NOD1在舌鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的　探索NOD1在舌鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法　采用免疫组织化学、RT-qPCR检测舌鳞状细胞癌组织和正常舌黏膜对照组中NOD1的表达,并分析其临床意义。应用SPSS13.0软件包,对各组m RNA的表达进行t检验。结果　NOD1蛋白表达于细胞质,舌鳞状细胞癌组织中NOD1 蛋白表达率为60 .0％（15/25）,显著低于正常舌黏膜对照组表达率80.0％(20/25,P<0.05)。舌鳞状细胞癌组织NOD1 mRNA表达量为正常舌黏膜对照组（0.437±0.103）倍（P＜0.05）。结论　舌鳞状细胞癌组织中NOD1 mRNA和蛋白表达显著低于正常舌黏膜对照组,但需要在更大样本中验证这一结果,并开展功能学研究以揭示其潜在的生物学机制。     

肿瘤抑制蛋Maspin在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生发展过程中的作用,为临床应用提供理论依据.方法 采用鼠抗人Maspin单克隆抗体及SP免疫组化法检测45例OSCC、33例癌旁组织及15例正常口腔组织中Maspin蛋白的表达水平,用半定量积分法判断结果.结果 在正常口腔组织、癌旁组织和OSCC组织中Maspin蛋白表达阳性率分别为86.67%(13/15)、72.73%(24/33)和37.78%(17/45).Maspin蛋白在OSCC组织、癌旁组织和正常口腔组织中表达逐渐增高,其中OSCC组织和正常口腔组织、OSCC组织和癌旁组织、癌旁组织和正常口腔组织之间表达差异有统计学意义(P<0.05).Maspin蛋白的表达与OSCC淋巴结转移和组织学分级有关(P<0.05),与TNM分期无关(P>0.05).结论 Maspin蛋白在OSCC的发生发展过程中可能起着重要作用,检测OSCC组织中Maspin蛋白的表达水平可能有助于对淋巴结转移潜能的预测.     

肿瘤抑制蛋白Maspin在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌（OSCC）发生发展过程中的作用,为临床应用提供理论依据。方法采用鼠抗人Maspin单克隆抗体及SP免疫组化法检测45例OSCC、33例癌旁组织及15例正常口腔组织中Maspin蛋白的表达水平,用半定量积分法判断结果。结果在正常口腔组织、癌旁组织和OSCC组织中Maspin蛋白表达阳性率分别为86.67％（13/15）、72.73%（24/33）和37.78%（17/45）。Maspin蛋白在OSCC组织、癌旁组织和正常口腔组织中表达逐渐增高,其中OSCC组织和正常口腔组织、OSCC组织和癌旁组织、癌旁组织和正常口腔组织之间表达差异有统计学意义（P<0.05）。Maspin蛋白的表达与OSCC淋巴结转移和组织学分级有关（P＜0.05）,与TNM分期无关（P＞0.05）。结论Maspin蛋白在OSCC的发生发展过程中可能起着重要作用,检测OSCC组织中Maspin蛋白的表达水平可能有助于对淋巴结转移潜能的预测。     

Bex1和NF-kBp65在舌鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨Bex1和NF-kBp65在舌鳞状细胞癌组织中的表达及意义.方法 免疫组化法检测60例舌鳞状细胞癌组织及相应癌旁正常组织中Bex1和NF-kBp65的表达情况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系.结果 舌鳞状细胞癌组织中Bex1阳性表达率为48.3％(29/60),低于癌旁正常组织的88.3％(53/60)...     

肿瘤转移抑制基因BRMS1 mRNA在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究肿瘤转移抑制基因-乳腺癌转移抑制基因(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)在口腔鳞癌组织及癌旁组织中的表达,并探讨其表达规律及与临床病理学关系。方法:用RT-PCR技术检测38份口腔鳞癌、20份癌旁正常组织的BRMS1 mRNA的表达情况,并结合肿瘤病人的临床病理学资料进行分析。结果:口腔鳞癌组织BRMS1 mRNA表达量比癌旁组织明显偏低,其差异具有统计学意义(P<0.05)。BRMS1 mRNA表达水平在转移病例明显低于非转移的病例,低分化标本明显低于高中分化标本,差异均有统计学意义(P<0.05);但是在肿瘤临床分期、性别、年龄、瘤体大小等之间的表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:BRMS1在口腔鳞癌中的表达水平跟肿瘤的转移密切相关,也跟肿瘤的组织分化程度有关,可以作为口腔鳞癌治疗的预后指标之一。     

Axl基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的检测Axl(Anexelekto)在口腔鳞状细胞癌中的表达,探索Axl与口腔鳞状细胞癌发生、发展的关系。方法免疫组织化学法(IHC)检测42例口腔鳞状细胞癌患者的癌组织(口腔癌组)及其相应的癌旁组织(癌旁组)Axl的表达状况。原代培养正常人口腔上皮细胞(HOEC),并培养1株永生化正常口腔角化上皮细胞系(NOK)及2株人舌鳞状细胞癌细胞系(UM1、UM2)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹分析(Western blot)检测上述4种细胞中的Axl的mRNA和蛋白的表达情况。结果 Axl在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率(61.9%)高于其相应的癌旁正常组织(26.2%),差异具有统计学意义(P<0.05),qRT-PCR和Western blot结果示在HOEC、NOK、UM2、UM1中Axl基因的mRNA表达和蛋白表达逐步增高,且在UM2、UM1中明显高于HOEC、NOK。结论 Axl在口腔癌组织及口腔癌细胞株中的表达较口腔正常组织和正常口腔上皮细胞者中高表达,提示Axl基因可能与口腔鳞状细胞癌的发生、发展相关。     

BATF2在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨BATF2基因在人舌鳞状细胞癌(oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC)中的表达及临床意义.方法 采用定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组化方法检测BATF2基因在OTSCC组织(16例)及对应癌旁黏膜组织(16例)的表达,探讨BATF2表达水平与临床病理及预后的关系.结果 定量PCR显示BATF2 mRNA在13例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;蛋白质印迹法检测显示BATF2蛋白在14例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;免疫组化显示在202例OTSCC标本中,BATF2蛋白无表达20例(9.9％),低表达104例(51.5％),高表达78例(38.6％);且BATF2蛋白表达水平与OTSCC组织分化相关(P=0.002),BATF2蛋白低表达患者预后显著差于BATF2高表达者(P＜ 0.001).结论 BATF2在OTSCC中低表达与肿瘤分化程度及预后相关,可作为预测OTSCC预后的分子指标及OTSCC潜在的治疗靶点.     

CCND1、ORAOV1、ERCC1在舌鳞状细胞癌中的表达和临床意义

目的:通过观察 CCND1、ORAOV1、ERCC1在舌鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CCND1、ORAOV1、ERCC1与舌癌发生、发展的相关性。方法:应用免疫组织化学染色方法检测38例舌鳞状细胞癌组织芯片及4例正常舌组织芯片中CCND1,ORAOV1,ERCC1蛋白表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。结果:舌癌组织中CCND1蛋白的阳性表达率明显高于正常舌组织(P<0.05),但其过表达水平与正常舌组织相比无统计学差异;CCND1阳性表达率及过表达水平与患者年龄、性别、肿瘤组织学分级及肿瘤有无淋巴结转移之间无明显相关。ORAOV1在舌癌组织中的表达明显升高(P<0.05),且与肿瘤有无淋巴结转移之间显著相关(P<0.05);ORAOV1在舌癌中的过表达水平与对照组相比无明显差异,但随着肿瘤分化程度的降低ORAOV1的过表达水平显著上升(P<0.05)。ERCC1蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的阳性表达率及过表达水平均明显低于正常舌组织(P<0.05),并均与肿瘤有无淋巴结转移之间显著相关(P<0.05);且与高、中分化组相比,低分化组ERCC1蛋白过表达水平上升,但无统计学差异。结论:在舌鳞状细胞癌组织中CCND1和ORAOV1显著高表达,ERCC1表达显著降低,三者的检测对早期诊断舌癌具有指导意义。     

金属蛋白酶,金属蛋白酶组织抑制因子及其在口腔鳞状细胞癌中的意义

金属蛋白酶（Ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ;简称ＭＭＰ）通过对基质降解而促进癌细胞对周围组织的浸润,并通过进入脉管而达远隔部位的转移;金属蛋白酶抑制因子（ｔｉｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ,简称ＴＩＭＰ）对...     

肿瘤抑制基因nm23-H1在口腔鳞癌组织中的蛋白表达及其与预后的关系

目的　研究nm2 3 H1 蛋白在口腔鳞癌中的表达情况 ,并探讨它与口腔鳞癌患者预后的关系。方法　采用免疫组化SABC法检测 75例口腔鳞癌、19例癌旁粘膜、8例正常口腔粘膜及 9例颈淋巴结转移灶中的nm2 3 H1 蛋白染色 ,利用 χ2 检验及单因素、多因素Cox比例风险模型进行统计分析。结果　χ2 检验发现 ,nm2 3 H1 蛋白表达水平在生存期小于 3年组和大于 7年组间差异有显著性(P <0 0 5 )。单因素Cox模型分析发现nm2 3 H1 蛋白表达水平等因素与预后有关 ;多因素Cox分析未发现nm2 3 H1 蛋白表达水平等因素与预后有关。结论　nm2 3 H1 蛋白表达水平的高低可能不是影响口腔鳞癌患者预后的主要因素 ,nm2 3 H1 蛋白可能通过对转移的作用间接影响预后。     

抑癌基因PTEN与PIP3、细胞周期蛋白D1在口腔鳞癌中的表达及其相关性分析

目的 通过检测口腔鳞癌及癌前病变中抑癌基因与张力蛋白同源10q丢失的磷酸酶基因（PTEN）、3、4、5-三磷酸磷脂酰肌醇（PIP3）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）的表达，分析其相关性，初步探讨在口腔鳞癌中PTEN可能的作用途径。方法采用免疫组化SP法检测63例口腔鳞癌、29例单纯增生、33例异常增生、25例正常口腔黏膜中PTEN、PIP3、cyclin D1的表达。结果PTEN在口腔鳞癌中阴性和弱阳性表达占25％，明显低于其他各组；PIP3在单纯增生、异常增生和口腔鳞癌中阳性或强阳性表达分别占66％、64％和76％，明显高于正常组的表达；cyclin D1在口腔鳞癌中阳性或强阳性表达的占49％，明显高于其他各组。PTEN与PIP3、cyclin D1之间呈负相关，PIP3与cyclin D1呈正相关。结论PTEN在口腔鳞癌的发生和发展过程中起着一定的作用；在口腔鳞癌中PTEN可通过下调PIP3，继而下调cyclin D1，从而抑制细胞的生长。     

Infrequent genetic alterations of the tumor suppressor gene PTEN/MMAC1 in squamous cell carcinoma of the oral cavity

BACKGROUND: Fifty tumor specimens from primarily untreated patients were analyzed to elucidate the involvement of the tumor suppressor gene PTEN/MMAC1 in the development of oral squamous cell cancer. METHODS: Eight microsatellite markers, spanning 10 cM of genomic DNA located centromeric, telomeric or intragenic of PTEN/MMAC1 were used for loss of heterozygosity (LOH) and breakpoint analysis. The microsatellite panel within or in close proximity (1 cM) to the 10q23.3 locus showed a LOH rate of 12%. Complete sequence analysis of the genes coding region was performed in all 10 cases that exhibited LOH in one of the eight microsatellite markers within or around the PTEN/MMAC1 gene. Comparative multiplex PCR reactions served to screen for homozygous deletions. RESULTS: There was no association between allelic loss of the gene, overall patient survival and recurrence-free survival. Sequencing did not reveal any mutation in the coding region of PTEN/MMAC1. Differential PCR analysis failed to detect any homozygous deletion. CONCLUSIONS: We conclude that PTEN/MMAC1 gene alterations do not play a key role in tumorigenesis of oral squamous cell cancers.     

舌鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系细胞周期蛋白D1RNA干扰的体外研究

目的 用人工合成的耐药相关基因细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的小分子干扰RNA（siRNA）处理人舌鳞癌顺铂耐药细胞系（Tca8113-CDDP），探讨对靶基因转录调控的作用效果以及剂量和时间效应关系，为耐药性逆转提供实验依据。方法 CY^3荧光素标记阳性对照基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）siRNA，分别于转染后4、24、48、72h在激光共聚焦显微镜下观察瞬时转染率，优化转染条件。用SYBR绿色荧光染料法、实时定量PCR技术分析目的基因mRNA的表达情况，同时采用蛋白印迹（Western blot）检测目的基因蛋白水平的表达。四甲基偶氮唑盐法检测cyclin D1 siRNA处理后细胞对顺铂敏感性的影响。结果 优化转染条件后，Tca8113-CDDP细胞中CY^3的GAPDH siRNA转染率达90％以上。转染cyclin D1 siRNA后24、48hmRNA表达的抑制率为81．6％、80．7％，72h最为明显，为94．3％。在低于100nmol／L浓度下，RNA干扰抑制与剂量大小有关；当剂量进一步加大时，抑制效应则维持在“平台期”。转染24、48和72h后，cyclin D1蛋白的表达也明显下降。siRNA干扰组和对照组细胞在顺铂作用后细胞生长抑制率分别为58．4％、34．8％。结论 化学合成的cyclin D1 siRNA在体外实验中，对Tca8113-CDDP细胞中目的基因的沉默提高了细胞对顺铂敏感性，并呈现剂量和时间依赖效应。     

口腔鳞状细胞癌中蛋白酪氨酸磷酸酶基因的突变与表达

目的 探讨抑癌基因蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted in chromosome 10,PTEN)的突变和基因表达水平变化在口腔鳞状细胞癌发生、发展过程中的作用.方法 应用聚合酶链反应(PCR)、基因测序方法检测42例口腔鳞状细胞癌和癌旁组织中PTEN第3、5、6、8外显子有无突变.应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测上述病例癌组织及癌旁组织中PTEN mRNA的表达.结果 发现2例口腔鳞状细胞癌组织中PTEN第5外显子发生点突变.42例口腔鳞状细胞癌和癌旁正常组织中均有PTEN mRNA表达,口腔鳞状细胞癌组织中PTEN mRNA表达量[PTEN/磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)]为(0.36±0.12),低于相应癌旁正常组织(0.64±0.09),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PTEN mRNA表达水平降低与口腔鳞状细胞癌的发生有一定关系.     

髓样来源的抑制细胞在舌癌小鼠中的表达及意义

目的 评价舌癌小鼠外周血和病变部位髓样来源的抑制细胞（MDSC）的变化及意义。方法 建立4NQO舌癌小鼠模型,观察MDSC细胞在外周血的表达,同时观察T细胞亚群的表达,评价MDSC细胞与T细胞亚群及CD4⁺/ CD8⁺比例变化的相关性。观察MDSC细胞在舌黏膜病变部位的表达,并检测舌组织精氨酸酶1（ARG-1）mRNA的表达。结果 4NQO小鼠外周血中MDSC比例随着肿瘤进展显著升高（P<0.01）,外周血中MDSC比例与相应CD3⁺CD8⁺T细胞的比例呈正相关,与CD4⁺/CD8⁺比呈负相关关系。4NQO小鼠异常增生区域的MDSC细胞较正常对照组有所增加,在舌癌组织内及与正常组织的交界处,均浸润了大量的MDSC细胞,而且ARG-1 mRNA水平显著升高（P<0.01）。结论 MDSC细胞在舌癌组织和外周血中的扩增可能是肿瘤进展的重要原因。MDSC细胞可能成为口腔癌免疫治疗的潜在靶点。     

过表达大肿瘤抑制因子2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨过表达大肿瘤抑制因子2（LATS2）基因对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖和凋亡的影响。方法 应用慢病毒介导的基因过表达技术,使用LATS2过表达慢病毒感染SCC-25细胞株。通过CCK-8检测过表达LATS2对细胞增殖的影响;流式细胞术检测LATS2基因过表达后细胞凋亡情况;Western blot检测LATS2过表达后对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的变化。结果 转染pEGFP-LATS2细胞的LATS2基因表达明显上调;pEGFP-LATS2组细胞增殖明显受到抑制;流式细胞术检测pEGFP-LATS2组凋亡率明显高于空白对照组（control）和空载体组（pEGFP-control）（P<0.05）。与control和pEGFP-control组相比,pEGFP-LATS2组Bax蛋白上调,而Bcl-2蛋白下调。结论 过表达LATS2基因可明显抑制SCC-25细胞增殖并促进细胞凋亡。