鼻息肉中核因子κB亚单位P50活性与IL-4、γ-IFN因子表达的关系

目的 测定鼻息肉中核因子κB亚单位P50的活性及其与IL-4、γ-IFN表达的关系,探讨P50对TH1/TH2细胞因子表达调节的可能机制。方法采用SP免疫组化染色法检测40例鼻息肉患者与20例正常钩突黏膜中IL-4、γ-IFN、P50的表达,以核染阳性率来评估P50活性。对P50活性与IL-4,γ-IFN因子行直线相关分析。结果①鼻息肉中P50胞浆、胞核均有阳性表达,主要位于上皮细胞、炎症细胞及腺上皮细胞胞浆,P50活性显著增强(P<0.001),IL-4表达亦明显增强(P<0.001), γ-IFN表达无明显改变(P>0.05);②Pearson相关性分析提示,P50活性与IL-4表达呈直线正相关关系(r=0.70, P<0.001),而与γ-IFN表达无相关性(r=0.14, P=0.40)。结论鼻息肉中P50的活性明显增强,P50的激活上调IL-4的表达可能是鼻息肉中Th1/Th2因子失衡的重要环节之一。     

鼻息肉中MMP-9和NF-κB的表达研究

目的：研究鼻息肉MMP-9和NF-κB的表达及其意义。方法:应用免疫组化的方法检测正常鼻黏膜和鼻息肉MMP-9和NF-κB的表达，图像分析系统进行半定量。结果:MMP-9在正常对照组中有弱阳性表达，而鼻息肉组的表达显著增强，主要在上皮细胞、炎症细胞、内皮细胞和腺上皮细胞中表达。NF-κB在正常对照组的胞浆呈弱阳性表达，而在鼻息肉的上皮细胞、炎症细胞和间质细胞的细胞核内表达呈强阳性；两种因子表达显著相关。结论:NF-κB和MMP-9的表达可能对鼻息肉的发生和发展有重要作用，而且在鼻息肉中NF-κB可能对MMP-9的表达也有调控作用。     

核因子κB与鼻息肉

核因子κB(nuclearfactor kappa B,NF-κB)是一种分布和作用均十分广泛的真核因子,参与多种免疫分子基因表达和调控,在炎症反应、免疫反应、凋亡等方面发挥重要的调节作用.NF-κB与鼻息肉(nasal polyps,NP)的发生发展密切相关,并为NP的治疗提供了理论依据.     

核因子κB与鼻息肉

核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)是一种分布和作用均十分广泛的真核因子,参与多种免疫分子基因表达和调控,在炎症反应、免疫反应、凋亡等方面发挥重要的调节作用。NF-κB与鼻息肉(nasal polyps,NP)的发生发展密切相关,并为NP的治疗提供了理论依据。     

PKC-NF-κB信号传导系统对变应性鼻炎Th2细胞因子IL-4及IL-5表达的调控

目的:探讨PKC-NF-κB信号传导系统在调节变应性鼻炎(AR)T淋巴细胞的活化及IL-4、IL-5表达及其在发病过程中的作用.方法:24例急性发作期AR患者和24例健康成人为研究对象,分别从每位受试者的外周血中分离出T淋巴细胞并分成3组进行培养;第1组为空白对照(正常空白对照组及 AR空白对照组);第2组加入终浓度为20 nmol/L的PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)(加PMA 正常组及加PMA AR组);第3组同时应用PKC激动剂PMA和终浓度为100 μmol/L的NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) (加PMA和PDTC 正常组及加PMA和PDTC AR组).将培养的T淋巴细胞涂片,用免疫组织化学染色方法检测NF-κB的表达,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中的IL-4及IL-5含量.结果:加PMA AR组T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与正常空白对照组及AR空白对照组比较,差异有统计学意义(均P<0.01);与加PMA正常组及加PMA和PDTC正常组T淋巴细胞比较,差异有统计学意义(均P<0.01);与加PMA和PDTC AR组T淋巴细胞比较,差异有统计学意义(P<0.01).同时,加PMA和PDTC AR组T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与加PMA AR组、AR空白对照组、正常空白对照、加入PMA正常组、加入PMA和PDTC正常组比较,差异有统计学意义(均P<0.01).T淋巴细胞NF-κB活化细胞的百分比与培养上清中IL-4和IL-5含量呈显著正相关性(r=0.88、0.85,均P<0.01).结论:T淋巴细胞PKC活化后使IL-4和IL-5的表达增加的生物信号能通过激活NF-κB来实现,T淋巴细胞的PKC-NF-κB信号传导系统可能是变应性鼻炎发病机制中的重要环节之一.     

鼻息肉组织中IL-4 IL-5 IL-6和IL-8的含量及其表达

目的：通过检测鼻息肉组织中IL-4、IL-5、IL-6、IL-8的水平及表达方式,探讨细胞因子在鼻息肉形成中的作用。方法：应用放射免疫法检测54例鼻息肉组织（鼻息肉组）中IL-4、IL-5、IL-6及IL-8的浓度,同时用免疫组织化学法观察其表达,以22例行鼻中隔手术患者中鼻甲黏膜作为对照（对照组）。结果：鼻息肉组IL-5及IL-8水平均明显高于对照组（均P〈0．01）;而IL-6在两组间差异无统计学意义（P〉0．05）;IL-4在变应原皮试阳性组明显增加,与对照组比较P〈0．05。IL-4主要表达于息肉组织内炎性细胞,多为淋巴细胞或浆细胞;IL-5主要表达于鼻息肉组织中嗜酸粒细胞和淋巴细胞;IL-6、IL-8主要表达于息肉上皮层及息肉组织中的炎性细胞,皮试阳性组和阴性组间无明显区别。结论：IL-5及IL-8在所有鼻息肉组织中具有一定作用,而IL-4仅在变应原皮试阳性息肉中具有一定意义,IL-6在鼻息肉组织中无明显作用。     

克拉霉素对离体鼻息肉组织中环氧合酶-2及核因子κB表达的影响

目的：检测用不同浓度梯度的克拉霉素干预后,离体鼻息肉组织中环氧合酶-2（COX-2）及核因子κB（NF-κB）的表达状况,探讨其在鼻黏膜炎症机制中的作用。方法：将鼻息肉组织块分别与克拉霉素（0、10^-6、10^-5及10^-4mol／L）于体外共同培养1d,应用Western blot和荧光实时定量PCR技术检测COX-2和NF-κB亚基的表达水平,观察克拉霉素干预后COX-2和NF-κB表达的变化规律。结果：对照组（0mol／L克拉霉素组）鼻息肉组织中COX-2、NF-κBp50和NF-κcBp65的蛋白质和核酸表达水平最高;随着克拉霉素干预剂量的增加,COX-2、NF-κBp50和NF—κBp65的表达水平呈剂量依赖性下降。相关分析表明,同一组鼻息肉组织中,COX-2核酸表达量分别与NF-κBp50、NF-κBp65呈直线正相关。结论：COX-2异常表达参与了鼻-鼻窦黏膜慢性炎症反应,克拉霉素可能通过阻断NF-κB通路来下调COX-2的合成,发挥其抗炎作用。     

核因子-kappa B活化对鼻息肉组织中PKC、IL-8表达活性的影响

目的探讨核因子-kappa B p65(NF-κB p65)活化对鼻息肉组织中蛋白激酶C-α(PKC-α)和白细胞介素- 8(IL-8)表达的影响及其在鼻息肉发病机制中的可能作用。方法息肉组织标本35例,正常下鼻甲黏膜16例,免疫组织化学技术检测NF-κB p65、PKC-α、IL-8的表达活性。结果鼻息肉中的NF-κB p65、PKC-α和IL-8表达活性明显高于下鼻甲黏膜,差异有统计学意义(P<0.01);NF-κB p65表达活性与PKC-α和IL-8呈正相关(r分别为0.902,0.946,P<0.01);PKC-α表达活性与IL-8呈正相关(r=0.970,P<0.01)。结论NF-κB-PKC信号传导通道可以调节IL-8的表达活性,是鼻息肉发病的重要机制之一。     

内毒素刺激前后鼻黏膜上皮细胞中Toll样受体4 mRNA及核因子κB p50亚型mRNA的表达及意义

目的探讨内毒素(即脂多糖,lipopolysaccharide,LPS)刺激前后 Toll 样受体4(Tolllike receptor 4,TLR4)mRNA 和核因子 kB(nuclear factor kB,NF-kB)p50亚型 mRNA 在正常鼻黏膜上皮细胞中的表达及意义。方法在15例成人鼻中隔偏曲患者(无鼻-鼻窦炎)矫正术中,取正常中鼻甲外侧黏膜组织各2份行组织外植块培养,其中15份加 LPS 刺激培养为 LPS 组,另外为培养组。应用 HE 染色光镜下观察鼻黏膜组织上皮细胞的病理形态学改变;应用核酸分子原位杂交技术检测离体培养正常鼻黏膜组织上皮细胞中 TLR4 mRNA 和 NF-kB p50 mRNA 的表达情况。结果①LPS刺激后,光镜下见正常鼻黏膜上皮细胞纤毛有粘连成束、胞体增大的病理形态学改变;②LPS 组 TLR4mRNA 表达明显高于培养组;LPS 组表达阳性区平均吸光度为1.283±0.027,培养组为0.538±0.038,二组间差异有统计学意义(t=1.761,P<0.05);③NF-kB p50 mRNA 在 LPS 组均出现阳性表达,而培养组阳性率仅为26.7%。LPS 组明显高表达于培养组,且以胞核表达为主,LPS 组表达阳性区平均吸光度为1.668±0.037;培养组为0.372±0.052,二组间差异有统计学意义(t=2.624,P<0.01)。结论 LPS 能通过 TLR4活化 NF-kB p50,进而激活正常鼻黏膜上皮细胞。这可能在 LPS 对鼻黏膜上皮细胞激活和损伤效应中具有一定的作用。     

核因子κB与鼻息肉

核因子KBnuclear factor kappaB，NF—kB）是一种分布和作用均十分广泛的真核因子，参与多种免疫分子基因表达和调控，在炎症反应、免疫反应、凋亡等方面发挥重要的调节作用。NF-kB与鼻息肉nasal polyps，NP）的发生发展密切相关，并为NP的治疗提供了理论依据。     

鼻息肉组织中Th_1、Th_2细胞因子的表达及其意义

目的 :探讨 IL- 4、IL- 5等 8种细胞因子在鼻息肉发病中的作用和对鼻息肉治疗的意义。方法 :采用酶联免疫吸附实验 (EL ISA)法检测 2 5例鼻息肉患者鼻息肉组织中 Th1 细胞因子 IFN- γ、IL- 2、IL- 12和 Th2 细胞因子 IL- 4、IL- 5、IL- 8、IL- 10、IL- 13的表达 ,并比较经皮质激素治疗前后鼻息肉中细胞因子表达的差异。结果 :2 5例中 ,IL- 4、IL- 5、IL- 8、IL- 10、IL- 13等 Th2 细胞因子的表达较正常组织增高 ,其中以 IL- 4、IL- 5最为显著 ,分别达3.9倍和 8.8倍 ;应用皮质激素后细胞因子的表达水平显著降低 ,而 IFN- γ、IL- 2、IL- 12等 Th1 细胞因子浓度较正常组织中降低 ,应用激素后其表达无明显改变。结论 :Th2 细胞因子 IL- 4、IL- 5、IL- 8、IL- 10、IL- 13等的升高 ,在鼻息肉的发病过程中可能具有重要的意义 ,通过改变 Th2 细胞因子的表达趋势 ,可能对鼻息肉的治疗具有一定的意义。     

IL-12和IL-4在鼻息肉表达的意义

目的探讨鼻息肉组织中T辅助细胞1（Th1）和Th2细胞及细胞因子IL 12和IL 4的含量及意义。方法标本取自30例鼻息肉患者的息肉组织和20例行鼻中隔手术患者的正常中鼻甲黏膜（对照组）。新鲜鼻息肉手术标本和正常中鼻甲黏膜制备单细胞悬液,流式细胞术测定Th1和Th2细胞的百分率。用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测IL 12和IL 4在冰冻鼻息肉标本和正常中鼻甲黏膜的含量。结果鼻息肉组织以Th1细胞亚群为主,且其中Th1和Th2细胞亚群显著高于对照组（P<0.05）;鼻息肉组织IL 12、IL 4的水平高于对照组（P<0.05）;Th1细胞百分率与IL 12的水平正相关（P<0.05）,Th2细胞百分率与IL 4的水平正相关（P<0.05）,IL 12的水平与IL 4负相关（P<0.05）。结论鼻息肉中Th细胞在IL 12和IL 4作用下分化为Th1和Th2,二者共同参与鼻息肉的发生发展和免疫应答。     

流式细胞术检测IFN-γ、IL-4在鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血表达的差异

目的检测鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血单个核细胞（PBMC）内IL-4，IFN-γ的表达，探讨细胞因子与鼻息肉和变应性鼻炎发病的关系，以及二者发病机制的不同。方法用流式细胞仪测定30例鼻息肉患者、30例变应性鼻炎患者和30例健康人的PBMC，经PMA诱导培养后IFN-γ／和IL-4的水平，与健康对照组比较，进行统计学分析。结果鼻息肉组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN-γ^＋和CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量均较健康对照组明显升高，比较有统计学意义（P〈0．05）。变应性鼻炎组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN—γ^＋含量较健康对照组明显降低，而CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量则明显升高，比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论鼻息肉患者体内分泌IFN-γ、IL-4均增高，分泌多种细胞因子，在鼻息肉的发生发展中起到网络调节作用。而变应性鼻炎患者分泌IL-4增高，分泌IFN-γ却受到抑制，这种细胞因子失平衡可能在变应性鼻炎发病机制中起到重要作用。     

喉癌组织细胞核因子κB的表达及意义

目的 :探讨喉癌组织中细胞核因子κB(NF κB)的表达及意义。方法 :应用免疫印迹杂交法测定 2 0例喉癌组织及 10例正常喉黏膜组织的NF κBp6 5蛋白表达水平 ,以及应用凝胶电泳迁移率法测定NF κB的DNA结合活性。结果 :喉癌组织中NF κBp6 5蛋白表达水平及NF κB的DNA结合活性均明显高于喉正常组织 (P <0 .0 5 )。结论 :NF κB是喉癌相关的一种癌蛋白 ,在喉癌的发生和发展中发挥作用。     

细胞因子与鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润增多的关系

鼻息肉是多种因素作用下的鼻粘膜慢性炎性病变。其中 ,以病变组织中嗜酸性粒细胞浸润增多为病理特征的鼻息肉约占 80 %～ 90 % ,其发生机制尚未阐明。局部微环境中组织来源的细胞因子 ,对包括嗜酸性粒细胞在内的炎性细胞的生物学活性发挥重要的调控作用。在目前缺乏统一的宏观认识的情况下 ,从局部微环境的角度 ,探讨细胞因子对鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞浸润增多这一明确病理学改变的作用机制 ,已成为学者们关注的焦点。1　概述细胞因子主要来源于 CD4 阳性 T细胞 ,依据所分泌细胞因子的不同 ,可分为 Th1细胞和 Th2 细胞两型。前者主要分…     

核因子κB在分泌性中耳炎动物模型鼓室黏膜中的表达

目的检测核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在分泌性中耳炎(secretory otitis media,SOM)动物模型鼓室黏膜中的表达,探讨NF-κB活化在SOM发病机制中的作用。方法应用灭活肺炎链球菌注入豚鼠中耳腔,制作SOM动物模型,采用免疫组织化学的方法检测致病鼠鼓室黏膜上皮在注入细菌后6h、1d、3d、7d及14d后NF-κBp65、TNF-α和IL-1β的表达及其关系。结果SOM动物模型的鼓室黏膜上皮中NF-κBp65在术后6h就有表达,24小时表达最强,随后表达明显下降,TNF-α和IL-1β的表达也出现相应波动。结论灭活肺炎链球菌致SOM的早期,NF-κB即被激活,在鼓室黏膜中出现过度表达,并与SOM发病中的重要致炎因子TNF-α和IL-1β的产生相关,提示NF-κB与SOM发病机制密切相关。     

核转录因子κB p65在喉癌中的表达及临床意义

目的：探讨核转录因子κBp65（NF-κBp65）在喉癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学及原位杂交方法,检测48例喉癌组织和20例正常喉黏膜组织中NF-κBp65的表达水平及与肿瘤生物学行为间的关系。结果：①NF-κBp65的表达在喉癌与正常喉黏膜组织间的差异有统计学意义（P〈0.05）。②NF-κBp65的高表达与颈淋巴结转移和临床分期有相关性,而与肿瘤部位及病理分化无相关性。结论：NF-κBp65是判断喉癌预后极具价值的指标。     

变应性鼻炎鼻黏膜组织中NF-κB p50表达及其与DNA结合活性的研究

目的:探讨核转录因子-κB亚单位p50(NF-κB p50)在季节性变应性鼻黏膜中的表达及活性状态.方法:采用免疫组织化学方法检测16例季节性变应性鼻炎(SAR组)下鼻甲黏膜组织中NF-κB p50的表达,其中6例为非发作期患者,10例为发作期患者;并与10例鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜进行对照.采用电泳迁移率滞后分析(EMSA)检测鼻黏膜组织中核蛋白提取物与特异性NF-κB探针的结合活性.结果:NF-κB p50在SAR组及对照组中均有表达,p50阳性表达主要分布在2组鼻黏膜的上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞质和部分胞核中;SAR组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率发作期是(41.83 ±4.43)%,非发作期是(37.19±3.93)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率仅(8.89±1.32)%.SAR组(包括发作期和非发作期)与对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率间比较差异有统计学意义(P<0.01);SAR组NF-κB的DNA结合的32P标记电泳带密度扫描值为32.14±8.73,与对照组(11.12±3.42)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在对照组鼻黏膜中保持低水平的表达,在SAR鼻黏膜中表达显著增高,且其与DNA-蛋白结合活性增高,提示NF-κB p50可能参与维持鼻黏膜的生理功能,并在SAR鼻黏膜持续慢性炎症反应中起重要作用.     

细菌脂多糖增加小鼠耳蜗核因子κB的DNA结合活性

目的 探讨鼓室内注射细菌内毒素脂多糖（lipoplysaccharide,LPS）是否诱发小鼠耳蜗中转录因子核因子κB（nuclear factor-κB,NF－κB)的激活，建立耳蜗组织NF－κB激活的研究方法。方法 CBA小鼠12只，分别鼓室内注射LPS（6只）或生理盐水（6只），3h后耳蜗进行核蛋白提取并定量，将核提取物与^32P标记的NF－κB寡核苷酸探针进行结合，通过4．5％聚丙烯酰胺凝胶电泳分离结合与游离探针，放射自显影分析，以检测耳蜗中核蛋白提取物与特异性NF－κB探针的结合活性，并用NF－κB亚单位P65和P50抗体进行超滞后分析。结果 LPS组NF－κB的DNA结合活性较生理盐水组明显增高。超滞后分析表明预先与P65和P50抗体反应的LPS组出现明显滞后电泳带，提示NF－κB激活与P65和P50亚单位有关。结论 鼓室内注射LPS可诱发耳蜗NF－κB激活，该方法可为进一步研究耳蜗NF－κB激活提供阳性动物模型。