Coronin-1 C蛋白表达与肝癌侵袭和转移相关

目的 采用膜蛋白质组学技术筛选与原发性肝癌侵袭和转移相关的分子,并加以验证.方法 以不同转移潜能的人肝癌细胞HCCLM9和MHCC97L为研究对象,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和电喷雾串联质谱技术比较和鉴定差异表达的膜蛋白,进一步行Westernblot、动物模型标本和临床标本验证. 结果电喷雾串联质谱鉴定表达差异条带中蛋白质14个,其中Western blot验证coronin-1 C在人肝癌细胞HCCLM9中灰度值coronin-1 C/整合素α3比值为7.31±0.73,在MHCC97L中为2.84±0.99.coronin-1C在HCCLM9细胞中的表达水平显著性升高(t=6.27,P<0.05).在裸鼠肝癌组织中免疫组织化学提示coronin-1C表达也明显升高.115例临床病理标本免疫组织化学显示,coronin 1C表达越强,肿瘤的侵袭程度越强、临床病期越晚.结论 Coronin-1C与肝癌的侵袭和转移相关.     

肝癌组织中ICAM-1的表达和意义

目的研究细胞间黏附分子-1(1CAM-1)在原发性肝癌中的临床意义.方法以免疫组化方法结合全自动图像分析观察40例肝细胞癌组织及其癌旁组织和28例肝硬化组织中ICAM-1的表达.结果40例肝细胞癌组织ICAM-1表达阳性率为80.0%(32/40)、癌旁组织为57.5%(23/40)、肝硬化为53.6%(15/28),阳性率与组织学分类相关.肝癌组织中ICAM-1含量明显高于癌旁及肝硬化组织(P＜0.05),转移组肝癌中ICAM-1的含量明显高于非转移组(P＜0.05),而癌旁及肝硬化组织中表达差异无显著性(P＞0.05).结论肝癌组织中高度表达ICAM-1,ICAM-1有可能作为判断肝硬化及肝癌发展程度及预后的指标之一.     

肝癌患者血清和组织中prohibitin的表达及其临床意义

目的研究抑制素prohibitin(PHB)在肝癌患者血清和组织中的表达及其临床意义。方法应用双抗体夹心ELISA法检测肝癌患者和健康人各82例血清PHB浓度。应用RT-PCR和免疫组织化学的方法检测PHB在30例肝癌患者组织、癌旁组织和正常肝组织中的表达水平。同时,收集肝癌患者的临床资料,分析PHB表达与各临床参数之间的相关性。结果 PHB在肝癌患者和健康人血清中浓度分别为227.97 pg/mL和55.78 pg/mL,肝癌患者血清PHB浓度明显高于健康人(Z=-4.532,P=0.000);肝癌患者血清中的PHB浓度与ALT、TBil、AFP呈正相关(r=0.337,P=0.034;r=0.431,P=0.006;r=0.319,P=0.045)。在肝癌组织和癌旁组织中PHB蛋白阳性表达率分别为73.3%和86.7%,与正常肝组织(6.7%)比较,差异有统计学意义;在肝癌组织和癌旁组织中PHB mRNA的表达较正常组织亦明显升高;肝癌组织中PHB表达与肿瘤分化程度、TNM分期和AFP含量相关,即肿瘤低分化、TNMⅢ~Ⅳ期、AFP≥400μg/L的肿瘤组织中PHB表达明显升高,差异有统计学意义。结论 PHB在肝癌患者血清和组织中均高表达,分别与肝脏损伤的程度和HCC恶性程度相关,提示PHB可能参与HCC的发生和发展。     

血清胸苷激酶1在胃息肉恶性进展中的变化及临床价值

目的通过检测血清胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)在胃息肉恶性进展过程中的水平变化,探讨TK1与胃息肉恶性进展的关系及其临床价值。方法 80例胃息肉患者,按活检病理结果分为A组(病理为腺瘤,32例)、B组(病理为低级别上皮内瘤变,27例)和C组(病理为高级别上皮内瘤变,21例)。利用增强化学发光法检测80例胃息肉患者血清TK1的含量,同时检测32例胃癌患者(胃癌组)和70例健康体检者(对照组)血清中的TK1含量。结果 TK1水平和阳性率在对照组、A组和B组依次升高,但差异无统计学意义(P0.05)。C组、胃癌组TK1水平和阳性率显著高于A组、B组和对照组(P0.05)。胃癌组TK1水平和阳性率最高,但较C组升高不明显(P0.05)。80例胃息肉患者(内镜下切除息肉后)和32例胃癌患者(胃癌根治术后)复查血清TK1均有下降,但下降仅在C组和胃癌组差异有统计学意义(P0.05)。结论血清TK1水平随着胃息肉的恶性进展而显著升高,在治疗后明显下降。因此,检测血清TK1可用于评估胃息肉的恶性程度,监测胃息肉的恶性进展,同时在早期诊断胃息肉恶变、判断和评估疗效及预后等方面具有一定的临床价值。     

人胸苷激酶基因在大肠杆菌中的表达

目的　在大肠杆菌中表达人胸苷激酶 (hTK)。方法　用内切酶将hTKTA克隆中的hTK基因切下 ,并与同样内切酶切的载体PET2 8a 连接 ,转化大肠杆菌 ,筛选阳性克隆 ,酶切和DNA序列分析鉴定 ,用IPTG诱导培养阳性克隆 ;SDS -PAGE鉴定hTK在大肠杆菌中的表达。结论　hTK基因重组入PET2 8a 的EcoRI和XhoI位点 ,IPTG可以明显诱导hTK在大肠杆菌中表达。     

肝癌组织中Vasohibin1和HIF-1α表达及临床意义

目的研究肝癌组织中血管生成抑制蛋白(Vasohibin1)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及两者的相关性,并探讨其临床意义。方法随机收集64例原发性肝细胞肝癌手术患者的癌组织,另选其中的26例癌旁组织作为对照组,应用免疫组织化学法检测Vasohibin1与HIF-1α在肝癌组织与癌旁组织中的表达特征并进行评分,进一步分析二者间的相关性及与肝癌患者临床病理特征间的关系。结果肝细胞肝癌组织中Vasohibin1和HIF-1α表达升高,与癌旁组织比较差异有统计学意义(χ2=20.19,P=0.00;χ2=5.147,P=0.023)。结合肝癌患者临床病理特征的统计分析表明,Vasohibin1的高表达与肝癌各临床病理参数在统计学上无明显相关性(P>0.05),HIF-1α的高表达与有无肿瘤转移有关(χ2=4.882,P=0.027),并且肝癌组织中二者的表达在统计学上有相关性(r=0.481,P=0.00)。结论 Vasohibin1和HIF-1α在肝癌组织高表达,提示二者在肝癌发生发展过程中发挥作用;二者的表达相关性提示它们之间可能以VEGF作为纽带或者存在相互作用。     

肝癌组织及血清中细胞间粘附分子-1表达的研究

目的研究细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）作为判断肝癌发展程度及转移状态指标的可能性。方法以免疫组化的方法检测ＩＣＡＭ－１在肝癌组织和正常肝组织中的表达，观察了ＩＣＡＭ－１表达在细胞的定位。以点免疫印迹法测定不同患者血清和不同肝组织中ＩＣＡＭ－１的表达。分析ＩＣＡＭ－１表达与肿瘤生长转移状态、肿瘤特性的关系。结果肝癌细胞ＩＣＡＭ－１表达阳性（阳性率为８００％），主要分布在细胞膜，正常肝细胞则为阴性。肝癌患者血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平高于正常人（Ｐ＜００１）及肝良性肿瘤患者（Ｐ＜００５），肝癌伴转移者高于无转移者（Ｐ＜００５）。肝癌组织中ＩＣＡＭ－１含量明显高于癌旁组织（Ｐ＜００１）及正常肝组织（Ｐ＜００１），而与肿瘤大小及有无包膜无关（Ｐ＞００５）；转移组肝癌中ＩＣＡＭ－１的表达明显高于非转移组（Ｐ＜００５），两组癌旁组织中ＩＣＡＭ－１表达无差别（Ｐ＞００５）。结论血清及组织中ＩＣＡＭ－１的水平在一定程度上可以反映肝癌发展程度及转移状态，有可能作为预测肝癌转移复发的指标。     

KAI 1基因在肝癌组织中表达的研究

肝癌是常见的恶性肿瘤之一，早期发生血行转移是其主要特点．ＫＡＩ１基因是１９９５年报道的抑制肿瘤转移的基因，位于人的第１１条染色体的ｐ１１２～１３区域，其ｃＤＮＡ长２４ｋｂ．ＫＡＩ１基因在前列腺癌组织的表达下降，已证实其具有抑制人前列腺癌转移的作用...     

肝癌组织和血清中钙囊素的表达及其意义

目的 研究人肝癌组织及血清中钙囊素(S100A11)的表达及其临床意义.方法 免疫组织化学法检测46例肝癌及其癌旁组织中S100A11表达,比较肝癌与癌旁组织中S100A11的阳性率,分析肝癌组织中S100A11表达水平与各临床参数之间的关系;同时检测肝癌(62例)、肝硬化(32例)、慢性肝炎(30例)患者及健康体检者(28名)血清中S100A11浓度,比较S100A11浓度与甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ(GGT-Ⅱ)诊断肝癌的灵敏性及特异性.结果 S100A11在肝癌组织中的表达阳性率(78.3%)显著高于癌旁组织(19.6%,P<0.01),其表达水平与分化程度相关,分化程度越低表达水平越高.根据ROC曲线,当确定诊断界值为7.3μg/L时,S100A11在肝癌患者血清中的阳性率为30.6%,明显高于肝硬化、慢性肝炎及健康人(P值均<0.05).肝癌患者血清中S100A11与AFP、GGT-Ⅱ均无相关性,联合检测三项指标对肝癌诊断有互补性,可使诊断敏感性提高至84.5%.结论 S100A11可能与肝癌的发生发展有关.联合检测S100A11与AFP和GGT-Ⅱ可提高对肝癌的诊断敏感度.

Abstract：

Objective To explore the expression of calcium binding protein (S100A11) and its clinical significances in human hepatocellular carcinoma (HCC) tissue and blood plasma. Methods The expressions of S100A11 in 46 cases of HCC tissues and their paracancerous tissues were detected by immunohistochemistry. The relationship between S100A11 expression level in HCC tissues and clinical parameters was analyzed. The S100A11 expression levels in blood plasma of HCC patients (62 cases), liver cirrhosis patients (32 cases), chronic hepatitis patients (30 cases) and healthy subjects (30 cases) were detected. The sensitivity and specificity of S100A11, alpha fetoprotein (AFP) and γ-glutamyl transpeptidase Ⅱ (GGT-Ⅱ ) in HCC diagnosis were compared. Results The positive rate of S100A11 in HCC tissue (78. 3%) was significantly higher than that in paracancerous tissues (19. 6%) (P<0. 05). The expression level was correlated with the degree of differentiation, the lower differentiation degree with the higher expression level. According to ROC curve, if the cutoff points for diagnosis was set at 7. 3 μg/L, the positive rate of S100A11 in HCC patients blood plasma was 30. 6% , which was significantly higher than that in the blood plasma of patients with liver cirrhosis, patients with chronic hepatitis and healthy persons (P<0. 05). There was no correlation between S100A11 and AFP or GGT-Ⅱ in the blood plasma of HCC patients. These three indicators were complementary in HCC diagnosis, and the diagnostic sensitivity increased to 84.5% with combined detection. Conclusions S100All may be related to HCC genesis and development. The HCC diagnostic sensitivity may be increased with combined detection of S100All ,AFP and GOT- Ⅱ.     

干细胞相关基因在肝癌细胞系中的表达

目的 了解Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin、Wnt5b等干细胞相关基因在4株人肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、MHCC-97和正常人肝脏细胞系L02中的表达情况,并比较不同细胞系中各基因量的差异和对全反式维甲酸(tRA)的反应.方法 逆转录聚合酶链反应测定4株人肝癌细胞系中Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin、Wnt5b mRNA的表达,实时荧光定量PCR比较不同细胞中各基因量的差异以及对tRA的反应.单因素方差分析比较各基因在不同细胞系中的表达差异.结果 干细胞相关基因Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin和Wnt5b在4株人肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、MHCC-97和正常人肝脏细胞系L02中有不同程度的表达(P<0.05);人肝癌细胞系HepG2和正常人肝脏细胞系L02对tRA的反应也存在明显差异(P<0.05).结论 干细胞相关基因在人肝癌细胞系中不同程度的表达,不同肝癌细胞系中这些基因表达有一定的差异,可能与其生物学特性不同有关,人肝癌细胞系HepG2中Oct4和Sox2的表达调控不同于胚胎干细胞.在肝癌细胞中可能存在着Oct4对于Wnt/β-catenin信号转导通路的调节作用.     

血清胸苷激酶1水平变化对恶性肿瘤的诊断价值

目的探讨血清胸苷激酶1(TK1)水平在恶性肿瘤中的诊断价值。方法采用点印迹免疫酶化学发光法检测43例健康体检者(对照组)、29例良性增生疾病患者(良性组)、37例恶性肿瘤患者(恶性组,其中未治疗者37例、治疗无效15例、治疗有效22例)血清中TK1水平。结果恶性组TK1水平显著高于对照组及良性组(P均<0.01);恶性组中未治疗者及无效者TK1水平显著高于治疗有效者(P均<0.01);TK1对于恶性肿瘤的诊断敏感性为93.1%,特异性为73.3%。结论血清TK1对恶性肿瘤的早期诊断及疗效评估有重要诊断价值。     

WNT1和WNT2在乙肝相关肝癌中的表达及其对预后的影响

目的探讨WNT1和WNT2在乙肝相关肝癌中的表达及其对预后的影响。方法选取铜川市人民医院收治的80例乙肝相关肝癌患者作为研究对象,比较癌组织和癌旁组织中WNT1和WNT2表达水平,并分析与临床病理相关性,比较不同WNT1和WNT2表达水平患者的生存率,分析乙肝相关肝癌预后的影响因素。结果 WTN1和WNT2在癌组织中的高表达率(58.8%、71.3%)均显著高于癌旁组织(21.2%、22.5%)(P0.05);WNT1表达水平与肿瘤大小、血管侵犯及HPV-DNA相关,WNT2表达水平与肿瘤大小、血管侵犯、TNM分期及HPV-DNA相关。ROC曲线结果显示,WNT2具有潜在的预测价值(AUC=0.812,95%CI:0.768～0.857,P=0.000)。Kaplan-Meier生存率结果显示,WNT1和WNT2低表达患者5年生存率(72.7%、78.2%)显著高于WNT1和WNT2高表达患者(55.3%、49.1%)(P0.05)。Cox单因素和多因素分析结果均显示,血管侵犯、TNM分期、WNT1表达及WNT2表达是乙肝相关肝癌预后的影响因素。结论 WNT1和WNT2在乙肝相关肝癌中的表达水平均显著升高,且与患者的预后密切相关,WNT2在乙肝相关肝癌中的诊断价值较高,值得进一步深入研究。     

PPM1A和P-Smad2在原发性肝癌中表达及意义研究

目的探讨肝癌及癌旁组织中P-Smad2蛋白与PPM1A的表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测31份肝癌（HCC）、25份癌旁组织及13份非癌性肝组织中P-Smad2蛋白和PPM1A的表达。结果①癌旁和病理分级小于Ⅱ级的癌组织中PPM1A表达以核为主，胞浆表达弱或不表达，病理分级大于Ⅲ级及以上的癌细胞中则以胞浆表达为主。正常、慢性肝炎和肝硬化组织中，PPM1A表达以核为主，胞浆无表达，差别有统计学意义（P〈0．05）。②P-Smad2在正常肝细胞、慢性肝炎、肝硬化、癌旁和病理分级Ⅰ-Ⅱ级的癌组织中表达以胞核和胞浆明显，胞浆表达主要聚集在核周，病理分级分级Ⅱ-Ⅲ级及以上的癌组织中，P-Smad2表达则以核为主，差别有显著性（P〈0．05）。③PPM1A和P-Smad2在癌组织的表达部位呈现负相关性（r=-0．345，P=0．001）。结论PPM1A与P-Smad2在肝癌组织的胞核和胞浆表达转位及强度与其组织病理改变有密切关系，二者可能通过其相互作用。共同参与肝癌的发生发展机制。     

细胞质胸苷激酶在肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨细胞质胸苷激酶(TK 1)在肺癌组织中的表达情况,分析其与临床病理特征以及与肿瘤标志物(CEA,CYFRA21-1,NSE)的相关性。方法 :化学发光法检测63例肺癌患者血清TK 1的表达情况,分析其与肺癌各临床病理特征间的关系,并就其敏感性及特异性与CEA,CYFRA21-1,NSE进行比较。结果TK 1在63例肺癌中的表达与吸烟史、远处转移及临床TNM分期不相关(分别为χ2=0.127,χ2=0.090,χ2=3.937,P0.05),但与患者病理学类型有相关性(χ2=7.549,P0.05)。TK 1,CEA,CYFRA21-1,NSE敏感性分别为74.60%(47/63),39.68%(25/63),57.14%(36/63),28.57%(18/63),特异性分别为23.58%(25/106),79.25%(84/106),58.49%(62/106),77.35%(82/106)。结论 TK1表达在不同病理类型的肺癌组织中存在差异,且其对肺癌诊断的敏感性较CEA、CYFRA21-1、NSE高。     

XAF1在人肝癌组织中表达及机制研究

目的 XIAP相关因子1(XIAP-associated factor 1,XAF1)可与XIAP直接结合并拮抗其抗凋亡作用.本文研究了XAF1在人体肝癌组织表达,同时探讨了XAF1可能的作用机制.方法 通过免疫组化方法检测了XAF1在人体肝癌组织中表达水平;建立稳定高表达XAF1的肝癌细胞克隆,通过基因芯片技术探讨了XAF1可能的作用机制.结果 XAF1在人肝癌组织中表达免疫组化实验结果提示,XAF1在人肝癌组织中的表达阳性率为0.56%±0.03%,在癌旁组织中的表达阳性率为5.1±0.023%,两组均值间差异有统计学意义(P＜0.05);基因芯片结果提示,7.03%的基因发生的改变有统计学意义.其中1.72%基因与细胞凋亡和细胞周期相关.在细胞凋亡和细胞周期相关基因中,41.9%与线粒体凋亡相关途径相关,可见XAF1可能通过线粒体内源性途径促进凋亡.结论 XAF1在人体肝癌组织中表达水平低于癌旁组织;其抑制凋亡反应可能是通过内源性途径机制实现,XAF1有可能成为肝癌基因治疗的新靶点.     

BMP2在原发性肝癌患者血清中的表达

目的:探讨血清骨形态发生蛋白2(BMP2)对原发性肝癌(PHC)的诊断价值.方法:对70例慢性肝病患者及17例正常对照者血清进行检测,并按临床诊断或病理诊断分组,其中慢性病毒性肝炎20例,肝炎后肝硬化20例,PHC 30例.分别用酶联免疫法检测血清BMP2,用放射免疫法测定血清甲胎蛋白(AFP),结果:肝癌组患者血清BMP2较正常对照组、肝炎组、肝硬化组降低,且差异均有统计学意义(P<0.05);BMP2诊断PHC的敏感性是90%,特异性是100%,准确率是96.55%;BMP2诊断PHC的敏感性高于AFP(x2=22.78,P=0.001).结论:血清BMP2对PHC的诊断具有一定的价值.     

肝癌组织和血清中半乳糖血凝素-3的表达及其意义

目的 研究人肝癌组织及血清中半乳糖血凝素-3(galectin-3)的表达及其临床意义.方法 免疫组织化学法检测46例肝癌及其癌旁组织中galectin-3,分析galectin-3表达水平与各临床参数之间的关系; 酶联免疫吸附法检测不同肝病患者及正常人血清中galectin-3浓度,同步比较galectin-3浓度与甲胎蛋白(AFP)、γ-谷氨酰转移酶同工酶Ⅱ(GGT-Ⅱ)诊断肝癌的灵敏性及特异性,探讨3项指标对肝癌的互补诊断价值.用Stata8.0及SPSS15.0统计软件对结果进行统计分析.采用配对设计四格表假设检验、秩和检验、χ2检验、Fisher's确切概率法、Spearman等级相关方法.结果 (1)galectin-3在肝癌组织中的表达阳性率为78.2%,癌旁组织为15.2%,χ2=92.000,P<0.01,差异有统计意义.其表达水平与分化程度相关,分化程度越低表达水平越高;(2)根据ROC曲线,当确定诊断界值为0.62μg/L时,galectin-3阳性率在肝癌患者中为64.5%,肝硬化患者中为3.1%、慢性肝炎患者及正常人中均为0,P<0.05(Fisher's确切概率法);(3)肝癌患者血清中galectin-3与AFP、GGT-Ⅱ均无相关性,联合检测3项指标对肝癌诊断有互补性,可使诊断敏感性提高至94.7%.结论 galectin-3在肝癌组织中高表达,与肝癌的分化程度相关,可能与肝癌的发生和发展有关;肝癌患者联合检测血清galectin-3、AFP和GGT-Ⅱ可提高对肝癌诊断的敏感性,galectin-3有望成为新的肝癌标记物.

Abstract：

Objective To study the expression of Galectin-3 in human hepatocellular carcinoma (HCC) tissues and the clinical value of serum Galectin-3 in the diagnosis of hepatocellular carcinoma. Methods Immunohistochemistry method was used to detect the expression of Galectin-3 in the 46 pairs of HCC tissues and their paracancerous tissues. The relationship between expression levels of Galectin-3 and clinical parameters was analyzed. Serum Galectin-3 in different liver diseases were measured with ELISA. The sensitivity and specificity of galectin-3, alpha fetoprotein (AFP) and gamma-glutamyltranspeptidase Ⅱ (GGT-Ⅱ)for diagnosis of HCC were compared and the complementary diagnostic values of Galectin-3 and AFP and GGT-Ⅱ for HCC were studied. Results (1) The positive rate of Galectin-3 in the tissue of HCC was 78.2%, dramatically higher than that in paracancerous tissues (15.2%) (P < 0.01). The expression levels were correlated with differentiation and with the high expression in poor differentiation tissues; (2) Based on ROC curve, the cut-off of serum Galectin-3 for HCC diagnosis was set as 0.62 μg/L, the serum galectin-3 positive rate was 64.5% in HCC cases, which was apparently higher than that in liver cirrhosis, chronic hepatitis and healthy persons (P < 0.05); (3) Serum Galectin-3 was not correlated with AFP and GGT-Ⅱ. Combined determination of the three markers had the complementary diagnostic value for HCC and might increase the diagnostic sensitivity to 94.7%. Conclusion Galectin-3 is overexpressed in HCC tissues and is correlated with the tumor differentiation, suggesting that Galectin-3 may be associated with the carcinogenesis and development of HCC. Serum galectin-3 increases in the HCC cases and combined determination of serum Galectin-3, AFP and GGT-Ⅱ can increase the diagnostic efficiency for HCC. Galectin-3 could be a novel serum tumor marker for HCC.