hTERT、Skp2、TTF－1 mRNA 联合检测在非小细胞型肺癌早期诊断中的意义

目的：探讨联合检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）、S 期激酶相关蛋白2（Skp2）、甲状腺特异性增强子结合蛋白（ TTF－1）基因在肺癌患者外周血中微转移中的临床意义。方法选取60例经病理组织学确诊为非小细胞型肺癌（ NSCLC）的患者、同期诊断为肺部良性疾病的20例患者为研究对象,未进行任何治疗前收集各研究对象的外周血,实时荧光定量PCR 方法检测血 hTERT、Skp2、TTF －1 mRNA并进行评价分析。结果（1） NSCLC患者外周血中hTERT、Skp2、TTF－1 mRNA高表达;（2） NSCLC患者外周血中hTERT、Skp2、TTF－1 mRNA的表达均与患者肿瘤的TNM分期显著相关（P＜0.05）,与年龄、性别、吸烟、肿瘤的组织学类型及分化程度无明显相关性（ P＞0.05）;（3）外周血hTERT、Skp2和TTF mRNA的检测对于早期诊断NSCLC具有较高的特异性和较好的敏感性,三种基因联合检测可以提高诊断的敏感性（80％）。结论联合检测外周血hTERT、Skp2和TTF mRNA可显著提高诊断的敏感性,具有早期诊断NSCLC的潜在价值。     

检测外周血Lunx mRNA表达用于诊断肺癌微转移的临床价值

目的：研究检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。方法：采用荧光定量RT-PCR技术,对42例NSCLC患者及18例良性肺部疾病患者外周血Lunx mRNA进行检测。结果：NSCLC患者外周血Lunx mRNA表达的阳性率为40．5％（17／42）,Ⅰ-Ⅱ期NSCLC患者的阳性率为18．8％（3／16）,Ⅲ期患者的阳性率为47．1％（8／17）,Ⅳ期患者阳性率为66．7％（6／9）,而肺部良性疾病患者外周血无1例阳性表达。结论：检测外周血Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移的一个参考指标。     

检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA微转移的临床意义

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其作为分子标志物检测NSCLC微转移的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测48例NSCLC患者,15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19 mRNA的表达。结果NSCLC患者CK19 mRNA的阳性表达率明显高于BLD患者和健康对照者,差异有统计学意义（Х^2=24．735,P=0．000）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率分别为44．4％（8／18）,75．0％（9／12）,92．3％（12／13）,4／5,不同临床分期NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异有统计学意义（Х^2=8．820,P=0．032）;有无淋巴结转移NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异亦有统计学意义（Х^2=6．813,P=0．009）;而不同病理类型、不同分化程度NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义（Х^2=4．655,P=0．459;Х^2=1．204,P=0．548）。结论检测外周血CK19 mRNA表达可作为诊断NSCLC患者微转移的一个有价值的参考指标。     

非小细胞肺癌患者外周血中生存素和血管内皮细胞生长因子的表达及临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中生存素和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及临床意义。方法:应用荧光定量PCR法检测42例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者及20例肺部良性疾病患者外周血中生存素mRNA和VEGF mRNA的表达。结果:NSCLC患者外周血中生存素mRNA和VEGF mRNA的表达水平明显高于肺部良性疾病患者(P=0.006;P=0.001)。NSCLC患者外周血中生存素mRNA的阳性表达率为59.5%,VEGF mRNA的阳性表达率为57.1%,两者联合检测阳性率可提高至76.2%。肺部良性疾病患者生存素mRNA阳性表达率为5%,VEGF mRNA均为阴性,明显低于NSCLC患者(P均<0.001)。NSCLC患者外周血中生存素mRNA和VEGF mRNA的表达与肿瘤的TNM分期显著相关(P<0.001;P=0.008),而与其他临床特征无明显相关性。结论:外周血生存素mRNA和VEGF mRNA表达可作为肺癌细胞的分子标志物用于临床诊断,两者联合检测可提高NSCLC患者外周血癌细胞的检出率。     

外周血MAGE-1基因表达与非小细胞肺癌复发转移关系的研究

目的探讨外周血黑色素瘤抗原-1（MAGE-1）基因表达与非小细胞肺癌（NSCLC）转移、复发的关系。方法56例NSCLC患者,34例肺部良性疾病患者（对照组）,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测血液中MAGE-1mRNA表达水平,并对NSCLC患者进行随访。结果 NSCLC组患者外周血中的MAGE-1 mRNA阳性表达率分别为56．86％（29/56）,对照组34例均无表达。术后2年,51例无远处转移患者出现复发、转移26例,其中I期1例,Ⅱ期4例,ⅢA期11例,ⅢB期10例。外周血MAGE-1mRNA表达阳性组与MAGE-1mRNA表达阴性组的复发转移比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 MAGE-1可作为非小细胞肺癌微转移的肿瘤标记物,外周血MAGE-1mRNA表达阳性与NSCLC肿瘤复发（转移）无关联。     

肺癌患者细胞角蛋白19 mRNA的表达及其临床意义

目的 探讨细胞角蛋白19（CK19） mRNA在肺癌患者外周血中的表达及其临床价值。方法 采用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法测定4JD例肺癌、10例肺良性病变、10例健康对照者外周血CKl9mRNA的表达。结果 肺癌患者CKl9mRNA阳性率为47．5％（19／40），明显高于肺良性病变组（P〈0．05）和健康对照组（P〈0．01），且与临床分期有关，与肿瘤病理类型无关。结论 肺癌患者外周血CK19 mRNA检测对肺癌的早期诊断、预后评估有意义。     

三种基因在非小细胞肺癌外周血有核细胞中阳性表达的意义

目的 为确定外周血有核细胞中LUNX基因、CK19基因和S100A4基因是检测非小细胞肺癌外周血微转移的重要指标提供实验依据.方法 术前抽取外周血,通过荧光定量PCR （PCR）检测其肺组织特异性蛋白（LUNX）、细胞角蛋白19（CK19）和钙结合蛋白A4（S100A4）的表达情况,并对其进行半定量分析.结果 肺癌患者外周血标本中LUNX mRNA、CK19 mRNA和S100A4mRNA的阳性表达率分别为66.7％、62.5％和56.3％,明显高于肺良性疾病患者和健康志愿者（P＜0.05）,这三种基因的表达与组织学类型、肿瘤位置有关,在腺癌中的阳性表达高于鳞癌,在周围型肺癌中的表达高于中央型肺癌.3种基因的表达与肿瘤的大小无明确关系.随着肿瘤分期的增高和淋巴结转移的发生,三种基因的表达有明显增高的趋势.结论 LUNX mRNA和CK19 mRNA、S100A4mRNA可作为检测肺癌微转移的分子标志物.     

Skp2和p27蛋白的表达与非小细胞肺癌的关系

目的：探讨Skp2和p27蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学S-P法检测Skp2和p27在115例NSCLC组织和正常支气管上皮细胞中的表达。结果：Skp2仅在肺癌组织中表达，且在吸烟者（P〈0．01）、鳞癌患者（P=0．03）和低分化患者（P=0．01）中过表达，而与患者的年龄、性别和病理分期无关。p27在正常支气管上皮细胞中均有表达，在肺癌组织中表达降低，但其表达仅与病理分期（P=0．02）有关；Skp2阳性表达的患者中p27表达明显降低（P=0．02）。结论：Skp2和p27的表达与NSCLC的发生和发展有一定的关系，在肺癌中二者之间可能存在某种相互作用机制。     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

非小细胞肺癌患者外周血上皮细胞黏附分子和黏蛋白的诊断价值

目的: 研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者外周血中上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule, EpCAM) mRNA和黏蛋白1（MUC1） mRNA表达水平及临床意义。方法： 应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测NSCLC患者(n=45)与肺部良性疾病患者(n=21)外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达情况;分析NSCLC患者EpCAM mRNA和MUC1 mRNA阳性表达率与临床病理特征的相关性。结果： NSCLC患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达水平分别为4.42±0.56,2.30±0.32;肺部良性疾病患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达水平分别为2.48±0.26,1.61±0.06;两者相比,差异均有统计学意义（EpCAM mRNA, P=0.025;MUC1 mRNA, P=0.018）。NSCLC患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA阳性表达率分别与肺部良性疾病患者比较,差异均有统计学意义(P均=0.001)。NSCLC患者外周血中这两种基因表达的阳性率与其年龄、性别及病理类型无明显相关性;而与TNM分期显著相关,Ⅲ+Ⅳ期NSCLC患者外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA阳性表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期患者(EpCAM mRNA,P=0.021;MUC1 mRNA,P=0.005)。结论： 检测外周血中EpCAM mRNA和MUC1 mRNA的表达有助于NSCLC的诊断,尤其对血液微转移的检出具有重要的临床参考价值。     

非小细胞肺癌患者外周血LUNX mRNA表达及临床意义

目的：通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗前后外周血中肺特异性X蛋白（LUNX）mRNA的表达,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对54例NSCLC患者化疗前后、非肺癌恶性肿瘤患者36例、肺良性疾病患者16例及健康志愿者15例的外周血进行LUNX mRNA检测。结果：54例NSCLC患者化疗前后外周血LUNX mRNA的阳性表达率分别是48.1%（26/54）和25.9%（14/54）,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;非肺癌恶性肿瘤患者、肺良性疾病患者及健康志愿者外周血LUNX mRNA的阳性表达率均为0,与NSCLC组比较均有统计学意义（P〈0.01）;LUNX mRNA的阳性表达率在化疗前后均随TNM分期增加而升高（P〈0.05）,与患者年龄、性别、病理类型及分化程度无明显相关性（P〉0.05）;NSCLC外周血LUNX mRNA表达与化疗近期疗效无关（P〉0.05）。结论：LUNX mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移较好的特异性标志物;化疗后NSCLC外周血LUNX mRNA的表达比化疗前显著降低,表明有效化疗可消灭NSCLC患者的微转移癌细胞。     

非小细胞肺癌外周血分子微转移研究

目的: 研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血癌胚抗原(CEA)、CK19、Lunx mRNA表达对于肿瘤微转移的价值。方法: 采用RT-PCR技术,对46例NSCLC患者(其中肺癌Ⅰ期组6例,Ⅱ期组9例,Ⅲ期组14例,Ⅳ期组17例))和同期18例良性肺部疾病(对照组)患者外周血CEA、CK19、Lunx mRNA进行检测。结果: NSCLC患者外周血Lunx、CEA、CK19 mRNA的阳性率为52.2%、43.5%、41.3%,其中Ⅰ期组Lunx、CEA和CK19 mRNA的阳性率为16.6%(1/6)、16.6%(1/6)和0%(0/6),与对照组差异均无统计学意义(P > 0.05);Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期组NSCLC患者Lunx mRNA的阳性率为44.4%(4/9)、50.0%(7/14)、70.6%(12/17),CEA mRNA的阳性率为33.3%(3/9)、50.0%(7/14)、52.9%(9/17),CK19 mRNA的阳性率为22.2%(2/9)、42.9%(6/14)、64.7%(11/17),肺癌Ⅱ期组Lunx、肺癌Ⅲ期组CEA和Lunx、肺癌Ⅳ期组CEA、CK19、LunxmRNA表达阳性与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: 检测外周血CEA、CK19、Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移重要的参考指标。     

肺癌外周血中EGFR mRNA、SP-D mRNA、LUNX mRNA表达的临床意义

目的:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肺癌患者肿瘤组织和外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测40例非小细胞肺癌组织和15例肺良性病变组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达;检测40例肺癌患者外周血中靶基因的表达,并以15例良性肺疾病患者和10名健康人外周血作为对照。结果:40例肺癌患者病理组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达率为77.5%(31/40)、100%(40/40)、100%(40/40),外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达阳性率分别为55.0%(22/40)、52.5%(21/40)和57.5%(23/40);对照组中15例肺良性病变患者病理组织中EGFRmRNA表达率为13.3%(2/15),无SP-DmRNA和LUNXmRNA表达,15例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达。结论:EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA作为检测肺癌组织及肺癌外周血微转移的分子标志物具有良好的敏感度和特异性;三者表达与肺癌TNM分期、组织学类型和癌细胞分化程度关系密切。     

Twist、VEGF在非小细胞肺癌中的表达及相关性研究

目的探讨Twist、VEGF蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测54例NSCLC标本组织、10例正常肺组织和10例肺良性病变中Twist、VEGF的表达。结果 Twist在NSCLC癌组织中的表达（68.52%）明显高于正常肺组织（10%）和肺良性病变组织（20%）（P〈0.05）;VEGF表达率64.8%（35/54）,明显高于正常肺组织（10%）和肺良性病变（20%）（P〈0.05）;Twist、VEGF在NSCLC癌组织中表达与肿瘤的分化程度、临床分期及淋巴结转移有关;Twist的表达与VEGF的表达存在明显正相关（r=0.654,P=0.000）。结论 Twist蛋白可能通过VEGF介导的肿瘤血管生成,在NSCLC的浸润、转移过程中发挥重要作用。Twist具有较好的临床病理学诊断应用和治疗价值。     

Twist和E-cadherin在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨Twist、E-cadherin蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测54例NSCLC肺癌标本组织、10例正常肺组织和10例肺良性病变中Twist、E-cadherin的表达。结果 Twist在NSCLC癌组织中的表达（68.5%）明显高于正常肺组织（10%）和肺良性病变组织（20%）（P〈0.05）;E-cadherin表达率40.7%（22/54）,明显低于正常肺组织（100%）和肺良性病变（100%）（P〈0.05）;Twist、E-cadherin在NSCLC癌组织中表达与肿瘤的分化程度、临床分期及淋巴结转移有关;Twist的表达与E-cadherin的表达存在明显负相关（P〈0.05）。结论 Twist蛋白可能通过下调E-cadherin的表达,在NSCLC的浸润、转移过程中发挥重要作用,二者的检测对肺癌的诊断及治疗具有指导意义。     

Skp2和P27在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究细胞S期激酶相关蛋白Skp2和P27蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,及其与非小细胞肺癌各项临床病理指标的关系。方法应用免疫组化S-P法检测82例非小细胞肺癌和20例正常肺组织中Skp2和P27蛋白的表达情况,同时结合其临床资料进行统计学分析。结果在非小细胞肺癌组织中Skp2蛋白表达的阳性率为48.78%,显著高于正常肺组织;非小细胞肺癌组织中P27蛋白表达的阳性率为42.68%,显著低于正常肺组织。Skp2和P27的表达与肿瘤的分化程度高低、淋巴结转移与否及TNM分期有关(P0.05),但与性别、年龄、组织学类型无关(P0.05),非小细胞肺癌组织中Skp2表达与P27表达呈显著负相关(P0.05)。结论非小细胞肺癌组织中Skp2蛋白表达与P27降解有关,提示这两种蛋白的检测可能成为非小细胞肺癌的早期诊断、评价其恶性程度及判断预后的重要指标之一。     

LRIG1和 EGFR mRNA在非小细胞肺癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的：观察非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中LRIG1和EGFR mRNA表达水平,并分析其与患者临床病理特征的关系,为NSCLC的治疗提供依据。方法：采用实时荧光定量PCR法分析69例NSCLC患者外周血单个核细胞中LRIG1和EGFR mRNA表达水平,并分析其与患者的肿瘤临床分期、性别、年龄及生存期的关系。结果：与正常人比较,NSCLC患者外周血中LRIG1 mRNA的表达水平降低, EGFR mRNA的表达水平增高,差异具有统计学意义（P<0.001）;LRIG1和EGFR mRNA的表达水平与患者性别、年龄及组织来源无关联(P>0.01 ),与患者肿瘤临床分期及生存期有密切关联(P<0.001);Cox回归分析,肿瘤临床分期、LRIG1和EGFR mRNA的表达水平可作为独立的预后因子;肿瘤临床分期越晚,患者预后越差（P=0.028）,相对风险度（RR）= 1.548,95%可信区间(95% CI)为1.074～2.283;LRIG1 mRNA的表达水平越高,患者预后越好（P= 0.026）,RR=0.242,95%可信区间为0.069－0.843;EGFR mRNA表达水平越高,患者预后越差（P=0.027）,RR= 3.732,95%CI为1.165～11.956。高表达LRIG1患者的生存时间长于低表达者（χ2 =56.560,P<0.001）;高表达EGFR mRNA患者生存时间短于低表达者（χ2 =51.962,P<0.001）。同一患者血液标本中LRIG1和EGFR 在mRNA表达水平呈负相关关系( r=－0.307,P=0.016)。结论：LRIG1通过负向调节EGFR的表达影响NSCLC患者的肿瘤临床分期和生存时间。LRIG1可能通过调节EGFR的表达影响NSCLC患者的疗效和预后。     

外周血循环MUCl mRNA表达水平与乳腺癌、肺癌的相关性研究

目的研究外周血循环MUClmRNA表达水平与乳腺癌、肺癌、其他癌等疾病的相关性以及对乳腺癌等疾病的诊断价值。方法分别采集健康对照组、良性肿瘤组、乳腺癌组、肺癌组以及其他癌组入院患者的血清样本，采用实时定量荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血循环MUClmRNA含量。结果良性肿瘤组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（10％）与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），乳腺癌组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（50％）与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），乳腺癌组中以浸润性导管癌最高，各种类型乳腺癌比较差异无统计学意义（P〉0．05），肺癌组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（60％）与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），其他癌组外周血循环MUClmRNA表达水平及阳性率（20％）与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MUCImRNA可以作为乳腺癌、肺癌的诊断标志物，但对乳腺癌分型的诊断没有价值。     

外周血表皮生长因子受体和LUNX mRNA表达对肺癌微转移诊断的价值

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者和肺良性病变患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA和LUNX mRNA表达情况,探讨其在肺癌微转移诊断中的价值.方法:采用荧光定量PCR方法检测42例肺癌患者和18例肺良性疾病患者外周血EGFR mRNA和LUNX mRNA表达.结果:42例NSCLC患者EGFR mRNA表达的阳性率为45.2%(19/42),LUNX mRNA表达的阳性率为40.5%(17/42),两者联合检测阳性率可提高到64.3%.良性肺部疾病患者均为阴性.结论:EGFR mRNA和LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的分子标志物,联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.