核心结合因子α1在SD大鼠胫骨骨折愈合过程中的表达

目的:观察核心结合因子α1在SD大鼠胫骨骨折愈合过程中表达的变化,探讨核心结合因子α1在骨折修复中的作用。方法:实验于2003-10/2005-02在教育部口腔生物医学工程重点实验室完成。①将48只6个月龄雌性SD大鼠左侧胫骨制成相同的骨折模型,采用克氏针行髓腔内固定。②于骨折术后7,14,21,28d分批处死动物,采用X射线、组织学及免疫组织化学、半定量反转录-聚合酶链反应方法观察核心结合因子α1在骨折愈合过程中不同时期表达情况。结果:①X射线显示胫骨骨折断端无移位。②组织学切片显示骨折愈合过程中可同时见纤维性骨痂和软骨性骨痂形成。③核心结合因子α1免疫组织化学染色显示骨折术后第7天及14天时在增殖的间充质细胞及软骨细胞中见强阳性反应,从第21天起,核心结合因子α1染色阳性细胞数及阳性反应程度明显下降,7,14,21,28d各时间点免疫组织化学染色的平均吸光度值分别为0.568±0.013,0.534±0.016,0.313±0.011,0.277±0.008。④反转录-聚合酶链反应结果表明骨折术后第7天及14天时核心结合因子α1mRNA表达量较高,第21天及28天时,核心结合因子α1mRNA表达下调,各时间点基因表达的相对强度均值分别为1.935±0.231,2.103±0.264,0.956±0.045,0.527±0.038。结论:在SD大鼠胫骨骨折髓腔内内固定模型中,骨愈合主要表现为二期愈合方式,核心结合因子α1集中表达在骨痂形成的早期,说明核心结合因子α1是骨折愈合的启动调节因子之一。     

蛋白激酶C-δ特异性脱氧核酶对HepG2细胞生长的影响

<正>蛋白激酶C(PKC)存在于细胞浆内,是一类由钙激活的磷脂依赖性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与神经传导、肿瘤生长及细胞生长、分化和凋亡等生理病理过程密切相关。依据对二酰基甘油(DAG)和Ca2+的依赖不同,PKC可以分为传统型(cPKC)、新型PKC(nPKC)和非典型PKC(aPKC)[1-3]三类。蛋白激酶C-δ(PKC-δ)属于nPKC,其激活物是DAG     

bFGF和NGF基因在大鼠脑震荡脑损伤中的表达研究

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和神经生长因子（NGF）基因在大鼠实验性脑震荡脑损伤中的表达及意义。方法：采用Wistar雄性二级大鼠复制脑震荡动物模型，于伤后1d、3d、7d、14d及30d活杀取脑组织，经免疫组织化学和原位杂交等技术研究bFGF和NGFmRNA和蛋白在脑震荡中的变化规律。结果：100g组见典型脑震荡的临床表现。bFGF蛋白和mRNA于伤后1d表达增强，3-7d达高峰，14d后开始减少，30d仍高于正常水平。阳性部位见于大脑皮质、海马、丘脑和小脑神经元胞浆内。NGF蛋白和mRNA于伤后1d，损伤区大脑皮质、海马、丘脑和小脑神经元胞浆内呈强阳性反应，表达明显增多，3-30d持续呈强阳性至阳性，但随时间的推移，呈减少趋势。结论：bFGF基因表达参与脑震荡发生时脑组织损伤的病理过程，可能对神经细胞变性、坏死起重要调节作用；NGF基因表达参与脑震荡脑损伤和恢复的全过程，尤其在早期急性期起重要调节作用。     

核心结合因子α1在SD大鼠胫骨骨折愈合过程中的表达

目的：观察核心结合因子α1在SD大鼠胫骨骨折愈合过程中表达的变化，探讨核心结合因子α1在骨折修复中的作用。方法：实验于2003-10／2005—02在教育部口腔生物医学工程重点实验室完成。①将48只6个月龄雌性SD大鼠左侧胫骨制成相同的骨折模型，采用克氏针行髓腔内固定。②于骨折术后7，14，21，28d分批处死动物，采用X射线、组织学及免疫组织化学、半定量反转录-聚合酶链反应方法观察核心结合因子α1在骨折愈合过程中不同时期表达情况。结果：①X射线显示胫骨骨折断端无移位。②组织学切片显示骨折愈合过程中可同时见纤维性骨痂和软骨性骨痂形成。③核心结合因子α1免疫组织化学染色显示骨折术后第7天及14天时在增殖的间充质细胞及软骨细胞中见强阳性反应，从第21天起，核心结合因子α1染色阳性细胞数及阳性反应程度明显下降，7，14，21，28d各时间点免疫组织化学染色的平均吸光度值分别为0．568&;#177;0、013，0．534&;#177;0．016．0．313&;#177;0．011，0．277&;#177;0.008。④反转录-聚合酶链反应结果表明骨折术后第7天及14天时核心结合因子α1 mRNA表达量较高，第21天及28天时，核心结合因子α1 mRNA表达下调，各时间点基因表达的相对强度均值分别为1．935&;#177;0．231，2．103&;#177;0．264，0．956&;#177;0．045，0．527&;#177;0．038。结论：在SD大鼠胫骨骨折髓腔内内固定模型中，骨愈合主要表现为二期愈合方式，核心结合因子α1集中表达在骨痂形成的早期，说明核心结合因子α1是骨折愈合的启动调节因子之一。     

坐骨神经切断后Fas、FasL和Caspase-3在脊髓的分布

目的：观察成年猫一侧坐骨神经切断后Fas、FasL和Caspase-3在脊髓的分布。方法：将成年猫坐骨神经切断后24小时，处死取其脊髓(L4)制作8μm厚石蜡切片，用Fas、FasL、Caspase-3(效价：1：250，1：250，1：250，)行免疫组织化学ABC法染色。观察Fas、FasL、Caspase-3在脊髓中的分布以及亚细胞定位。结果：Fas阳性神经元遍布整个灰质，以背角为主，胞浆染色，灰质内胶质细胞阳性反应，细胞核染色。FasL阳性神经元遍布整个灰质，胞浆染色，未见胶质细胞阳性染色。Caspase-3阳性反应神经元胞浆染色。结论：一侧坐骨神经切断后，有Fas、FasL和Caspase-3在猫脊髓分布，提示这些因子与脊髓神经元的凋亡信号传递功能有关。     

脊髓损伤大鼠组织形态学变化与不同时点的Netrin-1表达

目的:Netrin-1蛋白可能具有轴突引导作用,观察其在大鼠急性脊髓损伤后不同时点的表达及损伤脊髓组织形态学的变化.方法:实验于2002-10/2003-10在中国医科大学实验动物中心完成,选取Wistar大鼠40只,随机分为损伤组20只,假手术组15只,正常对照组5只.制作大鼠脊髓半横断损伤模型,并于术后1,3,5,7,14 d分别选择损伤组大鼠4只,假手术组3只,正常对照组1只,麻醉下取出T10节段脊髓经过处理制成切片,行苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织形态改变.经苏木精-伊红染色和常规卵白素-生物素-过氧化物酶复合物染色,电镜检测Netrin-1阳性反应物的表达.各组每只分别选取9张组化切片,分别从灰质前角至后角取8个高倍镜视野,测定其阳性反应物的平均灰度值,通过对平均灰度值的分析,测定Netrin-1的表达量.结果:在整个实验过程中,40只大鼠无死亡.实验切片360张,所取视野的平均灰度值均达到统计学分析要求.①3组苏木精-伊红染色组织形态学改变:假手术组与正常对照组脊髓均为正常结构.损伤组脊髓损伤后第1天灰质内出现片状出血、中央区碎裂,轴突断裂及脱髓鞘改变;第3天神经元肿胀,逐渐形成空洞,胶质细胞减少;第5,7天残存神经元减少,胶质细胞增生;第14天神经元胞浆内尼氏体染色呈虎斑状,提示生理功能逐渐恢复②3组Netrin-1表达:损伤组大鼠脊髓损伤后第1天于胶质细胞上可检测到Netrin-1的表达,第3天在神经元胞质内出现,表达逐渐升高,第5天表达量较假手术组增加26.3%,组间有差异x^2=0.023,P＜0.05.第7天达到高峰并趋于稳定,第14天开始逐渐下降.正常对照组仅少量表达,假手术组与正常组之间差异比较P＞0.05.结论:在脊髓损伤后轴突导向分子Netrin-1呈一过性表达,其表达变化与苏木精-伊红染色损伤组脊髓修复程度均具有时序性.     

电针对股骨骨折大鼠骨痂内神经肽表达水平的影响

目的研究电针刺激穴位对股骨骨折大鼠骨痂内神经肽表达水平的影响。 方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为骨折组和电针组,2组大鼠均制成股骨骨折模型,其中电针组大鼠于骨折模型建立后给予电针刺激。2组大鼠分别于术后第4,7,14及28天时各取5只处死,并采集骨折部位组织制成切片。采用免疫组织化学染色法检查各组大鼠术后不同时间点骨痂内降钙素基因相关肽（CGRP）及P物质（SP）表达情况。 结果电针组大鼠在术后骨折愈合不同阶段,其骨痂内各种细胞胞浆中均有CGRP、SP阳性颗粒表达,且出现时间较骨折组早,维持时间较骨折组长;图像分析系统显示电针组骨痂内CGRP、SP光密度值明显高于骨折组,组间差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论电针刺激穴位能显著提高骨折大鼠骨痂内CGRP、SP等神经肽表达,推测电针可通过影响神经肽水平参与并调节骨折愈合过程。     

大鼠坐骨神经移植术后BDNF在脊髓内表达的实验研究

目的探讨大鼠坐骨神经移植术后BDNF在相应脊髓节段前角运动神经元内的表达变化。方法选用成年雄性Wister大鼠随机分为对照组(假手术组)和实验组(坐骨神经移植组),分别于术后不同时间点取材,应用免疫组化的方法检测相应脊髓节段前角运动神经元内BDNF的表达及其变化,根据图像分析测得的免疫强度进行统计学分析。结果BDNF在对照组脊髓节段运动神经元细胞浆内有少量表达,实验组术后可见BDNF的阳性表达的运动神经元,阳性反应为棕黄色颗粒位于细胞质。术后1周BDNF表达开始升高,2周时达高峰,6-8周后逐渐下降,至8周时仍高于对照组。结论坐骨神经移植术后BDNF在相应脊髓节段前角运动神经元中的表达增强,BDNF可能参与了神经损伤后保护神经元及促进神经再生的过程。     

幼龄成骨细胞移植促进骨质疏松性骨折愈合中不同类型一氧化氮合酶的动态表达

目的:追踪观察移植细胞在骨折愈合不同时间点的神经型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶与内皮型一氧化氮合酶动态表达的生物学意义。方法:实验于1999-01/2004-02在中山大学动物试验中心、中山大学病理教研室完成、中山大学肿瘤防治中心完成。选择SD清洁级大鼠96只,按配对原则分为实验组48只,对照组48只;SD清洁级乳鼠20只进行成骨细胞原代培养。建立SD大鼠老龄骨质疏松骨折的动物模型,实验组将SD乳鼠颅骨体外培养的成骨细胞移植到SD雌性大鼠骨质疏松性骨折部位,对照组注入等量无血清培养液。手术后3,7,10,14,21,28,56,84d处死,每组每个时间点6只。用免疫组化检测骨折愈合不同时相的标本诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶和神经元型一氧化氮合酶的动态表达情况。结果:96只大鼠均进入结果分析。实验组:诱导型一氧化氮合酶在3d左右可见较多阳性表达的细胞,7d有表达高峰。内皮型一氧化氮合酶在3d左右可见少量阳性细胞,14d有表达高峰。神经元型一氧化氮合酶在10d左右可见少量阳性细胞,14～21d表达稍有增高,整个实验过程中神经元型一氧化氮合酶表达较弱,表达高峰不明显。而对照组诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶均有较弱表达,表达峰低平,而神经元型一氧化氮合酶表达很弱,未见明显表达高峰。结论:诱导型一氧化氮合酶、内皮型一氧化氮合酶在成骨细胞移植促进老年骨质疏松性骨折愈合的表达具有时效性,且表达的定位细胞不同,表达的量有差别,提示骨折部位一氧化氮合酶的释放可能对促进骨质疏松性骨折愈合有意义。神经元型一氧化氮合酶在成骨细胞移植促进老年骨质疏松性骨折愈合过程中的作用不明显。     

蛋白激酶C对原代培养神经元诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨PKC参与缺血性神经元损伤的可能机制。方法：采用SD大鼠大脑皮层神经元原代培养为模型，观察PKC刺激剂PMA对培养神经元的毒性率、凋亡及神经元内iNOS表达的影响。结果：PMA可以明显地促进神经元内iNOS的表达，增加神经元的毒性率，诱导神经元凋亡。结论：PKC激活参与神经元的损伤可能是通过引起神经元内iNOS的表达而实现的。     

Changes in the parameters of the rhythms of the electrolyte-excreting function of the kidneys in women in relation to the seasons of the year

The characteristics (period, mesor, amplitude) of the rhythms of urinary excretion of sodium, potassium, chlorine, calcium, magnesium, and phosphorus were examined in normal women during various seasons. The urine was collected for 5 days with 4-hour intervals. The rhythms were detected and their parameters established with the use of mathematical methods for the assessment of the tested curve fragments repetitions and by the least squares nonlinear method. The rhythms of renal urinary and electrolyte excretion were found very smooth, particularly so in the fall and winter. The circadian rhythms have been found the most stable during all the seasons. Examinations of individual electrolyte excretion have shown that Na and K excretion is more stable all the year round and therefore this parameter is the most informative for the detection of disorders in renal electrolyte excretion.     

分析心脏超声在胎儿及新生儿先天性心脏病检查中的应用

目的:分析在胎儿和新生儿的先天性心脏病筛查中通过应用心脏超声的诊断价值。方法:抽取2010年1月-2017年12月我院580例行胎儿心脏超声检查孕妇,统计其产前与产后的超声检查结果,并于胎儿的尸检结果进行对比。结果:产后超声提示新生儿先心病共计13例,产前超声共计检出12例,检出率为92.31%,漏诊率为7.69%,与产后超声结果比较中P>0.05;10例均采取引产方式,尸检结果与产前超声诊断结果完全一致,且比较中P>0.05。结论:通过运用心脏超声有利于实现对胎儿和新生儿先天性心脏病的明确诊断,临床应用价值较高。     

Change in the drug-metabolizing function of the liver in patients in the postoperative period in relation to the type of anesthesia]

Anesthesia-dependent changes in pharmaco-metabolic liver function have been studied in patients operated on for cosmetic facial defects. It has been established that the postoperative period in patients subjected intraoperatively to general combined anesthesia and controlled lung ventilation was characterized by inhibited drug metabolism in the liver, which required correction of the drug doses to reduce the risk of side and toxic effects of pharmacotherapy. Patients operated on under local procaine anesthesia had no considerable changes in pharmaco-metabolic liver function in the postoperative period.