伴有t(12;21)易位的儿童急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

目的　研究我国儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)中伴有t(12 ;2 1)易位者的发生率及其临床、免疫学和预后的特征。方法　采用套式逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测TEL AML1融合基因转录本 ,联合染色体R带核型分析和流式细胞仪免疫表型分析等方法。结果　在 5 5例儿童ALL(B系ALL 40例 ,T系ALL 13例 ,T、B系双表达ALL 2例 )中共发现 8例 (2 0 % )B系ALL有TEL AML1融合基因转录本 ,证实有t(12 ;2 1)易位存在。治疗后 8例均获完全缓解 (CR) ,随访至 1999年 5月 ,均在CR中 ,无一例复发。结论　t(12 ;2 1)B系ALL是儿童ALL中最多见且预后较好的一种亚型。RT PCR检测TEL AML1融合基因转录本是诊断t(12 ;2 1)ALL和监测其微小残留病最敏感有效的方法。     

Molecular findings in childhood leukemia in Brazil: high frequency of MLL-ENL Fusion/t(11;19) in infant leukemia

Translocations involving chromosome 11q23 are frequently found in pediatric leukemia, especially in infants. The mixed lineage leukemia (MLL)-AF4 fusion/t(4;11) is mostly found in acute lymphoblastic leukemia (ALL) and MLL-AF9 fusion/t(9;11) in acute myeloid leukemia (AML). We study 441 consecutive new cases of childhood leukemia diagnosed in Brazil. Chromosomal translocation was determined solely by conventional polymerase chain reaction (PCR) in 72 out of 265 ALL and in 43 out of 103 AML. MLL-AF4 fusion/t(4;11) was detected in 3 out of 265 ALL and MLL-AF9 fusion/t(9;11) in 4 out of 103 of AML. MLL-rearrangements were presented in 7 out of 23 infant leukemia, whose 5 were MLL-ENL fusion/t(11;19). No fusion MLL-AF4 fusion/t(4;11) was found. Other translocation frequencies differed from that reported for an American population suggesting interethnic differences on chromosomal translocations frequencies in acute leukemia.     

160例急性淋巴细胞白血病MICM分型及其治疗和预后相关性的研究

目的 研究儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）的MICM分型及其与治疗、预后的相关性。方法 采用细胞形态学检查、染色体R带或C带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测和套式逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测TEL－AML1、BCR－ABL融合基因转录本。结果 在160例儿童ALL中，76例为L1型，73例为L2型，5例为L3型，6例不能分类。在核型分析的151例中，75例（49．7％）有克隆性染色体异常。包括超二倍体16例，假二倍体12例，亚二倍体26例，染色体易位21例。后者包括t（4；11）7例，t（9；22）6例，其他少见易位8例。进行过免疫表型分析的128例中，64例（50％）为B系表达，38例（29．7％）为T系表达，14例（10．9％）为T、B混合表达，6例为B系、髓系混合表达，3例为T系、髓系混合表达，其他3例。套式RT－PCR检测到TEL－AML1融合基因转录本11例、BCR－ABL融合基因转录本2例。125例ALL患儿分别接受DOLP（柔红霉素、长春新碱、左旋门冬酰胺酶、泼尼松或左旋门冬酰胺酶、泼尼松或地塞米松）方案治疗，其中116例（92．85）获得完全缓解（CR）。CR达2年以上者16例，1年以上者28例，6个月以上者17例。结论 MICM分型由于能反映ALL的本质，因而比FAB分型更精确、完善，并且对于指导临床用药、提高ALL患儿缓解率和长期生存率有重要价值。     

儿童急性淋巴细胞白血病常见融合基因的检测及意义

目的建立逆转录-巢式PCR检测融合基因的方法,检测4种常见融合基因在儿童急性淋巴细胞白血病中阳性率,并对阳性患儿进行初步临床资料分析。方法对收治的92例初发的急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿,于化疗开始前抽取骨髓标本1.5～2.0 ml,采用巢式RT-PCR方法检测最常见的4种融合基因:TEL/AML1、E2A/PBX1、m-BCR/ABL和AF4/MLL。结果92例ALL患儿中TEL/AML1阳性21例,阳性率22.8%,占B细胞性ALL的24.7%(20/81例);6例E2A/PBX1阳性(6.5%),在前B细胞性ALL中占20.0%(3/15例);2例AF4/MLL阳性(2.2%),在婴儿ALL中占33.3%(2/6例);仅检测到1例m-BCR/ABL阳性(1.1%)。结论巢式RT-PCR方法是检测融合基因有效、敏感的方法。TEL/AML1在儿童ALL中阳性率最高,尤其是在B细胞性ALL中,该融合基因阳性的患儿病情较轻。     

E2A-PBX1融合基因的实时定量检测在小儿急性淋巴细胞白血病微小残留病监测中的应用

目的：实时荧光定量PCR方法检测E2A-PBX1融合基因的表达水平,探讨其在监测急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿微小残留病（MRD）及判断预后中的临床价值。方法：采用实时荧光定量RT-PCR方法,动态检测11例E2A-PBX1融合基因阳性的ALL患儿在初治期（11例）、完全缓解期（11例）、复发期（3例）和10例同期骨髓细胞形态学正常的非血液及肿瘤疾病对照组患儿的E2A-PBX1融合基因表达水平。结果：11例ALL患儿初治期和复发期的E2A-PBX1基因表达水平均显著高于缓解期及对照组（P<0.01）。与诱导缓解治疗第33天E2A-PBX1水平表达阴性的患儿比较,表达阳性的患儿3年的复发率增高,无病生存率降低（均P<0.05）。结论：实时荧光定量RT-PCR检测E2A-PBX1融合基因的表达水平是监测MRD、预测复发、指导个体化治疗的良好指标,诱导缓解第33天E2A-PBX1融合基因水平可用于判断预后。     

TEL-AML_1阳性儿童急性淋巴细胞白血病近期疗效分析

目的探讨TEL-AML1融合基因阳性儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床和预后特征。方法应用RT-PCR技术,对213例初诊ALL患儿骨髓进行t(12;21)染色体检测和TEL-AML1融合基因检测。结果213例ALL中25例(11.7%)存在t(12;21)染色体改变和TEL-AML1融合基因阳性,25例患儿发病时平均年龄5.8岁(2～10岁),均为非T细胞系免疫表型,以普通型ALL为主,经诱导化疗后全部得到完全缓解。结论t(12;21)/TEL-AML1表达是儿童ALL较为常见的遗传学改变,该类型儿童ALL经化疗预后良好。     

Characteristics of patients with TEL-AML1-positive acute lymphoblastic leukemia with single or multiple fusions

BACKGROUND: The TEL-AML1 fusion in precursor-B ALL is generated by a cryptic 12;21 translocation that is detectable by fluorescence in situ hybridization (FISH). It is generally considered a favorable prognostic indicator. Some TEL-AML1+ ALL patients present at diagnosis with extra copies of the fusion, enumerated by FISH. The aim of the study was to determine whether additional copies of TEL-AML1 have clinical significance. PROCEDURE: Charts of all TEL-AML1+ ALL patients at the UM and Children's Hospitals and Clinics of Minnesota between 1996 and 2004 were reviewed. RESULTS: Eight patients (7 males/1 female, mean age 46 months) with two or more TEL-AML1 fusion signals and 24 with single TEL-AML1 fusion signals (18 males/6 females, mean age 52 months) were identified. There was no statistically significant difference in age or gender between the two groups. Patients with double TEL-AML1+ had a higher frequency of myeloid markers CD13 (P = 0.04) or CD33 (P = 0.003) than single TEL-AML1+ patients. Single TEL-AML1+ patients had higher WBC (P = 0.04) than double TEL-AML1+ patients. A trend toward slower therapy response was seen in double TEL-AML1+ patients versus single, (1 of 7 [14%] <5% marrow blasts on Day 7 vs. 13 of 23 [56%], P = 0.09). Double TEL-AML1+ patients had a higher relapse rate (P = 0.09) than single TEL-AML1+ patients. CONCLUSIONS: Utilizing FISH to distinguish subgroups of TEL-AML1 fusion patients may have important prognostic implications. The presence of an extra fusion may portend poorer prognosis. A larger and longer-term follow-up study will be required to verify the possible clinical significance of the presence of multiple TEL-AML1 fusions.     

CCLG-ALL2008方案治疗10岁以上儿童及青少年急性淋巴细胞白血病的疗效分析

目的 探讨CCLG-ALL2008方案治疗10岁以上儿童及青少年初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）的长期疗效。方法 收集2008年4月至2015年4月采用CCLG-ALL2008方案治疗的150例10岁以上ALL患儿的临床资料,采用Kaplan-Meier生存分析评估患儿总体生存（OS）率和无事件生存（EFS）率。结果 150例患儿中,男87例（58.0%）,女63例（42.0%）,中位年龄11（10~15）岁;中危患儿84例（56.0%）,高危患儿66例（44.0%）;B-ALL患儿122例（81.3%）,T-ALL患儿28例（18.7%）;融合基因检测阳性51例（34.0%）,其中BCR-ABL阳性16例（31%）,TEL-AML1阳性11例（22%）,E2A-PBX1阳性8例（16%）,其他基因阳性16例（31%）。采用CCLG-ALL2008方案治疗1个疗程完全缓解率为96.0%（144/150）。150例患儿中位随访时间为52（3~122）个月,5年OS率为79.0%±3.5%,5年EFS率为67.3%±4.1%。中危患儿和高危患儿,以及B-ALL患儿和T-ALL患儿间5年OS率及5年EFS率比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）。诱导治疗结束时骨髓达完全缓解患儿的5年OS率及5年EFS率均高于骨髓未达完全缓解者（P < 0.05）。结论 10岁以上儿童及青少年ALL患儿采用CCLG-ALL2008方案治疗,其完全缓解率高,5年OS率及EFS率均较高。诱导治疗后未达到完全缓解患儿预后不良。     

儿童Pre-B急性淋巴细胞白血病和急性髓系白血病特异遗传亚型

目的总结儿童急性白血病(AL)特异遗传亚型的发生率和特征,为评估预后提供依据。方法对365例AL患儿进行骨髓染色体核型检测分析白血病细胞的遗传学特点,荧光原位杂交(FISH)检测特异基因及相应位点拷贝数变异。结果 175例前体B急性淋巴细胞白血病(Pre-B ALL)和54例急性髓系白血病(AML)存在特异亚型。在Pre-B ALL中,高超二倍体最常见(33%),t(12;21)/ETV6-RUNX1、t(4;11)/MLL重排、t(9;22)、t(1;19)和iAMP21占比分别为22%、5%、3%、7%和1%。在AML中,MLL重排最常见(18%),其中t(9;11)型占56%;BCR/ABL阳性1例,FISH证实是隐匿核型ins(22;9);t(8;21)、t(15;17)和inv(16)分别占12%、15%和8%。倍体水平显示ALL高超二倍体和AML超二倍体获得染色体方式为非随机性。值得注意的是特异亚型中的变异型和不同附加异常,如额外融合,del(9p),del(12p),dup(1q)和非整倍体等畸变。结论儿童Pre-B ALL和AML中特异遗传亚型的发生率与西方儿童相似,揭示遗传异质性可能有助于预后研究。     

CD45+和CD45-儿童急性B淋巴细胞白血病的临床特征分析

目的探讨CD45抗原表达与儿童急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的临床相关性。方法利用多参数流式细胞术(FCM)以CD45/SSC设门对61例B-ALL患儿进行免疫分型检测;采用染色体核型分析和多重巢式RT-PCR技术进行染色体、融合基因分析。结果免疫表型分析显示CD45+组CD13、HLA-DR抗原表达明显高于CD45-组(P<0.05);CD45-组的融合基因主要为HOX11和E2A/PBX1,而CD45+组主要为TEL/AML1、MLL/AF9、HOX11;相关临床参数、染色体核型及疗效比较两组间差异均无显著性(P>0.05)。结论 CD45抗原的表达与否和B-ALL患儿的临床特征、染色体畸变、治疗效果无统计学相关性;CD45+组较CD45-组高表达CD13和HLA-DR。     

基于动脉自旋标记成像技术探讨支气管肺发育不良对早产儿脑血流量影响的前瞻性研究

目的 探讨儿童高超二倍体（high hyperdiploid,HHD）急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）的临床特征及预后。 方法 回顾性分析2011年4月—2020年12月福建省5家医院收治的1 414例ALL初诊患儿的临床资料。根据染色体核型,分为伴HHD组（172例）和不伴HHD组（1 242例）,比较两组的临床特征及疗效,并进一步探讨HHD ALL的预后影响因素。 结果 在1 414例ALL初诊患儿中,172例（12.16%）检出HHD。伴HHD组初诊有不良预后危险因素（起病年龄≥10岁或<1岁、初诊白细胞计数≥50×10⁹/L、T细胞表型）、常见融合基因（TEL-AML1、BCR-ABL1、E2A-PBX1、MLL基因重排）阳性的患儿比例均低于不伴HHD组（均P<0.05）,而诱导化疗后微小残留病（minimal residual disease,MRD）<0.01%的患儿比例高于不伴HHD组（P<0.05）。伴HHD组预期10年无事件生存（event-free survival,EFS）率及总生存率均高于不伴HHD组（P<0.05）。单因素分析显示,染色体数目58~66、10号染色体三体、17号染色体三体、诱导化疗第15天或第19天骨髓MRD<1%、诱导化疗第33天或第46天骨髓MRD<0.01%是高EFS率的影响因素（均P<0.05）;10号染色体三体与高总生存率有关（P<0.05）。Cox比例风险回归模型分析显示,17号染色体三体与高EFS率密切相关（P<0.05）。 结论 儿童HHD ALL初诊时不良预后危险因素较少,总体预后佳;染色体数目及特定染色体三体与预后相关。