金水宝片对PM2.5致大鼠肺损伤的保护作用及其机制研究

目的观察金水宝片对PM2.5致肺损伤大鼠的影响并对其机制进行研究。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组及金水宝片低、中、高剂量(0.225、0.450、0.900g/kg)组,每组12只。除对照组外,其余各组大鼠气管滴注PM2.5(10 mg/kg)混悬液染毒,隔天1次,一周3次,连续4周,制备大鼠肺损伤模型。染毒结束后,除对照组、模型组外,其余各组ig给予相应金水宝片药液,1次/d,连续14 d。观察各组大鼠一般状态;检查用力肺活量(FVC)、0.3秒用力呼出量(FEV0.3)、最大呼吸气流(PEF);ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、嗜酸性粒细胞(EOS)及肺脏匀浆中转化生长因子-β1(TGF-β1)的水平;HE染色观察肺组织病理学改变;Western blotting检测肺组织中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化-蛋白激酶B(p-Akt)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)以及人α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与模型组比较,中、高剂量金水宝片均能提高肺损伤大鼠的FVC、FEV0.3、PEF、FEV0.3/FVC(P0.01),降低IL-6、TNF-α、EOS、TGF-β1水平(P0.05、0.01),显著改善大鼠肺组织病理学变化,降低大鼠肺脏中p-Akt、MMP-9、α-SMA表达(P0.05、0.01)。结论金水宝片对PM2.5导致大鼠肺损伤具有明显治疗作用,其作用机制可能与金水宝片通过PI3K/Akt信号通路减少炎症反应,延缓纤维化进展有关。     

桔梗皂苷-D对大鼠肺纤维化的干预作用及部分机制研究

目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肺纤维化的干预作用。方法:50只Wistar大鼠随机分为假手术对照组、模型组、PD 25 mg/kg组、PD 50 mg/kg组、甲强龙组。大鼠一次性气管内滴注盐酸博莱霉素诱导肺纤维化模型。观察各组大鼠的生存状况;检测大鼠血清中I型胶原(C-I)、III前胶原肽(PIIIP)、透明质酸(HA)的含量并进行比较;检测大鼠肺组织TGF-βmRNA的表达情况。结果:PD组大鼠的生存率较模型组高,PD能有效降低大鼠血清中C-I、PIIIP、HA的含量(P0.05),并能下调大鼠肺组织TGF-βmRNA表达(P0.05)。结论:PD可以改善盐酸博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠的一般情况,并通过抑制大鼠肺组织TGF-βmRNA表达,以达到抗纤维化的作用。     

邓氏清霾汤对PM2.5致急性肺损伤大鼠炎症反应的作用及机制探讨

目的观察和探讨邓氏清霾汤对PM2.5诱导急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及抑制炎症反应作用机制。方法 SD雄性大鼠72只,随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松组、邓氏清霾汤低剂量组、邓氏清霾汤中剂量组、邓氏清霾汤高剂量组,每组12只。造模开始后第1、8、15、22、28天除正常对照组采用生理盐水进行鼻腔滴注(100μL/只)外,其余各组同于上述几天滴注PM2.5混悬液(每只0.5mg/100μL)制备ALI模型。自造模之日起连续4周,正常对照组、模型组经口灌胃生理盐水3ml/只/天,地塞米松组以0.02mg/ml地塞米松溶液灌胃3ml/只/天,邓氏清霾汤低、中、高剂量分别以浓度0.73、1.45、2.29g/ml中药溶液灌胃,3ml/只/天。各组大鼠于最后一次滴鼻染毒后48 h内处死。HE染色光镜下观察肺组织病理学改变,ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)中白介素-1β(IL-1β)、白介素-10(IL-10)的含量,肺组织湿重/干重(W/D)比值及肺组织中NF-κB p65蛋白含量。结果鼻腔滴注PM2.5混悬液成功建立大鼠肺损伤模型,除正常对照组外,各组大鼠肺组织病理切片均可见不同程度的肺组织病理损害,邓氏清霾汤中、高剂量组、地塞米松组大鼠的肺组织病变明显减轻,肺组织W/D比值,BALF中IL-1β、IL-10含量,肺组织中NF-κB p65蛋白含量显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论邓氏清霾汤可通过有效减轻肺组织及气管周围炎性细胞浸润,降低ALI大鼠肺组织W/D比值,BALF中IL-1β、IL-10含量及ALI大鼠肺组织胞核内NF-κB p65蛋白含量起到对PM2.5诱导ALI大鼠肺组织预防保护作用,且存在着一定的剂量-效应反应关系。并同时发现中药减轻炎症反应是通过抑制NF-κB通路激活而实现。     

桔梗总皂苷对大鼠高脂血症的影响

采用饲喂高脂饲料建立大鼠高脂血症模型,研究桔梗总皂苷对高脂血症的作用。结果显示总皂苷具降血脂的作用,不同剂量的桔梗总皂苷对大鼠高血脂的降低作用差异较为显著：大剂量（２００ｍｇ／ｋｇ．ｄ）可以显著性地降低高脂血症大鼠的ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ,其作用程度超过阳性药物组（绞股蓝）;小剂量组和中剂量组仅对血脂的部分指标有影响。提示适当剂量的桔梗总皂苷对大鼠高脂血症具明显疗效。     

桔梗皂苷-D对大鼠肝纤维化的干预作用及部分机制研究

目的:研究桔梗皂苷-D(PD)对大鼠肝纤维化的干预作用及作用机制。方法:将大鼠随机分为5组,除对照组外,其余各组每周2次皮下注射四氯化碳(CCL4)溶液诱导肝纤维化模型,次日PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组分别给予PD 10、25、50 mg·kg-1·d-1灌胃持续给药治疗,对照组和模型组以等量0.9%氯化钠溶液代替。给药12周后,处死大鼠采集样本,检测各组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、血清肝纤维指标(HA、LN、PIIIP、C-Ⅳ)水平;肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形成蛋白-7(BMP-7)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达量;HE和天狼猩红染色观察肝组织病理学变化。结果:与模型组比较:PD各组能显著降低大鼠血清ALT、TNF-α、HA及肝组织TGF-β1mRNA水平,显著升高肝组织BMP-7mRNA水平(P<0.05);PD中剂量组和高剂量组能显著降低大鼠血清AST、LN及肝组织α-SMA mRNA水平(P<0.05);PD高剂量组能显著降低大鼠血清PIIIP、C-Ⅳ水平(P<0.05);肝组织纤维化程度明显改善。结论:PD具有抗肝纤维作用,并可能是通过降低TGF-β1和调高BMP-7的表达、抑制肝星状细胞的细胞增殖和活化,以达到抗纤维化的作用。     

健脾化痰、解毒护肺方干预PM2.5颗粒致肺损伤大鼠的机制及形态学影响

目的:探究健脾化痰、解毒护肺方(以下简称雾霾方)对PM2.5所致肺损伤大鼠的保护作用及其抑制炎症反应机制。方法:将25只大鼠随机分为空白组、模型组和中药高、低剂量组及西药组。空白组每日经鼻腔滴入0.9%氯化钠溶液0.1 mL,其余各组每日经鼻腔滴入浓度260μg/mL的PM2.5混悬液0.1 mL。造模结束后,空白组和模型组每日给予生理盐水3 mL灌胃;中药高、低剂量组每只给予雾霾方6 mL、3 mL灌胃;西药组予盐酸氨溴索3 mL灌胃,均每日2次;持续3周。结束后观察大鼠肺组织病理改变及血清中IFN-γ、MDA的含量。结果:模型组肺组织损伤明显、血清中IFN-γ、MDA的含量显著升高。中药低剂量组、西药组较模型组病理改变明显改善、血清中IFN-γ、MDA含量均有下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:本方能够有效改善肺组织损伤状态,抑制炎症反应,减少氧化应激反应,对雾霾所致呼吸系统疾病具有较好疗效。     

清霾饮对北京地区PM2.5致肺损伤小鼠的免疫调节作用研究

目的:探讨清霾饮对北京地区PM2.5大气暴露下小鼠的免疫调节作用。方法:采用鼻滴入PM2.5溶液的方法建立模型,将ICR小鼠随机分为生理盐水组、模型组、利巴韦林组、清肺化痰丸组、清霾饮中、高剂量组、清霾饮预防组。观察各组小鼠肺组织病理变化并运用双抗夹心酶联免疫吸附法比较TNF-α、IL-2、SIL-2R变化。结果:模型组小鼠肺匀浆中TNF-α水平和SIL-2R水平低于生理盐水组,IL-2水平高于生理盐水组,差异均有统计学意义(P0.01)。清霾饮中、高剂量组小鼠肺匀浆中TNF-α水平和SIL-2R水平均高于模型组,IL-2水平低于模型组,差异均有统计学意义(P0.01)。且各指标随干预剂量的升高其影响幅度增加。结论:清霾饮对PM2.5染毒小鼠具有一定的免疫调节作用。     

桔梗总皂苷含量测定方法研究

目的 建立一种香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷含量的方法,为桔梗的质量控制提供科学依据.方法 索氏提取器提取,大孔吸附树脂纯化,香草醛-硫酸比色法测定桔梗总皂苷含量.结果 比色法测定的线性方程为A=0.003 4C+0.006 4,相关系数为r=0.999 7,平均加样回收率为96.97%,RSD=1.51%(n=6).对不同来源桔梗中总皂苷含量进行测定,其含量范围为1.07%～3.76%.结论 该法测定准确,重复性好,可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定,便于对桔梗药材进行质量评价.     

桔梗总皂苷含量测定方法研究

目的：建立以香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷含量的方法,为中药桔梗的药材质量鉴定提供方法借鉴.方法：将桔梗进行处理之后采取抽滤的方式提取抽提物,运用大孔树脂分离纯化,采取香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷的含量.结果：比色法所得到的线性方程为A=0.00334C＋0.063,r=0.9989.对于来源不同的桔梗所测得的总皂苷的含量比率在2.04％～2.35％之间.结论：该方法测定桔梗中总皂苷含量稳定性好,操作简单,可以作为桔梗药材质量控制的评价指标.     

不同产地桔梗药材中总皂苷及桔梗皂苷D的含量比较

目的:比较不同产地桔梗中总皂苷及桔梗皂苷D的含量差异,为该药材的质量控制与生产提供参考。方法:采用2005年版《中国药典》方法测定桔梗总皂苷含量,2010年版《中国药典》方法测定桔梗皂苷D的含量,对36批桔梗药材总皂苷及桔梗皂苷D含量进行测定。结果:赤峰产区10批样品总皂苷质量分数在5.02%~9.20%,桔梗皂苷D质量分数在0.1%~0.175%,二者含量分布较窄。其他产区桔梗药材含量分布较宽,与内蒙古桔梗药材品质存在较大差异。结论:各产地桔梗的质量总体较好,但不同产地间及同产地各桔梗样品间的质量及其稳定性存在较大差异,浙江产桔梗的桔梗皂苷D和总皂苷含量均较高,而赤峰产桔梗品质稳定性较好;从整体质量评价角度看,桔梗质量标准中宜增加总皂苷含量的限量规定。     

不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定

目的建立测定桔梗Platycodon grandiflorum中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的测定方法,并准确测定我国不同产地桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量。方法采用超声波甲醇提取法,称重法测定桔梗总皂苷量;采用HPLC法测定桔梗皂苷D量,色谱条件:Waters Symmetry-C18色谱柱,流动相为乙腈-水(22∶78),体积流量1.0 m L/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果不同产地的桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量差别较大。在所测的桔梗药材中,浙江产桔梗总皂苷量最高,为12.03%;黑龙江、辽宁、安徽、山东、江西产桔梗总皂苷量均高于《中国药典》2005年版规定的6%;而其余各省的量均低于6%,最低的为河南,其量仅为1.57%。对于桔梗皂苷D来说,云南产桔梗的量最高,为0.654%;河北产桔梗的量最低,为0.017%。结论建立的方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于桔梗药材中桔梗总皂苷和桔梗皂苷D量的测定。在我国不同产地桔梗药材中,桔梗总皂苷和桔梗皂苷D的量存在差异。同一药材中桔梗总皂苷与桔梗皂苷D的量,未显示出相关性。     

调补肺肾系列方药对PM 2.5致肺损伤大鼠炎症和氧化应激的影响

目的评价调补肺肾系列方药(补肺方、补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方)对PM 2. 5致肺损伤大鼠炎症和氧化应激的影响。方法 60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肺组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组,除空白组外其余各组采用大气PM 2. 5实时浓缩进行动物暴露。自暴露第1天起,空白组、模型组给予0. 9%氯化钠溶液2 ml/只灌胃,其余各组分别给予相应的补肺方5. 22 g/(kg·d)、补肺健脾方4. 84 g/(kg·d)、补肺益肾方4. 44 g/(kg·d)和益气滋肾方4. 84 g/(kg·d)灌胃,每日1次,连续给药14天后检测大鼠肺功能,观察肺组织病理改变,检测血清总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)水平,肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、黏蛋白5AC(MUC5AC)水平,肺组织中嗜酸性粒细胞主要碱性蛋白(MBP)、中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)、IL-6、IL-1β表达水平。并采用R值综合评价法对各指标进行综合效果评价。结果与空白组比较,模型组大鼠肺功能下降,肺组织病理形态出现气道周围及肺泡腔炎性浸润增加,肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MBP、ELA2水平升高,血清T-AOC降低、MDA升高(P 0. 05或P 0. 01)。补肺组、补肺健脾组、补肺益肾组、益气滋肾组对肺功能、肺组织病理均有一定改善,能降低肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MBP、ELA2水平,使血清T-AOC升高、MDA降低(P 0. 05或P 0. 01)。R值综合评价结果显示,对肺功能综合纠正强度排序为:补肺健脾组补肺益肾组益气滋肾组补肺组,对炎症反应综合纠正强度排序为:补肺益肾组补肺健脾组补肺组益气滋肾组,对氧化应激综合纠正强度排序为:补肺益肾组补肺健脾组补肺组益气滋肾组,综合疗效优劣排序为:补肺益肾组补肺健脾组补肺组益气滋肾组。结论调补肺肾系列方药均可调节PM 2. 5暴露致肺损伤的炎症反应和氧化应激,其中补肺益肾方具有明显优势。     

中药对PM2.5致机体损伤的干预研究进展

正细颗粒物(PM2.5)作为大气污染的主要成分,对人体具有毒性强、危害大的特点。流行病学、毒理学资料研究证实,PM2.5与死亡率和发病率增加有关~([1]),能引发哮喘,造成肺功能下降、呼吸系统炎症甚至导致心血管系统疾病、神经系统疾病、免疫系统疾病,诱发肺癌、肝癌等~([2])。由于PM2.5的组成复杂,其致病机理是由多种因素导致     

黄芪甲苷治疗PM2.5致肺损伤的转录网络整合研究及实验验证

目的 挖掘黄芪甲苷介导铁死亡治疗PM2.5致肺损伤的调控网络,并进行实验验证。方法 通过数据库、R语言和Perl软件筛选出黄芪甲苷介导铁死亡调控PM2.5致肺损伤的关键基因,构建lncRNA-miRNA-mRNA转录网络进行富集分析。体内实验分为药效和机制两部分验证,药效部分中,35只雄性无特定病原体（Specific pathogen free,SPF）级SD大鼠,随机分为5组。采用喉镜下气管滴注PM2.5诱导肺损伤模型。通过肺组织苏木精-伊红染色（Hematoxylin-eosin,HE）、湿/干重比、支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)和白介素1β(Interleukin,IL-1β)浓度评估肺损伤程度;通过透射电镜和蛋白免疫印迹法检测铁死亡水平。机制部分中,28只雄性SPF级SD大鼠,随机分为4组。RSL3在PM2.5造模前1 h腹腔注射,其余组的干预及检测指标同药效部分。结果 挖掘出黄芪甲苷介导铁死亡治疗PM2.5致肺损伤的16个关键lncRNA、9个关键miRNA和6个关键mRNA组成的lncRNA-miRNA-m...     

桔梗茎叶总皂苷的提取工艺

目的:优选桔梗茎叶总皂苷的最佳提取和纯化工艺,为桔梗非药用部位的综合开发利用提供参考。方法:以桔梗茎叶总皂苷收率、桔梗皂苷D的含量与转移率为指标,采用正交试验考察溶剂用量、提取温度、提取时间与提取次数对桔梗茎叶皂苷提取工艺的影响,再进一步通过大孔吸附树脂富集纯化总皂苷。结果:最佳提取工艺参数为在100℃条件下,加12倍量的水,提取2次,每次1.5 h。优化纯化工艺参数为最佳工艺提取药液离心后浓缩至1.0 g生药/mL,通过AB-8型大孔吸附树脂,上样量为桔梗茎叶提取物量∶树脂量=0.8∶1,上样流速为1.0 mL·min~(-1),用5 BV的75%乙醇洗脱。结论:优选的提取和纯化工艺稳定可行,可用于桔梗茎叶皂苷的提取。     

桔梗中总皂苷的含量测定

目的:探讨一种较为简便的方法对不同产地与年限的桔梗药材中总皂苷含量进行测定,为桔梗的质量控制提供依据。方法:以桔梗皂苷D为指标性成分,采用超声提取—香草醛比色法。结果:吉林产桔梗中总皂苷含量最高;不同采集时期以春季采收的桔梗中总皂苷含量为高;平均加样回收率为99.22%,RSD=1.8%。结论:此方法简便、快速、准确,便于对桔梗药材进行质量评价。     

桔梗中总皂苷的含量测定

目的．探讨一种较为简便的方法对不同产地与年限的桔梗药材中总皂苷含量进行测定，为桔梗的质量控制提供依据。方法：以桔梗皂苷D为指标性成分，采用超声提取一香草醛比色法。结果：吉林产桔梗中总皂苷含量最高；不同采集时期以春季采收的桔梗中总皂苷含量为高；平均加样回收率为99．22％，RSD=1．8％。结论．此方法简便、快速、准确，便于对桔梗药材进行质量评价。     

珠子参总皂苷对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的:研究珠子参总皂苷对对四氯化碳所致大鼠慢性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用40%的CCl4橄榄油剂灌胃制备慢性肝损伤大鼠模型。分别采用不同浓度的珠子参总皂苷进行干预,9周后检测大鼠肝、脾脏器指数,血清ALT、AST浓度和TP、ALP、ALB含量,肝组织中MDA、SOD、T-AOC、GSH-Px、Hyp的含量。结果:珠子参总皂苷(60、120、240 mg/kg)灌胃给药能显著降低CCl4致慢性肝损伤大鼠肝脏、脾脏指数;降低血清中异常升高的ALT、AST;提高血清中降低的TP含量,降低血清中升高的ALP含量,降低肝组织中MDA水平,同时升高其低下的T-AOC、GSH-Px水平;降低Hyp含量。结论:珠子参总皂苷对大鼠实验性肝损伤具有一定程度的保护作用,其机制可能与抑制脂质过氧化反应、减少自由基生成、提高组织抗氧化能力、促进蛋白质合成有关。     

玉屏风散及过敏煎合止嗽散对PM2.5致Th17/Treg失衡诱发肺损伤大鼠的影响

目的观察PM2.5致辅助性T细胞17(TH17)与调节性T细胞(Treg)失衡诱发的大鼠肺损伤及不同中药治法的干预作用。方法将SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药1组和中药2组。采用气道滴注方法建立PM2.5致肺损伤模型,模型组和正常组予生理盐水灌胃,中药1组和及中药2组分别予玉屏风散及过敏煎合止嗽散灌胃。ELISA检测各组肺泡灌洗液(BALF)及血清白细胞介素(IL)-17、IL-10、IL-8、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、黏蛋白(MUC)5AC含量;免疫组化检测肺组织Foxp3、IL-17的表达。结果与正常组比较,模型组血清和BALF IL-8、IL-17、NE、MUCAC含量显著升高,IL-10含量明显降低(P0.05,P0.01),肺组织IL-17蛋白表达明显增加、Foxp3蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,中药1组及中药2组血清和BALF IL-8、IL-17、NE含量明显降低,BALF IL-10明显升高,中药2组血清IL-10明显升高(P0.05),肺组织IL-17蛋白表达明显降低、Foxp3蛋白表达明显增加(P0.01),病理学变化明显改善。结论 PM2.5可通过引起Th17/Treg失衡诱发肺损伤,玉屏风散及过敏煎合止嗽散均可明显改善PM2.5致大鼠肺组织病理损害,并可改善PM2.5导致的TH17/Treg失衡。