刚地弓形虫感染对小鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨刚地弓形虫感染对小鼠生精细胞(单倍体、二倍体、四倍体)凋亡的影响程度,进一步阐明弓形虫致雄性不育的机制。方法选用9~10周龄雄性BALB/c小鼠60只,随机分为PBS正常对照组、刚地弓形虫纯化速殖子感染组(2.5×103、5×103、1×104、2×104)及环磷酰胺阳性对照组。采用腹腔注射法建立刚地弓形虫感染致小鼠睾丸损伤的模型,病理切片观察,流式细胞仪检测各组小鼠睾丸各倍体生精细胞的凋亡情况,免疫组化测定睾丸凋亡蛋白bcl-2、bax的变化,进行图像分析。结果正常对照组未出现明显的凋亡峰,实验组小鼠睾丸的单倍体、二倍体细胞均出现明显凋亡,尤以二倍体明显,同时四倍体细胞明显减少;睾丸细胞bcl-2的表达无明显改变,但bax的表达量随攻虫剂量增加而增加。结论弓形虫可致小鼠睾丸各级生精细胞凋亡,对二倍体细胞的影响尤为明显。     

氟致大鼠生精细胞凋亡的研究

目的观察氟对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。方法通过腹腔注射氟化钠建立氟中毒动物模型,采用消化-离子选择电极法测定睾丸氟,采用光学显微镜和TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况。结果①染毒28 d时,低剂量祖(NaF 10 mg/kg)和高剂量组(NaF 20 mg/kg)大鼠睾丸氟分别为(8.14±0.44)、(9.78±0.75)μg/g,较对照组增高(P< 0.05);染毒38 d时,睾丸氟分别为(9.10±0.71)、(10.23±0.68)μg/g,也较对照组增高(P< 0.05)。②与对照组相比,各染氟组生精细胞凋亡指数均升高(P< 0.01)。③生精细胞凋亡指数与睾丸含氟量呈正相关(r= 0.905 1～0.961 6,P< 0.01)。结论氟在一定剂量和作用时间内可致生精细胞凋亡。     

人参皂苷Rg1对环磷酰胺小鼠少弱精症模型精子凋亡的干预作用

<正>近年来随着全球不孕不育发病率的不断攀升,越来越多的家庭受到不孕不育的困扰,而调查显示导致不孕不育发生的男性因素可占50%以上[1]。在不孕不育症的治疗过程中,传统中医药依旧是有效的治疗方法之一,而中草药之王的人参更是治疗不孕不育的常选药物[2]。本研究就人参的主要成分人参皂苷Rg1对环磷酰胺小鼠少弱精症模型精子凋亡的影响进行了探讨。1材料与方法1.1动物50只SPF级的雄性昆明小鼠(购自中国     

人参皂苷Rg1对过氧化氢诱导SK-N-SH细胞凋亡的保护作用

目的研究人参皂苷Rg1对过氧化氢(H2O2)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法建立H2O2致SK-N-SH细胞凋亡模型,MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测细胞bcl-2、bax的表达水平。结果100μmol/LH2O2诱导SK-N-SH细胞12h,细胞活力下降(均P<0.01),细胞凋亡率为16.6%,DNA断裂呈片段状,细胞培养液及细胞内MDA含量增加,SOD活性下降,细胞中bax表达明显升高。而人参皂苷Rg1可明显减少细胞损伤,使细胞中bax表达明显减少、细胞培养液及细胞内MDA含量减少、SOD活性增加、细胞凋亡的各项指标均明显改善。结论人参皂苷Rg1对H2O2诱导的SK-N-SH细胞凋亡具有保护作用,其作用机制可能与提高SK-N-SH细胞的抗氧化能力以及减少bax表达有关。     

蒺藜皂苷对抗D-半乳糖致小鼠皮肤衰老的影响

目的 探讨蒺藜皂苷对D-半乳糖所致小鼠皮肤衰老的影响.方法 健康昆明种小鼠40只,随机分为正常对照组、衰老模型组、蒺藜皂苷组和维生素E组,每组10只.颈背部皮下注射5％D-半乳糖连续6w,建立小鼠亚急性衰老模型.给药组同时灌胃给予蒺藜皂苷和维生素E,正常对照组和衰老模型组给予等体积纯净水.检测全血中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;检测皮肤组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)含量.结果 蒺藜皂苷可提高全血CAT及GSH-Px活力,提高皮肤SOD活力,降低皮肤MDA含量,提高Hyp含量.结论 蒺藜皂苷具有抗D-半乳糖所致小鼠皮肤衰老的作用.     

海参多糖对环磷酰胺诱导生殖系统受损小鼠生精功能的影响

目的 观察海参多糖（PSC）对环磷酰胺（CP）诱导生殖系统受损小鼠生精功能的影响.方法 将40只小鼠随机分成A、B、C、D组各10只,A组腹腔注射生理盐水,其他各组均腹腔注射CP 28 mg/kg,每天1次,连续5d;同时,C、D组分别给予PSC 300、600 mg/kg灌胃,A、B组给予同体积的蒸馏水灌胃,每天1次,连续4周.观察各组小鼠生存状态,计算精子总数、运动率、畸形率,并检测睾丸组织中蛋白质水平、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力.结果 与B组比较,C、D组小鼠精神状态、身体状况较好;与A组比较,B组小鼠精子密度、精子运动率及睾丸组织中蛋白水平、T-SOD活性均降低（P均≤0.01）,精子畸形率增加（P≤0.01）;与B组相比,C、D组精子密度、精子运动率及睾丸组织中蛋白水平、T-SOD活性均升高（P均≤0.01）,精子畸形率增降低（P≤0.01）,且D组较C组改善更显著（P均≤0.05）.结论 PSC对CP诱导生殖系统受损小鼠的生精功能具有一定的保护作用.     

睾丸生精细胞凋亡的外界影响因素

随着工业化的发展,环境越来越恶化,严重地危害了人类的健康.环境中一些化学、物理、微生物等污染源正严重地影响着男性的生殖健康,直接或间接地导致男性不育,影响精子的发生成熟.本文就影响精子发生过程中生精细胞凋亡的外界因素综述如下.`1 化学物质1.1 双酚A 双酚A是生产环氧树脂、聚碳酸酯的主要原料之一,广泛应用于人类的生产生活中,如:塑料制品、婴儿用品、牙齿填充物等.随着上述用品的大量使用,双酚A对环境造成的污染也日益严重.已有研究发现,双酚A对动物的生殖发育、遗传物质、免疫系统等均有毒性作用[1-2].     

大肠埃希菌感染诱导小鼠生精细胞凋亡的研究

目的探讨大肠埃希菌感染对雄性小鼠生精细胞凋亡以及对凋亡调控基因Fas/FasL的影响,进一步阐明大肠埃希菌感染致男性不育的分子机理。方法用大肠埃希菌直接注入成年雄性小鼠膀胱内模拟逆行感染的途径,感染后第7d处死小鼠,取睾丸组织分别作HE染色和用TUNEL法观察生精细胞凋亡及睾丸的病理变化;免疫组化法检测Fas/FasL在睾丸组织中的表达,同时检测精子数量、精子活动率和精子畸形率。结果大肠埃希菌感染小鼠后生精细胞的凋亡指数及Fas和FasL表达水平分别为(18.50±1.50)%、(48.10±4.19)%和(34.60±4.18)%,对照组分别为(7.40±1.69)%、(23.50±2.66)%和(19.10±4.30)%,差异均有统计学意义(P均<0.05)。感染组精子数量、精子活动率和精子畸形率分别为(6.00±1.41)×106/ml、(59.80±5.29)%和(14.78±2.03)%,对照组分别为(12.00±4.12)×106/ml、(88.90±5.37)%和(5.88±1.10)%,感染组和正常对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。感染组小鼠睾丸组织出现明显的病理变化。结论雄性小鼠感染大肠埃希菌后,可导致生精细胞凋亡增加及上调Fas和FasL蛋白的表达水平;Fas和FasL在小鼠睾丸组织的高表达诱导生精细胞的凋亡,最终使小鼠精子形成减少,活动率下降,畸形率增加。大肠埃希菌感染造成生精细胞凋亡可能是导致男性不育的原因之一。     

结核菌L型感染诱导小鼠生精细胞凋亡的实验研究

目的 探讨结核菌L型感染能否引起生精细胞凋亡,从而推测结核菌L型感染与男性不育的关系。方法 用牛型结核分支杆菌L型反复直接注入成年雄鼠睾丸内,40天后取睾丸组织分别作HE染色及凋亡细胞的原位末端标记显示（ISEL）。结果 实验组20列雄性小鼠有15例曲细精管的生殖细胞有凋亡;对照组20例无一例有生精细胞凋亡;两者生精细胞凋亡有显著性差异（P＜0．005）。结论 结核菌L型感染可引起小鼠生精细胞凋亡;结核菌L型感染与男性不育可能有一定关系。     

何首乌饮对衰老大鼠生精细胞凋亡的影响

目的探讨何首乌饮对衰老大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法选用18月龄Wistar大鼠为自然衰老动物模型,以12月龄大鼠作为青年对照,采用原位末端标记法和流氏细胞术分别检测何首乌饮灌胃用药60 d和30 d的18月龄大鼠睾丸组织细胞凋亡率变化和DNA含量的变化。结果与青年对照组相比,自然衰老组睾丸细胞凋亡率明显增高,单倍体和4倍体细胞明显减少并以二倍体为主,G_1/G0期细胞明显增多(P<0.05),细胞增殖指数明显降低(P<0.05);而何首乌饮用药后与自然衰老组相比,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);4倍体和单倍体比例明显增加(P<0.05),与青年对照组无显著性差异(P>0.05);细胞增殖指数明显升高(P<0.05),G_1/G_0期细胞明显减少(P<0.05)。结论何首乌饮可以抑制生精细胞凋亡,促进细胞增殖,达到延缓睾丸组织衰老的效果,但其具体作用机制有待研究。     

清毒退热药对内毒素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

目的 探讨清毒退热药对内毒素引起的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用。方法 24只昆明种小鼠，随机分为正常对照组、模型组和预防组。剖取胸腺观察细胞凋亡的变化。结果 模型组胸腺细胞凋亡数和DNA断裂的百分率明显多于治疗组和正常组。结论 清毒退热药对内毒素诱导的胸腺细胞凋亡有明显保护作用。     

蒺藜果总皂苷对实验性脑缺血作用的研究

目的 (1)研究蒺藜果总皂苷对实验性脑缺血大脑血流量、脑血管阻力的作用，(2)研究蒺藜果总皂苷对实验性脑缺血大鼠血浆内皮素含量、脑梗死面积的作用。方法 (1)采用结扎家犬一例颈外动脉及推动脉的方法，制备脑缺血模型。给予蒺藜果总皂苷15mmg/kg、30mg/kg，观察药物对血压、心率、脑血流量和脑血管阻力的影响。(2)通过结扎大鼠大脑中动脉，建立脑缺血模型。给予蒺藜果总皂苷25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg，观察药物对大鼠内皮素含量、脑梗死面积的影响。结果 蒺藜果总皂苷能减慢心率，降低血压，增加脑血流量，降低脑血管阻力，降低内皮素含量，减少脑梗死面积。结论 蒺藜果总皂苷能够改善脑血液循环，对实验性脑缺血动物模型有明显的治疗作用。     

性激素水平对染氟大鼠生精细胞凋亡的调节作用

目的探讨性激素水平对染氟大鼠生精细胞凋亡的调节作用。方法通过腹腔注射氟化钠(NaF)溶液的方法建立大鼠氟中毒模型,采用放射免疫的方法检测血清睾酮和雌二醇水平,采用末端标记法(TUNEL)检测凋亡的生精细胞。结果①NaF10、20mg·kg-1·(2d)-1染毒28d时,睾酮水平为(10.39±0.54)、(8.34±1.29)nmol/L,较对照组降低(P<0.05或0.01);染毒38d时,睾酮水平为(9.82±0.66)、(6.33±0.68)nmol/L,较对照组降低(P<0.01)。②NaF10、20mg·kg-1·(2d)-1染毒28d时,雌二醇水平为(44.24±11.32)、(36.27±3.00)pmol/L,较对照组降低(P<0.01);染毒38d时,雌二醇水平为(42.90±9.81)、(26.02±16.14)pmol/L,较对照组降低(P<0.01)。③与对照组相比,各染氟组生精细胞凋亡率均升高(P<0.01)。④生精细胞凋亡率与血清睾酮水平呈负相关(r值为-0.901～-0.886),与血清雌二醇水平呈负相关(r值为-0.989～-0.936)。结论氟在一定剂量和作用时间内可致大鼠血清性激素水平紊乱,是导致生精细胞凋亡的重要原因之一。     

蒺藜皂苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响

目的 探讨蒺藜皂苷(STT)对体外培养的卵巢癌细胞株SKOV3增殖的影响及机制.方法 选择对数生长的卵巢癌细胞株SKOV3分为空白对照组,实验组加STr.采用MTr法检测细胞活性,流式细胞术(FCM)测定各组SKOV3肿瘤细胞凋亡率及细胞周期变化;应用免疫组化检测SKOV3 Bcl-2和Bax蛋白表达变化.结果 与对照组相比,实验组对卵巢癌细胞的增殖具有明显的抑制作用(P＜0.05).细胞周期分析显示,实验组使卵巢癌细胞的S期细胞比例减小,G1期细胞比例增大(P＜0.05).STr能够降低Bcl-2蛋白表达(P＜0.05),增加Bax蛋白表达(P＜0.01).结论 STT能明显抑制卵巢癌细胞的增殖,其机制可能与细胞周期发生停滞有关,并通过影响细胞周期及下调Bcl-2蛋白和增加Bax蛋白的表达而诱导细胞凋亡.     

TRAIL与环磷酰胺诱导LN215细胞凋亡的作用

目的探讨人恶性胶质瘤细胞株LN215细胞对TRAIL的敏感性及TRAIL与环磷酰胺诱导LN215细胞凋亡的作用。方法培养LN215细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特性,应用酸性磷酸酶法检测LN215细胞对TRAIL单独及联合环磷酰胺作用诱导凋亡的程度。结果 LN215细胞在TRAIL低浓度时无明显的凋亡发生,甚至出现轻微的增殖现象;TRAIL浓度达到1 ng/ml时,细胞开始出现凋亡;随TRAIL浓度升高,凋亡水平逐渐升高,在300 ng/ml时,凋亡率可达到12%。TRAIL与环磷酰胺联合作用组(0.11±0.01)与对照组(0.29±0.02)相比具有显著性差异(P﹤0.01)。结论 LN215是TRAIL耐药细胞株,与环磷酰胺联合后可发挥协同作用,引起细胞发生明显的凋亡反应。     

弓形虫感染与生精细胞凋亡关系的研究

目的 探讨弓形虫感染与生精细胞凋亡的关系。方法 采用瑞-姬染色和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测弓形虫感染小鼠精子悬液的凋亡生精细胞。结果 弓形虫感染组生精细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.05)。结论 弓形虫感染可能有促进生精细胞凋亡的作用。     

阿米福汀对甲氨蝶呤诱导细胞凋亡的保护作用

目的：研究体外培养条件下阿米福汀对甲氨蝶呤诱导正常骨髓单个核细胞凋亡的影响，探讨阿米福汀对甲氨蝶呤导致骨髓抑制的保护作用。方法：将24例特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿分离骨髓单个核细胞，分为空白对照组、甲氨蝶呤组、阿米福汀组、阿米福汀加甲氨蝶呤组，在不同时间点采用形态学观察法，DNA琼脂糖凝胶电泳，流式细胞术检测细胞凋亡的情况。结果：培养8、12、24、48h，甲氨蝶呤组均可见大量的凋亡细胞，阿米福汀加甲氨蝶呤组凋亡细胞明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：阿米福汀能抑制甲氨蝶呤诱导的正常骨髓单个核细胞凋亡，减少坏死。     

黄芪对老龄小鼠脑神经细胞凋亡作用的研究

~~黄芪对老龄小鼠脑神经细胞凋亡作用的研究@张鹏霞$佳木斯大学基础医学院生化教研室!黑龙江佳木斯154007 @姚海涛$佳木斯大学基础医学院生化教研室!黑龙江佳木斯154007 @欧芹$佳木斯大学基础医学院生化教研室!黑龙江佳木斯154007 @叶耘$佳木斯大学基础医学院生化教研     

蚤休皂苷对过氧化损伤致ECV304细胞凋亡机制的研究

目的 研究蚤休皂苷对H2O2诱导的脐静脉内皮细胞(ECV304细胞)损伤的保护作用及其机制.方法 体外培养ECV304细胞,建立氧化损伤的细胞模型,然后分为5个组:正常对照组,氧化损伤组,蚤休皂苷高浓度(1 000 pg/ml)组、中浓度(100 pg/ml)组、低浓度(10 pg/ml)组;应用流式细胞仪Annexin V/PI染色检测药物干预H2O2氧化损伤前后的细胞凋亡情况,应用激光共聚焦显微镜观察其凋亡的形态学变化.并利用激光共聚焦显微镜观察、图像分析仪分析各组细胞中游离Ca2+的表达;结果流式细胞仪Annexin V/PI检测方法显示,损伤组的早期与晚期凋亡率之和最高,预处理后细胞的早期与晚期凋亡率之和降低.在损伤组细胞核着红色,细胞膜绿色或者细胞核将游移出细胞,而蚤休皂苷药物浓度增加,表现为红色细胞核的细胞量即晚期凋亡量逐渐减少.损伤组细胞内游离Ca2+浓度明显高于正常组(P＜0.01),而各蚤休皂苷预处理组均使Ca2+荧光强度下降,显著低于损伤组(P＜0.01),并呈剂量依赖性效应.结论 蚤休皂苷可以保护ECV304细胞因H2O2造成的氧化损伤,并与抑制钙离子介导的凋亡通路有关,达到保护内皮细胞、抗动脉粥样硬化的目的 .     

Lazaroid对低氧致肾小管上皮细胞凋亡的保护作用

目的通过研究低氧对肾小管上皮细胞的作用,探讨肾间质纤维化的机制及抗氧化剂lazaroid的保护作用.方法建立化学性低氧环境,应用台盼蓝染色作活细胞计数,并应用流式细胞技术检测肾小管上皮细胞凋亡.结果应用无糖、无血清培养液并加用antimycinA建立化学性低氧环境.化学性低氧作用肾小管上皮细胞12h后流式细胞仪可检测到明显亚二倍体subG1峰,提示出现明显的细胞凋亡,与对照组比较差异显著(其百分比分别为6.46±0.32和2.69±0.51,P＜0.01),而同时应用抗氧化剂lazaroid可减少低氧引起的细胞凋亡,与对照组比较差异不显著(其百分比分别为2.56±0.52和2.69±0.51,P＞0.05).同时台盼蓝拒染计数显示相似的结果,存活细胞数在化学性低氧作用12h后逐渐减少.结论低氧对肾小管上皮细胞具有直接的致细胞凋亡作用,这可能在肾间质纤维化中起重要作用,而抗氧化治疗可防止小管细胞的损伤.