家兔心房肌细胞环-磷酸腺苷动态变化的实时评价

目的:探索实时评价心房肌细胞内环-磷酸腺苷动态变化的方法,为细胞内第二信使代谢水平分析提供可靠的实验数据。方法:实验于2004-04/2005-12在吉林省延边大学基础医学院生理学与病理生理学教研部完成。①采用大耳白家兔32只,建立跳动心房灌流模型,跳动心房稳定60min后,4℃下每2min收集灌流液样本。②采用固定心房跳动频率(1.3Hz)的方法,每2min收集1个灌流液样本,12min为1个循环。在1个对照循环之后,处理垂体腺苷酸环化酶激活肽(100nmol/L)或在非选择性磷酸酯酶抑制剂(1.0mmol/L)存在下再处理垂体腺苷酸环化酶激活肽1个循环,观察心房组织环-磷酸腺苷含量与逸出量的关系。③1个循环对照之后,给予30nmol/L的垂体腺苷酸环化酶激活肽或不同浓度的垂体腺苷酸环化酶激活肽(1,10,100nmol/L,每种浓度之间穿插2个循环的恢复期),实时观察心房肌细胞环-磷酸腺苷动态变化的特点。结果:①垂体腺苷酸环化酶激活肽对心房组织生成和逸出环-磷酸腺苷的影响:用垂体腺苷酸环化酶激活肽处理12min后,环-磷酸腺苷含量在组织和灌流液中分别增加到(42.18±11.17)nmol/g和(204.17±44.50)fkat/g,与对照值相比差异明显(P<0.05)。当给与非选择性磷酸酯酶抑制剂 垂体腺苷酸环化酶激活肽后,环-磷酸腺苷含量在组织和灌流液中分别增加到(149.90±13.87)nmol/g和(747.00±65.83)fkat/g(P<0.01)。且灌流液环-磷酸腺苷逸出量与组织环-磷酸腺苷含量之间存在线性关系(Y=0.2918X-0.118,R2=0.8809;P<0.01)。②垂体腺苷酸环化酶激活肽促进心房环-磷酸腺苷逸出量的情况:随着垂体腺苷酸环化酶激活肽浓度的增加,环-磷酸腺苷逸出量也随之增多,10,100nmol/L垂体腺苷酸环化酶激活肽的逸出峰值分别为(247.83±50.83),(254.00±53.50)fkat/g,均显著高于对照值和1nmol/L垂体腺苷酸环化酶激活肽[(66.00±7.50),(75.50±7.50)fkat/g;P<0.01],呈时间、剂量依赖性。结论:跳动心房灌流模型中环-磷酸腺苷逸出量是一项能够反映该组织生成环-磷酸腺苷变化的指标,实时测定心房灌流液中环-磷酸腺苷逸出量能够实时评价心房肌细胞内环-磷酸腺苷的生成变化。     

糖尿病视网膜病变环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷含量变化及意义

目的：应用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型，探讨糖尿病视网膜病变环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟苷（cGMP）含量变化及意义。方法：健康成年Wistar大鼠32只随机分成实验组和对照组，每组16只。实验组大鼠腹腔注射链脲佐菌素65mg／kg，48、72h后测定全血空腹血糖、尿糖，血糖〉16．5mmol／L，尿糖在（＋＋＋）以上者确定为糖尿病大鼠、发病后第4、8、12和16周检测视网膜组织中cAMP和cGMP含量。结果：在实验各时点，实验组cAMP含量和cAMP／cGMP比值明显低于对照组，且随病程延长差异更为明显，而cGMP含量无明显改变。结论：糖尿病视网膜病变的发生和发展可能与高血糖状态下视网膜组织中cAMP含量和cAMP／cGMP比值明显降低所致的视网膜局部微循环功能障碍和代谢紊乱有关。糖尿病大鼠视网膜组织的代谢功能障碍可能在糖尿病视网膜病变的发生发展中起一定作用。     

复方丹参滴丸干预短暂性脑缺血发作时对血浆环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的影响

背景：在缺血性脑卒中急性期和恢复期皆可见血小板处于活化状态，环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷与血小板功能密切相关。目的：观察复方丹参滴丸预防治疗短暂性脑缺血发作的临床疗效及对血浆环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷的影响。设计：随机对照实验。单位：滨州医学院附属医院神经科。对象：选择2000-09／2001—04滨州医学院附属医院神经科门诊180例自愿参加本实验的短暂性脑缺血发作患者。采用随机数字表将患者按给予复方丹参滴丸剂量大小分为3组。给药10粒／d组60例，男35例，女25例；年龄50～70岁，平均（54．3&;#177;7．2）岁；给药20粒／d组60例，男32例，女28例；年龄49～62岁，平均（55．7&;#177;5．1）岁。给药30粒／d组60例，男33例，女27例；年龄52&;#177;69岁，平均（54．9&;#177;5．5）岁。方法：给药10粒／d组，1次／d，10粒／次；给药20粒／d组，2次／d，10粒／次；给药30粒／d组，3次／d，10粒／次。患者均在服药4周后，晨抽血3mL，采用放射免疫分析法，测定三组血浆中的环磷酸腺苷、环磷酸尿苷含量。每例患者均3个月随访一次，共随访18个月：①观察短暂性脑缺血发作的发作次数及发作形式。②发生缺血性脑卒中例数（包括心、脑卒中）。（④副作用：消化道反应，牙龈出血、鼻出血、皮下出血、口麻、头痛、头晕等。主要观察指标：①各组患者短暂性脑缺血发作的发作形式。②各组患者发生缺血性脑卒中例数。③各组患者副作用发生情况。④各组患者血浆中环磷酸腺苷，环磷酸鸟苷水平。结果：180例患者均进入结果分析。①发生短暂性脑缺血发作的发作例数：给药10粒／d组，发生颈内动脉系统短暂性脑缺血发作的1例；发生椎动脉系统短暂性脑缺血发作的2例；发生脑梗死的1例；发生心肌梗死的2例；给药20粒／d组，分别为2，2，1例；给药30粒／d组．分别为1，2，1例。②发生缺血性脑卒中例数：3组分别发生脑卒中的例数为6．5，4例。⑨各组患者副作用发生情况：三组不良事件及副反应分别为1．2，4例，其中给药10粒／d组出现口周麻木1例，给药20粒／d组出现口周麻木和头痛各1例，给药30粒／d组出现胃肠道反应1例，口周麻木2例，头晕1例；末出现牙龈出血、鼻出血及皮下出血病例，同时患者亦未因上述副作用退出治疗。各组比较，无显著性差异（P〉0．05）。（少各组患者血浆中环磷酸腺苷，环磷酸鸟背水平：3组环磷酸腺苷分别为（21．22&;#177;3．94），（22．5&;#177;3．67），（23．1&;#177;7．7）ng/L；环磷酸鸟苷分别为（3．67&;#177;1．18）．（4．74&;#177;2．12）．（4．6&;#177;0．7）ng／L，（P〉0．05）．结论：复方丹参滴丸在短暂性脑缺血发作的二级预防中，有肯定的疗效，各剂量比较疗效基本一致，同时无明显副作用。     

复方丹参滴丸干预短暂性脑缺血发作时对血浆环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷的影响

背景在缺血性脑卒中急性期和恢复期皆可见血小板处于活化状态,环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷与血小板功能密切相关.目的观察复方丹参滴丸预防治疗短暂性脑缺血发作的临床疗效及对血浆环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷的影响.设计随机对照实验.单位滨州医学院附属医院神经科.对象选择2000-09/2001-04滨州医学院附属医院神经科门诊180例自愿参加本实验的短暂性脑缺血发作患者.采用随机数字表将患者按给予复方丹参滴丸剂量大小分为3组.给药10粒/d组60例,男35例,女25例;年龄50～70岁,平均(54.3±7.2)岁;给药20粒/d组60例,男32例,女28例;年龄49～62岁,平均(55.7±5.1)岁.给药30粒/d组60例,男33例,女27例;年龄52～69岁,平均(54.9±5.5)岁.方法给药10粒/d组,1次/d,10粒/次;给药20粒/d组,2次/d,10粒/次;给药30粒/d组,3次/d,10粒/次.患者均在服药4周后,晨抽血3mL,采用放射免疫分析法,测定三组血浆中的环磷酸腺苷、环磷酸尿苷含量.每例患者均3个月随访一次,共随访18个月①观察短暂性脑缺血发作的发作次数及发作形式.②发生缺血性脑卒中例数(包括心、脑卒中).③副作用消化道反应,牙龈出血、鼻出血、皮下出血、口麻、头痛、头晕等.主要观察指标①各组患者短暂性脑缺血发作的发作形式.②各组患者发生缺血性脑卒中例数.③各组患者副作用发生情况.④各组患者血浆中环磷酸腺苷,环磷酸鸟苷水平.结果180例患者均进入结果分析.①发生短暂性脑缺血发作的发作例数给药10粒/d组,发生颈内动脉系统短暂性脑缺血发作的1例;发生椎动脉系统短暂性脑缺血发作的2例;发生脑梗死的1例;发生心肌梗死的2例;给药20粒/d组,分别为2,2,1例;给药30粒/d组,分别为1,2,1例.②发生缺血性脑卒中例数3组分别发生脑卒中的例数为6,5,4例.③各组患者副作用发生情况三组不良事件及副反应分别为1,2,4例,其中给药10粒/d组出现口周麻木1例,给药20粒/d组出现口周麻木和头痛各1例,给药30粒/d组出现胃肠道反应1例,口周麻木2例,头晕1例;未出现牙龈出血、鼻出血及皮下出血病例,同时患者亦未因上述副作用退出治疗.各组比较,无显著性差异(P＞0.05).④各组患者血浆中环磷酸腺苷,环磷酸鸟苷水平3组环磷酸腺苷分别为(2122±3.94),(22.5±3.67),(23.1±7.7)ng/L;环磷酸鸟苷分别为(3.67±1.18),(4.74±2.12),(4.6±0.7)ng/L,(P＞0.05).结论复方丹参滴丸在短暂性脑缺血发作的二级预防中,有肯定的疗效,各剂量比较疗效基本一致,同时无明显副作用.     

蛛网膜下腔连续注入环磷酸腺苷对脊髓损伤后神经再生的作用

目的：观察环磷酸腺苷(cAMP)在蛛网膜下腔内注入对脊髓损伤后神经再生的作用。方法：20只SD大鼠完全随机分为对照组(n=10)和cAMP组(n=10)，采用大鼠脊髓半切损伤模型，通过在体内埋入微泵和椎管内置管连续给入db-cAMP，作组织切片免疫组化染色，观察损伤区局部皮质脊髓束(CST)纤维及后肢运动功能BBB评分。结果：cAMP治疗组损伤区可见极少量可疑皮质脊髓束再生纤维，呈现出有利于神经再生的变化；后肢运动在四五周均恢复正常行走，与对照组无明显区别。结论：cAMP导致脊髓损伤区极少量皮质脊髓束纤维存在，可能有利于脊髓损伤的修复。     

蛛网膜下腔连续注入环磷酸腺苷对脊髓损伤后神经再生的作用

目的:观察环磷酸腺苷(cAMP)在蛛网膜下腔内注入对脊髓损伤后神经再生的作用。方法:20只SD大鼠完全随机分为对照组(n=10)和cAMP组(n=10),采用大鼠脊髓半切损伤模型,通过在体内埋入微泵和椎管内置管连续给入db-cAMP,作组织切片免疫组化染色,观察损伤区局部皮质脊髓束(CST)纤维及后肢运动功能BBB评分。结果:cAMP治疗组损伤区可见极少量可疑皮质脊髓束再生纤维,呈现出有利于神经再生的变化;后肢运动在四五周均恢复正常行走,与对照组无明显区别。结论:cAMP导致脊髓损伤区极少量皮质脊髓束纤维存在,可能有利于脊髓损伤的修复。     

中枢学习记忆功能与环磷酸腺苷反应单元结合蛋白的关系

环磷酸腺苷反应单元结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)是一种重要的核蛋白,属于结构相关转录因子CREB家族成员之一,其调节启动子中具有环磷酸腺苷反应单元(cAMPresponseelement,CRE)的基因转录。这种核转录因子具有调节包括学习记忆在内的广泛的生物学功能,是细胞内多种信号通路的一种关键成分。包括cAMP通路、Ca2+-CaMK通路、Ras/ERK通路、PI3激酶/Akt通路、应激状态诱导的P38MAPK通路以及磷酸酶反向调节通路等在内的多种信号转导通路涉及CREB的磷酸化及其活化作用。目前,来自海兔、果蝇、小鼠以及大鼠的药理学和遗传学研究已表明,细胞内构成长期而非短期记忆的变化需要依赖CREB的转录,CREB是长期记忆形成过程所必需的一种普遍存在的调节分子。由于已知人类CBP的突变可导致以精神迟缓为特征的Rubinstein-Taybi综合征,故CREB在记忆方面的重要性也有可能适合于人类,对CREB在记忆作用方面的研究不但可促进对记忆的了解,且有助于对与人类记忆障碍有关的认知疾病的认识。     

缺血预处理程序中心肌环磷酸腺苷含量及环磷酸腺苷依赖蛋白激酶活性的变化

目的:制备大鼠在体缺血再灌注模型,观察缺血预处理程序中心肌环磷酸腺苷含量及环磷酸腺苷依赖蛋白激酶活性的变化。方法:实验于2005-03/2006-10在解放军沈阳军区总医院医学实验动物中心和全军心血管研究所实验室完成。实验分组:选用健康雌性SD大鼠36只,根据预适应程序分为第1,2,3次缺血,第1,2,3次再灌注,每一时间点6只大鼠。实验过程:用手术套管法造成左冠状动脉主干缺血及再灌注。所有实验动物在实验程序结束后,取出心脏迅速置液氮保存备用。实验评估:用放射免疫法测环磷酸腺苷水平,生化法测环磷酸腺苷依赖蛋白激酶活性变化。结果:36只大鼠均进入结果分析。①环磷酸腺苷含量:第1次再灌注组低于第1次缺血组[(0.325±0.015),(0.395±0.024)pmol/g,t=6.06,P<0.001],第2次再灌注组低于第2次缺血组[(0.523±0.017),(0.708±0.067)pmol/g,t=6.56,P<0.001],第3次再灌注组低于第3次缺血组[(0.567±0.031),(0.712±0.038)pmol/g,t=7.24,P<0.001]。②环磷酸腺苷依赖蛋白激酶活性:第1次再灌注组低于第1次缺血组[(10.115±1.000),(16.351±0.849)pkat/g,t=11.12,P<0.001],第2次再灌注组低于第2次缺血组[(11.877±2.213),(14.869±0.619)pkat/g,t=3.31,P<0.01],第3次再灌注组低于第3次缺血组[(11.745±0.987),(14.766±0.329)pkat/g,t=7.09,P<0.001]。③缺血预处理程序中心肌环磷酸腺苷含量及环磷酸腺苷依赖蛋白激酶活性随缺血及再灌注呈周期性波动。在5min缺血预处理时表现为明显增高,而在间隔的再灌注程序中恰呈相反改变,有明显下降的趋势。结论:环磷酸腺苷及环磷酸腺苷依赖蛋白激酶的周期性波动变化可能是激发心肌缺血预处理的机制之一,环磷酸腺苷可能在预处理保护作用中起一些作用。     

电针足阳明经穴后家兔胃窦平滑肌细胞内钙离子浓度、三磷酸肌醇及环磷酸腺苷含量的变化

目的:通过测定胃窦平滑肌细胞内信使物质钙离子浓度及三磷酸肌醇、环磷酸腺苷含量的变化,探讨针刺足阳明经穴对胃窦平滑肌细胞内信息转导通路的影响。方法:实验于2003-06/2004-05在湖南中医学院针灸基础实验室完成。选用清洁级健康成年新西兰大耳白兔55只,随机分为5组,每组11只。①生理盐水组耳缘静脉滴注9g/L氯化钠溶液。②阿托品组耳缘静脉滴注0.25mg/L阿托品。③电针足阳明经穴组、电针足少阳经穴组和电针足太阳经穴组均在滴注阿托品总量的一半时,分别电针双侧足阳明经穴、足少阳经穴、足太阳经穴30min。各组分别处理后,分离胃窦平滑肌细胞,制成活的单个平滑肌细胞悬液;测定胞内钙离子浓度采用荧光法;测定胞内三磷酸肌醇含量应用蛋白质竞争结合分析法;测定胞内环磷酸腺苷含量采用放射免疫计数法。结果:纳入家兔55只,每组11只。最终进入结果分析动物数为:钙离子浓度分析55只,每组11只,无脱失;三磷酸肌醇及环磷酸腺苷含量分析数均为45只,均脱失10只。①各组家兔胃窦平滑肌细胞内钙离子浓度的比较:阿托品组、足少阳经穴组与足太阳经穴组钙离子浓度明显低于足阳明经穴组[(172.97±60.38),(203.57±72.20),(183.52±76.81),(321.22±55.36)nmol/L(F=9.37,P<0.01)]。②各组家兔胃窦平滑肌细胞内三磷酸肌醇含量的比较:阿托品组、足少阳经穴组、足太阳经穴组三磷酸肌醇含量均明显低于足阳明经穴组[(21.87±10.16),(21.08±10.97),(23.81±12.06),(39.00±12.97)pmol/106(F=3.61,P<0.01)]。③各组家兔胃窦平滑肌细胞内环磷酸腺苷含量的比较:各组差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:针刺足阳明经穴可使家兔胃窦平滑肌细胞内钙离子、三磷酸肌醇含量明显增高。脑肠肽是足阳明经与胃相关的重要物质基础,参与调节胃平滑肌运动的脑肠肽受体后信号转导通路可能与胞内钙离子、三磷酸肌醇等信使物质有关。     

胃腺癌细胞环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷含量的变化

细胞信号传导过程异常可导致细胞增殖、转化和肿瘤的发生。深入探讨受体水平后信号传导通路与肿瘤的关系，对于肿瘤的早期诊断和治疗具有深远的理论价值和实际的临床意义。胃腺癌细胞环磷酸腺苷（cAMP）和环磷酸鸟苷（cGMP）是细胞内重要的第二信使物质，广泛参与细胞内多种的生理、生化反应和细胞功能的调节。本文检测了培养的胃腺癌细胞和正常胃黏膜细胞内cAMP和cGMP含量，并比较了两者间的差异。     

Effects of atrial natriuretic factor on cyclic guanosine monophosphate and cyclic adenosine monophosphate accumulation in microdissected nephron segments from rats.

Atrial natriuretic factor (ANF) (1 microM) markedly increased cyclic guanosine monophosphate (cGMP) content in microdissected glomeruli (35-fold) and in microdissected inner medullary collecting ducts (IMCD) (20-fold). ANF caused little or no increase in cGMP content in other nephron segments. The threshold concentration for increased cGMP accumulation by ANF was 0.1-1 nM in IMCD, which is in the range reported for rat plasma. Sodium nitroprusside (1 mM), which selectively stimulates soluble guanylate cyclase, increased cGMP content in glomeruli but not in IMCD. ANF did not alter cAMP accumulation in the absence or presence of vasopressin (AVP) or parathyroid hormone (PTH) in outer and inner medullary tubule suspensions, or in microdissected proximal convoluted tubules (PCT), medullary thick ascending limbs (MAL) or IMCD. These data are compatible with the hypothesis that cGMP is a second messenger for a physiologic action of ANF in the inner medullary collecting duct. ANF apparently activates membrane-bound guanylate cyclase in this segment.     

靶肌肉注射环磷酸腺苷对周围神经再生的作用

目的:观察靶肌肉注射外源性环磷酸腺苷对大鼠坐骨神经再生的治疗作用。方法:实验于2004-10/2005-03在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠48只,制备大鼠左侧坐骨神经挤压伤模型。实验动物随机数字表法分为3组,每组16只,高剂量组:腓肠肌内注射0.2mL环磷酸腺苷1mg。低剂量组:腓肠肌内注射注射0.2mL环磷酸腺苷0.1mg。对照组:腓肠肌内注射0.2mL生理盐水。术后每日给药1次,共4周。术后4,8周时检测左侧小腿三头肌湿质量。术后8周时检测坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位波幅、潜伏期及形态学观察神经再生情况。结果:纳入动物48只,均进入结果分析。①术后4,8周时高剂量组和低剂量组大鼠左小腿三头肌湿质量显著高于对照组[术后4周分别为(1.70±0.58),(1.26±0.71),(0.91±0.24)g;术后8周分别为(2.26±0.62),(1.65±0.16),(1.24±0.37)g],且高剂量组明显高于低剂量组,差异有显著性意义(P<0.01)。②术后8周高剂量组和低剂量组坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位波幅、潜伏期及有髓神经纤维计数、髓鞘厚度、轴突直径均高于对照组[运动神经传导速度分别为(33.54±2.65),(26.96±4.12),(19.83±2.74)m/s;复合肌肉动作电位波幅分别为(2.435±1.257),(1.867±0.566),(1.218±0.647)mV;复合肌肉动作电位潜伏期分别为(2.946±0.658),(4.537±0.932),(5.825±1.043)ms;有髓神经纤维计数分别为(1693±201),(1357±185),(876±124)个;髓鞘厚度分别为(1.149±0.138),(0.924±0.086),(0.633±0.105)μm;轴突直径分别为(1.045±0.150),(0.794±0.095),(0.512±0.138)μm],且高剂量组显著高于低剂量组,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:靶肌肉注射环磷酸腺苷可促进周围神再生,高剂量环磷酸腺苷对神经再生具有更好的促进作用。     

靶肌肉注射环磷酸腺苷对周围神经再生的作用

目的：观察靶肌肉注射外源性环磷酸腺苷对大鼠坐骨神经再生的治疗作用。 方法：实验于2004-10／2005-03在华中科技大学同济医学院协和医院骨科实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠48只。制备大鼠左侧坐骨神经挤压伤模型。实验动物随机数字表法分为3组，每组16只，高剂量组：腓肠肌内注射0．2mL环磷酸腺苷1mg。低剂量组：腓肠肌内注射注射0．2mL环磷酸腺苷0．1mg。对照组：腓肠肌内注射0．2mL生理盐水。术后每日给药1次，共4周。术后4，8周时检测左侧小腿三头肌湿质量。术后8周时检测坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位波幅、潜伏期及形态学观察神经再生情况。 结果：纳入动物48只，均进入结果分析。①术后4，8周时高剂量组和低剂量组大鼠左小腿三头肌湿质量显著高于对照组[术后4周分别为（1．70&;#177;0．58），（1．26&;#177;0．71），（0．91&;#177;0．24）g；术后8周分别为（2．26&;#177;0．62），（1．65&;#177;0．16），（1．24&;#177;0．37）g]，且高剂量组明显高于低剂量组，差异有显著性意义（P〈0．01）。②术后8周高剂量组和低剂量组坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位波幅、潜伏期及有髓神经纤维计数、髓鞘厚度、轴突直径均高于对照组[运动神经传导速度分别为（33．54&;#177;2．65），（26．96&;#177;4．12），（19．83&;#177;2．74）m／s；复合肌肉动作电位波幅分别为（2．435&;#177;1．257），（1．867&;#177;0．566），（1．218&;#177;0．647）mV；复合肌肉动作电位潜伏期分别为（2．946&;#177;0．658），（4．537&;#177;0．932），（5．825&;#177;1．043）ms；有髓神经纤维计数分别为（1693&;#177;201），（1357&;#177;185），（876&;#177;124）个；髓鞘厚度分别为（1．149&;#177;0．138），（0．924&;#177;0．086），（0．633&;#177;0．105）min；轴突直径分别为（1．045&;#177;0．150），（0．794&;#177;0．095），（0．512&;#177;0．138）μm]，且高剂量组显著高于低剂量组，差异有显著性意义（P〈0．01）。 结论：靶肌肉注射环磷酸腺苷可促进周围神再生，高剂量环磷酸腺苷对神经再生具有更好的促进作用。     

Prostacyclin modulates cholesteryl ester hydrolytic activity by its effect on cyclic adenosine monophosphate in rabbit aortic smooth muscle cells.

We tested the hypothesis that prostacyclin (PGI2), 6-keto-prostaglandinF1 alpha(6-keto-PGF1 alpha), and several E series prostaglandins (PG) may affect the activity of cholesteryl ester (CE) hydrolase since our previous experiments indicated that smooth muscle cells (SMC) in neointima of injured rabbit aorta (a) acquire the capacity to produce PGI2 and (b) have increased lysosomal CE hydrolytic (acid cholesteryl ester hydrolase [ACEH])activity. Using cultured SMC from rabbit thoracic aorta, we demonstrated that PGI2, 6-keto-PGF1 alpha, and 6-keto-PGE1 enhanced ACEH activity fourfold. No significant effects on ACEH activity were observed with PGE1 or PGE2. Preincubation of SMC with an inhibitor of adenylate cyclase activity (dideoxyadenosine) abolished the effect of these PG on CE hydrolytic activity. Addition of dibutyryl cAMP to these SMC significantly increased ACEH activity. Although concentrations of PGI2 used significantly increased cAMP levels, proliferation of these SMC was not observed. In related experiments, we determined if the addition of PGI2, 6-keto-PGF1 alpha, or 6-keto-PGE1 to cultured aortic SMC would enhance the egress of unesterified cholesterol and CE from these SMC. A significant loss of total cholesterol from PG-treated SMC was observed at the end of 14 d. Results suggest that increased synthesis of PGI2 by neointimal SMC in the injured aortic wall may, at least in part, explain the changes in CE catabolism and accumulation following injury. These PG may also be important in CE metabolism and accumulation in human arteries.