我国不同地理株白纹伊蚊对登革病毒的易感性

本文用棉球病毒悬液法感染白纹伊蚊,比较了我国9个不同地理株白纹伊蚊对经口感染登革病毒Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ型的易感性。实验结果表明,我国不同地理株白纹伊蚊对经口感染登革病毒的易感性有差别。海口株对三个血清型登革病毒均较易感,北京株和成都株分别对登革病毒Ⅰ型和Ⅱ型较易感,各地理株白纹伊蚊对登革病毒Ⅱ型的易感性普遍较高。本文还用蚊胸内病毒接种技术,比较了我国9个不同地理株白纹伊蚊对胸内接种感染登革病毒Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ型的易感性,结果胸内接种各型登革病毒的易感性未见明显差异,提示经口感染易感性的差别是中肠屏障的作用。本文所采用的蚊脑涂片间接免疫荧光技术检测蚊脑内登革病毒抗原的方法,蚊脑组织在玻片上分布较均匀,可避免蚊头外骨骼对脑组织的遮盖,似比蚊头压片法易于观察结果,有利于提高检出率。     

不同地理株白纹伊蚊mtDNA-COI基因特征研究

目的 探讨不同地理株白纹伊蚊(Aedes albopictus)线粒体细胞色素氧化酶亚基I(mtDNA-COI)基因序列特征、种群差异和分化程度.方法 扩增不同地理株白纹伊蚊mtDNA-COI,并从网上下载部分白纹伊蚊mtDNA-COI进行序列测定、分析和比对.结果 ①获得mtDNA-COI长度为415 bp,碱基A+...     

用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术区分不同地理株白纹伊蚊

目的 对来自北京、广州、成都、上海和日本的冲绳及长乐寺6个不同地理株的12只雄蚊进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析。方法 RAPE—PCR。结果 UPGMA法构建的系统聚类图表明，12只白纹伊蚊可归为明显不同的两个组，不同地理株之间存在着显著的遗传分化。结论 用RAPD法可以区分不同地理株的白纹伊蚊。     

福建口岸三蚊种COI基因序列分析

〔目的〕分析福建口岸白纹伊蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊细胞色素C氧化酶亚基I(COI)基因序列,为建立蚊种分子鉴定方法奠定基础。〔方法〕扩增并测定在福建口岸采集的白纹伊蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊COI基因序列,与GenBank中相应序列进行对比分析。〔结果〕三蚊种COI基因扩增片段长度约500bp,A+T含量为65.61%~68.73%。核苷酸同源性分析结果表明,同一蚊种COI基因同源性为98.1%~100%,三蚊种间基因同源性为84.4%~87.7%;COI部分基因系统进化关系显示,三蚊种COI分子鉴定与形态学鉴定结果一致,阿蚊属与伊蚊属聚类为库蚊亚科,按蚊亚科位于系统进化树另一分支。〔结论〕COI基因核苷酸序列分析可应用于福建国境口岸三蚊种的区分,弥补形态特征信息量不足等传统分类鉴定方法的缺点,为建立外来或新发现蚊种分子鉴定方法奠定基础。     

红色蚋细胞色素氧化酶COI基因克隆及鉴定

目的对红色蚋细胞色素氧化酶亚基I(COI)基因进行克隆、鉴定与序列分析。方法以红色蚋成虫基因组DNA为模板,设计特异性引物进行PCR扩增、纯化基因片段后连接、转化大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆、测序并与NCBI数据库中的核酸序列进行同源性比对分析,掌握其基因序列及其蛋白质结构特征。结果克隆序列的结果表明COI基因全长1542 bp,编码513个氨基酸,编码蛋白等电点为5.84,相对分子量为56 KDa,具有一个细胞色素氧化酶亚基I的核心保守结构;其基因碱基组成A、T、C、G分别为28.60%,36.90%,17.76%,16.74%,G+C含量为34.5%,A+T含量为65.5%。结论成功克隆出红色蚋CO I基因序列,可为进一步研究奠定基础。     

极低频磁场对细胞色素氧化酶亚基1基因转录水平的影响

目的　克隆和鉴定本研究室经DD法在Daudi细胞中筛选到的一个极低频磁场的特异反应基因 (MF 1) ,并在多种磁场敏感细胞中证实该基因反应的普遍性 ,为揭示磁场所致生物学效应的作用机制提供实验依据。方法　克隆、序列分析MF 1片段 ;选择HL 6 0、L12 10和中国仓鼠肺成纤维细胞 (CHL)等细胞 ,用Northern技术观察该基因在不同条件的磁场辐照 (5 0Hz磁场 ,磁通密度分别是 0 .1mT和 0 .8mT ,辐照时间分别是 2 0min和 2 4h)后该基因转录水平的变化。结果　克隆测序及与GeneBank同源性比较表明 ,MF 1序列与细胞色素氧化酶亚基 1基因 (CO1)有 10 0 %同源性。HL 6 0、L12 10和CHL等细胞在 0 .1mT、0 .8mT磁场辐照 2 0min后 ,CO1转录水平 (分别为 0 .38± 0 .12、0 .37± 0 .0 4 )均比对照组 (0 .5 8± 0 .12 )下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;辐照 2 4h后 ,3种细胞该基因转录水平 (分别为 0 .4 6± 0 .0 9、0 .4 5± 0 .0 9)亦比对照组 (0 .6 5± 0 .0 6 )下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　CO1是磁场辐照密切相关的反应基因之一。磁场可能通过影响CO1的转录水平来影响细胞色素氧化酶的活力 ,从而影响多种生物学效应     

基于COⅠ基因的媒介蝇类快速分子鉴定研究

目的 为解决蝇类形态学鉴定的不足,建立基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因的DNA条形码技术对蝇类进行分子鉴定。方法 选取烟台口岸常见的16只蝇类作为研究对象,形态学鉴定后,取蝇的单后足代表微量组织,提取总DNA。依据资料,选取COⅠ国际通用引物LCO1490：5′-GGT CAA CAA ATC ATA AAG ATA TTG G-3′,HCO2198：5′-TAA ACT TCA GGG TGA CCA AAA AAT CA-3′,建立PCR体系,完善PCR程序,有效扩增蝇类的COⅠ基因。纯化PCR产物后进行序列测定和比对。此外,应用Mega5.05软件分别用最大似然法、邻接法、最大简约法分析系统发育,构建系统发育树比较进化关系。结果 16只蝇类COⅠ基因扩增片段长度为690 bp,其中A＋T平均含量高达68.53%。序列比对结果及系统进化关系显示,16只蝇类COⅠ基因的分子鉴定与形态学鉴定结果一致。结论 应用DNA条形码技术可成功扩增蝇类的COⅠ基因,其分子鉴定与形态学鉴定结果完全一致,尤其适用于微量组织样本的鉴定。     

铝暴露对大鼠精子线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ mRNA表达的影响

目的研究铝暴露对大鼠精子质量及线粒体细胞色素氧化酶(COX)亚基Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ mRNA表达的影响。方法取健康雄性Wistar大鼠48只,根据饮水中AlCl₃的半数致死量设立:对照组和低、中、高剂量组[剂量分别为0.00、64.18、128.36、256.72 mg/(kg·d)],每组随机分配12只,连续作用110 d。造模完成后称量生殖脏器重量并计算脏器系数,利用CASA检测精子质量参数,RT-PCR法测定COX Ⅰ、COX Ⅱ、COX Ⅲ mRNA表达。结果与对照组相比,低、中、高剂量组大鼠体重及睾丸重量均明显下降(P<0.05);中、高剂量组大鼠附睾重量、睾丸及附睾脏器系数均低于对照组(P<0.05);低、中、高剂量组大鼠前向运动精子百分比均显著低于对照组(P<0.05),死精子百分比均显著高于对照组(P<0.05);低、中、高剂量组大鼠COX Ⅰ、COX Ⅱ、COX Ⅲ mRNA相对表达量较对照组均有不同程度的下降(P<0.05)。结论铝暴露可致大鼠精子线粒体COX Ⅰ、COX Ⅱ、COX Ⅲ mRNA表达降低,从而影响雄性生殖...     

高脂饲料对冷暴露大鼠细胞色素C氧化酶及脂蛋白脂酶活…

大鼠预饲高脂饲料（占日摄入热量的２０％、３５％和４５％）１月后，进行急性（－１５℃，２ｈ）和慢性（０℃，３ｗｋ）冷暴露。测定心肌线粒体细胞色素Ｃ氧化酶（ＣＣＯ）及肝线粒体脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）活性及耐寒力。结果如下：（１）急性冷暴露组ＣＣＯ及ＬＰＬ活性明显高于慢性冷暴露组及室温对照组（Ｐ〈０．０１）。慢性冷暴露组的ＬＰＬ活性亦高于室温对照组。（２）０℃、８ｈ冷暴露时直肠温度下降辐度明显小于食用普通低     

高脂饲料对冷暴露大鼠细胞色素C氧化酶及脂蛋白脂酶活性和耐寒力的影响

大鼠预饲高脂饲料（占日摄入热量的２０％、３５％和４５％）１月后，进行急性（－１５℃，２ｈ和慢性（０℃，３ｗｋ）冷暴露。测定心肌线粒体细胞色素Ｃ氧化酶（ＣＣＯ）及肝线粒体脂蛋白脂酶（ＬＰＬ）活性及耐寒力。结果如下：（１）急性冷暴露组ＣＣＯ及ＬＰＬ活性明显高于慢性冷暴露组及室温对照组（Ｐ＜０．０１）。慢性冷暴露组的ＬＰＬ活性亦高于室温对照组。（２）０℃、８ｈ冷暴露时直肠温度下降幅度明显小于食用普通低脂饲料的大鼠（Ｐ＜０．０１）。（３）２０％和３５％脂肪组在０℃、３ｗｋ慢性冷暴露过程中，体重的恢复早于４５％脂肪组。结果提示预饲１个月高脂饲料，有利于提高耐寒力和加速冷适应，脂肪产热比以２０％～３０％为宜。