ATIP1和ATIP3a对口腔恶性肿瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨过表达MTUS1/ATIPs对口腔恶性肿瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法:应用RT-PCR检测舌鳞癌(TSCC)细胞UM1、腺样囊性癌组织(ACC)和唾液腺腺样囊性癌细胞(SACC-83)中MTUS1/ATIP表达水平及亚型分布.应用含ATIP1和ATIP3a片段的质粒转染口腔恶性肿瘤细胞UM1和SACC-83,...     

舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系

目的：探讨舌鳞癌预后与细胞增殖和凋亡的关系。方法：采用TUNEL法和免疫组织化学法检测52例舌鳞癌细胞中自发性凋亡水平及Bax、Bcl-2、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclea antigen,PCNA)的表达，及其与预后的关系。结果：舌鳞癌中凋亡指数（apoptosis index,AI)、Bcl-2、Bax和PCNA表达的阳性率分别为55．8％、65．4％、73．1％和100．0％。单因素生存分析显示：舌癌患者生存率降低与Bax低表达（P＝0．0020）、PCNA高表达（P＝0．0179）、Bcl-2/Bax比值＞1（P＝0．0072）和高TNM分期（P＝0．0351）有关，但与Bcl-2表达和凋亡指数无关（P＝0．885，P＝0．3536）。结论：Bax、PCNA、Bcl-2/Bax比值和TNM分期一样具有预后价值，综合分析这些指标有助于识别舌癌的生物学特性并准确判断患者的预后。     

微小RNA-21反义寡核苷酸对舌鳞癌细胞增殖和凋亡的调控作用

目的探讨微小RNA-21（miR-21）反义寡核苷酸（miR-21ASO）对舌鳞癌细胞增殖和凋亡的调控作用。方法通过转染miR-21ASO，采用实时荧光定量RT—PCR（qRT—PCR）检测舌鳞癌细胞株SCC-15和CAL27中miR．21的表达变化，荧光素酶活性检测实验分析miR-21ASO在舌鳞癌细胞中的调控功能．并运用多种细胞增殖和凋亡检测方法以观察miR-21ASO对舌鳞癌细胞调控产生的系列效应。结果miR-21在两株舌鳞癌细胞SCC-15和CAL27中的表达显著高于在正常舌鳞状上皮细胞中的表达（P=0．037，0．015），转染miR-21ASO可显著抑制其表达（P=0．017，0．006），miR-21对荧光素酶活性的抑制率由50％显著减少到20％以下（P=0．002，0．003），SCC-15和CAL27细胞存活率比转染前明显降低（P=0．002，0．004），细胞克隆形成率比转染前明显降低（P=0．007，0．032）；流式细胞仪检测显示转染miR-21ASO后．SCC-15和CAL27细胞凋亡明显增加，激光共聚焦显微镜观察到线粒体细胞色素C释放较转染前增加。结论miR-21ASO对舌鳞癌细胞miR-21水平降低具有靶向特异性．转染miR-21ASO可有效抑制miR-21的促癌效应，利用反义核酸技术的高度特异性开展针对促癌microRNA分子的靶向治疗将可能为舌鳞癌的基因治疗开辟新的途径。     

姜黄素对人舌鳞癌Tca8113细胞增殖和凋亡作用研究

目的 探讨姜黄素对体外培养人舌鳞癌Tca8113细胞增殖和凋亡作用.方法 不同浓度的姜黄素处理体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,并行凋亡相关蛋白Fas、P53、Bcl-2的免疫组化测定.结果 在10、30、50、70 μmol/L浓度范围内,姜黄素可剂量依赖性抑制人舌鳞癌Tca8113细胞增殖的作用.30、40、50 μmol/L三个不同浓度姜黄素处理组的凋亡指数与对照组比较差异有统计学意义(P ＜ 0.05),细胞凋亡率与药物浓度正相关.30、40、50 μmol/L不同浓度姜黄素处理组Fas、P53、Bcl-2凋亡细胞阳性率与对照组比较差异具有统计学意义(P ＜ 0.05).结论 姜黄素可显著抑制人舌鳞癌Tca8113细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用呈剂量依赖关系.     

干扰素γ对舌鳞癌细胞增殖影响的研究

目的：观察干扰素γ对舌鳞癌细胞增殖的影响。方法：采用不同浓度的干扰素γ对舌鳞癌细胞处理,观察肿瘤细胞的增殖情况;基因芯片分析干扰素γ处理后基因表达的变化,并采用实时定量PCR验证;western blot检测AKT信号通路的表达情况。结果：采用不同浓度的干扰素γ处理CAL27细胞后,肿瘤细胞的生长明显加快,肿瘤生长72、96h后,细胞数量有显著性差异（P〈0.05）。基因芯片结果显示PIK3C2A的表达提高2.5倍以上。western blot结果证实干扰素γ处理细胞后,AKT信号通路被激活。结论：干扰素γ处理舌鳞癌细胞后能加快肿瘤细胞的生长,激活AKT信号通路,其不适用直接对舌鳞癌进行治疗。     

岩黄连总碱对Tca8113细胞增殖和凋亡作用的影响

目的:观察岩黄连总碱对体外培养人舌鳞癌Tca8113细胞增殖抑制及诱导凋亡作用。方法:MTT法检测不同浓度的岩黄连总碱分别处理体外培养的Tca8113细胞24、48和72 h后的细胞增殖抑制情况,Hochest33258染色及DNA ladder检测细胞凋亡,并用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)原位检测细胞凋亡及细胞凋亡率。结果:岩黄连总碱对Tca8113细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.01),且呈现出一定的时间和浓度依赖性;Hochest33258检测发现岩黄连总碱作用48 h后可见凋亡细胞;DNA ladder检测可见凋亡特有的180～200 bp整数倍DNA条带;TUNEL结果显示岩黄连总碱处理组细胞凋亡率呈时间和浓度依赖性。结论:岩黄连总碱能抑制Tca8113细胞增殖,呈时间和浓度依赖性;同时能诱导Tca8113细胞凋亡,且诱导凋亡的作用也呈时间和浓度依赖性。     

免疫化疗对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 评价白细胞介素—2(IL—2)局部注射联合化疗对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡特性的影响。方法 34例T3、T4期口腔鳞癌患者随机分2组接受术前治疗，其中23例行免疫化疗(IL—2局部注射合并PVP化疗)，11例行单纯PVP化疗。采用免疫组化和原位DNA末端标记法分别检测治疗前后肿瘤增殖细胞核抗原和细胞凋亡的表达情况，计算出增殖指数和凋亡指数。结果 免疫化疗组治疗后肿瘤细胞增殖指数明显低于单纯化疗组(P＜0．05)，细胞凋亡指数明显高于单纯化疗组(P＜0．05)。经过免疫化疗对抑制口腔鳞癌细胞增殖，诱导细胞凋亡具有重要意义。     

转化生长因子β1在舌白斑及鳞癌中的表达

探讨转化生长因子 β1(TGF - β1)有无作为舌癌前病变研究和治疗的生物标志物的潜力。方法　采用免疫组织化学技术对舌的癌前病变到舌癌 (2 4例舌白斑和 16例舌鳞状细胞癌 )发生的不同阶段进行了TGF - β1的表达研究。结果　TGF - β1在舌正常粘膜和舌单纯性白斑上皮中均被广泛染色 ,其染色程度和染色范围二者表达一致 ;舌白斑伴有重度异常增生病变和舌癌病变于上皮及癌巢中染色不均匀癌 ,巢上皮染色范围和染色强度均高于或大于舌单纯性白斑病变 ,差异具有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论　正常粘膜与单纯性白斑 ,单纯性白斑与异常增生性白斑 ,舌高分化鳞癌和舌低分化鳞癌之间无差异 (P >0 .0 5 )。     

Survivin在舌鳞癌中的表达及意义

目的：检测舌鳞癌组织中凋亡抑制蛋白Survivin的表达,探讨Survivin在舌鳞癌中的临床意义.方法：应用免疫组织化学方法检测10例正常舌黏膜、13例高分化舌鳞癌、20例中分化舌鳞癌和12例低分化舌鳞癌标本中Survivin的表达情况.采用SPSS13统计软件包进行非参数Kruskal-Wallis检验及Mann-Whitney U检验.结果：舌鳞癌标本中Survivin的阳性表达率为68.9%,显著高于正常对照组（P＜0.01）,Survivin蛋白表达与舌鳞癌组织学分级,TNM分期相关（P＜0.05）,与淋巴结转移密切相关（P＜0.01）.结论：Survivin在不同分化阶段的舌鳞癌中明显增加,与舌鳞癌发生、临床进展及预后密切相关,有望成为舌鳞癌治疗的新靶点.     

毫米波对人舌鳞癌细胞增殖抑制作用的研究

目的　探讨毫米波对人舌鳞癌细胞增殖的影响。方法　用频率为 3 6.9GHz、功率密度为 5～ 2 5mW /cm2 的毫米波 (mmW )照射人舌鳞癌细胞。采用四唑盐比色试验 (MTT测定法 ) ,观察mmW对人舌鳞癌细胞增殖的影响。结果　mmW以时间依赖、非功率密度依赖方式抑制Tca8113细胞增殖 ( p <0 .0 1) ,导致癌细胞致死性变化。结论　mmW抑制人舌鳞癌细胞Tca8113增殖 ,可辅助治疗舌鳞癌。     

shRNA沉默LASP-1对舌鳞状细胞癌SCC9细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨LASP?1在人舌鳞状细胞癌细胞中的表达,并应用shRNA沉默人舌鳞状细胞癌细胞SCC9中LASP?1基因,研究LASP?1对SCC9细胞增殖和迁移能力的影响。方法构建携带绿色荧光蛋白的LASP?1 shRNA质粒及阴性对照组质粒LASP?1 shNC,通过脂质体转染SCC9细胞,采用MTT法检测细胞增殖;RT?PCR法检测细胞LASP?1 mRNA表达;Western blot检测细胞LASP?1蛋白的表达;运用Transwell小室实验检测细胞迁移能力。结果 LASP?1在舌鳞状细胞癌细胞中高表达;实验组和阴性对照组分别转染相应质粒48 h后细胞均有绿色荧光蛋白表达,表明质粒转染成功;实验组SCC9细胞LASP?1 mRNA和LASP?1蛋白表达明显降低;与空白对照组相比,实验组细胞培养48 h和72 h细胞存活率分别降低了（51.23±1.47）%和（50.07±2.11）%;Transwell实验结果显示, LASP?1基因被沉默后细胞迁移能力明显下降,比对照组降低约43%。结论 LASP?1在舌鳞状细胞癌细胞中高表达,下调LASP?1基因表达可抑制SCC9细胞的增殖和迁移。     

热疗联合Id-1基因沉默对舌鳞癌CAL-27细胞增殖及侵袭的影响

目的: 探讨热疗联合Id-1基因沉默对舌鳞癌细胞增殖及侵袭的影响及其机制。方法: 将培养的舌鳞癌细胞株CAL-27分为4组。①沉默Id-1组（Id-1-siRNA）—用siRNA基因转染法沉默舌鳞癌CAL-27细胞中Id-1的表达,RT-PCR法检测其Id-1的mRNA表达变化;②热疗组（HT）—细胞置于42.5℃恒温培养箱内40min;③联合组（HT+ Id-1-siRNA）—siRNA基因转染法沉默细胞内Id-1的表达后进行42.5℃、40 min的热疗处理;④空白对照组—常规培养细胞。通过CCK8和Transwell侵袭实验,分别检测CAL-27细胞的增殖能力和侵袭能力变化; Western免疫印迹法检测CAL-27细胞中PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达变化。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果: siRNA能成功沉默CAL-27细胞内Id-1的表达,沉默Id-1组与空白对照组相比,Id-1的mRNA表达水平下降81.6%。沉默Id-1和热疗均可抑制CAL-27细胞的增殖和侵袭能力,下调PI3K、p-Akt蛋白表达（P<0.05）,热疗联合沉默Id-1作用于CAL-27细胞后的结果更为显著（P<0.01）。结论: 热疗协同沉默Id-1可显著抑制人舌鳞癌细胞的增殖及侵袭能力,其作用是通过PI3K/Akt信号通路来实现。     

The downregulation of ANGPTL4 inhibits the migration and proliferation of tongue squamous cell carcinoma

ObjectiveTongue squamous cell carcinoma (TSCC) is the most common malignant cancer in the oral cavity, with a high rate of metastasis to the neck lymphoid node. Angiopoietin-like protein 4 (ANGPTL4) and microvessel density (MVD) may be novel indicators for tumor metastasis. The aim of the present study was to investigate the expression and function of ANGPTL4 in TSCC and the relationship between ANGPTL4 and MVD.MethodsThe expression levels of ANGPTL4 and MVD (CD34) were analyzed in 65 TSCC specimens and the adjacent non-cancerous tissues using immunohistochemistry (IHC). siRNA was delivered into TSCCA cells to downregulate ANGPTL4 expression. Subsequently, validation with real-time RT-PCR and western blot analyses was performed to analyze ANGPTL4 expression levels. In addition, a proliferation assay, migration and invasion assays were carried out.ResultsANGPTL4 expression was associated with tumor stage, lymph node metastasis and MVD expression. Cox regression analysis showed that high levels of ANGPTL4 expression were closely associated with poor survival time. In vitro analyses using qRT-PCR and western blot confirmed that ANGPTL4 was successfully inhibited in TSCCA cells. Suppressing ANGPTL4 resulted in the inhibition of cell proliferation and migration, but neither invasion nor cisplatin resistance was significantly affected.ConclusionHigh expression levels of ANGPTL4 are associated with the T stage, lymphatic metastasis, angiogenesis and poor overall survival in TSCC patients. The downregulation of ANGPTL4 inhibits the migration and proliferation of cells in TSCC. Taken together, ANGPTL4 may serve as a novel biomarker and therapeutic target for TSCC.     

舌癌、舌乳头状瘤中细胞凋亡和细胞增殖及其与Bc1-2蛋白表达关系

目的 :探讨细胞凋亡和细胞增殖与舌鳞状细胞癌发生发展的关系。方法 :对 6 9例标本 ,其中正常舌粘膜 7例、舌乳头状瘤 2 0例 (维汉各 10 )、舌癌 42例 (高分化鳞癌 30例 ,中分化鳞癌 12例维汉各 2 1例 ) ,采用原位末端标记法和免疫组织化学染色技术并进行光镜下观察。结果 :不同民族和不同性别之间 ,凋亡指数 (TI)及增殖指数 (PI)无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;舌乳头状瘤组较正常组凋亡指数和增殖指数均增高 (P <0 .0 5 ) ;舌癌组中 ,随恶性程度的增加 ,增殖指数显著增高 ,凋亡指数降低 (P <0 .0 5 ) ;Bcl 2蛋白表达 ,自乳头状瘤→高分化鳞癌→中分化鳞癌而逐渐降低 (P <0 .0 5 ) ;乳头状瘤组 ,PI与TI呈正相关 (r =0 .6 13) ;舌癌组 ,PI与TI呈负相关 (r =-0 .6 0 1) ,Bcl 2蛋白表达与TI呈负相关 (r =-0 .484)。结论 :细胞凋亡和细胞增殖在肿瘤的发生发展中具有重要作用 ,bcl 2基因通过抑制细胞凋亡而使肿瘤细胞迅速聚积     

尼古丁对舌鳞状细胞癌Cal27细胞的生物学影响

目的 探讨吸烟对舌鳞癌患者Cal27细胞系的影响。方法 将舌鳞癌Cal27细胞传代培养,将对数生长期细胞分为空白对照组、尼古丁组及 7型烟碱乙酰胆碱受体（ 7nAChR）抑制组。空白对照组不作任何处理,尼古丁组用尼古丁连续处理细胞1周, 7nAChR抑制组给予尼古丁及 7nAChR抑制剂α-银环蛇毒素（ -BTX）处理细胞1周。采用电子显微镜观察空白对照组及尼古丁组细胞形态;采用CCK-8试剂盒检测空白对照组及尼古丁组细胞增殖力;细胞划痕实验检测空白对照组及尼古丁组细胞迁移能力;Transwell小室检测空白对照组及尼古丁组细胞侵袭能力;免疫印迹实验测定尼古丁组、空白对照组及 7nAChR抑制组细胞Wnt信号通路蛋白相对表达水平。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果 Cal27细胞形态为不规则多角形,体积较大,周围可见伪足伸展,在细胞培养基上呈铺路石样排列。空白对照组、尼古丁组及 7nAChR抑制组Cal27细胞形态无显著差异。孵育96 h后,尼古丁组细胞数显著大于空白对照组及 7nAChR抑制组（P<0.05）;相同时间内尼古丁组细胞划痕愈合程度显著大于空白对照组与 7nAChR抑制组（P<0.05）;相同时间内,尼古丁组穿过小室细胞数显著大于空白对照组及 7nAChR抑制组（P<0.05）;尼古丁组细胞β-catenin、c-Myc、p-GSK3β及Ror2等Wnt通路蛋白相对表达水平显著高于空白对照组及 7nAChR抑制组细胞（P<0.05）。结论 尼古丁可通过激活Wnt信号通路,提高舌鳞癌Cal27细胞增殖、迁移及侵袭能力。     

Bmi1对舌鳞癌侧群细胞迁移、侵袭和增殖能力的调控作用及机制探讨

目的: 探讨Bmi1如何调控舌鳞癌侧群细胞的迁移、侵袭和增殖能力。 方法: 首先采用Hoechst33342法,利用流式细胞仪分选舌鳞癌细胞株UM1（高转移株）中的侧群细胞（side population cell, SP）和非侧群细胞（non-side population cell, Non-SP）。Transwell 实验检测沉默Bmi1后SP细胞的迁移、侵袭能力。球囊形成和平板克隆实验检测沉默Bmi1后SP细胞的球囊和克隆形成率;CCK8 实验检测沉默Bmi1后SP细胞的增殖能力。Western免疫印迹检测沉默Bmi1后SP细胞中侵袭、转移相关基因（SOD2、Slug）及干细胞标志物（ABCG2、Nanog）的表达水平。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学处理。 结果: 转染Bmi1 siRNA使SP细胞中Bmi1表达水平下调后,SP细胞的迁移和侵袭能力显著下降;球囊形成率和克隆形成率也显著低于对照组;增殖能力受到抑制;SOD2、Slug和干细胞标志物ABCG2和Nanog的表达水平显著下降。 结论: 沉默Bmi1可调控舌鳞癌侧群细胞的迁移、侵袭和增殖。     

土曲霉酮对人舌鳞状细胞癌细胞系SCC9的作用

目的 观察土曲霉酮对人舌鳞状细胞癌细胞系SCC9的影响.方法 不同浓度的土曲霉酮处理SCC9细胞后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力,用Annexin V/PI试剂盒及碘化丙啶分别检测细胞凋亡及细胞周期情况.结果 土曲霉酮对SCC9细胞有抑制增殖的作用,抑制作用随着药物浓度的增大(P＜0.05)及给药时间的延长而增强(P＜0.05).此外,与不给药组相比,5 μmol/L和10 μmol/L土曲霉酮处理,可引起处于G2/M期的SCC9细胞比例由(24.8±0.6)％分别增加到(26.2±0.4)％和(34.2±1.2)％ (F=132.13,P＜0.01),但对SCC9细胞凋亡没有明显的影响.结论 土曲霉酮通过引起G2/M期阻滞来抑制人舌鳞状细胞癌细胞系SCC9细胞的增殖,提示土曲霉酮有望在舌鳞状细胞癌的治疗中发挥作用.     

Met激酶抑制剂BMS-777607对舌鳞癌细胞CAL27增殖、凋亡的影响

目的:探讨Met激酶抑制剂BMS-777607对人舌鳞状细胞癌(鳞癌)CAL27细胞增殖、凋亡的影响.方法:采用MTT、克隆形成实验及EdU细胞成像实验,检测BMS-777607对CAL27细胞增殖的影响.通过Heochst33342染色,观察BMS-777607对CAL27细胞的凋亡形态变化.采用JC-1染色,检测B...     

c-fos调控p16/CyclinD1信号途径并促进口腔鳞状细胞癌增殖和迁移

目的:探讨c-fos对口腔鳞状细胞癌增殖和迁移的影响及作用机制.方法:免疫组化法分别检测口腔鳞状细胞癌组织标本和正常口腔黏膜组织标本(n=60)中的CyclinD1、p16和c-fos.根据不同处理将HN6和SCC9细胞分为空白对照组、siRNA-scramble组、siRNA-c-fos组.检测各组细胞中CyclinD1和p16 mRNA和蛋白表达量的变化,以及细胞增殖和迁移能力的变化.结果:与正常组比较,病例组中c-fos和CyclinD1表达增加,p16表达降低;与空白对照组相比,siRNA-c-fos组HN6和SCC9细胞中CyclinD1表达显著降低,p16表达明显上升,细胞的增殖能力和迁移能力都显著下降.结论:c-fos可以通过p16/CyclinD1信号途径增强口腔鳞状细胞癌增殖和迁移.