急性胰腺炎肝损伤TNF-α mRNA及IL-6 mRNA的表达实验研究

目的 探讨急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)肝肿瘤坏死因子-α mRNA(tumor necrosis factor-α mRNA,TNF-α mRNA),白细胞介素-6 mRNA(interleukin-6 mRNA,IL-6 mRNA)的表达及肝脏损伤.方法 SD大鼠随机分为AP组和假手术组(sham operation,SO),分别于术后3,6,12 h取肝组织行光镜及电镜观察;检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT);放射免疫法(radio immunoassay,RIA)测定血清TNF-α,IL-6;实时定量聚合酶链反应(realtime polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测肝组织TNF-α mRNA,IL-6 mRNA.结果 与SO组正常的肝组织、细胞形态对比,AP组出现肝损伤的病理形态变化;与SO组相比,AP组的血清ALT以及TNF-α,IL-6水平显著增高(P＜0.05);在AP发展的3～12 h内,肝TNF-α mRNA和IL-6 mRNA的表达明显增加,显著高于同一时段的SO组.结论 AP时肝TNF-α mRNA,IL-6 mRNA的表达与其肝脏损伤可能相关,提示肝TNF-α,IL-6对AP肝脏损伤发生和发展有重要作用.     

急性胰腺炎大鼠肝脏NF-κB 对 TNF-α表达的调控及其在肝损伤中的作用

目的 观察急性胰腺炎发生时肝组织中核因子-κB(NF-κB)对TNF-αmRNA表达的调节及其在肝损伤中的作用。方法 Wistar大鼠72只，随机均分为急性胰腺炎组(AP组)、急性胰腺炎吡咯基二硫氨基甲酸酯(PDTC)处理组(APP组)以及对照组(SO组)。分别在术后3h、6h、12h及24h检测肝组织NF-κB活性、TNF-αmRNA的表达以及血浆ALT水平。结果 AP组及APP组的NF-κB活性、TNF-αmRNA表达及血浆ALT水平分别在术后3～6h及3～24h显著高于SO组。在应用了NF—κB抑制剂的APP组，NF-κB活性、TNF-αmRNA表达以及血浆ALT水平均显著低于AP组。结论 急性胰腺炎发生时，肝脏中活化的NF-κB促进了TNF-αmRNA的表达，并参与了肝损伤的发生。     

抗肿瘤坏死因子抗体对大鼠急性出血坏死性胰腺炎的治疗作用

采用牛磺胆酸钠复制大鼠急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）模型,动态观察其血浆肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）含量、血清脂肪酶含量和胰腺病理改变等,以及抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体（ＴＮＦαＭＣＡｂ）的治疗对它们的作用,并与假手术组比较。结果显示：假手术组大鼠的各项检测指标无异常改变,无动物死亡。ＡＨＮＰ组腹水量、血清脂肪酶及血浆ＴＮＦα水平均较假手术组显著增加,胰腺病理改变明显;经ＴＮＦαＭＣＡｂ治疗后,血浆ＴＮＦα水平未见升高,而血清脂肪酶下降,腹水积聚减少,胰腺病理改变减轻,动物死亡率显著下降。由此提示,ＴＮＦα在ＡＨＮＰ发病机理中起重要作用,ＴＮＦαＭＣＡｂ对ＡＨＮＰ大鼠有一定的治疗作用     

利多卡因对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用

目的 探讨利多卡因对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用。方法 80只雄性Wistar大鼠建立失血性休克模型后,随机分为四组,假手术组(Ⅰ组,n=8)、休克组(Ⅱ组,n=8)、生理盐水组(Ⅲ组,n=32)、利多卡因组(Ⅳ组,n=32)。Ⅰ组于假手术后,Ⅱ组于休克60 min,Ⅲ、Ⅳ组分别于复苏开始后2、4、8、12 h,测定中性粒细胞(PMNs)表面粘附分子CD11b/CD18表达、肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,并采用光镜和透射电镜观察肺组织的病理学改变。结果 与Ⅰ组比较,Ⅲ组、Ⅳ组复苏后各时点PMNs表面CD11b/CD18表达均升高(P<0.01),Ⅱ组差异无显著性(P>0.01),Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组复苏后各时点肺组织中MPO活性升高(P<0.05或0.01)。与Ⅲ组比较,Ⅳ组复苏后同一时点、Ⅰ组、Ⅱ组PMNs表面CD11b/CD18表达及肺组织中MPO活性降低(P<0.01)。结论 小剂量利多卡因可以抑制失血性休克大鼠PMNs表面CD11b/CD18的表达,减少PMNs在肺组织中的浸润,从而减轻肺损伤。     

联合应用甘氨酸和甲强龙对失血性休克大鼠肝脏枯否细胞的影响

目的探讨失血性休克大鼠肝脏枯否细胞的功能变化以及联合应用甘氨酸和甲强龙对枯否细胞的影响。方法50只大鼠随机分成假休克组（仅进行手术操作但不放血诱导休克）、休克组、甘氨酸组、甲强龙组和联合治疗组（甘氨酸＋甲强龙）,每组10只。大鼠经动脉放血,造成失血性休克,随后用自体血和生理盐水回输进行复苏。复苏后2h,行肝脏枯否细胞的分离和培养,细胞培养24h后分别用1、10、100和1000ng/ml的脂多糖（LPS）刺激,测定细胞内Ca^2＋和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果枯否细胞内Ca^2＋在20min左右开始大幅度增高,大约27min达到高峰,同时细胞内Ca^2＋浓度增加呈现LPS剂量依赖性。联合治疗组细胞内Ca^2＋浓度和TNF-a含量明显低于休克组以及低于甘氨酸、甲强龙治疗组,差异具有统计学意义（P〈0．005）。结论联合应用甘氨酸和甲强龙比单一制剂更有效抑制失血性休克后枯否细胞内Ca^2＋升高、抑制枯否细胞的激活,抑制TNF-α的过度产生和机体炎症反应。     

TNF-α单克隆抗体对急性胰腺炎胰腺组织中ICAM-1的表达的影响

目的 探讨急性胰腺炎(AP)胰腺组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的表达与炎症发生发展的关系，以及肿瘤坏死因子-α单克隆抗体(TNF-αMCAb)预处理后的影响。方法 采用免疫组化技术结合多媒体图像分析系统检测AP大鼠胰腺组织中ICAM-1的表达与炎症轻重程度的关系，以及应用TNF-αMCAb对ICAM-1的表达的影响。结果 正常胰腺组织仅少量ICAM-1阳性表达，随着炎症程度的加重，ICAM-1表达逐渐升高，与炎症程度呈正相关。应用TNF-αMCAb预处理后胰腺组织ICAM-1表达明显减弱，炎症程度明显减轻。结论 急性胰腺炎ICAM-1的表达在炎症的发生发展中起着重要的作用，TNF-αMCAb通过抑制ICAM-1的表达，减轻了胰腺组织炎症反应，对胰腺组织有明显的保护作用。     

急性化脓性腹膜炎相关性腹水对大鼠肝脏的损伤作用研究

目的 探讨急性化脓性腹膜炎相关性腹水(ASPAAF)诱导大鼠肝脏损伤的作用及其机理.方法 将32只SD大鼠(雌雄不拘)随机分为2组: ASPAAF组(n=16)和对照组(n=16),分别向腹腔内注射ASPAAF 和生理盐水,每只8 ml.于腹腔注射后6 h 和12 h分批处死大鼠,每时间点8只.检测血清内毒素及TNF-α水平和肝功能(AST、ALT和STB); 检测肝脏组织TNF-α水平; 光镜下观察肝脏组织损伤情况.结果 于腹腔注射后6 h 和12 h,ASPAAF组血清内毒素、TNF-α、AST、ALT和STB水平以及肝脏组织TNF-α水平均较对照组高 (P＜0.05); 以上指标在ASPAAF组组内随时间的增加而显著增高(P＜0.05); ASPAAF组肝脏组织细胞出现水肿,甚至点状坏死,6 h 和12 h间无明显差别,对照组肝脏组织细胞正常.结论 ASPAAF能引起大鼠肝脏损伤,内毒素和TNF-α在这一损伤过程中发挥了重要作用.     

氯胺酮对失血性休克鼠动脉血浆肿瘤坏死因子浓度和肺损伤的影响

严重休克可引起急性肺损伤,肿瘤坏死因子(TNF-α)在其中发挥重要作用。本研究拟通过对失血性休克动脉血浆TNF-α含量、肺组织形态学等指标的观察,探讨氯胺酮对TNF-α和肺损伤的影响,为休克病人复苏后肺损伤的防治提供一定的理论依据。     

TNF-α单克隆抗体对急性胰腺炎胰腺组织中ICAM-1的表达的影响

目的　探讨急性胰腺炎 (AP)胰腺组织中细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的表达与炎症发生发展的关系 ,以及肿瘤坏死因子 α单克隆抗体 (TNF αMCAb)预处理后的影响。方法　采用免疫组化技术结合多媒体图像分析系统检测AP大鼠胰腺组织中ICAM 1的表达与炎症轻重程度的关系 ,以及应用TNF αMCAb对ICAM 1的表达的影响。结果　正常胰腺组织仅少量ICAM 1阳性表达 ,随着炎症程度的加重 ,ICAM 1表达逐渐升高 ,与炎症程度呈正相关。应用TNF αMCAb预处理后胰腺组织I CAM 1表达明显减弱 ,炎症程度明显减轻。结论　急性胰腺炎ICAM 1的表达在炎症的发生发展中起着重要的作用 ,TNF αMCAb通过抑制ICAM 1的表达 ,减轻了胰腺组织炎症反应 ,对胰腺组织有明显的保护作用     

休克期切痂对大鼠肺组织ICAM-1、TNF-α mRNA表达的影响

目的 研究烧伤后肺组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达和肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性变化的规律,探讨实施休克期切痂对上述指标变化的影响。方法 Wistar大鼠176只,30％体表面积Ⅲ度烫伤,采用逆转录PCR方法分别观察伤后不同时相点及不同时机切痂后肺组织ICAM-1、TNFα mRNA的表达及肺脏：MPO活性变化。结果烫伤后肺组织ICAM-1及TNFα的mRNA表达在伤后4h即已升高,分别在伤后12h和24h达到高峰,伤后8h和24h切痂组动物切痂后再次出现一峰值,但低于第一个峰值,伤后96h恢复正常。未切痂组和96h切痂组在伤后7d仍未恢复正常;休克期切痂动物的肺组织MPO活性伤后96h恢复正常,而非休克期切痂组动物一直维持较高水平。结论 尽早切痂去除坏死组织可阻断炎症介质及细菌毒素的释放,避免了内皮细胞大量合成ICAM-1等粘附分子,减轻由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

延迟应用TNF-α单抗治疗重度失血性休克的实验研究

目的：观察延迟应用肿瘤坏死因子－α单抗（ＴＮＦ ＭＡｂ）对失血性休克所致血液动力学改变、多器官损伤及存活率的影响，并对其作用机理进行探讨。方法：采用大鼠重度失血性休克（４．００￣４．６６ｋＰａ，１８０分钟）、复苏模型，实验动物随机分成治疗组（复苏后注射ＴＮＦ ＭＡｂ２０．０ｍｇ／ｋｇ）和对照组（白蛋白，２０．０ｍｇ／ｋｇ）。结果：延迟应用ＴＮＦ单抗治疗后，心脏指数有所增高、外周血管阻力指数显著降低     

失血性休克大鼠血浆及腹腔巨噬细胞释放细胞因子改变

目的：研究大鼠失血性休克前后血浆及腹腔巨噬细胞释放细胞因子的变化。方法：将30只大鼠分为失血性休克组（20只）和对照组（10只）,观察大鼠休克前后血浆和腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子（TNF）－α,白细胞介素（IL）－1β,IL－6和IL－8改变。结果：失血性休克90min后大鼠腹腔巨噬细胞释放TNF－α,IL－1β,IL－6和IL－8显著减少（P＜0．01）,而血浆中这些细胞因子水平明显升高（P＜0．01）。结论：失血性休克对大鼠细胞免疫功能有抑制作用。     

失血性休克急性肺损伤的发病机制

背景 急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是失血性休克死亡率和发病率升高的重要原因. 目的 对失血性休克ALI的可能发病机制作一综述. 内容 多核中性粒细胞(polymorph nuclear neutrophils,PMNs),Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs),活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS),低氧诱导因子(hypoxia-inducibie factor,HIF)以及核因子(nuclear factor-κB,NF-κB)的激活和相互作用参与了创伤失血性休克后ALI,并且发挥了关键作用. 趋势 加深对创伤失血性休克ALI发病机制和各种损伤因素横向联系将有助于其治疗.     

急性失血及失血性休克白细胞介素-1、6和肿瘤坏死因子-α的变化

1999年 5月～ 2 0 0 1年 8月间我们对 1 52例人群、30例动物以正常、失血及失血性休克组进行白细胞介素 (ＩＬ) 1、6和肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)测定与分析 ,以此研究急性失血及失血性休克患者细胞因子活性变化 ,探讨失血性休克免疫机制 ,现将结果报道如下。一、材料与方法1 .临床研究对象和分组 :(1 )研究组 :1 2 2例均为我院急诊入院的重症失血患者 ,累计失血量均为 50 0ｍｌ以上 ,其中失血性休克 2 2例 ,全组男 90例、女 32例 ,平均年龄 (2 5 .40± 2 .96)岁。将其中失血 1 0 0例、休克 2 2例各列为一组。(2 )对照组 :选健康体检者 30…     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠重症急性胰腺炎肝损伤的保护作用

目的探讨S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)对大鼠重症急性胰腺炎(severe acutepancreatitis,SAP)并发肝损伤的保护作用及机制。方法 48只大鼠随机均分为:假手术组,SAP模型组,2个剂量的SAM(100 mg/kg,200 mg/kg)预处理+SAP模型组。各组于造模后18 h取血检测血清淀粉酶(AMY),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;取肝脏组织,用RT-PCR和Western blot方法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达情况。结果与假手术组比较,其余各组大鼠肝脏TNF-α表达和血AMY,ALT,AST水平均有不同程度升高(均P<0.05);2个剂量的SAM预处理均能明显抑制SAP大鼠肝脏TNF-α表达,降低血AMY,ALT,AST水平(均P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论外源性补充SAM对SAP后肝损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肝脏TNF-α的表达有关。     

大鼠失血性休克致肠道菌移位的病理学观察

有研究表明，胃肠道可能是创伤后菌血症、内毒素血症的重要来源＾〔１〕。我们对大鼠失血性休克后胃肠道的病理变化及肠道菌的移位情况进行观察，现将结果报道如下。     

重症急性胰腺炎大鼠肝脏毛细血管渗漏的发生机理

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝脏毛细血管渗漏的发生机理。方法 40只SD大鼠采用完全随机法随机分为假手术(sham operation,SO)组和SAP组,SAP按不同的取材时间又分为3、6、12及24 h 4个亚组,每组8只。以胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠建立SAP模型,观察各组肝脏组织病理改变,检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,干湿重法检测肝脏组织含水率,免疫组织化学方法检测肝脏组织中occludin蛋白表达水平,RT-PCR法检测肝脏组织中occludin mRNA表达水平。结果 SO组肝脏组织病理无明显改变;SAP组肝脏组织表现为典型SAP病理改变,包括血管扩张明显、组织疏松水肿、炎性细胞浸润。SAP组各时相TNF-α水平、肝脏组织含水率逐渐升高,在观察时间范围内,24 h时均达最高,TNF-α水平、肝脏组织含水率在SAP组不同时相比较差异均有统计学意义(P<0.05),且SAP组不同时相均明显高于SO组(P<0.05)。SAP组3 h时occludin蛋白和mRNA水平均开始降低,6 h时达最低值,12 h和24 h时较6 h时明显升高(P<0.05),但仍均低于SO组(P<0.05)。结论 SAP大鼠肝脏发生严重的毛细血管渗漏,可能与SAP时TNF-α表达上调,导致紧密连接蛋白occludin及其mRNA表达下调有关。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠急性胰腺炎保护作用的研究

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠急性胰腺炎(AP)的保护作用的机理.方法 雄性SPF级SD大鼠30只,随机分为三组(n=10):假手术组(SO组)、急性胰腺炎模型组(AP组)、NAC治疗组(NAC组).胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导AP模型,造模后30min腹腔注射5%NAC(0.2 ml/100 g).检测血清淀粉酶(AMY)、髓过氧化物酶(MPO)活性的变化,观察胰腺组织病理学变化并评分,免疫组化SABC法检测胰腺组织NF-κB表达的变化,RT-PCR法检测胰腺组织TNF-α mRNA表达的变化.结果 与AP组相比,NAC治疗后血清AMY水平、病理评分、胰腺组织MPO活性、NF-κB阳性表达率以及TNF-αmRNA表达均下降(P<0.01);但上述指标仍高于SO组(P<0.01).结论 NAC通过抑制胰腺组织NF-κB活化、减少TNF-αa mRNA的表达从而减轻胰腺损伤,对AP具有治疗和保护作用.