多重和套式聚合酶链反应检测血液,腹膜透析患者血清中HBV D…

利用免疫学和聚合反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透），１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶ ＲＮＡ ＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感     

套式及免疫套式聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗原阴性肝病患者血清中乙型肝炎病毒DNA

为了更准确、简便而又快速地了解乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性肝病患者的病因，建立了套式和免疫套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的技术，结合丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染指标的检测，对ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者的病因进行了研究。发现套式ＰＣＲ能将单次ＰＣＲ的敏感性稳定地提高１０００倍；免疫套式ＰＣＲ可检测到０．１～０．０１ｐｇ／Ｌ水平。检测ＨＢｓＡｇ阴性肝硬化２２例（Ａ组）、ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝炎１３例（Ｂ组）、ＨＢｓＡｇ阴性和乙型肝炎病毒核心抗体（抗－ＨＢｃ）阳性正常对照组３０例（Ｃ组）及ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（－）肝硬化患者１２例（Ｄ组），分别有４５．５％、３０．８％、１３．３％和１００％患者血清中ＨＢＶＤＮＡ阳性。ＨＢＶＤＮＡ在一些抗－ＨＢｓ（＋）肝病患者和所谓健康人的血清中也存在。Ａ、Ｂ两组检出有ＨＢＶ和（或）ＨＣＶ感染患者分别占８１．８％和５３．８％。提示套式和免疫套式ＰＣＲ是简便、快速而又高度敏感的检测方法；ＨＢＶ感染可能是引起ＨＢｓＡｇ阴性慢性肝病的重要原因，且ＨＢｓＡｇ阴性肝病病因大多与病毒感染有关；应该重新认识自然感染者血清中抗－ＨＢｓ的临床意义。     

输血后丙型肝炎病毒感染的血清病毒定量研究

目的 研究血清丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）含量与ＨＣＶ致病的关系及ＨＣＶ含量与抗－ＨＣＶ和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的相关性。方法 以逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法对ＨＣＶ感染的受血及相关供血系列血清进行ＨＣＶ ＲＮＡ定量分析,同时检测ＡＬＴ与抗－ＨＣＶ。结果 致输血后ＨＣＶ感染的供血中,ＨＣＶ ＲＮＡ平均含量为１０＾８．６拷贝／Ｌ,抗－ＨＣＶ及ＡＬＴ的异常检出率随ＨＣＶ ＲＮＡ滴度升高而增加。结论     

聚合酶链反应检测HBV DNA的临床意义

应用ＰＣＲ对１７１例肝病血清检测结果，ＨＢＶＤＮＡ阳性率５９．１％，ＥｌｉＳＡ检测ＨＢｓＡｇ阳性率４３．２７％，二者比较有显著性差异（Ｐ〈０．０１），ＨＢｓＡｇ（＋）／ＨＢｅＡｇ（＋）组ＨＢＶＤＮＡ阳性率７９．５％，而ＨＢｓＡｇ（＋）抗－ＨＢｅ（＋）组主５７．９％，ＨＢｓＡｇ（－）／抗－ＨＢｓ（＋）组，ＨＢＶＤＮＡ阳性率３６．８％。     

多重和套式聚合酶链反应检测血液、腹膜透析患者血清中HBV DNA和HCV RNA

利用免疫学和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，对３５例血液透析（血透）、１４例腹膜透析（腹透）患者的８４份血清进行了检测。血透组抗－ＨＣＶ阳性率８２．９％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性率５１．４％；腹透组抗－ＨＣＶ阳性率仅７．１％，ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ均阴性。ＨＢｓＡｇ和（或）ＨＢｅＡｇ在二组的阳性率分别为２５．７％和２１．４％；ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ阳性率分别为４５．７％和６４．２％。透析患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染率显著高于一般人群。血、腹透两组ＨＣＶ感染率相差非常显著，血透患者抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ阳性高于腹透患者，表明血透过程在丙型肝炎传播方面起重要作用。作者还采用多重和套式ＰＣＲ方法，将ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ在合并的逆转录和ＰＣＲ扩增系统中，连续进行逆转录和第一轮多重ＰＣＲ扩增，再进行第二轮多重ＰＣＲ，具有特异、敏感、简便、快速和经济等特点，适于临床应用。     

庚型肝炎病毒（GBV—C／HGV）与HBV和HCV联合或重叠感染的初步研究

目的 研究庚型肝炎病毒（ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ）与ＨＢＶ和ＨＣＶ联合或重叠感染的情况，方法 采用ＥＬＩＳＡ的方法检测血液制剂和血源乙肝疫苗原料血浆中的ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ；并用５′非编码区的引物，用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ。结果 ＨＢｓＡｇ和抗ＨＣＶ均阴性血浆的ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性率为１８．８％（１５／８０）；ＨＢｓＡｇ阳性而抗ＨＣＶ阴性血浆的ＧＢＶ－     

HBsAg阳性的胃溃疡患者HCV感染的情况分析

为探讨ＨＢｓＡｇ阳性的胃溃疡患者ＨＣＶ感染情况。方法用ＥＬＩＳＡ法及ＰＣＲ法对ＨＢｓＡｇ阳性的胃溃疡患者７５例（其中接受输血者３８例,未输血者３７例）和单纯ＨＢｓＡｇ阳性患者３２例的血清进行抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ测定。结果接受输血者抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ阳性率明显高于未输血者及单纯ＨＢｓＡｇ阳性患者（Ｐ＜０．０１）。结论输血为传播ＨＣＶ的主要途径,未发现消化道传播ＨＣＶ的证据。     

套式及免疫套式聚合酶链反应检测乙型肝炎表面抗原阴性肝病患…

为了更准确，简便而又快速地了解乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性肝病患者的病因，建立了套式和免疫套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ的技术，结合丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染指标的检测，对ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者的病因进行了研究，发现套式ＰＣＲ能将单次ＰＣＲ的敏感性稳定地提高１０００倍；免疫套式ＰＣＲ可检测到０．１～０．０１ｐｇ／Ｌ水平，检测ＨＢｓＡｇ阴性肝硬化２２例（Ａ组）     

丙型肝炎病毒抗体检测的诊断价值

用国产第二代丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）检测试剂盒检测了２９６例临床血清标本以及２８例供血者血清标本。并用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了这些标本的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，以了解抗－ＨＣＶ检测对ＨＣＶ感染的诊断价值。同时探讨其在供血员筛选中的应用价值。结果在临床标本中，抗－ＨＣＶ阳性者有８１．１％ＨＣＶＲＮＡ阳性。抗－ＨＣＶ阴性者有２１．７％ＨＣＶＲＮＡ阳性。但是２８例抗－ＨＣＶ阴性的供血者ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。提示：抗－ＨＣＶ阳性对于ＨＣＶ感染的诊断价值很高。临床怀疑为ＨＣＶ感染而进行检测的血清标本即使抗－ＨＣＶ阴性，也不能除外ＨＣＶ感染。用抗－ＨＣＶ筛选供血者可能使供血中ＨＣＶＲＮＡ阳性率大大降低。     

佛山地区存在经输血传播病毒(TTV)感染

我们应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ法检测了４５例甲到戊型标志物均阴性的肝炎患者和４４例献血员血清中的ＴＴＶＤＮＡ。资料与方法：４５例肝炎患者均为我院传染科或门诊病人,血清经ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ均阴性,ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ,ＨＣＶＲＮＡ均阴性。４４例某院献血员检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ为阴性,肝功能正常。抽提标本血清ＤＮＡ进行Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ：以ＲＤ０３７和ＲＤ０３８为引物进行第一次ＰＣＲ,再以Ｒ…     

肝细胞癌患者乙、丙和丁型肝炎病毒感染状况

为探讨乙型、丙型和丁型肝炎病毒（ＨＢＶ，ＨＣＶ和ＨＤＶ）感染对肝细胞癌（肝癌）发生的意义，本文作者采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应法对７２例广东籍肝癌患者ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＤＶ血清标志以及血浆ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ进行了检测。ＨＢｓＡｇ和抗－ＨＣＶ阳性率分别为８４．７％和１８．１％，显著高于１２８名健康对照者。ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢＶＤＮＡ总阳性率为９３．１％，抗－ＨＣＶ和／或ＨＣＶＲＮＡ阳性率为２７．８％，ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染率为２２．２％。其中６１例ＨＢｓＡｇ阳性肝癌的ＨＤＶ血清标志检出率为１４．８％，明显高于６１例ＨＢｓＡｇ阳性的肝炎对照者。结果表明，广州地区肝癌的发生，主要与ＨＢＶ和ＨＣＶ感染密切相关外，且可能与ＨＤＶ感染有关。     

用套式聚合酶链反应检测乙型肝炎疫苗免疫后无抗体反应者血清…

为了解乙型肝炎（乙肝）疫苗接种后不产生抗－ＨＢｓ的原因，作者用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了正常人君中乙肝疫苗免疫后１５例不产生抗－ＨＢｓ和２０例产生抗－ＨＢｓ者血清的ＨＢＶ ＤＮＡ，同时用Ａｂｂｏｔｔ试剂检测血清的ＨＢｅＡｇ。结果发现，不产生抗－ＨＢｓ者的１５例中有６例（４０％）第２次ＰＣＲ扩增ＨＢＶ ＤＮＡ为阳性，其中３例（５０％）为ＨＢｅＡｇ阳性，产生抗－ＨＢｓ者的２０例其血清ＨＢＶ     

PCR技术检测HBV DNA评价

目的 为评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨＢＶ ＤＮＡ较之传统酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）的优越性,评价ＨＢｓＡｇ阴性消化科住院病人携带ＨＢＶ的状态,方法 我们使用ＰＣＲ技术检测了１１９例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性的消化科住院病人的ＨＢＶ ＤＮＡ,并与１０３例ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢｓＡｇ阴性传染科住院肝炎病人相比较。结果：５２．１％的消化科住院病人ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｅ、抗－Ｈ     

肾移植患者丙型肝炎病毒感染的临床研究

目的：了解肾移植患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的感染情况及ＨＣＶ感染后的临床影响。 方法：对６７例肾移植患者进行至少１年的随访，用第二代ＥＬＩＳＡ法和Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ测定血清中抗ＨＣＶ和ＨＣＶ ＲＮＡ。 结果：抗ＨＣＶ的阳性率５０．７％（３４例），ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为４７．８％（３２例）。ＨＣＶ ＲＮＡ阳性组术前血透时间和输血量及丙氨酸转移酶（ＡＬＴ）水平明显高于ＨＣＶ ＲＮＡ阴性组，ＨＣＶ ＲＮ     

乙型肝炎病毒基因组S区编码产物的检测及临床意义

为了进一步明确 ＨＢＶ基因组 Ｓ区编码产物对乙型病毒性肝炎诊断的临床价值，用双抗体夹心 ＥＬＩＳＡ法检测 ９０份乙型病毒性肝炎患者血清标本ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、Ｐｒｅ－Ｓ１和 Ｐｒｅ－Ｓ２，并与 ＨＢＶＭ及 ＨＢＶＤＮＡ ＰＣＲ进行对比分析。结果以抗 ＨＢｃ、ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ、ＨＢＶＤＮＡ（ＰＣＲ）及 Ｐｒｅ－Ｓ２的阳性检出率为最高，分别为８７．８％、７３．３％、７２．２％和６４．４％，以ＨＢＶＤＮＡ作为ＨＢＶ感染的金标准，无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；其中ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ的符合率最高，分别为 ７６．７ ％和 ７４．７ ％；ＭＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ与 ＨＢＶＤＮＡ具有高度相关性。ＨＢｓＡｇ·ＰＨＳＡ－Ｒｅ做为早期诊断ＨＢＶ感染及判断是否具有传染性方面，是一项非常重要的血清学指标，Ｐｒｅ－Ｓ２也可作为ＨＢＶ复制活跃的标志之一，用于急慢性肝炎的预后判断．     

CPH肝组织,血清HBV与血清HBV标志物不同状态的相关性探讨

目的和方法：经肝活检诊断为慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）５１例，均做ＰＣＲ、斑点杂交进行肝组织、血清ＨＢＶＤＮＡ检测，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测了ＨＢＶ血清标志物。结果，ＨＢＶＤＮＡ检出率依次为肝组织ＰＣＲ９４１％（４８／５１）、血清ＰＣＲ９２２％（４７／５１）和肝组织斑点杂交９０２％（４６／５１）。三者之间无显著差异（χ２＝０４９５，Ｐ＞００５）。各项血清标志物总检出率ＨＢｓＡｇ３７２％（１９／５１），ＨＢｅＡｇ３３３％（１７／５１）和抗－ＨＢｅ２１５％（１１／１５），显著低于ＰＣＲ和斑点杂交ＨＢＶＤＮＡ的检出率（χ２＝３０．９，Ｐ＜０００５）。在抗－ＨＢｅ（＋）的１１例患者中１０例检出肝组织和血清ＨＢＶＤＮＡ，８例抗－ＨＢｓ（＋）患者，６例肝组织及血清ＰＣＲＨＢＶＤＮＡ阳性，结论：表明抗－ＨＢｅ（＋）及／或抗－ＨＢｓ（＋）不能代表ＨＢＶ复制停止或被清除，并且肝脏病变可仍然存在     

PCR直接法检测HBsAg阴性肝病的价值

目的研究ＨＢｓＡｇ阴性肝病患者和自然人群中乙肝病毒（ＨＢＶ）携带者。方法采用ＤＮＡＰＣＲ直接法测定急、慢性肝炎，肝硬变和单项ＡＬＴ增高者共２３１例ＨＢｓＡｇ阴性患者中ＨＢＶＤＮＡ，２４０例ＨＢＶ标志阴性的自然人群对照。结果检出率在患者组和对照组分别为３３．７％（７８／２３１）和１１．５％（２８／２４０），Ｐ＜０．０１。单项ＡＬＴ增高组最高，达６６．７％（１０／１５），其他依次为慢肝组（ＣＨ）４１．９％（１３／３１）、肝硬变组（ＬＣ）３０．７％（５２／１６９）和急肝组１８．７％（３／１０）。单项ＡＬＴ增高组与ＬＣ、急肝组有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论在ＨＢｓＡｇ阴性的肝病患者和自然人群中均有ＨＢＶ携带者     

抗HCV阳性慢性肝病患者HBV感染及前C／C区基因变异

探讨ＨＢＶ基因变异在ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性慢性肝病中的意义。方法用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）与限制片段长度多态性相结合，对５６例慢性肝病患者６例ＨＢｓＡｇ阴性抗ＨＣＶ阳性（Ａ组）．１９例ＨＢｓＡｇ阳性抗ＨＣＶ阳性（Ｂ组）及３１例单独ＨＢＶ成染（Ｃ组）进行前Ｃ区密码２８终止变异（Ａ８３）和Ｃ区密码９７异亮氨酸亮氨酸变异（Ｌ９７）分析。结果Ａ组和Ｂ组Ａ８３和Ｌ９７变异检出率分别为３３％和４２％显著低于Ｃ组８１％（Ｐ值＜０．００１）：而Ａ组和Ｂ组间无统计学差异（Ｐ值＞０．０５）。结论ＨＢＶ和ＨＣＶ双重感染ＨＢｓＡｇ阴性与Ａ８３和Ｌ９７变异无相关。     

慢性肝病者肝组织HBV抗原表达,临床病理与血清HBVDNA的关系

利用敏感的多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术及免疫病理方法，我们对１２４例慢性肝病者的血清ＨＢＶＤＮＡ、肝组织ＨＢｃＡｇ和ＨＢｓＡｇ分别进行了检测。在１０９例慢性肝炎者中，其血清ＨＢＶＤＮＡ的检出率分别为：慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）５８．６％、慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）４４．５％、肝炎后肝硬化（Ｃｉｒ）５３．３％；肝组织ＨＢｃＡｇ（＋）的检出率为：ＣＡＨ３４．３％、ＣＰＨ５．５％、Ｃｉｒ１３．３％。本文还观察     

乙型肝炎病毒C基因逆转录病毒载体的构建及在永生化人外周？…

目的体外研究乙型肝炎病毒Ｃ（ＨＢＶ／Ｃ）基因变异的生物学意义。方法 应用逆转 录病毒勒体ＰＸＴ１构建ＨＢＶ／Ｃ基因表达载体，并转染永生化人外周血Ｂ细胞使之稳定ＨＢｃＡｇ。结果 重组质粒ＰＸＴ１－ＨＢＶ／Ｃ经聚合酶链反应（ＰＣＲ）和ＢｇｌⅡ及ＸｈｏⅠ双酶切鉴定均阳性，转染后的永生化人外周血Ｂ细胞ＰＣＲ鉴定含目的ＤＮＡ，流式细胞仪分析显示，约４７．４％的细胞膜上表达了ＨＢｃＡｇ。结论ＨＢＶ／Ｃ基因逆转