ELISA法检测肠道病毒EV71抗体临床应用

目的 分析酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中的肠道病毒71型IgM（EV71-IgM）抗体对诊断手足口病的意义.方法 用酶联免疫法对86例（其中5例重症患儿）临床诊断为手足口病患儿血清标本进行IgM抗体检测.结果 86例血清标本中EV71-IgM抗体检出率为86.1%,5例重症患儿EV71的检出率100%.结论 酶联免疫法检测血清中肠道病毒71型IgM抗体灵敏度高,耗时短,成本低,应用范围广,有利于EV71感染的早期诊断.     

病毒性脑炎患者脑脊液肠道病毒和EV71检测与分析

目的 探讨肠道病毒和EV71所致脑炎的发病情况及荧光定量PCR诊断病毒性脑炎的意义.方法 收集银川市118例临床诊断病毒性脑炎、脑膜炎患者脑脊液和血清,用荧光定量PCR检测肠道病毒和EV71阳性率及病毒拷贝数,用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）定性检测血清EV71病毒IgM抗体.结果 荧光定量PCR检测肠道病毒阳性病例42例,检测阳性率为35.6％;EV71阳性病例22例,检测阳性率为18.6％,占EV阳性病例的52.3％;ELISA定性检测EV71病毒IgM抗体,阳性病例30例,检测阳性率25.4％,肠道病毒和EV71病毒性脑炎患者6岁以内幼儿明显多见于其他年龄组.结论 肠道病毒是本地区病毒性脑炎、脑膜炎患者最常见的病原体,EV71可能是本地区肠道病毒性脑炎中最多见的一种,肠道病毒和EV71感染所致脑炎都以6以内幼儿为主;荧光定量PCR对EV71检测特异性高于ELISA.     

2009～2010年秦皇岛市手足口病样本检测结果

目的了解影响实验室手足口病毒检出的因素,分析秦皇岛市2009~2010年手足口病例肠道病毒核酸的检测情况。方法应用实时荧光PCR技术对可疑手足口病例送检的咽拭子、肛试子、疱疹液等样本中肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）、肠道病毒通用型（EV）进行病原学检测。结果 307例可疑病例中肠道病毒检出率为69.38%,样本的不同来源和存在的不同状态都对结果的检出有影响;秦皇岛市手足口发病集中在5~7月份,男女性别比为2.04：1,以5岁以下儿童为主;EV71与其他病毒所致重症手足口之比为12.5：1差异有统计学意义（χ2=18.86,P〈0.05）。结论切实加强实验室肠道病毒核酸检测工作,从多方面提高病毒检出的敏感性和特异性;EV71型是引起手足口重症病例的主要毒株,实时荧光PCR法可以快速检测手足口病样本中的肠道病毒核酸,为临床诊断和流行病防控提供病原学依据。     

2013～2014年重庆市渝中地区手足口病流行病学研究

目的：调查2013～2014年手足口病在重庆市渝中地区的流行特点,为临床防治提供科学依据。方法收集2013～2014年重庆市渝中地区手足口疑似患者样本1103例,用磁珠法提取样本后用荧光定量PCR法进行病原体检测。结合患者临床资料,分析患者性别、年龄、病原体型别的分布比例。结果在2013～2014收集的1103例手足口疑似患儿样本中,检测出肠道病毒EV型580例（52．58％）,其中EV71型171例（15．50％）,CA16型77例（6．98％）,其他肠道病毒型332例（30．10％）。男、女性别在各型肠道病毒中的检出率差异无统计学意义（ P＞0．05）。在不同年龄组中其他肠道病毒型为最主要型别。与2013年相比,2014年EV71和CA16的检出例数有所增加,但是占肠道病毒阳性个数的比例有所下降。结论该地区手足口的主要病原体病以其他肠道病毒型为主,EV71、CA16感染比例近1年来有下降的趋势。     

重症手足口病患儿合并肺炎支原体感染实验室检测指标对于临床诊断及治疗的提示性作用

目的 探讨肠道病毒71型合并肺炎支原体感染的重症手足口患儿的检测指标对于临床诊断及治疗是否起到提示作用。方法 收集2014年3月至8月于首都医科大学附属北京地坛医院住院的手足口病患儿100例,非手足口病患儿50例,对其粪便标本采用荧光定量RT-PCR方法检测,得出核酸定性结果。对其血清标本采用被动凝集法检测以得出肺炎支原体抗体效价。分析肺炎支原体感染在手足口病组和非手足口病组中的差异,探讨肠道病毒71型合并肺炎支原体感染与手足口病严重程度的相关性。结果 重症手足口病组患儿的肺炎支原体阳性率(76%)高于轻症手足口病组患儿的肺炎支原体阳性率(48%),差异有统计学意义(χ²=8.319,P=0.004)。结论 肠道病毒71型阳性合并肺炎支原体感染的重症手足口病患儿,应在临床诊治中引起关注。对于降低重症手足口病患儿向危重症的转化具有提示意义。     

深圳市社区人群EV71和CoxA16隐性感染的流行病学分析

目的为了解肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CoxA16）在深圳市健康人群中的隐性感染情况,进一步探讨隐性感染在儿童手足口病（HFMD）中的传播特征及危害性。方法实验采用酶联免疫（ELISA）法检测不同年龄层（0～59岁之间）的健康人群血清中抗肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CoxA16）的IgM和IgG抗体水平,并采用荧光定量PCR检测IgM阳性的样本中病毒核酸的阳性率。结果抗EV71和CoxA16 IgG抗体的阳性率都随着年龄段的增长呈下降趋势,0～5岁儿童组的IgG抗体阳性率最高,其中抗EV71的IgG抗体阳性率为79.7%,抗CoxA16的IgG抗体阳性率为91.93%。30岁以下者,两种病毒的抗体阳性率在70%以上,显著高于30岁以上人群,P〈0.01。5岁以下儿童抗EV71抗IgM抗体阳性率达15.9%。49份抗EV71 IgM阳性样本中有42份EV71的核酸阳性,阳性率为85.7%;31份抗CoxA16 IgM阳性样本中有25份CoxA16核酸阳性样本,阳性率为80.6%。结论人群对EV71和CoxA16普遍容易感染,健康人群中存在较高的隐性感染,隐性感染率与人群的年龄分布存在相关性,因此隐性感染人群也是病原体传播的传染源之一。     

实时荧光PCR技术在手足口病原学检查中的应用

目的：采用实时荧光PCR法检测手足口病患儿病原体。方法：收集40例本市确诊手足口病患儿的肛拭子样本,进行肠道病毒筛选和柯萨奇病毒16型与肠道病毒71型鉴别与分析。结果：实时荧光PCR法检测40例患儿肛拭子标本使用通用型试剂盒检出22例阳性,其中9例为CVA-16感染,12例为EV71感染,发病3 d内采集标本检出阳性患儿占75%。结论：CVA-16和EV71肠道病毒是手足口病的主要病原体,手足口病病毒检出率与标本的采集时间相关性,实时荧光PCR技术对手足口病的病原诊断具有重要价值。     

免疫层析法与酶联免疫吸附试验检测手足口病肠道病毒71型-免疫球蛋白M抗体的阳性率比较

目的对比观察免疫层析法(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测手足口病患儿肠道病毒71型-免疫球蛋白M(EV71-IgM)抗体的阳性率。方法选取我院于2017年7月至2018年7月收治的83例手足口病患儿为研究对象,分别使用GICA法和ELISA法检测患儿末梢血,比较检测EV71-IgM抗体的阳性率。结果 GICA法检测阳性率为47%(39/83),ELISA法检测阳性率为27%(22/83)。临床诊断一致性检测显示Kappa值为0.529,P<0.05,这表明2种方法检测EV71-IgM抗体一致性存在差异。2种检测方式McNemarχ~2检验结果显示:P<0.05,认为GICA法检测EV71-IgM抗体阳性结果高于ELISA法。结论 GICA法对手足口病患儿血液标本中抗EV71-IgM抗体的检出率高于ELISA法,在手足口病的早期诊断中应尽早推广。     

不同标本巨细胞病毒DNA检测在小儿巨细胞感染中的应用

目的不同标本血液、尿液、母乳HCMV-DNA检出率比较,探讨荧光定量PCR法与ELISA法对HCMV感染的诊断价值。方法 378例疑似HCMV感染婴儿,为金乡县人民医院2014年7月至2015年6月新生儿科及儿科住院患儿,根据年龄分为两组:新生儿组(0-28天)116例,婴儿组(29天~12月)262例;其中男230例,女148例。选择未感染HCMV病毒的新生儿血清标本100例作为正常对照组。分别收集血液、尿液及母乳。分别应用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测DNA,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)比较,并进行统计学处理。结果不同标本血液、尿液、母乳HCMV-DNA检出率比较,新生儿组母乳检出率最高,血液次之尿液最低;婴儿组尿液检出率最高。荧光定量PCR法检测尿液DNA含量较酶联免疫法检测血清Ig M抗体阳性率高,两者比较有统计学意义(P0.01)。结论血液检测是有创检查,尤其是新生儿采血又很困难,通过本试验得出可以用尿液HCMV-DNA检测代替巨细胞病毒的初筛;荧光定量PCR法阳性检出率高于酶联免疫法检测血清Ig M抗体,两者比较有统计学意义,表明荧光定量PCR法在临床上对巨细胞病毒的诊断更有优势和价值。     

宝鸡市肾综合征出血热病例血清诊断结果分析

目的分析宝鸡市肾综合征出血热病例血清IgM抗体检测结果和汉坦病毒基因检测结果,为该病的诊断和防控提供科学依据。方法收集临床疑似肾综合征出血热病例发病初期血清,采用胶体金法和酶联免疫法检测IgM抗体,应用荧光RT-PCR法进行汉坦病毒基因检测,统计流行病学资料,分析检测结果。结果 228份标本IgM抗体检测胶体金法阳性率为9.6%,酶免法阳性率为7.9%;男性多于女性;以农民为主。应用荧光RT-PCR法对病毒基因进行检测,检测阳性12份,均为汉滩型(HTNV)。结论采用胶体金法、酶联免疫法对病例血清标本进行了肾综合征出血热IgM抗体检测,应用荧光RT-PCR技术对病毒基因进行了分型,结果显示本地区属汉滩型(HTNV)出血热流行疫区。     

实时荧光PCR技术在手足口病实验诊断中的应用探讨

目的:研究分析实时荧光PCR技术在手足口病实验诊断中的应用价值。方法:针对本院2013年5月至2016年1月收治的疑似手足口病患儿378例进行研究分析,并采集粪便标本,进一步针对肠道病毒通用型以及CA-16(柯萨奇病毒16型)和EV-71(肠道病毒71型)进行鉴别诊断和分析。结果:本次研究收集的378份粪便标本经过实时荧光PCR检测采用通用型试剂盒阳性检出例数为319份(阳性检出率为84.39%),其中有58例患儿是EV-71感染(占18.18%),CA-16感染患儿有132例(占41.38%)。结论:调查分析发现,CA-16和EV-71肠道病毒是导致手足口病发生的主要病原体,并且本地区以CA-16占主导。实时荧光PCR技术用于手足口病实验诊断具有重要的应用价值。     

肠道病毒71型诱发的重症手足口病患儿中致病基因表达筛选

目的:筛选肠道病毒71型诱发的重症手足口病的相关标志物.方法:酶联免疫吸附实验检测重症手足口病患儿外周血中相关细胞因子的表达水平,RNA-Seq检测重症手足口病患儿外周血中单个核细胞的差异基因,Real-time PCR方法验证差异基因的表达情况.结果:重症手足口患儿外周血中细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-4和I...     

ELISA法和荧光定量PCR法在检测儿童肺炎衣原体感染中的比较

目的比较ELISA法与荧光定量PCR法在检测儿童肺炎衣原体感染中的应用。方法对我院213例呼吸道感染患儿的血液标本运用酶联免疫吸附试验（ELISA）法进行肺炎衣原体抗体检测（CP—IgM）,同时运用荧光定量PCR方法对其深部呼吸道标本进行检测（FQ—CP—DNA）。结果血CP—IgM与深部呼吸道标本CP—DNA两种方法差异无统计学意义（P〉0．05）,但后者对3—6岁的患者检出率更高（P〈0．05）。结论两种检测方法结合可以取长补短,提高衣原体感染的检出率。     

实时荧光定量PCR快速检测肠道病毒EV71

目的建立荧光定量PCR技术用于检测肠道病毒EV71。方法临床诊断或疑似为手足口病病例的咽拭子或肛拭子387份,采用荧光定量PCR技术检测EV71病毒的感染情况。结果 EV71病毒的感染率为50.90%。年龄为2个月～6岁,其中,男性为231例,感染率为51.95%（120/231）;女性为156例,感染率为49.36%（77/156）,最小感染者5个月,最大感染者6岁。结论实时荧光定量PCR技术可用于肠道病毒EV71的检测,有利于感染者的早发现并对患者治疗提供依据。     

FQ—PCR法与IBT法在人巨细胞病毒检测中的价值比较

目的对荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒进行比较分析。方法分别应用FQ—PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMVDNA和血清HCMV IgM。结果42例小儿尿HCMVDNA阳性检出率为57．14％,血HCMV IgM阳性检出率为35．71％。前者的诊断阳性率高于后者（χ2=3．88,P〈0．05）,有统计学差异;42例成人尿HCMVDNA阳性检出率为14．29％,血HCMVIsM阳性检出率为71．43％。后者的诊断阳性率显著高于前者（χ2=28,P〈0．005）,有统计学差异;84例患者尿HCMVDNA阳性检出率为38．10％,血HCMVIgM阳性检出率为48．81％。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ2=1．96,P〉0．1）。结论FQ—PCR检测HCMVDNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

2011-2014年百色市手足口病病原学监测结果分析

目的：探讨百色市2011—2014年手足口病病原学特征以及流行病学特征,为临床手足口病防治提供依据。方法对该中心2011年12月—2014年12月百色市1843例手足口病病原学监测标本、重症病例和聚集性免疫患者相关资料进行综合性回顾性分析,采用Realtime RT-PCR法对患者标本进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）以及柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)的特异性核酸进行检查,分析其监测结果。结果2011年阳性检出率为89.0%;2012年阳性检出率为95.7%,实验室诊断出127例;2013年阳性诊断率为95.7%,实验室诊断出699例;2014年阳性检出率为91.3%,实验室诊断出538例。结论2011—2012年百色市手足病病原体更多以EV71为主,2013—2014年以其他肠道病毒为手足口病主要病原体, EV71仍是手足口重症以及患者死亡流行趋势。     

实时荧光PCR法和病毒分离培养法在手足口病病毒检测中的应用分析

目的 筛选快速准确的检测方法,为手足口病监测与防控工作提供及时可靠的病原学依据。方法 采用病毒分离培养法和实时荧光PCR检测法对2014年牡丹江市手足口病监测哨点医院采集的手足口样病例标本进行检测,比较检测结果。结果 2014年采集的206份标本中,实时荧光PCR法检测肠道病毒EV 71型42例、Cox A16型9例、肠道病毒通用型37例,阴性118例。病毒分离培养法检测肠道病毒EV 71型4例、Cox A16型4例、肠道病毒通用型6例。实时荧光PCR法、病毒分离培养法检测阳性率分别为42.72%和6.80%;与实时荧光PCR法相比,病毒分离培养法灵敏度、特异度分别为15.91%、100.00%。结论 实时荧光PCR法比病毒分离培养法更灵敏快捷、特异性强、敏感度高等,适用于手足口病病原体的检测。     

2010年邢台市手足口病重症病例检测结果分析

目的对2010年邢台市手足口病重症病例进行病原体检测。方法收集临床诊断为手足口病重症病例的疱疹液、咽拭子和肛拭子标本385份,采用实时荧光定量PCR对这些标本进行人肠道病毒71型、柯萨奇病毒A组16型和其它肠道病毒的分型检测。结果人肠道病毒71型阳性率80.00%,柯萨奇病毒A组16型阳性率0.26%,其它肠道病毒阳性率7.53%;阳性率较高的地区为东南部平原人口密集区,发病率较高的年龄组为1～3岁,男性多于女性。结论实时荧光定量PCR可用于手足口病的病原体分型检测,一旦发现手足口病患者感染的病原体为人肠道病毒71型,可提示临床医生警惕手足口病重症病例的发生,对减少手足口病重症病例发生及防止患儿死亡具有重要作用。     

IgG抗体亲和力指数在儿童巨细胞病毒感染诊断中的意义

目的探讨IgG抗体亲和力指数(AI)在儿童巨细胞病毒(HCMV)感染诊断中的意义。方法分别收集120例临床疑似HCMV感染患儿的尿液和外周血标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和微粒子酶免化学发光法检测尿液HCMV DNA载量和血清HCMV IgM/IgG抗体;采用尿素变性结合酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HCMV IgG抗体亲和力指数(AI)。结果 120例疑似HCMV感染患儿的尿液HCMV DNA、血清HCMV IgM和HCMV IgG阳性检出率分别为70.83%(85/120)、60.83%(73/120)和76.67%(92/120),差异有统计学意义(χ2=7.252,P=0.027);25例HCMV IgM-/IgG+患儿中,以高亲和力抗体检出为主,占92%(23/25);67例HCMV IgM+/IgG+患儿中,以低、中等亲和力抗体为主,分别占26.87%(18/67)和53.73%(36/67);高、中、低IgG抗体AI患儿尿液HCMV DNA阳性检出率分别为36.11%(13/36)、86.84%(33/38)和100%(18/18),差异有统计学意义(χ2=32.262,P<0.01)。结论 IgG抗体亲和力指数测定能准确地反映HCMV感染的活动状况,有助于HCMV感染的诊断与治疗。     

化学发光法与酶联免疫法在乙肝病毒血清学检验中的临床对比研究

目的 比较化学发光法与酶联免疫法在乙肝病毒血清学检验中的应用价值。方法 选择2021年1月—2021年12月广昌县中医院收治的100例疑似乙肝病毒感染患者进行研究,在确认所有患者病例资料完整后抽取其空腹血,分别采用化学发光法和酶联免疫法对患者乙肝五项进行检测,对比2类检测方法对乙肝五项阳性检测率的差异,以实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）检测结果作为金标准,对比化学发光法及酶联免疫法检测HBV的诊断效能。结果 化学发光法检测乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBs Ag）、乙肝e抗体（hepatitis B e antibody,HBe Ab）的阳性检出率高于酶联免疫法（P<0.05）;2类方法在乙肝表面抗体（hepatitis b surface antibody,HBs Ab）、乙肝e抗原（hepatitis B e antigen,HBe Ag）、乙肝核心抗体（hepatitis B core antibody,HBc Ab）...