甲型肝炎原型活疫苗在灵长类动物模型中的研究

作者将甲型肝炎病毒(HAV)HM175株在非洲绿猴肾细胞中连续传代,将第21代(P21)和第32代(P32)的两个原型活疫苗经静脉感染黑猩猩和狨猴,发现此两株活疫苗病毒的生物学特性有所不同。接种P21株和P32株的黑猩猩的血清丙氨酸转氨酶(ALT)值均低于接种野型HAV者,接种P32株的黑猩猩的ALT值与接种前无明显差异,但显著低于接种野型HAV者。狨猴接种P21株和野型HAV后,血清异柠檬酸脱氢酶(ICD)值明显升高,接种P32株后ICD值比接种野型HAV者低4倍,但仍比接种P32株     

甲型肝炎病毒:体内和体外培养的野毒株和减毒株的生长特性

将甲型肝炎病毒(HAV)MS-1株在狨猴体内连续传代,可增加病毒产量,导致更严重的肝病,并可缩短潜伏期,从第1代的55天缩短至第9代以上的3～7天。在狨猴体内传递8代的MS-1株接种黑猩猩可产生典型的甲型肝炎疾病过程,血清酶活性增高,肝脏和粪便中可检出HAV抗原以及IgM抗-HAV阳转。值得提出的是,用传递20代的HAV     

病毒性肝炎的病原学分型及诊断依据

1　病原学分型目前病毒性肝炎的病原学分型至少可分为六型 ,即甲型病毒性肝炎 (HAV)、乙型病毒性肝炎 (HBV)、丙型病毒性肝炎(HCV)、丁型病毒性肝炎 (HDV)、戊型病毒性肝炎 (HEV)和庚型病毒性肝炎 (HGV)。2　各型病毒性肝炎病原学诊断依据2.1　甲型肝炎　急性肝炎患者血清抗 HAVIg M阳性 ,可确诊为近期感染。但在慢性乙型肝炎或自身免疫性肝病患者 ,血清中检测抗 HAVIg M阳性时 ,判断 HAV重叠感染应慎重 ,需排除类风湿因子 (RF)及其他原因引起的假阳性。接种甲型肝炎疫苗后 2～ 3周约 8%～ 2 0 %接种者可产生抗 - HAVIg M,…     

原位酶免疫法对快速复制并致细胞病变的甲型肝炎病毒HM175A.2株作感染性滴定

作者用甲型肝炎病毒(HAV)HM175A.2株感染BS-C-1细胞,获感染性病毒,经观察细胞致病作用(CPE)测得其感染性滴度为1×10~6半数组织培养感染量(TCID_(50))/ml。分装,-70℃保存。将此HAV纯化后注射豚鼠制备抗-HAV超免疫血清,并预留豚鼠的免疫前血清。在96孔细胞培养板上接种病毒进行原位酶免疫试验(EIA)测定病毒感染性滴度,并以CPE滴定法作对照,以评价EIA的准确性和可靠性。     

甲型肝炎减毒活疫苗候选株在黑猩猩中的研究

本文介绍经狨猴、恒河猴胚肾细胞(FRhK6)和人二倍体肺成纤维细胞适应传代的甲型肝炎病毒(HAV)CR326株的9株变异株在黑猩猩中进行免疫原性和保护性试验的结果。每株变异株感染2只黑猩猩,每只静脉接种1.0ml。定期采血及作肝穿刺,测定血清谷丙转氨酶(SGPT)活性、甲型肝炎抗体(抗-HAV)及肝脏病理变化;每天收集感染的黑猩猩大便标本,以固相放射免疫试验测定甲型肝炎抗原(HAAg)。攻击用毒株为CR326株13代狨猴肝标本,攻击量为10~6狨猴50％感染剂量。     

急性病毒性肝炎的血清学诊断

急性病毒性肝炎是由至少五种病毒引起的疾病,即HAV引起的甲型肝炎、HBV引起的乙型肝炎、δ因子引起的δ肝炎、非甲非乙型肝炎和EB病毒引起的传染性单核细胞增多症。本文报道1976～1978年50例急性病毒性肝炎病毒血清学标志的检测结果。24例血清抗-HAV阳性,但其中仅10例抗-HAVIgM阳性,属甲型肝炎,余仅抗-HAVIgG阳性。28例HBsAg阳性,其中4例非属急性乙型肝炎,皆在急性肝炎发病前HBsAg阳性已达9个月至4年。抗-HBcIgM均阴性,2例抗-HAVIgM阳性属甲型肝炎,另2例高滴度抗-δ阳性属δ肝炎。26例抗-HBcIgM阳性,其中2例HBsAg阴性,但1例HBeAg阳性,另1例高滴度抗-HBs,故仍属乙型肝炎,余HBsAg均阳性。1例为急     

甲型和乙型肝炎联合疫苗对青年的免疫原性和反应原性

作者对150名甲型肝炎病毒抗体(抗-HAV)、抗-HBs、抗-HBc和HBsAg阴性的健康青年(男39人、女111人)进行了随机双盲研究.乙型肝炎疫苗系酵母重组HBsAg,甲型肝炎疫苗用HM175株病毒灭活制成.每剂(1ml)联合疫苗含HBsAg20μg,HAV抗原720ELISA单位(ELU),用0.45mg铝盐吸附,由Smithkline Beecham生物制品公司制备,按0、1和6月程序接种於上臂三角肌内.把150名青年分成3组接种3批疫苗.首针后1、2、6和7月采集血标本,用ELISA测抗-HAV,≥33mIU/ml为血清阳转;用放射免疫法测抗-HBs,≥1mIU/ml为阳转,≥10mIU/ml为保护水平.同时测转氨酶活性.共有147人完成研究.局部和全身反应发生率各组间没有显著差异,局部反应两倍     

贵州存在戊型病毒性肝炎

对180例病毒性肝炎患者进行了血清抗-HEV的检测,并对急性肝炎进行了病原学分型研究。抗-HEV总阳性率为11.11％(20/180)。亚急性重型肝炎患者血清抗-HEV阳性率最高达33.33％(2/16),急性肝炎和慢性活动性肝炎血清抗-HEV的阳性率分别为11.13％(17/154)与7.14％(1/14)。17例抗-HEV阳性的急性肝炎患者血清学上无甲、乙、丙、丁肝炎病毒、CMV和EBV感染标志。戊型肝炎在急性肝炎中的比例为11.03％。结果提示贵州存在有戊型肝炎。     

HAV三个中间传代株在细胞培养上增殖和减毒的部分特征

为了更好地了解甲型肝炎病毒(HAV)突变程度对病毒在细胞培养上增殖能力的影响及引起病毒减毒的因素,作者比较了不同代次HAV HM-175株的5′端非编码区和2BC区的基因序列及这些病毒在几种细胞上的增殖能力和对狨猴、黑猩猩的致病力。 作者将HAV HM-175株在原代非洲绿猴肾(AGMK)细胞上分别传9或10代(p10)、21代(p21)和32代(p32),用聚合酶链反应法对病毒的5′和2BC区进行扩增,然后作序列测定。 对不同传代水平HM-175株核苷酸序列的比较结果表明,在5′端非编码区和p2区的2BC基因存在突变,野毒株和经细胞培养传35代的适应株(p35)在所有13个位点上均不同。     

恒河猴胎肾细胞中增殖的甲型肝炎病毒HAS-15株的吸附、纯化和生长特性

业已证明,甲型肝炎病毒(HAV)在原代及次代非洲绿猴肾细胞、新生狒狒肾细胞、恒河猴胚肾(FRhK)细胞及人二倍体细胞株(WI-18和MRC-5)中不产生病毒增殖所引起的细胞致病效应(CPE)和细胞死亡。据此,作者报道一种将HAV HAS-15株在FRhK-4细胞上增殖以期产生较高滴度HAV的方法。用放射免疫灶试验(RIFA)、放射免疫试验(RIA)、病毒特异性免疫荧光试验(IF)和免疫电镜等检测病毒的感染性和产量,均证明此法可提供HAV研究的材料来源。用于增殖病毒的FRhK-4细胞株在150和490cm~2的转瓶中生长,生长培养基和维持培养基分别用含20%和2%加热灭活胎牛血清(FBS)的William培养基E。培养温度为37℃。俟FRhK-4细胞长成单层后,先用     

甲型肝炎灭活疫苗在学龄前儿童中的安全性和免疫原性

日托中心的幼儿是甲型肝炎病毒(HAV)感染的重要来源。为了评估福马林灭活的HAV疫苗在学龄前儿童中的安全性和免疫原性,作者挑选了3个日托中心的57名2～5岁、血清抗-HAV阴性的健康儿童,随机分成两组:A组28名,接种程序为0、1和2月;B组29名,接种程序为0、1和6月,每剂0.5ml(含360ELISA单位)。A组分别于首剂接种后2、3及8个月采血,B组分别于首剂接种后2、6及8个月采血,测定血清抗HAV抗体。 结果显示,所有57名接种HAV疫苗的学龄前儿童都产生了抗HAV抗体,血清阳转率为100％。首剂接种后2个月,A、B两组     

病毒性肝炎的血清学诊断

一、甲型肝炎:人感染甲型肝炎病毒(HAV)后,抗-HAV的最高水平出现在潜伏期末或血清酶活性增高之初,并且在病后长期存在。可以应用放射免疫(RIA)、免疫电镜、免疫血凝粘附、补体结合和免疫酶标技术等方法测定病人血清中的抗-HAV。如果病人恢复期血清的抗-HAV滴度较急性期增长4倍以上,即可确诊为甲型肝炎。但抗-HAV的检测不能用于早期诊断,若采血较晚时,抗体滴度已经很高,所以有漏诊的可能。应用RIA法检测抗-HAV     

人甲型肝炎病毒在非洲绿猴肾细胞培养中繁殖:原代分离与连续传代研究

[Daemer RJ et al:Infect Immun 32(1)388,1981(英文)] 1979年Provost等首次用经狨猴连续传31代的HAV株进行体外培养成功。本文作者发展了Provost等的研究,在原代非洲绿猴肾(AGMK)细胞上直接用HAV阳性的临床材料进行HAV的原代分离和连续传代研究,并获得成功。     

检测抗HAV抗体的敏感ELISA

灵敏的免疫学检测是测定抗甲型肝炎病毒(HAV)抗体(HAVAB)的合适方法.作者用阻断ELISA、竞争抑制ELISA和抗HAVIgM捕获ELISA来检测总抗-HAV,并与美国Abbott实验室的HAVAB放射免疫法(RIA)和酶免疫法(EIA)的测定结果进行比较.阻断ELISA法是待测血清与被固相上抗-HAV捕获的HAV反应,随后加入辣根过氧物酶标记的抗HAV IgG.竞争抑制     

甲型肝炎灭活疫苗两种免疫程序的免疫原性比较

本文旨在比较甲型肝炎(HA)灭活疫苗两种免疫程序(标准程序:0、4周,缩短程序:0、2周)的免疫原性;以及同时接种其他疫苗(如乙型肝炎、白喉、破伤风、脊髓灰质炎、狂犬病、伤寒、黄热病、乙型脑炎和霍乱)对HA疫苗免疫原性和反应原性的影响.作者使用Smithkline公司生产的HM-175株甲醛灭活HA疫苗,每剂含720ELISA单位.在第2次免疫后2周采血以世界卫生组织提供的标准血清为参考品采用竞争ELISA法检测HA病毒(HAV)抗体,抗体滴度>20mIU/ml为抗-HAV阳性.于接种后30分钟开始观察局部和全身反应.     

用检测唾液的方法诊断甲型肝炎和乙型肝炎

作者报道了用唾液标本诊断急性病毒性肝炎的研究结果.为进一步证实甲型肝炎(HA)的临床诊断,还从一些黄疸患者中采集血液标本进行血清IgM抗-HAV测定.检测方法有3种:(1)竞争性的放射免疫法(RIA)检测血清中总抗-HAV或抗-HBc.(2)IgG抗体捕获RIA检测血清或唾液中的抗-HAV和抗-HBc.(3)IgM抗体捕获RIA检测唾液中的抗-HAV和抗-HBc.结果表明,用唾液标本诊断HA时,从29例因黄疸住院、血清学证实为急性期HA     

婴儿接种甲型肝炎疫苗的安全性及免疫原性

作者将48名意大利健康婴儿按其母亲是否具有抗甲型肝炎病毒（HAV）抗体分为3组:第1组10人,母亲抗-HAV阴性,第2组34人,母亲抗-HAV阳性,第3组4人,母亲抗-HAV状况不明。在5月龄时于上臂三角肌肌肉接种第1针HAV灭活疫苗Havrix(含720 ELISA单位）,11月龄时（6个月后）加强接种1针。其接种时间与意大利儿童期     

用异倍体猴传代细胞系制备的甲型肝炎灭活疫苗的特性

本文报告了甲型肝炎灭活疫苗的实验室制备方法及某些特性。选用甲型肝炎病毒(HAV)LBA-86株在健康的非洲绿长尾猴肾传代细胞系上培养,传20代后,HAV水平稳定在10~(7.5)～10~(8.0)。半数组织培养感染量(TCID_(50))/ml。接种病毒后14～21天收获的、与上清液混合的感染细胞裂解物作为原苗,然后经低速离心和进一步提纯,有效地去除细胞和血清蛋白以及底物DNA。每剂疫苗浓度降至50～90pg,即没有超过世界卫生组织专家组推荐的上限为100pg的水平。     

对检测抗HAV抗体和抗HAV IgM的免疫测定法的比较

本文介绍了两种新建立的检测抗甲型肝炎病毒（HAV）抗体和抗HAV IgM的方法。 新的抗-HAV检测法是,将HAV和血清样品加到链霉亲和素管中,培育30分钟后加入生物素标记的抗-HAV和过氧物酶标记的抗-HAV,放置120分钟,然后加入底物ABTS再放置30分钟。结果用自动光度计测定。用标准的7～75mU/ml抗-HAV可以进行定量测定。新的抗-HAV IgM检测法是把     

在卫生人员中进行的甲型肝炎灭活疫苗的安全性和免疫原性研究

1979年Provost等在细胞中成功地培养了甲型肝炎病毒(HAV),为研制HAV减毒活疫苗和灭活疫苗提供了所需的技术。至80年代末在人二倍体细胞系中繁殖出大量HAV后,开发了各种候选的HAV灭活疫苗。本文作者设计了两种免疫程序,以评估HAV HM175株灭活疫苗在血清阴性的卫生人员中的安全性和免疫原性。 作者将志愿者随机分成两组,A组78人(男性58％,女性42％),平均年龄30岁(21～65岁),按0、1和6个月程序接种,分别于0、1、2、6、7、13和24个月采血;B组73人(男性78％,女性22％),平均年龄29岁(22～63岁),按0、1和12个月程序接种,分别于0、1、2、7、13和24个月采血。接种剂量均为1ml(含720ELISA抗原单位)。用ELISA抑制法滴定血样中的抗-HAV(抗-HAV滴度≥20mIU/ml被认为有保护作用),并记录每位志愿者接种后6天内的不良反应。