参芪抑瘤方含药血清对BGC-823胃癌细胞增殖和周期的影响

目的:探讨参芪抑瘤方含药血清对胃癌细胞BGC-823增殖和周期的影响,并探讨其作用机制。方法:以参芪抑瘤方3%,5%,10%含药血清干预BGC-823细胞后,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测其对细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测细胞周期变化;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclindependent kinase inhibitor,CDKN)1B,CDKN1C mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p27,p57蛋白表达情况。结果:不同浓度含药血清作用于BGC-823细胞24,48,72 h后,细胞存活率显著降低(P0.01),且与时间和浓度呈依赖关系;不同浓度含药血清作用于BGC-823细胞24 h后,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少;Real-time PCR结果表明,与溶剂组和空白血清组比较,参芪抑瘤方各组CDKN1B,CDKN1C mRNA表达上调(P0.05,P0.01);Western blot结果显示,与溶剂组比较,参芪抑瘤方各组p27,p57蛋白表达上调(P0.05,P0.01)。结论:参芪抑瘤方含药血清可以抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,其机制可能通过调节CDKN1B,CDKN1C mRNA及p27,p57蛋白表达,进而干预细胞周期有关。     

阿魏酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响

目的观察阿魏酸对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响,探讨其诱导胃癌细胞凋亡的作用机制。方法不同浓度阿魏酸干预体外培养人胃癌MGC-803细胞,作用24、48、72 h后,MTT法检测细胞增殖;不同浓度(0、5、7.5、10 mg/m L)阿魏酸作用MGC-803细胞48 h,Annexin V-FITC/PI法和流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-q PCR和Western-blot检测Capase-3、Capase-9、Bax、Bcl-2和Xiap的m RNA和蛋白表达。结果与对照组比较,5、7.5、10、12.5 mg/m L阿魏酸作用MGC-803细胞的OD值明显降低,阿魏酸抑瘤作用明显,阿魏酸作用MGC-803细胞24、48、72 h的IC50分别为12.93、9.73、5.52 mg/m L;5、7.5、10 mg/m L阿魏酸作用MGC-803细胞48 h后均能诱导MGC-803细胞凋亡,5、7.5、10 mg/m L阿魏酸均能上调Capase-3、Capase-9和Bax的m RNA和蛋白表达,下调Bcl-2和Xiap的m RNA和蛋白表达。结论阿魏酸能有效抑制MGC-803细胞增殖,并能诱导MGC-803细胞凋亡,其作用机制与内源性线粒体凋亡途径和下调Xiap的表达有关。     

连黛片药物血清对人胃癌细胞株MGC-803增殖周期的影响

目的：观察连黛片大鼠药物血清对人胃癌细胞株MGC－803增殖周期的影响,从而探讨连黛片防治胃癌的可能机理。方法：不同因素处理过的MGC－803细胞以PI染色,流式细胞仪分析。结果：连黛片药物血清处理过的MGC－803细胞的S期细胞数均明显少于未经任何处理的正常组（P＜0．05－0．01）;而空白对照血清处理过的MGC－803细胞的S期细胞数则与未经任何处理的正常组相当（P＞0．05）。此外随着药物血清浓度的增加G1期细胞含量有上升趋势。结论：连黛片可能通过使MGC－803细胞阻滞于G1期而不进入或延期进入DNA合成期（S期）的方式发挥抑癌作用。     

参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45细胞周期阻滞及抗侵袭转移的影响

目的探讨不同浓度参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45细胞周期阻滞及抗侵袭转移作用的相关机制。方法 60只SPF级Wistar大鼠,随机分为对照组和参芪抑瘤方低、中、高剂量组,每组15只。参芪抑瘤方低、中、高剂量组分别给予0.25、0.50、1.00 g原药材/m L药液灌胃,空白组给予等量饮用水灌胃,每日2次,连续7 d,末次灌胃2 h后取血,分离血清。MKN-45细胞经不同浓度药物血清处理后,流式细胞术检测细胞周期,免疫组化检测COX-2、PTEN蛋白表达。结果药物血清干预后细胞G0~G1期比例增加,S期比例减少;药物血清可降低MKN-45细胞COX-2蛋白阳性表达率,升高PTEN蛋白阳性表达率(P0.05)。结论参芪抑瘤方药物血清阻滞细胞周期及抗侵袭转移作用可能与影响COX-2、PTEN蛋白表达有关。     

树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增殖及对EGFR表达的影响

目的 研究树舌多糖(Ganoderma applanatum polysaccharides,GAPS)粗提物对人胃粘液性腺癌MGC-803细胞增殖、细胞周期及其对受体蛋白酪氨酸激酶EGFR表达的影响,探讨树舌多糖抗肿瘤作用机制.方法 MTT法检测不同时间不同浓度树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增殖抑制作用;流式细胞仪检测2.0 g/L树舌多糖作用72 h后MGC-803细胞的周期分布,流式细胞仪检测和免疫荧光显微镜观察树舌多糖对MGC-803细胞EGFR表达的影响.结果 树舌多糖对胃癌细胞MGC-803具有增殖抑制作用,并呈时间及浓度依赖性.2.0 g/L树舌多糖作用72 h后,MGC-803细胞被阻滞于G_0/G_1期,S期和G_2/M期细胞减少,与细胞对照组比较有差异,具有统计学意义(P<0.05).荧光显微镜下观察树舌多糖组MGC-803细胞EGFR荧光强度较对照组明显减弱;流式细胞仪检测树舌多糖能下调MGC-803细胞EGFR表达,与细胞对照组比较有差异,具有统计学意义(P<0.05).结论 树舌多糖可以抑制胃癌MGC-803细胞的增殖,这与树舌多糖能够阻止肿瘤细胞由G_1期进入S期、延缓细胞周期进程,降低受体型酪氨酸蛋白激酶EGFR的表达、阻断细胞增殖信号转导途径的信息传递有关.     

胃康宁含药血清对胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用及机理研究

目的:观察胃康宁含药血清对胃癌细胞的增殖影响,从细胞凋亡角度探讨作用机理。方法:制备胃康宁含药血清培养胃癌细胞,采用MTT法检测细胞增殖,Hoechst DNA荧光染色法检测细胞凋亡,并计数凋亡率。结果:胃康宁各剂量组在初期均有抑制细胞增殖的作用,而高、中剂量抑制时间更持久。胃康宁高剂量组具有诱导细胞凋亡的作用。结论:胃康宁含药血清可明显抑制细胞增殖,其机理除与诱导细胞凋亡有关,还与细胞周期受阻也有关系。     

健脾化瘀方对胃癌MGC-803细胞侵袭转移相关基因表达的影响

目的探讨健脾化瘀方抑制人胃癌MGC-803细胞侵袭转移的作用机制。方法分别采用Real-time q PCR和Western Blot技术检测健脾化瘀方对胃癌MGC-803细胞侵袭转移基因转录和蛋白表达的影响。结果健脾化瘀方作用于人胃癌MGC-803细胞24h后,MMPs、VEGF随着给药浓度增加其mRNA和蛋白表达下降,RECK随着给药浓度增加其mRNA和蛋白表达上升,STAT3基因转录和蛋白表达未见明显变化,而p-STAT3蛋白表达量随着给药浓度增加下降。结论健脾化瘀方具有体外抑制MGC-803细胞侵袭转移的作用,其分子机制可能与抑制STAT3蛋白磷酸化和RECK基因转录、表达,进而影响下游VEGF、MMPs等有关。     

白刺对胃癌MGC-803细胞的抑制作用

目的:探讨白刺对胃癌MGC-803细胞的抑制作用。方法:采用噻唑蓝法(MTT法)检测白刺对胃癌MGC-803细胞的抑制率,荧光显微镜检测白刺对胃癌MGC-803细胞的凋亡效果,通过病理切片观察白刺对胃癌MGC-803细胞的毒性。结果:白刺对胃癌MGC-803细胞具有抑制作用,可使细胞核固缩,出现凋亡小体,病理结果显示白刺对昆明小鼠的脏器没有明显毒性。结论:白刺具有抑制胃癌MGC-803细胞的作用。     

氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤

目的：通过观察氧化苦参碱（oxymatrine,OXY）对人胃癌MGC-803细胞系裸鼠移植瘤的抑制作用,观察氧化苦参碱对该移植瘤形态学的影响,阐述其抗肿瘤作用。方法：将60只裸鼠分为阴性对照组、阳性对照组、氧化苦参碱小剂量组、氧化苦参碱中剂量组、氧化苦参碱大剂量组,腹腔注射给药。观察荷瘤鼠肿瘤生长情况,分析氧化苦参碱对MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤增形态学的影响。结果：氧化苦参碱具有抑制MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤生长的作用,各用药组肿瘤平均体积明显小于阴性对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）;从第9天开始,阳性对照组与其他各用药组裸鼠体质量相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞系裸鼠肿瘤有抑制作用。     

人参黄芪汤对人胃癌MGC-803细胞株的影响

目的:探讨人参黄芪汤对胃癌MGC-803细胞株的影响。方法:通过细胞增殖抑制实验、克隆形成实验、细胞凋亡实验、细胞周期检测及划痕实验,对照研究人参黄芪汤、5-氟尿嘧啶或人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶对胃癌MGC-803细胞增殖活性和细胞迁移能力的抑制作用。结果:1人参黄芪汤组(7~140)mg/ml,5-FU组(0.0125~0.1)mg/ml以及人参黄芪汤+5-FU组(7.0125~140.1)mg/ml均对胃癌MGC-803细胞株有抑制其增值促进其凋亡的作用。2人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶组的抑制率高于人参黄芪汤组和5-氟尿嘧啶组,且对胃癌MGC-803细胞的抑制作用随着药物浓度的增加而增强;人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶组的IC50为9.117mg/ml,小于人参黄芪汤组IC50和5-氟尿嘧啶组IC50之和。③人参黄芪汤+5-FU组的克隆形成率低于人参黄芪汤组及5-FU组。④人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶组的细胞凋亡率高于人参黄芪汤组、5-氟尿嘧啶组及空白组。⑤人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶组G0/G1期的细胞含量明显多于人参黄芪汤组、5-氟尿嘧啶组及空白对照组;人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶组S期细胞含量少于人参黄芪汤组、5-氟尿嘧啶组及空白对照组。⑥人参黄芪汤+5-氟尿嘧啶组各个时间点的划痕愈合率均低于人参黄芪汤组、5-氟尿嘧啶组及空白对照组。结论:单用人参黄芪汤对胃癌MGC-803细胞的影响不大,人参黄芪汤与5-氟尿嘧啶联用能提高对胃癌MGC-803的增殖抑制作用,降低癌细胞克隆,减弱癌细胞迁移能力,阻滞细胞期于G0/G1期,促进癌细胞凋亡。     

钱氏消瘤口服液药物血清对体外培养胃癌细胞增殖的影响

采用^3H-TdR掺入法和MTT比色法研究钱氏消瘤口服液不同时期、不同剂量药物血清对体外培养的人胃腺癌细胞SGC-7901增殖的影响。结果发现该方大剂量2t-1时相药物血清对SGC－7901细胞的增殖抑制作用最佳，^3H-TdR掺入量和MTT转化率分别为45．69％和58．60％，与对照组比较均有显著性差异。提示钱氏消瘤口服液对SGC－7901细胞的增殖具有抑制作用。     

芪竹方对MGC-803细胞VEGFKDR表达影响的研究

目的:了解芪竹方对MGC803细胞血管内皮生长因子VEGF及其受体KDR表达的影响。方法:分成芪竹方高、低浓度、DMSO对照、空白对照4组处理MGC803细胞,运用RT-PCR、免疫荧光法研究VEGF、KDR的表达量。结果:芪竹方高、低浓度、DMSO对照、空白对照4组VEGFmRNA表达量光密度积分分别是:(6.7±2.12)、(9.98±3.27)、(18.99±7.73)、(20.55±4.85),芪竹方高浓度与空白对照组间差别具有显著性;KDRmRNA分别是(49.66±9.76)、(38.22±3.54)、(47.5±5.87)、(45.18±7.25),各组间无显著性差别;VEGF蛋白表达量荧光度值分别是:(24.6±5.5)、(29.4±4.8)、(43.2±7.4)、(40.4±3.2),芪竹方高浓度与空白对照组间差别具有显著性;KDR蛋白表达量荧光度值分别是:(32.2±8.6)、(35.4±8.3)、(37.4±11.3)、(27.4±4.7),各组间无显著性差别。结论:芪竹方对MGC803细胞VEGF表达具有下调作用,对KDR表达无明显影响。芪竹方抑制胃癌的作用可能与抑制VEGF表达有关。     

钱氏消瘤口服液药物血清对体外培养胃癌细胞增殖的影响

采用 3H— Td R掺入法和 MTT比色法研究钱氏消瘤口服液不同时相、不同剂量药物血清对体外培养的人胃腺癌细胞 SGC— 790 1增殖的影响。结果发现该方大剂量 2 t- 1时相药物血清对 SGC- 790 1细胞的增殖抑制作用最佳 ,3H— Td R掺入量和 MTT转化率分别为 45 .6 9%和 5 8.6 0 % ,与对照组比较均有显著性差异。提示钱氏消瘤口服液对 SGC— 790 1细胞的增殖具有抑制作用     

多伞阿魏对人胃癌MGC-803裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响

该文系统研究了多伞阿魏活性部位对人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响。采用细胞悬液种植法建立人胃癌MGC-803裸鼠皮下异位移植性肿瘤模型,通过抑瘤率、脏器指数等评价多伞阿魏活性部位对移植瘤生长的影响。采用HE染色法、TUNEL染色法、RT-PCR法、Western-blot法、ELISA法分别进行病理学检查,凋亡情况观察,以及凋亡相关基因、蛋白、细胞因子表达水平检测。结果表明,与模型组比较,多伞阿魏活性部位低、中、高剂量组对裸鼠移植瘤均有不同程度的抑制作用,随着药物浓度的增加,凋亡比率增高。与模型组比较,多伞阿魏可下调裸鼠血液中survivin mRNA表达水平,不同程度升高裸鼠肿瘤组织中Bax,Bcl-2,caspase-3和caspase-9蛋白表达水平;多伞阿魏活性部位高剂量组可下调裸鼠血浆中IL-10和TGF-β1含量。结果表明,多伞阿魏能显著抑制人胃癌MGC-803皮下异位移植瘤的生长,其作用机制可能与下调survivin mRNA表达水平,上调凋亡相关蛋白Bax,caspase-3和caspase-9等表达水平有关。     

连黛片药物血清诱导MGC-803细胞凋亡的初步观察

胃癌是我国死亡率很高的主要恶性肿瘤之一。近年来,应用以中药为代表的天然药物针对于胃癌的防治研究已成为当今医学研究的热点。连黛片为一个由黄连、青黛等中药所组成的复方制剂。已有研究表明,该方能明显降低由N-甲基-N'-硝基-亚硝基胍(MNNG)自由饮用或胃溃疡结合MNNG灌胃攻击两种模型所诱发的大鼠胃癌的发生率,并明显抑制     

EGCG通过Hedgehog信号抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过Hedgehog信号抑制人胃癌MGC-803细胞增殖的机制。方法:采用不同浓度的EGCG干预人胃癌MGC-803细胞。MTT比色法观察EGCG对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞凋亡率;分光光度法检测细胞caspase-3活性;电泳法检测Smo、Gli-1蛋白表达;RT-PCR测定bcl-2,bax mRNA表达水平。结果:EGCG(10,20 mol/L)以剂量依赖性地抑制MGC-803细胞增殖,诱导其凋亡,增加caspase-3活性,抑制Smo、Gli-1蛋白表达,上调bax mRNA表达水平的同时下调bcl-2 mRNA表达水平。结论:EGCG通过Hedgehog信号抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,诱导其凋亡。     

紫花苜蓿黄酮对人胃癌MGC-803细胞周期和凋亡的影响

目的探究紫花苜蓿黄酮在体外抑制肿瘤细胞活性的研究。方法采用四氮甲基唑蓝(MTT)法测定紫花苜蓿黄酮在体外的抗肿瘤活性;流式细胞术检测紫花苜蓿黄酮对人胃癌细胞MGC-803周期和凋亡的影响;Western blotting方法检测相关细胞蛋白的表达情况。结果 MGC-803细胞经紫花苜蓿黄酮预处理后,细胞存活率显著降低(P0.05)。流式细胞术检测发现紫花苜蓿黄酮能够诱导细胞凋亡;引起细胞周期紊乱,使细胞阻滞在G0/G1期。Western blotting实验结果表明它能够活化促凋蛋白Caspase-9,Caspase-3,RARP,抑制抑凋蛋白Bcl-2的表达;引起相关细胞周期蛋白Cyclin D1,CDK4,CDK6的表达量下调。结论紫花苜蓿黄酮能够通过诱导MGC-803细胞凋亡途径和调节正常周期活动来抑制MGC-803细胞增殖,并且这种抑制作用还存在着时间和剂量依赖效应。     

消痰散结方药物血清对人胃癌MKN-45细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察消痰散结方药物血清对人胃癌MKN-45细胞生长和凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度消痰散结方药物血清处理MKN-45细胞后,倒置相差显微镜下观察MKN-45细胞的形态学变化,血球计数盘计数细胞,细胞活性计数试剂盒检测消痰散结方药物血清对MKN-45细胞增殖的影响;AnnexinV-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双标记法流式细胞术检测消痰散结方药物血清诱导MKN-45细胞后细胞凋亡的情况。结果:低、中、高浓度消痰散结方药物血清均能不同程度地抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖,细胞发生了脱落、变圆、折光率下降等形态学变化;AnnexinV-FITC/PI双标记法检测显示消痰散结方药物血清可诱导细胞发生凋亡,其中中、高剂量的效果有高于低剂量的趋势。结论:消痰散结方药物血清可抑制人胃癌MKN-45细胞的增殖,促进其凋亡。     

姜黄素对人癌细胞BCH、MGC-803、BEL-7402细胞增殖的影响

目的观察姜黄素对人癌细胞系BCH、MGC-83、BEL-7402细胞增殖的影响.方法采用Mosman MTT细胞增殖检测法.结果姜黄素在4×10-5mol/L与BCH细胞接触,在不同时相的药物细胞毒效应不同,其与BCH细胞接触16h是药物细胞毒作用最佳时期.姜黄素在(1×10-5～1×10-4)mol/L范围对上述三种体外培养癌细胞有明显的抑制活性.其IC50分别为3.58×10-5mol/L(BCH)、3.83×-5mol/L(MGC-803)、7.3×10-5mol/L(BEL-7402),并且药效与药物浓度呈相关性.结论姜黄素对三种癌细胞的增殖有明显抑制作用.其药效浓度达到国内抗肿瘤药体外药效评价标准.     

氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤抑制作用的实验研究

目的：通过比较各组肿瘤的体积和重量,观察氧化苦参碱对MGC-803细胞系裸鼠移植瘤的抑瘤率（IR%）。方法：体外培养MGC-803细胞,采用皮下移植法接种于BALB/c-nu裸鼠皮下造成裸鼠皮下荷瘤模型。将造模后的30只裸小鼠随机分为阴性对照组、阳性对照组、氧化苦参碱组3组,均按照公斤体重腹腔注射给药,阴性对照组给予生理盐水,阳性对照组给予氟尿嘧啶,氧化苦参碱组给予氧化苦参碱。观察荷瘤鼠肿瘤生长情况、体积和重量,分析氧化苦参碱对MGC-803细胞裸鼠皮下移植瘤的抑瘤率。结果：氧化苦参碱组小鼠瘤体总重量及平均重量、体积均小于阴性对照组和阳性对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。氧化苦参碱组平均抑瘤率为43.20%。结论：氧化苦参碱对肿瘤有显著的抑制作用。