血浆华法林HPLC测定法及心脏换瓣术后患者血药浓度监测初探

目的　建立反相 HPL C法测定血浆中华法林浓度 ,并探讨心脏瓣膜替换术后患者华法林血药浓度与抗凝疗效的关系。方法　血浆样品经二氯甲烷 -正己烷 ( 1∶ 9)萃取浓集等预处理后 ,于国产 YWG C18柱上 ,以甲醇 - 5 0 mm ol/ L醋酸铵缓冲液 ( p H2 .5 ) ( 70∶ 30 )为流动相分离 ,紫外 30 8nm波长测定。结果　华法林最低检测浓度为 2 0 ng/ m l,标准曲线线性范围 5 0～ 2 0 0 0 ng/ m l。血浆华法林萃取回收率 78.0 %～ 81.6 % ,方法回收率10 3.1%～ 10 6 .5 % ,日内 RSD 2 .33%～ 5 .46 % ,日间 RSD 5 .2 9%～ 7.73%。用本法监测 70例心脏换瓣术后患者 ,结果 INR值在推荐国人安全范围的 44例中 ,37例 ( 84.1% )患者华法林血药浓度在 6 16 .2± 15 4.8ng/ m l。结论　该法用于华法林药浓监测对患者抗凝治疗具有指导意义     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

目的　对测定血清中罗红霉素浓度的高效液相色谱法进行改进。方法　其改进要点是 :采用Penom enex L una C1 8分析柱 (5 μm,15 0 m m× 4.6 m m) ,以乙腈 -甲醇 - 0 .0 5 m ol/ L 磷酸 (39∶ 19∶ 42 ,用氨水调 p H至7.2 )为流动相 ,克拉霉素作内标。血清样品碱化后用二氯甲烷提取浓集 ,再经进一步纯化后进样 ,在 2 10 nm波长处检测 ,按内标法定量。结果　本法与原方法的标准曲线线性范围分别为 0 .2 5～ 32 mg/ L 和 0 .2 5～ 16 m g/ L,最低检出量分别为 5 ng和 2 0 ng,罗红霉素保留时间分别为 5 .0分钟和 13.2 7分钟 ,日内 RSD小于 2 .5 %和 7.5 % ,日间RSD小于 3.0 %和 5 .5 % ,萃取回收率和方法回收率一致。结论　本法与原法相比具有快速简便、灵敏准确等优点     

反相高效液相色谱法测定人血清地尔硫浓度

目的 :建立人血清地尔硫浓度的高效液相色谱分析方法。方法 :样品在 p H9条件下 ,用二氯甲烷提取。流动相为含1.6 %乙腈的甲醇— 0 .0 2 5 m ol/ L磷酸 -醋酸铵缓冲液 (5 3∶ 4 7) ,流速 1ml/ min,shim - pack CL C- C8(6 .0 m m ID× 15 0 m m,5μm )色谱柱分离 ,检测波长 2 38nm。结果 :地尔硫在 8～ 2 5 0 ng/ L浓度范围呈线性 ,r =0 .9999。方法回收率 (99.0±0 .9) % ,绝对回收率 (84 .0± 2 .0 ) %。日内、日间 RSD均小于 4 .9% ,最低检测浓度 3μg/ L。结论 :此法操作简便、准确 ,精密度高 ,重现性好 ,适用于地尔硫的体内药物分析。     

超临界流体萃取-胶束电动毛细管色谱法测定银杏叶粗提物中槲皮素和山奈素的含量

目的 :以超临界流体萃取 ( SFE)银杏叶粗提物中槲皮素和山奈素 ,以胶束电动毛细管色谱法 ( MECC)测定这两种成分的含量。 方法 :采用正交设计法考察 SFE提取工艺 ,SFE条件 :压力 42 m Pa;温度 6 0℃ ;静态萃取时间 4m in;动态萃取体积 4m l;改性剂 0 .2 ml乙醇。 MECC条件 :空心熔融石英毛细管柱 ( 5 5 cm× 75μm ) ;缓冲液为磷酸二氢钠 -硼砂 =2 5 - 6 .2 5mm ol/L ( p H 8.5 ) ;SDS 35 mmol/L ;检测波长 2 5 4nm。结果 :SFE时改性剂对萃取效率的影响最大 ;MECC以肉桂酸为内标 ,在 2 1.2～ 10 6 .0μg/ml和 2 0 .0～ 10 0 .0μg/ml范围内 ,槲皮素和山奈素均呈良好的线性关系和重现性。 40 ,6 0和 80μl槲皮素的加样回收率分别为 93.87% ,94.0 2 %和 94.10 % ;40 ,6 0和 80μl山奈素的加样回收率分别为 94.5 0 % ,94.17%和 94.2 5 %。结论 :SFE与 MECC法联用 ,简便快速 ,可用于银杏叶粗提物中的黄酮类成分的分离分析。     

HPLC法测定大鼠血浆中丹参酚酸A的浓度

目的　建立大鼠血浆中丹参酚酸 A的含量测定方法。方法　利用 HPL C,色谱柱 :Hypersil ODS柱 (4.6mm× 2 0 0 mm ,10μm) ,流动相 :乙腈 -水 (1∶ 2 .6 5 ,甲酸调 p H值至 2 .5 ) ,流速 :0 .9m L /m in,检测波长 :2 85 nm ,以桂皮酸作为内标物。结果　方法回收率在 98.9%～ 10 6 .9% ,提取回收率大于 83% ,日内、日间精密度均低于8.4 %。结论　该法可作为丹参酚酸 A在大鼠体内药物动力学研究的检测手段     

高效液相色谱法测定酮洛芬的血药浓度

目的建立人血浆中酮洛芬分离测定的高效液相色谱方法.方法选择乙醚为提取溶剂、萘普生为内标物,采用HypersilODS\-2(200mm×4.0mm,5μm)分离柱,以乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钠(45∶55)为流动相,流速1.0ml/min,紫外检测波长258nm.结果酮洛芬血浆样品在0.20～10.00μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9991,n=5),萃取回收率大于80.0%,方法回收率大于90.0%,日内日间精密度小于6.5%.结论本法简便,准确,重现性好,可应用于临床酮洛芬血药浓度的定量监测.     

反向高效液相色谱法测定大鼠血清、组织中加替沙星药物浓度

目的 :建立反向高效液相色谱法测定大鼠血清、组织 (心、肝、肾、胃、肺、大肠、脾、睾丸、大脑、骨骼肌 )匀浆中加替沙星药物浓度。方法 :采用 Sino Chrom C1 8ODS- AP色谱柱 (5 μm i.d.4 .6× 2 5 0 mm) ,流动相为 0 .0 5 mol/ L 磷酸盐缓冲溶液 -甲醇 -三乙胺 (5 5 .0∶ 4 4 .5∶ 0 .5 ) ,p H为 3.1 0 ;流速 1 .0 m l/ min,检测波长为 2 93nm,柱温为 35℃ ,以环丙沙星为内标 ,含药大鼠血清、组织匀浆经二氯甲烷提取 ,于 4 0℃水浴用氮气吹干和盐酸溶解后直接进样。结果 :本测定方法血清加替沙星浓度在 0 .1～ 1 0μg/ ml范围内线性关系良好 ;组织药物浓度在 0 .0 5～ 4 .0μg/ ml范围内线性关系良好。血清中最低检测限为 0 .0 1 μg/ m l,组织中加替沙星的最低检测限均为 0 .0 2 μg/ ml,相对回收率在 88.2 %～ 1 0 8.9%之间 ,绝对回收率在 78.5 %～ 96 .5 %之间 ,日内、日间变异均分别小于 1 0 .4 %和 7.8%。结论 :高效液相色谱法测定大鼠血清、组织中的加替沙星药物浓度精确、灵敏、可靠 ,可用于加替沙星的药代动力学研究     

高效液相层析法测定血浆中曲他维啉

建立了一种简便、灵敏的测定血浆中曲他维啉的高效液相层析方法。血浆中曲他维啉在碱性条件下被乙醚提取 ,然后用 0 .1mol/L盐酸反提取。 1 0 μL提取液进C1 8柱 ,检测波长 2 5 4nm ,流动相为 0 .0 2mol/L磷酸二氢 钠∶甲醇 =30∶70 ,高氯酸调 pH至 2 .8。曲他维啉与血浆中其他组分和内标能很好分离。本方法具有良好的线性关系 ,相对标准偏差小于 1 5 % ,检出下限 (信号噪声比 =3∶1 )为 8μg/L ,回收率 80 %～ 1 0 0 %。此方法可用于曲他维啉的药代动力学研究及诊断检测     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度

目的建立大鼠血浆中游离脂肪酸 (FFAs)浓度的测定方法。方法以十七烷酸为内标 ,用 ψ(异丙醇∶正庚烷∶2mol/L磷酸 ) =(4 0∶10∶1)提取 ,溴苯乙酮衍生化 ,流动相为 ψ(乙腈∶水 ) =(81∶19) ,流速 1.0mL/min ,柱温 5 5℃ ,分析柱Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm) ,紫外检测波长 2 4 2nm。 结果各FFAs最低检测限为 0 .6 μmol/L ,平均回收率为 (10 0 .1± 2 0 ) % ,批内、批外RSD <6 .5 %。结论本法稳定、灵敏、可靠 ,适用于大鼠血浆中FFAs浓度测定     

RP-HPLC荧光法测定人血浆中替米沙坦浓度

目的建立人血浆中替米沙坦浓度RP-HPLC荧光检测法。方法以缬沙坦为内标定量血浆中替米沙坦的浓度,血浆样品在酸性条件下用苯萃取后氮气吹干,残留物用流动相复溶后直接进样。样品分离用ZORBAXEclipseXDB-C18柱(4.6×150mm,5μm)和填充相同材料的预柱(4.6×12.5mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-10mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH3.2)(5∶40∶55,v/v/v),流速为1.0mL/min,进样体积为20μL,荧光检测激发波长为250nm,发射波长为375nm,柱温为25℃。结果血浆中内源性物质不干扰测定结果,替米沙坦和内标的保留时间分别为8.8min和10.7min。在浓度1μg/L~180μg/L范围内线性关系良好,线性方程:A=0.2769R+0.03788,相关系数r=0.9995,检测限为1μg/L。浓度为2.0、30.0、70.0μg/L血浆质控样品的平均回收率分别为97.53%、104.6%和105.1%。低、中、高浓度血浆质控样品的日内和日间相对标准偏差(RSD)均小于7%。结论本研究建立的血浆中替米沙坦的浓度测定方法,具有准确、快速、简单,灵敏度高、线性范围宽等特点。该方法更适于替米沙坦血药浓度测定及替米沙坦药物代谢动力学研究。     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

OBJECTIVE: To make better the RP-HPLC method for the determination of roxithromycin(RM) in human serum. METHODS: RM and clarithromycin (internal standard) were extracted from alkalinized serum sample (500 microliters) with methylene chloride. After evaporation of the organic layer, the residue was dissolved in 100 microliters of acetonitrile-ammonium phosphate (1:1, pH 6.0) and washed with n-hexane, then 20 microliters was injected onto a column (5 microns, 15 cm x 4.6 mm) of Penomenex luna C18. The mobile phase was acetonitrile-0.05 mol/L phosphoric acid (39:19:42, adjusted to pH 7.2 with ammonia water) pumped at 1.2 ml/min through the column. The variable wavelength UV detector operated at 0.01 aufs and the wavelength was set at 210 nm. RESULTS: The retention times for RM and clarithromycin were 4.4 min and 5.0 min, respectively. Standard curve was linear in the concentration range of 0.25 to 32 mg/L. The detection limit in serum was 0.06 mg/L; the average method recovery 97.4%; the inter-day RSD less than 3.0%. CONCLUSION: This method was found to be simple, rapid, sensitive and accurate for determination of RM in human serum.     

血浆中萘丁美酮活性代谢物的反相高效液相色谱法测定

为研究萘丁美酮的相对生物利用度,建立了用反相高效液相色谱法测定血浆中萘丁美酮的活性代谢物６－甲氧基－２萘乙酸（ＭＮＡ）溶液的方法。实验结果表明,以萘普生作内标,甲醇：０．０２ｍｏｌ／Ｌ醋酸盐缓冲液（ｐＨ３．０）为７４．２６作流动相,用ＹＷＧ－Ｃ１８柱有良好的分离效果;血浆样品在ｐＨ３．０醋酸盐缓冲液存在下,用二氯甲烷萃取,回收率高,在２７０ｎｍ波长下检测杂质峰少。该法标准曲线在０．５～６４ｍｇ／Ｌ     

反相离子对色谱法测定青风藤中青藤碱的含量

目的建立离子对色谱法测定青风藤中青藤碱的含量。方法使用Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈:磷酸盐缓冲液(0.03 mol/L磷酸二氢钾和0.03 mol/L庚烷磺酸钠,磷酸调节pH值至4.0)=18:82为流动相,流速1.0 ml/min,柱温40℃,检测波长262 nm。结果青藤碱在0.025~0.5 mg/ml(r=1.000)范围内呈良好的线性关系。最低检测限为2.5μg/ml,低、中、高3个浓度的日内精密度RSD分别为0.62%、0.35%、0.60%,日间精密度RSD为1.54%、0.70%、0.45%。平均回收率99.9%(RSD=2.9%,n=6),均符合分析要求。结论该方法简单快捷,结果准确,适用于测定青风藤中青藤碱的含量。     

愈痹丸质量标准的研究

目的 :为控制愈痹丸的质量 ,建立了阿魏酸的HPLC方法及有关药材鉴别方法。方法 :色谱条件为 :YMG -C184.6× 2 5 0mm ,以乙腈 - 0 .0 0 32mol/L四丁基氢氧化铵 (TBAH) (15 :85 )用 10 %磷酸调pH =2 .3为流动相 ,流速 1.0ml/min ;检测波长为 32 0nm。结果 :平均回收率 98.8% ,RSD =2 .10 %。结论 :此方法简便、灵敏、准确、重现性好 ,其它组分对测定无干扰 ,可用于该制剂的质量评价和质量控制     

HPLC法测定感冒清片中马来酸氯苯那敏的含量

目的：采用高效液相色谱法测定感冒清片中马来酸氯苯那敏的含量。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢铵水溶液（17∶83）为流动相,流速为1.0 ml/min;柱温为30℃;检测波长为262 nm。结果：马来酸氯苯那敏的线性范围为0.2～2.0μg/ml（r=0.999 9）,平均回收率为99.38%（RSD为0.5%）。结论：所建立的方法样品分离效果好,测定结果准确、可靠、重复性好。     

HPLC法测定苯磺酸氨氯地平片含量

目的：建立一种用HPLC法测定苯磺酸氨氯地平片含量的方法.方法：采用20RBAX EclipseXDB-C18柱（4.6 mm×215;250 mm,5μm）,流动相：甲醇-0.03 mol/L磷酸二氢钾溶液（75∶ 25）;检测波长237nm,流速为1.0 ml/min.结果：线性范围8.55～85.5 μg/ml（r=0.9999,n=5）,回收率为99.6％,RSD为0.43％.结论：本法结果准确,可用于苯磺酸氨氯地平片的含量测定.     

高效液相色谱法测定十三味马钱子丸士的宁的含量

[目的]用高效液相色谱法测定十三味马钱子丸士的宁的含量。[方法]采用HyperClone BDS C18柱（250×4.6mm,5um）;流动相为乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值为2.8）（21：79）;流速1.0ml/min;检测波长260nm;柱温30℃。[结果]士的宁浓度的线性范围为7.382～366.4μg/ml,r=0.9996,回收率为98.74%（RSD=0.6%）。[结论]本法方便、快速、准确,可用于十三味马钱子丸的质量控制。     

HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱的浓度

目的建立HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱浓度的方法。方法色谱柱为ZORBAX SB C18柱（150mm×4.6 mm,5 m）。以甲醇-水（80：20）（含0.0025 mol.L-1三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）为流动相,检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为20 l。结果钩藤碱与内源性杂质有较好分离度,钩藤碱在0.39~12.50g/ml浓度范围内呈良好线性关系;最低检测浓度为0.39 g/ml;回收率大于95%;日内和日间RSD均小于7%。结论此方法准确可靠,可用于测定钩藤碱的血药浓度。     

HPLC法测定玉郎伞中水黄皮素的含量

[目的]建立高效液相色谱法测定玉郎伞中水黄皮素含量的方法。[方法]以CLC-ODS（6.0 mm×150 mm,5μm）为色谱柱,[0.05 mol/L庚烷磺酸钠–0.05 mol/L磷酸二氢钾（3∶5）]–乙腈（1∶1）用磷酸调pH 3.0为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长261 nm,柱温30℃。[结果]水黄皮素的线性范围为0.099～0.998μg,平均回收率为100.3%（RSD=1.2%）。[结论]所建立的HPLC法可用于玉郎伞中水黄皮素含量测定及质量控制。     

哌嗪雌酚酮的含量测定方法研究

目的 采用非水滴定法和HPLC-UV法测定哌嗪雌酚酮原料药含量,建立柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法测定狗血浆中哌嗪雌酚酮含量。方法 分别采用无水冰醋酸为溶剂,0．1mol／L高氯酸为滴定液,结晶紫指示液指示终点的非水滴定法和HPLC-UV法测定哌嗪雌酚酮原料药含量;以FMOC-CL为衍生化试剂,采用柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法测定狗血浆中哌嗪雌酚酮含量。结果非水滴定法日内精密度(RSD)及日间精密度(RSD)分别为0．28％、0．21％;HPLC-UV法中哌嗪雌酚酮在1．001～5．005μg范围内呈良好的线性关系和重现性,方法的检测限为4ng(S／N=3);柱切换柱前衍生化荧光检测的HPLC法中线性范围为8．4～420ng／mL,净化回收率为77．24％～83．10％,方法回收率为98．33％～103．3％,日内精密度(RSD)及日间精密度(RSD)分别小于7．7％和7．3％,方法的检测限为1ng(S／N=3)。结论 以上三种方法简便、准确、重现性好,分别为哌嗪雌酚酮原料药及狗血浆中的哌嗪雌酚酮的含量测定提供了方法。