转染RECK基因对人骨肉瘤MG-63细胞MMP-2活化及侵袭能力的影响

目的 观察转染RECK基因对人骨肉瘤细胞MG-63的MMP-2活化及细胞侵袭力的影响.方法 以脂质体LipofectamineTM2000介导的方法将含RECK全长基因的真核重组表达质粒pcDNA3-RECK转染入MG-63细胞,RT-PCR、流式细胞术检测目的 基因的表达,明胶酶谱法、Matrigel侵袭实验分别检测MG-63细胞MMP-2活化比例及细胞侵袭力变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和细胞生长曲线法观察转染质粒DNA对细胞的毒性作用.结果 转染后RECK基因在MG-63细胞Mrna和蛋白水平分别有稳定高表达;明胶酶谱显示重组质粒转染组MMP一2的活化比例均明显低于正常对照组、空载质粒转染组(均P<0.01),Matrigel侵袭实验显示重组质粒转染组穿透Matrigel的细胞数目均明显低于正常对照组、空载质粒转染组(均P<0.05);而MTT法测重组质粒转染组细胞生长曲线与正常对照组、空载质粒转染组无明显差异(均P>0.05).结论 RECK基因过表达可显著减少骨肉瘤细胞MG-63的MMP-2活化及其侵袭能力,RECK基因可能成为肿瘤治疗的新靶点.     

RECK基因在子痫前期患者胎盘的表达及其与MMP-2活化的关系

目的 通过检测RECK基因在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与MMP-2活化的关系,探讨RECK基因在胎盘滋养细胞浸润机制中的作用.方法 分别采用RT-PCR、Western blot检测正常妊娠孕妇(正常妊娠组,22例)、子痫前期孕妇(其中轻度22例,重度20例)胎盘组织中RECK mRNA和蛋白的表达;采用明胶酶谱法检测3组孕妇胎盘组织中MMP-2的活化比例.结果 轻度、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于正常妊娠组,且重度子痫前期组RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01);而轻度、重度子痫前期组MMP-2的活化比例均明显低于正常妊娠组,且重度子痫前期组MMP-2的活化比例明显低于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01).正常妊娠组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA及其蛋白表达与MMP-2的活化比例均呈负相关关系(均P<0.01).结论 子痫前期孕妇胎盘组织中RECK表达异常升高,MMP-2活性受到抑制,可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程.     

RECK及MMP-2在骨肉瘤组织中的表达及意义

目的 检测RECK蛋白及明胶类基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在骨肉瘤组织表达,探讨其在骨肉瘤的发生、发展、浸润和转移中的作用.方法 选择临床及病理资料完整的存档骨肉瘤标本30例,另取骨软骨瘤标本10例作为对照.采用 PV-6000免疫组化方法检测RECK及MMP-2蛋白的表达.结果 RECK在骨肉瘤组织中低表达(30.0%),在骨软骨瘤组织中高表达(80.0%),两者相比差异有显著性(χ2=5.76,P<0.05); MMP-2在骨肉瘤组织中高表达(76.7%),在骨软骨瘤组织中低表达(10.0%),两者相比差异有显著性(χ2=11.25,P<0.05);骨肉瘤组织中RECK与MMP-2的表达呈负相关(r=-0.84,P<0.05).结论 骨肉瘤组织中RECK低表达,而MMP-2高表达.RECK及MMP-2可能作为预测骨肉瘤浸润转移的重要指标.     

前列腺癌细胞株中RECK基因的表达及其与MMP的关系

目的:检测RECK基因及MMP-2、MMP-9在不同前列腺细胞株BPH-1、DU-145、LNCap以及PC-3中的表达,探讨其表达差异及其意义.方法:应用RT-PCR检测4种不同前列腺细胞株RECK及MMP-2、MMP-9 mRNA的表达;应用Western印迹法检测不同前列腺细胞株中RECK蛋白的表达.结果:前列腺癌细胞株DU-145、LNCap以及PC-3中RECK mRNA的表达较良性前列腺增生细胞株BPH-1中明显降低(P<0.01),MMP-2、MMP-9 mRNA表达则明显升高(P<0.01).另外,DU-145、LNCap以及PC-3细胞株中RECK蛋白的表达较正常组织明显降低(P<0.01). 结论:RECK基因在前列腺癌中的表达量明显下降,而MMP-2、MMP-9的表达量明显升高,RECK基因可能通过抑制MMP-2、MMP-9的表达起到抑癌基因的作用.     

miR-99a抑制物对骨肉瘤细胞生物行为学的影响

目的:探索miR-99a在骨肉瘤中的表达情况及其对骨肉瘤细胞生物学行为特性的影响。方法:收集7例骨肉瘤组织及瘤旁骨组织,RT-PCR检测并比较miR-99a表达情况;RT-PCR技术检测miR-99a在骨肉瘤细胞系143B、MG-63和U2OS中的相对表达量,以人成骨细胞系hFOB1.19作为对照比较;RT-PCR检测hepG2、lovo、A549和MCF-7中的miR-99a相对表达量,以143B作对照比较。培养人骨肉瘤细胞系143B,瞬时转染miR-99ainhibitor后,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕试验检测细胞迁移,Transwell小室法检测细胞侵袭,Western Blot检测RECK、MMP-2、MMP-9蛋白的表达情况。结果:miR-99a在7例骨肉瘤组织中的相对表达量(0.81±0.06)要明显高于瘤旁骨组织(0.48±0.06)(P<0.01)。3组骨肉瘤细胞系miR-99a表达量均高于人成骨细胞hFOB1.19,差异有统计学意义(P<0.01);骨肉瘤细胞系中miR-99a相对表达明显高于四种非骨肉瘤细胞系(P<0.05)。miR-99ainhibitor转染组细胞增殖速率显著减慢,低于inhibitor-NC组和空白组(P<0.05);转染组早期凋亡和晚期凋亡均未明显增加(P>0.05);转染组细胞迁移能力明显受到抑制;转染组143B细胞穿过小室底膜的数目明显低于inhibitor-NC组和空白组(P<0.05);转染组RECK蛋白表达上调,MMP-2和MMP-9蛋白表达下调。结论:miR-99a在骨肉瘤组织和细胞系中呈现高表达,下调miR-99a能抑制骨肉瘤细胞系143B增殖、侵袭和转移能力,其机制可能是通过调控RECK/MMP-2蛋白表达而实现的。     

前列腺癌组织中RECK的表达及其与MMP-9的关系

目的:观察前列腺癌组织RECK基因及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达,探讨前列腺癌发生中RECK基因的可能作用机制.方法:取20例前列腺癌及12例正常前列腺组织,RT-PCR及real-time RT-PCR检测RECK基因表达,RT-PCR法检测MMP-9的表达,Western印迹法检测RECK蛋白表达.结果:RT-PCR及real-time RT-PCR检测发现前列腺癌组织RECK基因表达明显低于正常组织(P＜0.01),而MMP-9 mRNA表达明显高于正常组织(P＜0.01).Western印迹分析见前列腺癌组织中RECK蛋白的表达明显低于正常组织(P＜0.01).结论:前列腺癌组织中RECK基因表达较低,RECK基因可能通过抑制前列腺组织MMP-9表达发挥抑癌作用.     

RECK和MMP-9在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨癌基因MMP-9和抑癌基因RECK在喉癌组织中的表达与喉癌临床特征的关系,了解喉癌的生物学行为,并研究两种基因的表达相关性. 方法 分别采用PV9000免疫组织化学两步法及RT-PCR方法检测38例喉磷癌组织及对应癌旁正常组织中MMP-9 和 RECK蛋白的表达及mRNA转录情况,同时取10例喉乳头状瘤作为对照. 结果 ①MMP-9在喉鳞癌组织中蛋白阳性表达率为92.11%,显著高于癌旁组织中表达(P<0.01);而RECK在癌组织中蛋白阳性表达率为60 53%,显著低于癌旁组织中表达(P<0.01);②MMP-9与RECK在癌组织中的mRNA相对表达量均与癌旁组织中的表达相比有显著差异(P<0.01);③MMP-9和RECK在喉鳞癌组织中的表达水平与患者临床分期和肿瘤病理学分级分别呈正相关和负相关.MMP-9在伴颈淋巴结转移组中的表达水平明显高于非转移组,而RECK则正好相反;④MMP-9的基因表达水平与RECK基因表达呈负相关(r=-0.907,P<0.01). 结论 ①MMP-9和RECK两因子在喉鳞癌组织中的表达水平与喉鳞癌患者的临床病理参数密切相关;②MMP-9和RECK可能共同参与了喉鳞癌的发生、发展,并与喉鳞癌的浸润及转移有密切关系.     

S100A4在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的 探讨S100A4在食管鳞癌发生发展及浸润转移中的作用.方法 采用免疫组化检测100例食管鳞癌组织中S100A4、MMP-2及E-cadherin蛋白的表达,采用RT-PCR及Western blot检测食管鳞癌细胞系EC-1和TE-1中S100A4基因的表达并采用Boyden小室检测EC-1和TE-1细胞的体外侵袭能力.结果 100例食管鳞癌组织中S100A4蛋白的表达(52.0%)明显高于食管正常黏膜(26.0%)(P<0.01),与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),且与MMP-2表达呈正相关(P<0.01),与E-cadherin表达呈负相关(P<0.05).食管鳞癌细胞EC-1中S100A4mRNA(0.894±0.021)、蛋白(0.897+0.053)表达及体外侵袭力(91.00+17.44)明显高于TE-1细胞(S100A4 mRNA:0.812±0.040,蛋白:0.645±0.089,体外侵袭力:61.80±11.10)(P<0.01).结论 S100A4基因在食管鳞癌组织以及高侵袭性食管鳞癌细胞EC-1中的高表达提示其可能参与了食管鳞癌的发生发展及浸润转移.     

RECK及MMP-2在膀胱移行细胞癌中的表达及其与侵袭复发的关系

目的:探讨RECK及MMP-2在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化法检测42例膀胱移行细胞癌及13例正常膀胱黏膜组织中RECK及MMP-2的表达.结果:在肿瘤组织中RECK的表达阳性表达率为52%(22/42),明显低于正常膀胱黏膜组织(85%,11/13),而MMP-2在癌组织中的阳性表达率为74%(31/42),明显高于正常膀胱黏膜组织(23%,3/13)(P<0.05).RECK随临床病理分期升高及复发而表达降低(P<0.05),MMP-2表达随肿瘤组织学分级、病理分期和肿瘤复发显著升高(P<0.05).RECK与MMP_2表达旱负相关.结论:RECK和MMP-2的表达与膀胱移行细胞癌的侵袭、转移和复发密切相关,可作为膀胱移行细胞癌预后判断的生物学指标.     

宫颈鳞癌中RECK与MMP-9的表达及意义

目的:探讨宫颈鳞癌中逆转录富含半胱氨酸蛋白（RECK）和基质金属蛋白酶（MMP）-9的表达及意义。方法:应用免疫组织化学法,检测20例正常子宫颈组织及70例子宫颈鳞状细胞癌中RECK和MMP-9的表达。结果:RECK蛋白在正常宫颈组织、子宫颈鳞癌组织中表达的阳性率分别为95.00%和31.43%,差异有统计学意义（P<0.01）;有淋巴转移组的阳性率较无淋巴转移组明显降低（P<0.01）。MMP-9在正常宫颈组织、子宫颈鳞癌组织中表达的阳性率分别为25.00%和80.00%,差异亦有统计学意义（P<0.01）;MMP-9表达在宫颈鳞癌有淋巴转移组的阳性率较无淋巴转移组明显升高（P<0.01）。RECK及MMP-9在宫颈鳞癌中的表达呈负相关关系（P<0.01）。结论:RECK在宫颈鳞癌中表达减少或缺失可能是通过上调MMP-9的表达从而促进宫颈鳞癌的侵袭与转移,RECK和MMP-9与宫颈鳞癌的浸润转移密切相关。     

完善病案复印 改善医患关系

《医疗机构病历管理规定》存在一些未详细说明的问题，如什么是有效身份证明，什么年份的病案可以复印等？这不仅影响医院为患者提供病历复印工作，更影响和谐医患关系，造成医患关系紧张；因此，一方面要完善《医疗机构病历管理规定》，另一方面，医院应利用出院记录等医疗文件进行详尽的告知义务，同时，应将住院检验、影像报告单一式两份，一份贴于病案中，一份直接给病人，这样能极大的方便患者，改善医患关系。     

病案信息管理发展趋势

目的探索病案信息管理未来发展方向。方法将病案信息管理过程中所涉及的问题进行分析。结果病案信息管理在医疗、教学、科研、医院管理、医疗保险、法律等起着举足轻重的作用。结论病案信息管理发生显著的变化,向数字化、高智能化的电子病案方向发展。     

拓展利用病案资源 突出病案服务功能

从病案信息利用的范围及病案信息利用的管理两大方面阐述了病案在信息时代所处的地位及其利用价值,同时就拓展病案利用价值提出了一些建议。     

加强病历书写的质量监控确保病案质量

目的针对住院病案缺陷的常见原因，提出解决方法。方法对2007年上半年出院病案进行质量检查。结果抽查病历924份，病历缺陷924份，共2540项次。结论加强医师的法制观念，加强责任感，强化基本功讪练，实行病案质量四级监控，杜绝缺陷病案归档上架，确保病案质量。     

从“神、形、纳、眠、便”判断糖尿病治疗效果

朱章志教授通过长期临床实践,在糖尿病治疗方面形成了一套独特的理论,创新性的提出以"神、形、纳、眠、便"判断疗效,即以患者的精神状态、形体、饮食、睡眠及二便等症状作为糖尿病治疗效果的判断标准。人体的"神、形、纳、眠、便"是在人体正气的推动下才能够正常,"神、形、纳、眠、便"出现异常,实际上是反应了人体正气的虚弱,因而可以用来评价人体的正气是否正常,这一方法在临床上具有很强的实用性,以此作为指导,取得了广大患者的认可。     

病案首页信息质量与统计报表的准确性

目的提高病案首页信息质量,保证医院统计报表的准确性.方法通过了解病案首页信息质量的要求(完整性、准确性、时效性);分析病案首页信息质量常见问题对医院统计指标的影响;提出对病案首页信息质量存在问题的对策.结果病案首页信息质量,直接影响医院统计报表的准确性.结论只有提高病案首页信息质量才能保证医院统计报表的准确.     

学习环境中的气味与记忆成绩相关性研究

目的探索学习环境中的气味,单独或同时出现于编码与提取过程中,其对短时记忆储存的影响。方法设计两个试验:试验一,将被试随机分为气味组、想象组、控制组,在有桂花香气味、想象气味、没有也不想象气味的学习环境中分别测验被试的整体回忆成绩和相关词汇的回忆量,并进行统计学处理。试验二,气味为愉快气味和不愉快气味2种,试验是3个被试间设计(学习时伴随气味:愉快的,不愉快的,无气味×3;回忆时伴随气味:愉快的,不愉快的、无气味×3)。试验分两次进行,间隔24h,然后进行统计学处理。结果试验一,气味组的整体回忆成绩(12.500±3.117)个高于想象组(9.571±2.387)个和控制组(7.625±5.225)个,变差分析显示3组间差异有显著性(P<0.05),想象组成绩低于气味组,但高于控制组。试验二,在学习中呈现气味和回忆中呈现气味之间有着显著的相互作用(P<0.05);但对气味呈现于测验(回忆)中则无显著影响(P>0.05)。均数逐对检验亦发现A1B1、A2B1、A2B3三个组的均数与其余各组(除A2B2组外)都差异有显著或非常显著;A2B2组只与A3B1组差异有显著性。结论1.学习和回忆时,如果呈现同一种愉快气味,那么会产生记忆的增益(提高)现象,愉快气味可以认为是一种有效的记忆提取线索;2.学习时,如果呈现一种不愉快气味,那么回忆时不管有否气味,都会产生记忆的增益(提高)现象。     

学习环境中的气味与记忆成绩相关性研究

目的 探索学习环境中的气味,单独或同时出现于编码与提取过程中,其对短时记忆储存的影响.方法 设计两个试验:试验一,将被试随机分为气味组、想象组、控制组,在有桂花香气味、想象气味、没有也不想象气味的学习环境中分别测验被试的整体回忆成绩和相关词汇的回忆量,并进行统计学处理.试验二,气味为愉快气味和不愉快气味2种,试验是3个被试间设计(学习时伴随气味:愉快的,不愉快的,无气味×3;回忆时伴随气味:愉快的,不愉快的、无气味×3).试验分两次进行,间隔24 h,然后进行统计学处理.结果 试验一,气味组的整体回忆成绩[(12.500±3.117)个]高于想象组[(9.571±2.387)个]和控制组[(7.625±5.225)个],变差分析显示3组间差异有显著性(P＜0.05),想象组成绩低于气味组,但高于控制组.试验二,在学习中呈现气味和回忆中呈现气味之间有着显著的相互作用(P＜0.05);但对气味呈现于测验(回忆)中则无显著影响(P＞0.05).均数逐对检验亦发现A1B1、A2B1、A2B3三个组的均数与其余各组(除A2B2组外)都差异有显著或非常显著;A2B2组只与A3B1组差异有显著性.结论 1.学习和回忆时,如果呈现同一种愉快气味,那么会产生记忆的增益(提高)现象,愉快气味可以认为是一种有效的记忆提取线索;2.学习时,如果呈现一种不愉快气味,那么回忆时不管有否气味,都会产生记忆的增益(提高)现象.     

肠内营养支持对胎儿宫内发育迟缓的疗效

目的探讨肠内营养支持对胎儿宫内发育迟缓（IUGR）治疗效果,以及妊娠期长时间应用肠内营养支持的可行性和安全性。方法胎儿宫内发育迟缓孕妇48例,随机分为观察组和对照组,每组24例,对照组给予相应胎龄所需热量的饮食,观察组除给予对照组的饮食外再加适量的肠内营养制剂,应用30天。结果观察组孕妇的宫高和双顶径的增加显着大于对照组孕者;观察组胎儿无应激试验（NST）阳性的比率显着大于对照组（P〈0.01）;观察组低体重出生儿（小儿出生体重小于2500g）及和Apgar小于7分的患儿比率显着小于对照组（P〈0.01）。结论肠内营养支持在胎儿宫内发育迟缓的治疗中不仅有效,而且对孕妇和胎儿也是安全的。