肺癌的治疗研究目前比较热门，也取得了一些成果。     

基因治疗：过去、现在和未来

基因治疗最初的概念是将包含正常基因的DNA序列通过载体导入细胞内以矫正由于该基因缺陷所导致的疾病。由于这个概念非常直观且易于接受，而临床上众多基因缺陷导致的遗传性疾病基本无药可治，因此基因治疗产生伊始便受到了高度关注。随着20世纪七八十年代以来基因工程技术的长足发展，基因治疗从实验室研究进入了临床探索，并于1990年完成了第一个基因治疗的临床试验，进入了一个高速发展期。10年后由于美国的一项基因治疗临床试验发生了患者的意外死亡，全球的基因治疗研究明显放缓。基因治疗的重新兴起以美国食品药品管理局(FDA)批准的治疗Leber先天性黑朦的Luxturna(2017)和用于治疗脊髓性肌萎缩症(SMA)的Zolgensma(2019)上市为标志，疗效确切、价格昂贵的基因药物终于成为临床医生手中能够为以往束手无策的患者解除病痛的有力武器。而除了基因替代性基因补充疗法，针对临床不同需求的基因编辑性基因矫正疗法、基于反义寡核苷酸和小干扰RNA的基因抑制疗法、基于基因开关的基因调控疗法等多种基因治疗方法均在综合研发中。为促进我国基因治疗的发展，本研究概述了基因治疗的发展过程和近年来的发展现状，并展望了...     

肝癌细胞的基因修饰治疗研究进展

肝癌的基因治疗是肿瘤基因治疗的研究热点之一,其治疗方案包括:肝癌的抑癌基因治疗,肝癌的反义基因治疗,肝癌的自杀基因治疗和肝癌的免疫基因治疗。利用导入肝癌细胞的各种基因干扰或破坏肝癌细胞的代谢,从而杀死肝癌细胞,这称为肝癌细胞的基因修饰,本文就这方面研究进展作一综述。一、抑癌基因抑癌基因包括Rb、P53、P16、P21、myc、nm23等。人们在抑癌基因疗法研究中开展了两方面工作:一是利用抑癌基因疗法治疗已发生的肿瘤;二     

应用TK自杀基因治疗骨肉瘤的研究进展

近年来，人们针对骨肉瘤及其肺转移的基因治疗方面进行了多领域的研究，尤其是在应用自杀基因治疗骨肉瘤方面取得了许多可喜成果，比如替代性前体药物的研究、肿瘤特异性启动子联合自杀基因的研究等。本文就TK自杀基因在骨肉瘤基因治疗中的研究进展进行综述。     

骨肉瘤基因治疗研究进展

随着骨肉瘤发生机制研究不断深入,骨肉瘤基因治疗技术得到很大发展.目前常用的骨肉瘤基因治疗策略有反义基因治疗、抑癌基因治疗、免疫基因治疗、自杀基因治疗、抗血管生成基因治疗、联合基因治疗等方法.该文就骨肉瘤基因治疗研究进展作一综述.